2 studentská vědecká konference
univerzita karlova v praze
1 lékařská fakulta
konaná 14 5 2001 pod záštitou děkana 1 lf
doc mudr štěpána svačiny csc obsah
slovo úvodem 3
pozvánka 4
seznam úãastníkû 2 studentské vûdecké konference 1 lékaﬁské fakulty 5
hodnotitelské komise 6
abstrakta prací úãastníkû 2 studentské vûdecké konference podle umístûní v sekcích 7
sekce prací pregraduálních studentû ãást teoretická 8
sekce prací pregraduálních studentû ãást klinická 11
sekce pﬁednesen˘ch prací v doktorském studijním programu 15
sekce posterû v doktorském studijním programu 26
vítûzné práce 2 studentské vûdecké konference in extenso 31
sekce prací pregraduálních studentû ãást teoretická 32
david kemlink václava jeﬁábková anal˘za teratogenního úãinku retinové kyseliny u rekombinantních inbredních kmenû laboratorního potkana 32
ale‰ hejãl amygdala v histologick˘ch ﬁezech a její zmûny v prûbûhu ïivota 35 tûpán havránek jan kolaﬁík disperze intervalu qt a projekce vektoru vlny 38
sekce prací pregraduálních studentû ãást klinická 40
muc martin tomeãek zánût zubního lûïka u kuﬁákû incidence a mikrobiální obraz 40
jan moravík bilirubin v krvi a nûkteré rizikové faktory ichs 45 tûpán gála jitka hrachová cariogram moderní metoda predikce zubního kazu 54
sekce pﬁednesen˘ch prací v doktorském studijním programu 59
mudr ondﬁej eda l edová l kazdová d kﬁenová v kﬁen metabolic profile of pd cub chromosome 8 congenic strains shr-lx and bn-lx 59
mgr markéta âapková h hansíková c godinot h hou‰èková j hou‰tûk j zeman biochemical and molecular studies in five children with leigh disease and cytochrome c oxidase deficiency 64
mgr lenka indeláﬁová z zemanová p smí‰ek j star˘ k michalová pouïití interfázické
fish pﬁi detekci hyperdiplodií u dûtí s akutní lymfoblastickou leukemií all 67
mudr petra bene‰ová vliv kainátu na poãet nadph-diaforáza pozitivních neuronû v hippocampu u potkanû vystaven˘ch chronické hypoxii 70
mudr radek jirman anal˘za napjatosti hlavice temporomandibulárního kloubu 73
práce ocenûna zvlá‰tní cenou zdravotnick˘ch novin 78
mudr jiﬁí pe‰ina prevalence kuﬁáctví a znalosti t˘kající se tabáku zji‰tûné mezi novináﬁi ãesk˘ch deníkû 78
fakultní 2 studentská vûdecká konference 2001 se konala v prostorách dûkanátu dne 14 kvûtna 2001 vzhledem k tomu ïe jiné fakulty mají studentskou vûdeckou konferenci v jarním termínu po kterém následuje celostátní kolo mu-
sela fakulta zkrátit termín a uspoﬁádat konferenci jiï pouh˘ pûlrok po konání minulé velmi pﬁíjemnû nás proto pﬁekvapil
poãet pﬁihlá‰en˘ch sdûlení zejména pak stomatologická pracovi‰tû pﬁipravila ﬁadu kvalitních prací jak v pﬁedná‰kové tak
v posterové sekci naopak nûkterá pracovi‰tû s tradiãnû dobrou vûdeckou základnou nebyla letos zastoupena atmosféra studentsk˘ch konferencí je desítky let nemûnná kontrastuje vysoká kvalita nûkter˘ch prací s nervozitou studentû kteﬁí vystupují ãasto poprvé na veﬁejnosti a mají v pár minutách zasvûtit posluchaãe do problematiky vysvûtlit cíl své práce a uvést její v˘sledky kaïd˘ z nás uãitelû fakulty si v tu chvíli vzpomene jak za podobn˘ch podmínek sám
zaãínal svou dráhu vysoko‰kolského pedagoga kaïd˘ si jistû také vzpomene na své uãitele a vedoucí práce kteﬁí jiï ãasto
nejsou mezi námi i já si vïdy pﬁipomenu jak jsem zaãínal jako pomocná vûdecká síla na biologickém ústavu a jak pod ve-
dením nedávno zemﬁelého doc mudr franti‰ka soukupa csc jsem pﬁedná‰el svou první studentskou práci studentská vûdecká konference rozhodnû mezi fakultními akcemi není akcí opomíjenou pﬁi ní se rozhoduje o tom kdo ze studentû bude získán pro vûdu a kdo v budoucnosti bude v˘voj fakulty ovlivàovat hodnotící komise i letos vybrali ﬁadu prací k ocenûní nejlep‰í studenti budou ocenûni sponzorsk˘mi firmami a záro-
veà nás budou reprezentovat na celostátní úrovni rád bych jim touto cestou podûkoval za skvûlou práci za precizní pﬁípravu a organizaãní zaji‰tûní konference bych velmi rád podûkoval prof mudr vladimíru tesaﬁovi drsc prodûkanovi pro vûdeckou práci a v˘zkum vedoucí oddûlení pro vûdeckou práci a v˘zkum paní jitce buczkové pracovnici
tohoto oddûlení paní ivanû rûïiãkové a paní mgr vlastû helekalové vedoucí oddûlení vnûj‰ích stykû pﬁípravy pﬁí‰tího tﬁetího roãníku konference kter˘ se uskuteãní na jaﬁe 2002 byly samozﬁejmû jiï zahájeny pﬁeji studentûm aby pﬁipravili práce minimálnû stejnû kvalitní jako byly ty leto‰ní doc mudr tûpán svaãina csc dûkan fakulty
slovo úvodem
3
2 studentská vùdecká konference
1 lékaﬁské fakulty konaná pod zá‰titou dûkana 1 lf
doc mudr tûpána svaãiny csc 14 kvùtna 2001
univerzita karlova v praze
1 lékaﬁská fakulta
2 studentskou vûdeckou konferenci zahájí dûkan 1 lékaﬁské fakulty doc mudr tûpán svaãina csc dne 14 5 2001 v 8 00 hodin v zasedací místnosti dûkanátu 1 lf na boji‰ti 3 praha 2 studentská vûdecká konference bude uspoﬁádána ve dvou sekcích sekce postgraduálních prací a sekce pregraduálních prací která je rozdûlena na ãást teoretickou a preklinickou sekce pregraduálních prací bude probíhat 14 kvûtna 2001 a to klinická ãást od 8 15 hodin v posluchárnû stomatologické kliniky 1 lf kateﬁinská 32 praha 2
teoretická ãást od 13 00 hodin v posluchárnû stomatologické kliniky 1 lf kateﬁinská 32 praha 2
sekce postgraduálních prací bude probíhat 14 kvûtna 2001 od 8 15 hodin v zasedací místnosti dûkanátu 1 lf na boji‰ti 3 praha 2
práce mohou b˘t prezentovány v ãeském i anglickém jazyce doba pﬁedná‰ky bude maximálnû 10 minut a prostor pro diskusi 5 minut k dispozici bude dataprojektor zpûtn˘ projektor a diaprojektor s moïností dvojprojekce úãastníky konference ïádáme aby si pﬁinesli svûj osobní notebook pro zpracování sborníku z této konference ïádáme aby abstrakt byl zpracován v následující formû a pﬁedán na disketû pﬁi prezenci forma abstrakt 1 ﬁádek název práce bez zkratek
2 ﬁádek jméno a pﬁíjmení autora nebo autorû
3 ﬁádek kolitel jméno pﬁíjmení titul a název pracovi‰tû
4 30 ﬁádek abstrakt práce úvod metodika v˘sledky závûr abstrakta pi‰te velikost písma 12 ﬁádkování 1 5 poãet úderû v ﬁádku 60 maximální poãet ﬁádkû 30 typ písma times new roman k pozvánce je pﬁiloïen ãasov˘ harmonogram jednotliv˘ch vystoupení prof mudr vladimír tesaﬁ drsc doc mudr tûpán svaãina csc prodûkan pro vûdeckou práci a v˘zkum dûkan 1 lf
ve‰keré informace o konání svk oddûlení pro vûdeckou ãinnost
a zahraniãní styky 1 lf
ivana rûïiãková tel 249 643 58
e-mail ivana ruzickova@lf1 cuni cz
pozvánka
4
sekce prací pregraduálních studentû - ãást teoretická
1 tûpán havránek
2 ale‰ hejãl
3 václava jeﬁábková
4 david kemlink
5 jan kolaﬁík
6 martin leníãek
sekce prací pregraduálních studentû - ãást klinická
1 ing magdalena foﬁtová
2 eszter horváth
3 jitka hrachová tûpán gála
4 adéla kalabisová
5 karel kuãera
6 jan moravík
7 tûpán podzimek
8 irena sinecká jiﬁina vachková
9 martin tomeãek
10 stsiapan vinakurau
sekce pﬁednesen˘ch prací v doktorském studijním programu
1 mudr petra bene‰ová
2 mgr klára benetková
3 mudr nikolina canová
4 mgr markéta âapková
5 mudr jan âern˘
6 mudr hana fikáãková
7 mudr roman fra‰ko
8 mudr eva houïviãková
9 mudr michaela jakoubková
10 mudr kateﬁina jandová
11 mudr martin janeãek
12 mudr radek jirman
13 mudr monika kolská
14 mudr barbora komárková
15 mudr jana kuãerová
16 mudr franti‰ek li‰ka 17 mudr david melechovsk˘
18 mudr jiﬁí pe‰ina
19 mudr ondﬁej eda
20 mgr lenka indeláﬁová
21 mudr iveta valkounová
22 mudr jitka vaàková
23 mgr marek vecka
24 mgr kamila záli‰ová
seznam úâastníkò 2 studentské vùdecké konference 1 léka¤ské fakulty
5
sekce posterû v doktorském studijním programu
1 mudr simona dostálová
2 mudr karin kormanová
3 mgr zuzana krátká
4 mgr zuzana krátká
5 mgr martin krátk˘
6 ing lenka mrázová
7 mudr sergej romaniv
8 mudr olga veselá
hodnotitelské komise 2 studentské vûdecké konference 1 lf konané dne 14 5 2001
sekce pregraduálních studentû
klinická ãást
pﬁedseda prof mudr jan krha drsc ãlen prof mudr jaroslav racek drsc teoretická ãást
pﬁedseda prof mudr emanuel neãas drsc ãlenové prof mudr petr zvolsk˘ drsc prof mudr pavel petrovick˘ drsc sekce postgraduálních studentû
pﬁedseda prof mudr jiﬁí kraml drsc ãlen prof rndr franti‰ek vítek drsc hodnotitelské komise 6
abstrakta prací úâastníkò 2 studentské vùdecké konference podle umístùní v sekcích
1 místo
anal¯za teratogenního úâinku retinové kyseliny u rekombinantních inbredních kmenò laboratorního potkana autoﬁi david kemlink václava jeﬁábková kolitel prof mudr vladimír kﬁen drsc ústav biologie a lékaﬁské genetiky 1 lf a vfn
retinová kyselina ra patﬁí k derivátûm vitaminu a retinoidûm které se pouïívají pﬁi léãbû koïních chorob v onkologii a hematologii teratogenní úãinek ra na v˘voj konãetin byl popsán u my‰í laboratorního potkana a v po-
slední dobû je prokazován v epidemiologick˘ch studiích i u ãlovûka cílem této farmakogenetické studie je pomocí asociaãní anal˘zy nalézt oblasti potkaního genomu které ovlivàují interakci s ra ve studii pouïíváme novou sadu rekombinantních inbredních kmenû pxo které vykazují kontinuální distribuci projevû modelového syndromu poruchy v˘voje konãetin pls samci vybran˘ch kmenû pxo byli kﬁíïeni se
samicemi progenitorního kmene shr lx protoïe modifikátory shr genomu sniïují embryotoxick˘ efekt ra a je pak
moïné kvantitativní hodnocení kosterních zmûn bﬁezím samicím bylo 13 den gravidity podáno 100 mg kg all-trans-
-retinové kyseliny tretinoin plody byly odebrány 22 den zváïeny a obarveny diferenciálnû na kost a chrupavku jako
kontroly slouïily bﬁezí samice kter˘m byl podán pouze rozpou‰tûcí roztok na obarven˘ch plodech je hodnocen poãet prstû pﬁedních a zadních konãetin a provádí se morfometrická digitální anal˘za parametrû auto- zuego- a stylopodia zadních konãetin jejíï v˘sledky budou podkladem pro asociaãní anal˘zu v˘sledky anal˘zy poãtu prstû zadních konãetin
vykazují signifikantní rozdíly mezi jednotliv˘mi pxo kmeny po podání ra 2 místo
morfologie amygdaly v histologick¯ch ¤ezech
autor ale‰ hejãl kolitel prof mudr pavel petrovick˘ drsc anatomick˘ ústav 1 lf
amygdala je struktura cns zapojená do systému drah souvisejících s emocemi pamûtí sexuálním chováním atd z tûchto dûvodû ale hlavnû pro nové moïnosti zobrazení v nmr se dostává do popﬁedí zájmu klinikû dnes je na kli-
nikách ãastou metodou posuzování amygdaly volumetrie v obraze nmr v tûchto obrazech je v‰ak dobﬁe urãitelná pouze její laterální a mediální hranice klinická literatura ukazuje znaãné rozdíly v urãování hranic amygdaly dané vût‰i-
nou moïnostmi a zamûﬁením klinického pracovi‰tû pﬁesnou hranici amygdaly mûïe urãit pouze morfologická metodika
a mûﬁení cílem této práce je proto vytvoﬁit morfologick˘ podklad corpus amygdaloideum pro její hodnocení v ﬁezech vznik-
l˘ch metodou nmr a to hlavnû ve vztahu k vûku na‰e práce vychází z mûﬁení amygdaly na histologick˘ch ﬁezech mozkû
ve frontální rovinû získan˘ch post mortem vût‰ina tûchto mozkû je pﬁed morfologick˘m zpracováním vy‰etﬁena magne-
tickou rezonancí pro následnou korelaci mezi anatomií a nmr po fixaci mozku ve formolu jsou ﬁezy oblastí amygdaly o tlou‰èce 100 µm v sérii po 0 5 mm nabarveny kresylvioletí zobrazeny pomocí zvût‰ovacího zaﬁízení a mûﬁeny plani-
metrem do souãasné doby bylo zpracováno a zmûﬁeno 12 mozkû ve vûkovém rozmezí od 38 do 89 let u nichï byla mûﬁena velikost amygdaly jak absolutní tak i pomûrná získané hodnoty byly vztaïeny k objemu celého ﬁezu mozkem v úrovni commisura anterior o tlou‰èce 1 cm tento vztah byl vybrán proto aby usnadnil pﬁi klinickém hodnocení v nmr
vyhodnocení individuální variability velikosti amygdaly u rûzn˘ch pacientû dosavadní mûﬁení vykazují hodnoty absolutních
velikostí amygdaly mezi 1 1 aï 2 3 cm3 velikosti pravé a levé amygdaly se u jednotliv˘ch mozkû li‰í stejnû jako se li‰í velikosti pravé a levé hemisféry pﬁiãemï ani pravá ani levá amygdala není statisticky vût‰í relativní velikosti amyg-
daly vztaïené na objem ﬁezu mozku v úrovni commissura anterior se pohybují od 2 3 do 4 4 pﬁi vztaïení tûchto hodnot k vûku mozku je zﬁejm˘ pokles objemu amygdaly v prûbûhu 50 let 38 rokû 89 rokû a to jak v absolutních tak
i relativních hodnotách aï o 50 3 místo
disperze intervalu qt a projekce vektoru vlny t
autoﬁi jan kolaﬁík tûpán havránek kolitel doc mudr otomar kittnar csc fyziologick˘ ústav 1 lf
vedle klasického vysvûtlení disperze intervalu qt qtd jako projevu regionální heterogenity repolarizace myokardu
se nyní pro tento fenomén prosazuje je‰tû dal‰í moïná interpretace ta vysvûtluje existenci qtd rozdílnou projekcí sekce prací pregraduálních studentò âást teoretická
8
sumárního repolarizaãního vektoru do pﬁíslu‰ného svodu to ïe se v nûkterém ze svodû objevila nulová amplituda dﬁíve
neï v jiném znamená ïe svod mohl b˘t v daném okamïiku kolm˘ na vektor elektrického pole u intervalu qt to tedy
prakticky znamená ïe na osu svodu by byla kolmá poslední ãást t-smyãky vektorkardiogramu z tûchto dûvodu jsme zkoumali morfologii smyãky t na vektrokardiografick˘ch záznamech souboru zdrav˘ch tûhot-
n˘ch ïen na nichï byla jiï dﬁíve nalezena statisticky v˘znamná qtd záznamy byly poﬁízeny na pﬁístroji cardiag
112 2 u souboru 10 tûhotn˘ch pﬁed a po porodu a u kontrolní skupiny 15 dobrovolnic na smyãce t jsme hodnotili ve tﬁech na sebe kolm˘ch rovinách frontální sagitální i transverzální tyto parametry amplitudu a úhel vektoru t úhel
smyãky t v první a poslední ãtvrtinû trvání vlny t a úhel ‰íﬁky smyãky ve frontální rovinû jsme u tûhotn˘ch nalezli v˘znamnû niï‰í amplitudu vektoru t 375 ± 163 oproti kontrolám 586 ± 42 a pﬁedev‰ím rozdíl v jeho orientaci konkrétnû men‰í úhel osy t k horizontální rovinû 11 ± 19 vs 31 ± 13 a také vût‰í ‰íﬁku smyãky t 10 3 ± 5 3 vs 6 1 ± 2 4 tyto zmûny korespondují se zv˘‰ením qtd podle v˘‰e uvedené hypotézy a naznaãují ïe mezi qtd a konfigurací smyãky t existuje úzk˘ vztah jeho pﬁípadnou kauzalitu v‰ak bude tﬁeba je‰tû ovûﬁit bez ocenùní intracelulární znaâení hippocampálních bunùk
autor tûpán havránek kolitel prof mudr jaroslav pokorn˘ drsc fyziologick˘ ústav 1 lf
anal˘za morfologie dendritû nervov˘ch bunûk je velmi dûleïitá pﬁi klasifikaci neuronû hodnocení jejich stavu ãi úrovnû jejich v˘voje jednou z moïností jak získat kvalitní informace o dendritech neuronû je metoda vyuïívající plnûní neuronu vhodnou látkou intracelulární injekcí pod pﬁímou zrakovou kontrolou v na‰em pﬁípadû se intracelulární injekce provádûjí na mikroskopu pracujícím v oblasti infraãerveného svûtla ir se sledováním preparátu na obrazovce u tohoto mikroskopu máme pevn˘ stolek s pohybliv˘m objektivem k mikroskopu
je pﬁipojeno mikromanipulaãní zaﬁízení umoïàující pohyb sklenûné mikroelektrody rûzn˘mi rychlostmi v osách x y a v ose p svírající s osou x úhel 45° je nutno zdûraznit ïe k orientaci pod mikroskopem v ose z osa z je kolmá k rovinû
stolku uïíváme jako jednotek vzdálenosti poãet otoãení mikro‰roubem o 360° nejprve se elektrodou pﬁiblíïíme na vzdá-
lenost jednoho otoãení mikro‰roubu nad zajímavou oblast preparátu a pak po vybrání pﬁíslu‰né buàky v ir se pomocí dvou
jednoduch˘ch pﬁesnû vymûﬁen˘ch pohybû v osách x a p umístí hrot elektrody do cytoplasmy buàky vlastní látka mety-
lenová modﬁ evansova modﬁ lucifer yellow je do buàky vpravena elektroforeticky pomocí stejnosmûrného proudu preparát je následnû pozorován ve viditelném svûtle a ve fluorescenci nejvût‰ím problémem se zatím zdá b˘t únik injikované látky do okolí plnûné buàky kter˘ velmi ztûïuje následné pozorování ve fluorescenci genetická anal¯za rekombinantních inbredních kmenò pxo laboratorního
potkana autoﬁi václava jeﬁábková david kemlink kolitel prof mudr vladimír kﬁen drsc ústav biologie a lékaﬁské genetiky 1 lf a vfn
rekombinantní inbrední ri kmeny pxo jsou fixovaná imortalisovaná f2 populace vzniklá kﬁíïením polydaktyl-
ního kmene shr lx a oligodaktylního kmene bxh2 kter˘ je rovnûï ri kmenem vznikl˘m z vysoce inbredních kmenû
shr a bn lx a také nese alelu lx podmiàující syndrom polydaktylie luxace pls pxo kmeny novû doplàují stáva-
jící sady ri kmenû které slouïí jako zvíﬁecí modely nûkter˘ch lidsk˘ch onemocnûní malformace konãetin pls a hypertenze v‰echny pxo kmeny jsou homozygotní v alele lx a nesou rûzné kombinace modifikátorû pûvodu shr
nebo bn spoleãnû s ostatními ri kmeny vykazují kontinuální distribuci projevû pls genetická mapa popisující geno-
typ inbredního kmene strain distribution pattern sdp umoïàuje porovnávání fenotypu a genotypu asociaãní anal˘zu sdp vhodné k asociaãní anal˘ze má jednotliv˘mi markery pokr˘vat rovnomûrnû cel˘ genom cílem této práce je urãení genotypû u jednotliv˘ch pxo kmenû a sestavení sdp dna izolovaná od jednotliv˘ch kmenû je metodou pcr analyzována pomocí anonymních mikrosatelitních markerû a nûkter˘ch znám˘ch genû poﬁadí
markerû a jejich zaﬁazení na pﬁíslu‰né chromosomy je pﬁebíráno ze stávající mapy ostatních ri kmenû a veﬁejnû pﬁístup-
n˘ch zdrojû pro mapování genomu potkana v souãasné dobû je nejpodrobnûji zpracována mapa potkaního chromosomu 10 rno 10 kam mapuje nûkolik kandidátních modifikujících genû 9
purifikace rekombinantní podjednotky b verotoxinu escherichie coli se speci-
ficitou pro globotriaosylceramidov¯ receptor
autor martin leníãek kolitelé mudr martin hﬁebíãek rndr jana ledvinová ústav dûdiãn˘ch metabolick˘ch poruch 1 lf a vfn
úvod podjednotka b verotoxinu e coli specificky rozpoznává globotriaosylceramid gb3 kter˘ je mimo jiné hlavní
stﬁádanou molekulou u pacientû s fabryho chorobou právû znaãné specificity této vazby lze vyuïít pﬁi prûkazu gb3 pﬁi
diagnostice v˘zkumu a monitorování úãinnosti léãby fabryho choroby oproti protilátkám zde oãekáváme vy‰‰í citlivost vzhledem k tomu ïe se gb3 jako molekula cd 77 vyskytuje v plazmatick˘ch membránách bunûk a v˘znamnû se podílí
na vzniku hemolyticko uremického syndromu a hemoragické kolitidy pﬁi infekci e coli lze oãekávat i pouïití v této ob-
lasti metodika podjednotku b verotoxinu slt 1b jsme pﬁipravili ve formû fúzního proteinu s maltose binding protein kter˘ jsme pﬁeãistili na amylosové kolonû a roz‰tûpili faktorem xa ze vzniklé smûsi jsme se pokusili odstranit mbp a ne-
roz‰tûpen˘ fúzní protein opût pomocí amylosové kolony nikdy v‰ak nedo‰lo k dostateãnému vyãi‰tûní ani na iontomû-
niãové kolonû deae sephadex se nepodaﬁilo proteiny oddûlit pravdûpodobnû pro nespecifické interakce mbp a slt 1b dal‰í pouïitou metodou byla filtrace pﬁes membránu millipore cut off 10 kda vyuïívající rozdílné velikosti
mbp 42 kda a slt 1b 5 kda nezabránili jsme tvorbû pentamerû 25 kda v této formû se slt 1b vyskytuje a tak ani tuto metodu nelze pouïít nakonec jsme pﬁipravili afinitní kolonku gb3 hydrofobnû vázan˘ na silanizované sklenûné kuliãky na kterou jsme smûs proteinû nanesli po promytí jsme analyzovali zachycené proteiny na elektroforézou sds page do‰lo prakticky ke kvantitativnímu záchytu slt 1b pokusy o uvolnûní této vazby nebyly úspû‰né ani pﬁi pouïití ph v rozmezí 2 5 8 nacl o konc aï 0 9 m laktózy ãi galaktózy o konc 0 5 m ãi 0 2 m resp ãásteãné denaturace guanidiniem ãi sds pouze 1 m tris ph 9 6 dokázal vazbu rozru‰it efektivita v‰ak byla velmi malá v˘sledky a závûr podaﬁilo se nám prokázat specificitu vazby slt 1b na gb3 nepodaﬁilo se ale najít dostateãnû úãinnou metodu purifikace proto zkou‰íme pﬁípravu vt jin˘m expresním systémem kde lze pﬁi ãi‰tûní vyuïít samo‰tû-
pící vlastnosti inteinu 10
1 místo
mikrobiální obraz zánùtu zubního lòîka u ku¤ákò
autor martin tomeãek kolitel as mudr hana staàková stomatologická klinika 1 lf a vfn
hojení extrakãní rány a pﬁípadn˘ vznik zánûtliv˘ch komplikací ovlivàuje ﬁada faktorû ze strany pacienta jsou to predisponující onemocnûní napﬁ diabetes mellitus hypertenze poruchy koagulace aj úroveà ústní hygieny a závaïn˘m
faktorem je pravdûpodobnû i kouﬁení dal‰ími faktory jsou okolnosti vlastní extrakce vasokonstrikãní pﬁísady anestetik technické provedení chirurgického v˘konu a jeho délka profylaktické podání antibiotik pﬁedloïená prospektivní studie hodnotí skupinu nemocn˘ch o‰etﬁen˘ch posluchaãi stomatologie 1 lf v praze klade
si za cíl ovûﬁit 1 vliv kouﬁení na incidenci zánûtu zubního lûïka 2 vliv kouﬁení na mikrobiální obraz zánûtu zubního lûïka pomûr aerobní a anaerobní flóry obû závislosti jsou sledovány ve standardizovan˘ch skupinách s vylouãením jin˘ch predisponujících vlivû a s ohledem
na mnoïství vykouﬁen˘ch cigaret a pﬁed extrakcí b v den extrakce c v následujících dnech po extrakci klíãová slova zánût zubního lûïka mikrobiální obraz kouﬁení 2 místo
bilirubin v krvi a nùkteré rizikové faktory ichs
autor jan moravík kolitelé mudr ladislav novotn˘ ústav hygieny a epidemiologie 1 lf a vfn
prof mudr vladimír bencko drsc pﬁednosta ústavu hygieny a epidemiologie 1 lf a vfn
bilirubin v krvi bil patﬁí mezi endogenní antioxidanty a je indikátorem celkové antioxidaãní kapacity krve tato
vlastnost se nyní zvaïuje pﬁi vysvûtlování pozorovaného niï‰ího v˘skytu ischemické choroby srdeãní ichs u mírné hyperbilirubinémie na souboru 165 muïû manaïérû bez manifestované ichs a nebo cévní mozkové pﬁíhody vy‰etﬁe-
n˘ch rutinní preventivní prohlídkou demonstrujeme vztah celkového bilirubinu k rizikov˘m faktorûm ichs a dal‰ím parametrûm které ovlivàují hladiny bil a které je nutno vzít v úvahu pﬁi interpretací vztahu bil k ichs celkov˘ bilirubin prûmûr 15 4 sd 6 2 µm 75 percentil 18 0 min 5 0 max 42 0 negativnû koreloval r hladina v˘znamnosti
p 0 05 s trombocyty -0 14 s poãtem vykouﬁen˘ch cigaret za den -0 08 nev˘znannû ns vûkem -0 13 ns a dále ale také nev˘znamnû s celkov˘m a hdl cholesterolem triglyceridy glykémií systolick˘m krevním tlakem a body mass
indexem pozitivním korelátem bilirubinu byl stﬁední objem destiãek 0 27 v˘znamnû a koncentrace ldl 0 11 ns v˘znamná souvislost poãtu a stﬁedního objemu destiãek byla patrná i pﬁi multivariaãní anal˘ze a oba parametry byly v˘znamnû ovlivnûny kouﬁením cigaret práce naznaãuje ïe pﬁi zkoumání pﬁedpokládaného ochranného vlivu bilirubinu jako endogenního antioxidantu je nutno zváïit jeho moïnou spotﬁebu v pﬁítomnosti pro-oxidativních situací a poãítat s tímto fenoménem pﬁi anal˘zách asociací bilirubinémie u chronicky nemocn˘ch pacientû 3 místo
cariogram i moderní metoda predikce zubního kazu
autoﬁi tûpán gála jitka hrachová kolitel doc mudr jan handzel csc stomatologická klinika 1 lf a vfn
cariogram je poãítaãov˘ program pocházející ze védska jeho cílem je na základû objektivnû zji‰tûn˘ch údajû od pacienta stanovit riziko vzniku zubního kazu cariogram vychází z 10 faktorû podílejících se na vzniku zubního kazu
- mnoïství plaku dosavadní kazivost sloïení a frekvence pﬁíjmu potravy mnoïství vyprodukované sliny a její pufrovací
schopnosti fluoridov˘ program mnoïství streptococcus mutans ve slinû a také osobní dojem vy‰etﬁujícího cariogram zpracovává tûchto 10 faktorû v˘sledkem je graf vyjadﬁující procentuální pravdûpodobnost ïe nevznikne zubní
kaz v následujícím roce a procentuální podíl potravy orální flóry vnímavosti skloviny a okolností na vzniku zubního kazu vy‰etﬁili jsme 21 studentû 3 roãníku stomatologie stanovili jsme individuální cariogram u kaïdého z nich riziko ïe nevznikne kaz se u studentû pohybovalo od 19 do 70 pﬁi zpracování v˘sledkû jsme porovnávali dvû skupiny studentû podle cariogramu pravdûpodobnost ïe nevznikne kaz u studentû ze stomatologick˘ch rodin je 43 3 a u studentû z rodin nestomatologick˘ch 37 3 sekce prací pregraduálních studentò âást klinická
11
v závûru pro názornost srovnáváme 2 studenty jednoho s nízk˘m a jednoho s nejvy‰‰ím rizikem vzniku kazu podle v˘sledkû cariogramu cariogram je dobrou pomûckou pro zubního lékaﬁe ozﬁejmuje pacientovi multifaktoriální podklad vzniku zubního
kazu cariogram je cestou jak motivovat pacienta k profylaxi a péãi o vlastní chrup a ukázat pacientovi jak ovlivnit rizika
kazivosti bez ocenùní koncentrace metabolitò vitaminu d v krevním séru p¤i sníîené funkci ledvin
autor ing magdalena foﬁtová kolitelé doc mudr sylvie sulková csc interní oddûlení strahov 1 lf a vfn
prof mudr tomá‰ zima drsc ústav klinické biochemie 1 lf a vfn
v dﬁívûj‰ích sledováních jsme zjistili ãast˘ v˘skyt nízk˘ch hladin aktivních metabolitû vitaminu d u pacientû se sníïe-
nou funkcí ledvin cílem této studie bylo sledovat odezvu parametrû fosfokalciového metabolismu na individualizovanou
suplementaãní terapii do studie bylo zaﬁazeno 57 pacientû z 6 nefrologick˘ch stﬁedisek âr a = 38 dosud nedialyzovan˘ch ccr 0 42 ± 0 22 ml s vûk 62 4 ± 10 8 let b = 19 hemodialyzovan˘ch vûk 61 5 ± 16 4 let u pacientû byly sledovány parametry kostního metabolismu ca pi alp rutinní metody kalcitriol kalcidiol pth imunochemické metody u více neï 70 pacientû byly nalezeny sníïené v˘chozí koncentrace kalcitriolu a u 40 kalcidiolu na podkladû
tûchto v˘sledkû byla léãba individuálnû upravena kontrolní stanovení bylo provedeno po 2 aï 3 mûsících léãby v˘chozí a v˘sledné hodnoty kalcitriolu 1 25d ng l kalcidiolu 25d ug l a pth pmol l v obou skupinách udává tabulka p 0 01 p 0 05 a-pﬁed a-po b-pﬁed b-po fyz meze
1 25d 18 2 ± 8 3 24 62 ± 11 5 11 22 ± 8 1 23 22 ± 10 1 19 9 67 0
25d 13 82 ± 7 4 14 02 ± 5 6 10 02 ± 5 9 14 52 ± 4 3 8 9 46 7
pth 10 52 ± 6 1 11 02 ± 8 1 20 02 ± 13 8 15 12 ± 13 0 1 0 6 8
v˘sledky ukázaly ïe vy‰etﬁení koncentrací metabolitû vitaminu d pﬁedstavuje v˘znamn˘ pﬁínos pro vãasnou a indivi-
dualizovanou úpravu hladin coï mûïe pﬁispût k prevenci pozdních pokroãil˘ch forem poruchy kostního metabolismu noâní polysomnografie u amyotrofické laterální sklerózy als autoﬁi eszter horváth karel onka jan fiksa michaela jakoubková jana sussová soàa nev‰ímalová kolitel doc mudr karel onka csc neurologická klinika 1 lf a vfn
als pﬁi své progresi vede k ventilaãní insuficienci pﬁedpokládá se ïe první pﬁíznaky ventilaãní insuficience u als se projeví bûhem spánku a ïe spánek je u als nekvalitní vy‰etﬁili jsme 7 pacientû s als prûmûrn˘ vûk 61 1 ± 6 9 let trvání choroby 1 8 ± 0 5 roku norrisovo skóre 71 7 ± 12 3 u v‰ech byla provedena celonoãní polysomnografie eeg eog emg mm mentales a tibiales anteriores ekg ventilace a saturace hemoglobinu kyslíkem byly sledovány poãty
respiraãních událostí za 1 hodinu spánku rdi trvání jednotliv˘ch spánkov˘ch stádií a pﬁítomnost dal‰í patologie ve spánku v˘sledky efektivita spánku 67 5 ± 8 9 latence usnutí 26 1 ± 24 6 min
trvání 3 4 nrem 13 2 ± 6 2 trvání rem spánku 12 0 ± 4 4 trvání bdûlosti po usnutí 25 5 ± 8 7 rdi celkem 7 6 ± 7 8
rdi rem 13 4 ± 21 5
rdi nrem 5 2 ± 5 6
u 3 pacientû byly nalezeny v˘razné apnoické pauzy v rem spánku 6 nemocn˘ch mûlo zhor‰enou architekturu spánku periodické pohyby konãetinami ve spánku plms byly u 44 4 pacientû závûr spánek u als je nekvalitní má ‰patnou architekturu a nedostateãné zastoupení 3 a 4 nrem a rem spánku âasté jsou apnoe v rem spánku a plms 12
cad-cam systém p¤i o et¤ování defektò zubò a sledování úspù nosti o et¤ení
laserovou fluorescencí
autor adéla kalabisová kolitel mudr jana du‰ková csc v˘zkumn˘ ústav stomatologick˘ 1 lf a vfn
systém cad cam computer aided design and computer aided manufacturing pﬁedstavuje jeden z moderních
postupû pﬁi o‰etﬁování defektû zubû v postranním úseku pﬁi kterém se vyuïívá poãítaãového zobrazení situace v ústech
pomocí intraorální kamery a následného robotického zhotovení keramické inlaye resp onlaye tímto technologick˘m po-
stupem lze o‰etﬁit rozsáhlé defekty zubu inlayí nebo onlayí pﬁipravenou z materiálu s dobr˘mi mechanick˘mi i barevn˘mi
vlastnostmi hlavní pﬁedností tohoto zpûsobu je téï moïnost o‰etﬁení v jedné náv‰tûvû tento systém je plnû vyuïíván napﬁ pﬁi zhotovování inlayí pﬁístrojem cerec siemens ceramic reconstruction v prûbûhu na‰í studie jsme tímto postupem o‰etﬁili ‰est defektû zubû a úspû‰nost o‰etﬁení jsme hodnotili po pûl roce pro klinické hodnocení úspû‰nosti tj sledování kvality okrajového uzávûru jsme pouïili neinvazivní metodu laserové fluo-
rescence kavo diagnodent v prûbûhu dosavadního sledování jsem nezaznamenali subjektivní obtíïe spojené s o‰etﬁe-
ním rozsáhl˘ch defektû a pﬁi kontrole po pûl roce jsme nezjistili ïádná po‰kození okrajového uzávûru keramick˘ch inlayí mù¤ení hemodynamick¯ch parametrò regionálního parciálního tlaku oxidu
uhliâitého a intramucosálního ph
autor karel kuãera kolitel mudr martin stﬁítesk˘ ii chirurgická klinika klinika kardiovaskulární chirurgie 1 lf a vfn
úvod cílem práce je pomocí mûﬁení hemodynamick˘ch parametrû gastrického pco2 a phi ovûﬁit pozitivní vliv vysoké epidurální anestezie na celkov˘ stav nemocn˘ch v peri i postoperaãním období u pacientû podstupujících kardio-
chirurgick˘ v˘kon v mo metodika v prospektivní randomizované studii porovnáváme rozdíln˘ vliv vysoké hrudní anestezie ve srovnání s celkovou anestezií na hemodynamické parametry a splanchnickou oblast u pacientû podstupujících kardiochirurgick˘ v˘kon v mo k mûﬁení reg perfuze pouïíváme údajû reg pco2 a phi metodou gastrické tonometrie zároveà jsou mo-
nitorovány ve‰keré hemodynamické parametry biochemick˘ monitoring sestává z parametrû acb minerálû ko koag parametrû a lab markerû orgánov˘ch dysfukcí v˘sledky charakteristika souboru se neli‰ila v obou zkouman˘ch skupinách ve skupinû s epidurální anest jsme museli pro dislokaci katetru jednoho pacienta ze studie vylouãit mezi skupinami celkové anestezie a kombinované anestézie byl signifikantní rozdíl v tf a hodnotách sys tk v perioperaãním období rozdíl byl patrn˘ i v co a svr v pooperaãním období byl patrn˘ nejvût‰í rozdíl v dobû probuzení a dobû extubace epidurální anestezie se ukázala také
jako nejsilnûj‰í analgetikum závûr v této prospektivní studii jsme porovnávali dva rûzné zpûsoby anestezie u kardiochirurgick˘ch operací zatímco
balancovaná anestezie je standartní metodou v kardiochirurgii kombinovaná anestezie epidurální inhalaãní se stala
moderní metodou v kardiochirurgii aï s pﬁíchodem nov˘ch operaãních technik dle na‰ich poznatkû se jedná o bezpeã-
nou metodu jeï odpovídá nov˘m trendûm v anestezii rychlá probuditelnost sníïení pooperaãních komplikací krat‰í doba hospitalizace velk˘ pooperaãní komfort pacienta a hemodynamická stabilita jedna z jejich nev˘hod je invasivnost této metody reakce na tùîké kovy u pacientò s protilátkami proti spermiím
autoﬁi tûpán podzimek lenka pﬁibylová
doc mudr z ulãová-gallová drsc gynekologicko-porodnická klin lf a fn plzeà kolitel mudr jarmila procházková csc v˘zkumn˘ ústav stomatologick˘ 1 lf a vfn
úvod souãástí dentálních materiálû jsou biologicky aktivní látky které i pﬁes deklarovanou biokompatibilitu mohou u citliv˘ch jedincû vyvolat zdravotní obtíïe pﬁi ïv˘kacím procesu se abrazí zubních v˘plní korunek a mûstkû uvolàuje nezanedbatelná ãást tûïk˘ch kovû do organismu vût‰inû osob neãiní tyto kovy z dentálních materiálû ïádné zdravotní
problémy existuje v‰ak skupina pacientû u kter˘ch se díky jejich sensitivitû projevuje neïádoucí reakce na kovy rtuè která je spoleãnû s dal‰ími kovy souãástí zubního amalgamu byla v literatuﬁe oznaãena jako jeden z moïn˘ch etiologic-
k˘ch faktorû pﬁi muïské neplodnosti cílem na‰í studie bylo proto zjistit zda u pacientû prokázan˘mi protilátkami proti
spermiím existuje neïádoucí reakce na rtuè a dal‰í tûïké kovy které jsou obsaïeny v dentálních materiálech materiál a metodika vy‰etﬁovan˘ soubor pacientû tvoﬁilo 21 muïû a 22 ïen s prokázan˘mi protilátkami proti spermiím
v séru kontrolní soubor byl sestaven z 13 dobrovolníkû bez protilátek proti spermiím v séru a bez problémû s plodností 13
v‰echny osoby byly vy‰etﬁeny anamnesticky stomatologicky a jejich reakce na kovy byla testována imunologickou metodou melisa test blastické transformace modifikovan˘ pro kovy principem metody je mûﬁení syntézy dna v buà-
kách stimulovan˘ch mitogeny ãi roztoky kovû a v buàkách nestimulovan˘ch v˘sledkem testu je stimulaãní index si pﬁedstavující pomûr míry proliferace bunûk stimulované a nestimulované kultury jako neïádoucí reakci hodnotíme si 1 5 v˘sledky z anamnestick˘ch údajû jsme zjistili ïe v‰ichni vy‰etﬁení mají chrup sanován amalgamem a dal‰ími kovov˘mi
dentálními materiály a dále ïe vût‰ina na‰ich pacientû trpí alergiemi u pacientû byla zji‰tûna neïádoucí reakce pﬁedev‰ím na anorganické formy rtuti ïelezo stﬁíbro a hliník mononukleární buàky 72 na‰ich pacientû silnû prolife-
rovaly po stimulaci hgcl2 si 2 zatímco u kontrol byla tato reakce niï‰í si 1 5 diskuse a závûry z na‰ich ‰etﬁení vypl˘vá ïe rtuè je jedním z kovû kter˘ mûïe pﬁispívat u disponovan˘ch osob k váïnému po‰kození imunitních reakcí coï se mûïe obrazit nejen v celkovém zdravotním stavu organismu ale i v takové
oblasti jako je reprodukce stav chrupu a úrove≈ péâe o dutinu ústní u studentò 1 roâníku oboru stomato-
logie 1 lf rozdíly mezi dûtmi stomatologû a dûtmi v jejichï rodinách stomatolog není
autoﬁi irena sinecká jiﬁina vachková kolitel doc mudr jan handzel csc stomatologická klinika 1 lf a vfn
námûtem na‰í práce byla finská studie mudr taly 1989 uvádûjící velké rozdíly v kazivosti chrupu u potomkû sto-
matologû ve srovnání s ostatními kazivost u potomkû stomatologû byla témûﬁ nulová zajímalo nás zda u nás nalezneme
podobné rozdíly vy‰etﬁily jsme 30 studentû 1 roãníku oboru stomatologie 1 lf které jsme rozdûlily do 2 skupin potomky stomatologû
a ty jejichï rodiãe stomatologové nejsou 14 z tûchto 30 studentû má stomatologa v rodinû nejprve jsme pomocí dotazníku zji‰èovaly jakou péãi vûnovali a vûnují úãastníci na‰eho prûzkumu svému chrupu z hlediska preventivního a or-
todontického dále jsme u kaïdého z nich vy‰etﬁily kazivost chrupu krvácivost dásní a mnoïství pﬁítomného zubního plaku zji‰èovaly jsme také úroveà stimulované salivace a pufrovací kapacitu sliny z nasbíran˘ch vzorkû sliny jsme kultivovaly na
specifick˘ch pûdách streptococcus mutans a lactobacilli neboè jsou jedním z rizikov˘ch faktorû tvorby zubního kazu v˘sledky vy‰etﬁení jsme zpracovaly pro kaïdou skupinu zvlá‰è a vzájemnû jsme je porovnaly oãekávaly jsme ïe u dûtí stomatologû zjistíme niï‰í kazivost vy‰‰í úroveà prevence a podstatnû lep‰í ústní hygienu neï u jejich kolegû kteﬁí
nejsou ze stomatologick˘ch rodin získané hodnoty v‰ak na‰e pﬁedpoklady nepotvrdily pﬁi porovnání prûmûrn˘ch hodnot se ukázalo ïe v daném vzorku studentû je situace opaãná zjistily jsme ïe u potomkû stomatologû je více dbáno
pouze na ortodontickou léãbu stav chrupu a ústní hygiena jedincû které jsme vy‰etﬁily jsou pﬁeváïnû ‰patné aã by právû oni jako budoucí stomato-
logové mûli o svûj chrup peãovat mnohem lépe neï ostatní jakou situaci pak lze oãekávat v na‰í populaci nebylo by tedy vhodné vûnovat mnohem vût‰í pozornost prevenci a hygienû ve v‰ech vûkov˘ch skupinách rodiny stomatologû a stomatology samé nevyjímaje kvalitativní a kvantitativní vyhodnocení stravy u studentò léka¤ské fakulty
pomocí jídelníâkového programu progana
autor stsiapan vinakurau kolitel doc mudr zdenûk vilikus csc ústav tûlov˘chovného lékaﬁství 1 lf a vfn
úvod âeská republika byla koncem 80 let v ukazatelích rizikov˘ch faktorû ichs na pﬁedních místech evropského
ïebﬁíãku po roce 1989 do‰lo k v˘znamnému sníïení mortality na kardiovaskulární onemocnûní podle studie monika
se na tomto pﬁíznivém trendu podílejí zejména zmûny ve kvalitû a kvantitû stravování cíl cílem na‰í práce bylo zjistit jak se stravují studenti lékaﬁské fakulty a v ãem se jejich strava li‰í pokud se li‰í od doporuãen˘ch v˘ïivov˘ch dávek publikovan˘ch v kajabou et al 1992 metody údaje o kvalitû a kvantitû stravy jsme zji‰èovali u 30 studentû 4 roãníku 1 lf ïeny 20 vûk 23 5 - 0 5 muïi 10 vûk 23 8 - 0 5 pomocí standardizovaného dotazníku vyhodnocení jsme provádûli pomocí speciálního programu progana urãenému k vyhodnocování v˘ïivy v˘sledky energetick˘ pﬁíjem byl pﬁimûﬁen˘ studenti pﬁijímali stravu s men‰ím podílem rostlinn˘ch bílkovin a tukû a naopak s vy‰‰ím podílem ïivoãi‰n˘ch bílkovin a tukû strava obsahovala málo kyseliny linolové málo draslíku a hrubé
vlákniny vitaminu c obsahovala strava dostatek vitaminy skupiny b a zejména vitamin e byl ve stravû obsaïen v nedo-
stateãné kvantitû pﬁíjem cholesterolu byl mírnû vy‰‰í neï doporuãuje norma závûry ve stravû studentû jsme zjistili urãité nedostatky autor studie zjistil pﬁimûﬁenou kvantitu stravy av‰ak zastou-
pení jednotliv˘ch sloïek v˘ïivy ukazuje na v˘znamné kvalitativní nedostatky 14
1 místo
metabolic profile of pd cub chromosome 8 congenic strains shr-lx and bn-lx
autor mudr ondﬁej eda kolitel prof mudr vladimír kﬁen drsc institute of biology ad medical genetics first faculty of medicine charles university in prague
insulin resistance is often considered a link between attributes of the metabolic syndrome x i e hyperinsulinemia dyslipidemia essential hypertension and obesity due to complex nature of this frequent disorder precisely defined animal models are used in its study the pd cub inbred rat strain has recently been established as a model of metabolic
syndrome x as it showed hypertriglyceridemia hyperinsulinemia increased adiposity index increased levels of non-
-esterified fatty acids nefa and insulin resistance of adipose and muscle tissues two congenic strains bn-lx and shr-lx were established both carrying the differential segment of chromosome
8 of pd cub origin on bn normometabolic and shr spontaneously hypertensive genetic backgrounds respectively the metabolic profile of these congenic strains was determined under conditions of standard high-sucrose and high-
cholesterol diets in summary the levels of triglycerides nefa and cholesterol were significantly higher in bn-lx
and shr-lx congenic strains compared to their bn and shr progenitors but still significantly lower compared to pd cub strain in most cases the difference is more pronounced between bn and bn-lx strains under the conditions
of standard and high-sucrose diets after high-cholesterol diet there is no significant difference between metabolic profile
of bn and bn-lx strains thus it can be concluded that the differential segment of rno8 carries genes involved in regulation of carbohydrate and lipid metabolism as indicated from human studies more genes and gene-gene and gene-environment interactions are definitely involved in determination of such complex trait so a more detailed genetic dissection is needed therefore we derived a segregating intercross population between pd cub and bn progenitor strains in order to identify possible candidates for particular attributes of metabolic syndrome x 2 místo
biochemical and molecular studies in five children with leigh disease and cytochrome coxidase deficiency
autoﬁi mgr markéta âapková department of pediatrics first faculty of medicine charles university in prague
h hansíková department of pediatrics first faculty of medicine charles university in prague
c godinot ucb lyon france
j hou‰tûk institute of physiology and centre for integrated genomics ascr prague
j zeman department of pediatrics first faculty of medicine charles university in prague kolitel doc mudr j zeman drsc department of pediatrics first faculty of medicine charles university in prague
leigh disease subacute necrotizing encephalopathy associated with cytochrome c oxidase cox deficiency the terminal enzyme of the mitochondrial respiratory chain is one of the most common mitochondrial disorders in childhood a large number of leigh disease patients with cox deficiency have been shown to belong to a single
complementation group with mutations in surf1 gene surf1 located on chromosome 9q34 is homologous to the yeast shy1 gene which encodes an inner mitochondrial membrane protein involved in the biogenesis and assembly
of cox complex as a result of mutations in surf1 gene the activity of cox and mitochondrial respiration are impaired materials and methods typical clinical symptoms of leigh disease were found in five children from the group of over 120 patients with various mitochondrial disorders of energy generating metabolism diagnosed on biochemical or molecular levels in our laboratory here we present the results of biochemical and molecular analyses in these 5 children the activity and protein composition of respiratory chain complexes were studied in isolated lymphocytes and or trombocytes cultured fibroblasts and muscle biopsies the presence of surf1 protein in mitochondria or mitoplasts isolated from cultured
fibroblasts was analysed by western blot using specific anti-hsurf1 antibodies generous gift of dr e a shoubridge results generalised decrease of specific activity of cox was observed in all children two-dimensional electrophore-
sis of mitochondrial proteins showed severely decreased amount of cox and all its subunits western blot analyses in cultured fibroblasts demonstrated the absence of surf1 protein in all affected children molecular analyses are in progress mutations in the surf1 gene were found in two patients up to now sekce p¤ednesen¯ch prací v doktorském studijním programu
15
conclusions elucidation of molecular etiopathogenesis of the mitochondrial disorders in childhood fully depends on co-operation of clinicians and specialists in biochemistry and molecular biology this study was supported by grants vz 111100003 and gauk 8 2000 c 3 místo
pouîití interfázické fish p¤i detekci hyperdiploidií u dùtí s all
autoﬁi mgr lenka indeláﬁová centrum nádorové cytogenetiky iii interní kliniky 1 lf a vfn
z zemanová centrum nádorové cytogenetiky iii interní kliniky 1 lf a vfn
j bﬁezinová ústav hematologie a krevní transfuze
j star˘ 2 dûtská klinika fn motol praha
k michalová centrum nádorové cytogenetiky iii interní kliniky 1 lf a vfn ústav hematologie a krevní transfuze kolitel doc ing kyra michalová drsc centrum nádor cytogen iii int klin 1 lf a vfn
u více neï 40 dûtsk˘ch pacientû s akutní lymfoblastickou leukémií all nacházíme v kostní dﬁeni hyperdiploidní
bunûãné klony s vy‰‰ím poãtem chromozómû neï 46 âasná detekce hyperdiploidie má diagnostick˘ a prognostick˘ v˘znam a je dûleïitá pro zaﬁazení pacienta do odpovídajícího léãebného protokolu pouïití molekulárnû-cytogenetické me-
tody fish bunûk v interfázi umoïàuje odhalit i skrytou hyperdiploidii u pacientû s neúspû‰n˘m nebo normálním v˘sled-
kem klasického cytogenetického vy‰etﬁení bûhem posledních tﬁí let jsme metodou fish vy‰etﬁili 70 dûtí s all 45 chlapcû a 25 dívek prûmûrn˘ vûk 8 4 let pouïili jsme postupnou hybridizaci centromerick˘ch a lokus-specifick˘ch sond pro chromozómy x 4 6 8 10 14 16 18 20 a 21 nejãastûji zmnoïené v hyperdiploidních klonech u kaïdého pacienta bylo hodnoceno 200 interfázních jader a rozsah hyperdiploidních klonû byl 2 5-95 hodnota cut-off level 2 5 byla testována na zdrav˘ch kontrolách na základû molekulárnû-cytogenetick˘ch v˘sledkû lze pacienty
rozdûlit do podskupin s rûznou prognózou nalezli jsme 33 pacientû 47 1 s vysokou hyperdiploidií 50 chromozómû 10 14 3 s nízkou hyperdiploidií 47-50 chromozómû 2 2 9 s témûﬁ triploidií tetraploidií a 4 5 7 s nespecifikovanou hyperdiploidií ve sdûlení budou prezentovány metodika a v˘sledky interfázické fish tato práce byla podporována granty iga mz âr 4744-3 gaâr 302-98-0071 a 301-01-2000 4 místo
vliv kainátu na poâet nadph-diaforáza pozitivních neuronò v hippocampu u potkanò vystaven¯ch chronické hypoxii
autor mudr petra bene‰ová kolitel doc mudr milo‰ langmeier csc fyziologick˘ ústav 1 lf
histochemickou anal˘zou stanovením nadph-diaforázy jsme testovali vliv kainátu podaného intraperitoneálnû 1 den po skonãení pûsobení chronické hypoxie na jednotlivé oblasti hippocampu nadph-diaforáza enzym kolokalizo-
van˘ s nitric oxide syntázou nos tj enzymem produkujícím oxid dusnat˘ no je nepﬁím˘m prûkazem po‰kození
mozku experimentálními zvíﬁaty byli samci laboratorního potkana kmene wistar vlastního chovu od 2 do 17 dne vûku byla
mláìata spoleãnû s matkou vystavena vlivu chronické hypoxie v hypobarické komoﬁe v simulované v˘‰ce 7000 m vïdy 8 hodin dennû 18 den tedy 1 den po skonãení pûsobení hypoxie byl zvíﬁatûm i p aplikován kainát 2 5 mg kg k experimentûm byly pouïity 4 skupiny zvíﬁat 1 mláìata vystavená hypoxii 2 mláìata vystavená hypoxii kter˘m byl 18 den vûku aplikován kainát 3 mláìata nevystavená hypoxii 4 mláìata nevystavená hypoxii kter˘m byl 18 den vûku aplikován kainát 22 den vûku tj 4 dny po aplikaci kainátu byla zvíﬁata usmrcena v pentobarbitalové narkóze transaortální perfuzí 4 pufrovaného paraformaldehydu po nakrájení 40 µm tlust˘ch ﬁezû na kryostatu byly tyto ﬁezy obarveny na prûkaz
nadph-diaforáza pozitivních neuronû poté byly nadph-diaforáza pozitivní neurony kvantifikovány v jednotliv˘ch
ãástech hippocampu ca 1 ca 3 hilus dorzální a ventrální list gyrus dentatus z v˘sledkû je patrné ïe chronická hypoxie zvy‰uje poãet nadph-diaforáza pozitivních neuronû v oblastech ca 1 16
ca 3 a v hilu gyrus dentatus v porovnání s kontrolní skupinou v dorzálním a ventrálním listu gyrus dentatus jsou rozdíly
oproti kontrole nev˘znamné kainát aplikovan˘ normoxick˘m zvíﬁatûm poãet nadph-diaforáza pozitivních neuronû v oblastech ca 1 ca 3 a v hilu gyrus dentatus rovnûï zvy‰uje a v dorzálním a ventrálním listu gyrus dentatus nemûní naproti tomu kainát aplikovan˘ hypoxick˘m zvíﬁatûm poãet nadph-diaforáza pozitivních neuronû v hilu dorzálním a ventrálním listu gyrus dentatus sniïuje v oblastech ca 1 a ca 3 je rozdíl oproti kontrole zanedbateln˘ hypoxie prav-
dûpodobnû zvy‰uje produkci no ovlivnûním genové exprese nos kainát pak zﬁejmû vede k zv˘‰ení produkce no vazbou
na kainátové kanály subpopulaci non-nmda receptorû na‰e v˘sledky svûdãí pro to ïe hypoxie souãasnû sniïuje den-
zitu kainátov˘ch receptorû a tím nepﬁímo produkci no po následovné aplikaci kainátu tato práce je podporována grantem uk 32 2001 c 1 lf gaâr 305 99 0976 a msm 1111 00001 5 místo
anal¯za napjatosti hlavice temporomandibulárního kloubu
autor mudr radek jirman kolitel prof mudr jiﬁí mazánek drsc stomatologická klinika 1 lf a vfn
vytvoﬁení reálného matematického modelu kterékoli ãásti lidského tûla napomûïe správnû porozumût fyziologii patofyziologii ale i funkãnosti dané partie tûla cílem této práce bylo vytvoﬁit matematick˘ model hlavice ãelistního kloubu
pomocí metody koneãn˘ch prvkû na kterém jsme posléze simulovali vliv maximálního zatíïení pﬁi skusu na hlavici ãelistního kloubu pro získání maximální pﬁesnosti tvaru byla geometrie kloubní hlavice zpracována pouïitím dat z poãí-
taãové tomografie vznikl˘ trojrozmûrn˘ model byl následnû zpracován metodou koneãn˘ch prvkû tj byla vytvoﬁena síè hexagonálních elementû takzvan˘m mapováním a posléze staticky zatíïen silami od ïv˘kacích svalû které odpovídaly jejich maximálním
hodnotám pﬁi skusu v˘sledkem bylo získání polí povrchové napjatosti-kontaktních tlakû dolní ãelisti ukazující na nejkritiãtûj‰í místo ãelistního kloubu pro pﬁenos zatíïení bez ocenùní imunitní mechanismy v patogenezi âasné parodontitidy
autoﬁi mgr klára benetková z krátká j procházková o krejsa j bártová kolitel mudr j procházková csc oddûlení ústní biologie v˘zkumn˘ ústav stomatologick˘ 1 lf a vfn
úvod parodontitida je chronické zánûtlivé onemocnûní závûsného aparátu zubû parodontu které je v souãasné populaci stﬁedního vûku nejãastûj‰í pﬁíãinou ztráty zubû onemocnûní zaãíná ãasto jiï v dorostovém vûku nebo v rané dospûlosti ãasná parodontitida early onset periodontitis eop parodontitida je multifaktoriální onemocnûní jehoï
prûbûh ovlivàují faktory vnûj‰ího prostﬁedí pﬁedev‰ím nûkteré druhy bakterií zubního povlaku i vnitﬁního prostﬁedí paro-
dontu imunitní reakce dûleïit˘ je podíl genetické predispozice metodika longitudinální studie zahrnuje 24 pacientû s diagnózou eop a 14 zdrav˘ch osob v‰em osobám bylo odebráno 20 ml nesráïlivé krve do stﬁíkaãek vaccuette s heparinem mononukleární a polymorfonukleární buàky pmn byly izolovány na ficoll paque gradientu chemotaktická a metabolická funkce pmn byla testována testem chemotaxe
pod agarózou a int testem tvorba il-4 th2 a ifn-γ th1 po stimulaci mitogeny pwm pwm cona buàkami
bakterií a actinomycetemcomitans e coli a jejich ‰okov˘mi proteiny hsp64 hsp70 byla sledována v plné periferní krvi ﬁedûné 1 10 produkci imunoglobulinû iga igg a igm jsme sledovali metodou elisa po polyklonální stimulaci izolovan˘ch mononukleárních bunûk pwm inhibici polyklonálnû tvoﬁen˘ch imunoglobulinû jsme stanovili souãasnou
kultivací bunûk s pwm cona v˘sledky chemotaktickou a metabolickou funkci pmn jsme srovnávali na zaãátku studie 5 a 7 let po zahájení terapie zjistili jsme stále pﬁetrvávající niï‰í funkci tûchto bunûk tvorba cytokinû potvrzovala na‰e pﬁedchozí v˘sledky pacienti tvoﬁili v porovnání s kontrolními osobami více il-4 a ménû ifn-γ u 15-ti pacientû pﬁetrvávala po 7-mi letech
terapie porucha inhibice polyklonálnû tvoﬁen˘ch iga a igg závûr rozvoj zánûtlivé reakce v parodontu i u mlad˘ch jedincû je v˘sledkem poruchy v souhﬁe vnûj‰ích a vnitﬁních fak-
torû domníváme se ïe porucha funkce pmn vede k rychlej‰ímu nástupu chronick˘ch zánûtliv˘ch zmûn v parodontu u pacientû s poruchou inhibice polyklonální tvorby imunoglobulinû lze pﬁedpokládat zhor‰enou prognózu onemocnûní práce byla vypracována v rámci grantû mz ã 5006-3 5015-3 a v˘zkumného projektu ã 00002377901 17
expression of inducible nitric oxide synthase in rat hepatocyte cultures and its down-regulation by cyclosporin a autoﬁi mudr nikolina canová mudr petra stﬁe‰tíková kolitel prof dr farghali h drsc institute of pharmacology first faculty of medicine charles university in prague
our objectives were to provide additional information which gives new insight into the controversy of no status of the liver during endotoxemia and to asses the modulatory effect of cyclosporin a csa on the expression of inducible
nitric oxide synthase inos in hepatocytes and mechanism of its action was analysed hepatocytes were isolated from
male wistar rats using standard two-phase perfusion method after separation from hepatic nonparenchymal cells 1 5x106 hepatocytes were plated into collagen-coated culture dishes and maintained at 37 °c 95 air and 5 co2
in william’s medium e supplemented with gentamicin l-glutamine and 10 fbs hepatocytes were cultured for 24hr with or without either lps 5 µg ml or cytokine mixture tnf-α 500 u ml il-1β 200 u ml ifn-γ 100 u ml and in the absence or presence of csa 0 1 and 1 µg ml total rna from hepatocytes was isolated and using rt-pcr
assessed the expression of the gene for inos the concentration of no2- in culture supernatants was taken as a measure
of nitric oxide no production csa 1 µg ml reduced the cytokine mixture lps -induced increase of no2- levels by 32 24 alt leakage increased and urea synthesis was reduced both lps and cm increased inos expression
while csa exhibited an inhibitory effect on a phosphatase at the transcriptional level in hepatocytes this study demon-
strates that no produced during endotoxemia and under present conditions is protective to the liver and the inhibition
of inos by compounds like csa should be taken in practise the outcome of patients with b-cell lymphoproliferative disease b-lpd seems
to be improved in pcr negative patients after high dose therapy hdt with
autologous stem cell transplantation asct or monoclonal antibody therapy
autoﬁi mudr jan âern˘ i interní klinika 1 lf a vfn
a slavíãková i interní klinika 1 lf a vfn
m trnûn˘ i interní klinika 1 lf a vfn
b procházka szú praha kolitel prof mudr radim brdiãka drsc úhkt praha
introduction the hdt followed by asct or therapy with monoclonal antibody anti-cd20 rituximab represent
effective treatment modalities for relapsed refractory b-lpd methods we performed clinical and pcr follow-up of patients pts treated with asct or rituximab in samples of bone marrow and peripheral blood results out of 72 pts nhl-70 cll-1 mw-1 tested by pcr before asct or rituximab therapy 40 were pcr and 30 were eligible for further monitoring 17 pts reached the pcr- status after asct 6 monitored pts progressed and 1 patient died within the median of 36 months after rituximab 5 monitored pts progressed and 3 pts died within the median of 10 months the estimated pfs of pcr- pts was significantly better than in the pcr pts both after asct 100 vs 25 at 3 y p = 0 03 as after rituximab 86 vs 37 at 1 y p = 0 01 the improvement in pfs only trans-
lated into os improvement in pcr- pts after rituximab 100 vs 33 at 1 y p = 0 02 comparing all pcr- pts 17 and pcr pts 13 we observed an improvement in pfs in the pcr- group 76 vs 46 at 2 y p = 0 02 that did not
have effect on os conclusion our study confirms that pcr- after treatment correlates with prolonged pfs in pts with b-lpd this project has been suported by grant no m mt cez j13 98 1111 00004 moînosti vyuîití terapeutického laseru ve stomatologii
autoﬁi mudr hana fikáãkova mudr zuzana erösová kolitel doc mudr leo‰ navrátil csc ústav biofyziky 1 lf
konzultant-specialista mudr b navrátilová
cílem studie bylo objektivnû zhodnotit pﬁínos terapeutického laseru ve stomatologii materiál a metodika pﬁi léãbû jsme pouïili laser o vlnové délce 630 nm stﬁedním v˘konu 10 mw a hustotû ener- gie 4-6 j cm2 pacienti byli rozdûleni do tﬁí skupin skupina a zahrnovala 94 nemocn˘ch kteﬁí byli léãení terapeutick˘m laserem 18
skupina b 92 pacientû byla kontrolní a 196 nemocn˘ch ve skupinû c bylo o‰etﬁeno klasick˘m zpûsobem bez pouïití laseru hodnocení porovnáním v˘sledkû léãby pacientû skupin a b c mûïeme potvrdit pozitivní vliv neinvazivní laserote-
rapie na prûbûh léãby nûkter˘ch stomatologick˘ch onemocnûní závûr na základû této studie lze doporuãit pouïití terapeutického laseru v následujících indikacích herpatické a aftózní afekce slizniãní eroze a dekubity stavy po obtíïn˘ch extrakcích úspûch léãby laserem v˘raznû závisí na dobû zahájení aplikace a fyzikálních parametrech pﬁístroje projekt byl ﬁe‰en v rámci v˘zkumného zámûru m mt âr ã 111100005 hlavní koordinátor prof mudr m pe‰ková drsc perkutánní elektrogastrografie u pacientò podstupujících laparoskopickou
bandáî îaludku na i chirugické klinice 1 lf
autor mudr roman fra‰ko kolitel doc mudr robert gürlich csc i chirurgická klinika 1 lf a vfn
perkutánní elektrogastrografie egg pﬁedstavuje metodu umoïàující neinvazivní sledování myolektrické ïaludeãní
aktivity v tomto sdûlení jsou prezentovány v˘sledky mûﬁení myoelektrické ïaludeãní aktivity v perioperaãním období u nemocn˘ch podstupujících na 1 chirurgické klinice vfn laparoskopickou neadjustabilní bandáï ïaludku data byla zaznamenávána pﬁístrojem microdigitrapper a vyhodnocována za pouïití spektrální anyl˘zy a fourierovy transformace rovnûï jsou krátce diskutovány podmínky nutné k zaji‰tûní studie a je zmínûno i fyziologické a patofyziologické pozadí
této metody 14 pacientû bylo sledováno 24 hodin pﬁed operací a dále pak 5 hodin 24 a 48 hodin po v˘konu preprandiálnû
i postprandiálnû dynamika perioperaãních zmûn je prezentována v souvislosti s v˘sledky získan˘mi od skupiny zdrav˘ch dobrovolníkû ve sdûlení jsou rovnûï prezentovány v˘sledky mûﬁení u dvou pacientû u kter˘ch se vyskytla ãasná a pozdní pooperaãní
komplikace nejãastûj‰ím nálezem v ãasném pooperaãním období byla bradygastrie návrat k preoperaãním hodnotám nastával v prûmûru 48 hodin po v˘konu perkutánní elektrogastrografie je neinvazivní metoda která je schopna v ãasném pooperaãním období poskytnout chirurgovi nûkteré zajímavé informace o myoelektrické ïaludeãní aktivitû nízkov¯konn¯ laser v terapii tinnitu
autor mudr eva houïviãková mudr jana kuãerová kolitel doc mudr leo‰ navrátil csc ústav biofyziky 1 lf
tinnitus je nepﬁirozené vnímání zvukû v hlavû nebo v uchu je jedním z nejvût‰ích problémû v otolaryngologii a jin˘ch
oblastech medicíny vzhledem k nárûstu civilizaãních chorob se poãet nemocn˘ch s tinnitem neustále zvy‰uje rozli‰ujeme
dva základní typy tinnitu za prvé subjektivní kter˘ vnímá pouze nemocn˘ a dále objektivní kter˘ sly‰í nemocn˘ i lékaﬁ
pﬁi auskultaci mimoto existuje i fyziologick˘ tinnitus kter˘ jako formu ãist˘ch tónû ‰umû a hlukû vnímá 80-90 zdrav˘ch ve zvukotûsn˘ch místnostech úspûch terapie kaïdé nemoci je vïdy dán mírou jejího kauzálního pûsobení na danou chorobu ãi symptom kvûli rûznorodému pûvodu tohoto onemocnûní kter˘ neb˘vá vïdy objasnûn je léãba tinnitu tûïk˘m problémem tinnitus v‰ak mûïe b˘t i symptomem kter˘ signalizuje závaïnou organicky podmínûnou chorobu proto je tﬁeba jeho diagnostice vûnovat znaãnou pozornost kaïd˘ pacient by mûl b˘t podroben komplexnímu
vy‰etﬁení orl neurologickému a internímu samozﬁejmou souãástí vy‰etﬁovacího postupu by mûlo b˘t provedení audio-
metrie rtg hlavy a krãní páteﬁe v pﬁípadû mlad˘ch lidí nebo u náhle vzniklého tinnitu je potﬁeba doplnit o dal‰í zobra-
zovací metody ct nebo mri mozku terapii lze v zásadû rozdûlit na medikamentózní chirurgickou fyzikální rehabi-
litaãní a psychoterapii vedle toho se uplatàují je‰tû ménû obvyklé zpûsoby léãby jako je napﬁíklad akupunktura a elektrická
stimulace v souãasnosti ve shodû s recentní literaturou se zaãala vyuïívat i jiná fyzikální terapie v terapii tinnitu se vyuïívá úãinku terapeutického laseru ukazuje se ïe laserov˘ paprsek ve v˘konech definovan˘ch pro kategorii nízko
v˘konn˘ch laserov˘ch pﬁístrojû legislativnû do 500 mw klinicky vût‰inou vyuïívány pﬁístroje od 200 mw vykazuje v˘razn˘ efekt antiflogistick˘ antiedémov˘ a pﬁedev‰ím v˘razn˘ úãinek ve smyslu stimulace regeneraãních pochodû v buàce pﬁestoïe se touto problematikou jiï nûkolik pracovi‰è zab˘vá dosud neexistuje ucelená studie posuzující úãinnost metody
laseroterapie tinnitu v závislosti na charakteristikách pouïit˘ch sond vlnová délka v˘kon na na‰em pracovi‰ti oddûlení
klinické radiobiologie ústavu biofyziky 1 lf v praze probíhá studie ve které hodnotíme úãinek dvou sond o v˘konu 200 a 400 mw mezi základní cíle na‰í práce téï spadá posouzení vlivu nízkov˘konného laseru na tinnitus rûzného pûvodu a to apli-
kovaného samostatnû a v kombinaci s jin˘mi léãebn˘mi metodami jako je farmakoterapie mechanoterapie elektroterapie 19
pﬁípadnû hydroterapie soubor pacientû je rozdûlen do 5 skupin podle pravdûpodobné etiologie tinnitu cévní vertebro-
genní zánûtlivé akutrauma a ostatní etiologie nejasná smí‰ená diagnostika tohoto onemocnûní je velkou mûrou zaloïena na subjektivním vyjádﬁení pacienta pouïíváme desetistupàovou ‰kálu hodnotící intenzitu tinnitu kdy stupeà 1
oznaãuje nejlep‰í stav a stupeà 10 nejhor‰í stav ãi vûbec ïádné zmûny poruchy spánku u parkinsonovy nemoci subjektivní i objektivní údaje
autoﬁi mudr michaela jakoubková k onka j roth e rûïiãka r jech m volfová s nev‰ímalová kolitel doc mudr karel onka csc neurologická klinika 1 lf a vfn
úvod cílem studie byla objektivizace anamnesticky získan˘ch údajû u standardnû sledovan˘ch pacientû s parkin-
sonovou nemocí nestûïujících si spontánnû na pﬁípadné poruchy spánku metodika na poruchy spánku zamûﬁenou anamnesou a celonoãní polysomnografií bylo vy‰etﬁeno celkem 15 pacientû z toho 7 ïen a 8 muïû prûmûrn˘ vûk pacientû byl 56 5 ± sd = 8 5 roku prûmûrná délka léãby byla 4 3 ± 2 8 roku stupeà postiïení parkinsonovou nemocí klasifikováno v hoehn and yahr stadiích byl v prûmûru 2 3 ± 0 4 l dopa v mono-
terapii bylo léãeno 11 pacientû kombinaci l dopa a dopaminového agonisty uïívali 4 pacienti v˘sledky jiï anamnesticky pomocí cílen˘ch otázek jsme zjistili ïe alespoà jednou ze sledovan˘ch poruch spánku trpí 11 z 15ti pacientû subjektivnû pacienty nejvíce obtûïovalo prodlouïené usínání 46 pacientû zpûsobené hlavnû
psychick˘mi faktory ãi organicky podmínûné syndromem neklidn˘ch nohou u 26 pacientû byl subjektivnû spánek naru‰ován apoick˘mi pausami a 53 pacientû udávalo alespoà jednu z moïn˘ch známek poruchy s abnormálním chováním v rem spánku v objektivním polysomnografickém nálezu v‰ak tûïi‰tû obtíïí nebylo ve zhor‰eném usínání ale u vût‰iny pacientû byla zji‰tûna souvislost s jinou dyssomnií jako je syndrom spánkové apnoe 40 a porucha s periodick˘mi pohyby konãetinami ve spánku 24 ãi s parasomnií jako je porucha s abnormálním chováním v rem
spánku 24 v‰ech 15 pacientû mûlo velmi nekvalitní spánkovou architekturu s ãetn˘mi probouzecími reakcemi ãi probuzeními s redukcí hlubokého synchronního spánku a redukcí rem spánku a s procentuálnû v˘znamn˘m zastou-
pením bdûlosti závûr objektivnû jsme prokázali velmi nekvalitní noãní spánek u v‰ech vy‰etﬁen˘ch pacientû s parkinsonovou nemocí kteﬁí si ale sami na poruchy spánku spontálnû nestûïovali proto je podle na‰eho názoru nezbytné se na moïnost v˘skytu poruch spánku u pacientû s parkinsonovou chorobou více zamûﬁit nejvíce zastoupené dyssomnie a parasomnie
lze navíc zjistit nebo alespoà na nû mít podezﬁení jiï z dobﬁe provedené anamnesy úâinek magnézia na denzitu nadph-diaforáza pozitivních neuronò v hippo-
campu u potkanò vystaven¯ch dlouhodobé opakované hypoxii
autor mudr kateﬁina jandová kolitel doc mudr milo‰ langmeier csc fyziologick˘ ústav 1 lf
histochemicku anal˘zou na nadph-diaforáza nadph-d pozitivní neurony jsme testovali vliv magnézia podáva-
ného v prûbûhu dlouhodobé opakované hypoxie na jednotlivé oblasti hippocampu nadph-d je enzym kolokalizovan˘
s nitric oxid syntázou nos tj enzymem produkujícím oxid dusnat˘ no kter˘ se zﬁejmû podílí na po‰kození mozku
bûhem hypoxie mláìata laboratorního potkana byla spoleãnû s matkou vystavena 8 hodin dennû od narození do 17 dne vûku simulo-
vané v˘‰ce 7000 m k experimentûm jsme pouïili 4 skupiny zvíﬁat 1 mláìata vystavená hypoxii spolu s matkami 2 mláìata vystavená hypoxii spolu s matkami které v prûbûhu laktace mûly k dispozici vodu obohacenou magnéziem 3 mláìata nevystavená hypoxii spolu s matkami 4 mláìata nevystavená hypoxii spolu s matkami které mûly v prûbûhu laktace k dispozici pitnou vodu obohacenou magnéziem pokusy byly provádûny 25 den jejich ïivota tedy 8 dní po poslední expozici hypoxii v pentobarbitalové narkóze byla
zvíﬁata usmrcena transaortální perfúzí 4 pufrovaného paraformaldehydu v kryostatu nakrájené ﬁezy mozkû byly barveny
na nadph-d a v nich kvantifikovány nadph-d pozitivní neurony v jednotliv˘ch oblastech hippocampu v˘sledky ukázaly ïe opakovaná dlouhodobá hypoxie zvy‰uje denzitu nadph-d pozitivních neuronû v hilu gyrus den-
tatus v porovnání se zvíﬁaty kontrolními magnézium podávané v prûbûhu expozice hypoxii sniïuje denzitu nadph-d
pozitivních neuronû témûﬁ ve v‰ech oblastech hippocampu v˘sledky naznaãují ïe by magnézium mohlo mít neuroprotektivní úãinek proti vlivu voln˘ch radikálû tato práce je podporována grantem uk 31 2001 c 1 lf uk 32 2001 c 1 lf gaâr 305 99 0976 a msm 1111 00001 20
léâba membranosní nefropatie cyklosporinem
autoﬁi mudr martin janeãek vladimír tesaﬁ jan krtil jiﬁí îabka romana ry‰avá ivan rychlík kolitel prof mudr vladimír tesaﬁ drsc i interní klinika 1 lf a vfn
v cca pûtiletém období od roku 1993 byla na 1 interní klinice vfn zahájena léãba cyklosporinem u 18 pacientû s membranosní nefropatií indikováni byli pﬁeváïnû 14 z 18 pacientû nemocní refrakterní na pﬁedchozí cytostatickou léãbu efekt byl kromû klinického stavu hodnocen pomocí bûïn˘ch laboratorních parametrû renálních funkcí po jednom roce léãby cyklosporinem resp u pacientû kde byla léãba ukonãena dﬁíve neï po roce pﬁi ukonãení terapie do‰lo k v˘raznému poklesu proteiunurie 11 57 vs 3 35 g 24 hod wilcoxonûv párov˘ test p 0 01 hodnota
sérového kreatininu v tomto období mírnû vzrostla 96 86 vs 126 86 µmol l wilcoxonûv párov˘ test p 0 01 nemocné sledujeme i po vysazení cyklosporinu z devíti sledovan˘ch pacientû byla bûhem prvního roku po vysazení
cyklosporinu u dvou nasazena jiná imunosuprese ve skupinû zbyl˘ch sedmi pacientû do‰lo bûhem tohoto období k dal‰ímu mírnému poklesu proteinurie v na‰em souboru v‰ak statisticky nev˘znamné ve srovnání s hodnotami rok po zahájení léãby resp pﬁi ukonãení léãby pokud byla terapie ukonãena dﬁíve neï po roce do‰lo k poklesu sérového kreatininu 126 86 vs 115 µmol l wilcoxonûv párov˘ test p 0 05 závûr nasazení cyklosporinu vede u nemocn˘ch s membranosní nefropatií k ústupu nefrotického syndromu a to
i v pﬁípadech refrakterních na pﬁedchozí cytostatickou léãbu problémem zûstávají relapsy po vysazení cyklosporinu sledování nemocn˘ch po ukonãení léãby cyklosporinem si jistû zaslouïí dal‰í pozornost lipidov¯ metabolismus a ateroskleróza u dùtí s nefrotick¯m syndromem ns autor mudr monika kolská klinika dûtí a dorostu 3 lf praha kolitel prof mudr vladimírtesaﬁ drsc i interní klinika 1 lf a vfn
klinicky se ateroskleróza obvykle vyvíjí se znaãnou latencí prekurzory ateromatózních plátû jsou ale u jedincû se zv˘‰enou hladinou lipidû prokazatelné jiï v dûtství hyperlipidémie a dyslipoproteinémie je bûïn˘m nálezem u ns jsou zv˘‰eny hladiny celkového vldl a ldl cholesterolu apolipoproteinu b lipoproteinu a hodnoty hdl mohou
b˘t zv˘‰ené i sníïené a mûní se pomûr hdl2 hdl3 etiologie lipidov˘ch zmûn je multifaktoriální a není plnû objasnûna je zv˘‰ena hepatální syntéza a sníïeno odbourávání lipoproteinû závaïnost lipidov˘ch zmûn koreluje s hypoalbuminémií
a proteinurií hladiny cholesterolu mohou b˘t extrémní trvání a dûsledky lipidov˘ch zmûn závisí na klinickém prûbûhu ns u dospûl˘ch s ns bylo prokázáno 4 5x vy‰‰í riziko ischemické choroby srdeãní a 3 5x vy‰‰í úmrtnost na
kardiovaskulární onemocnûní obdobné studie u dûtí s ns schází u dûtí s kongenitálním ns finského typu byly zji‰tûny
ãasné aterosklerotické zmûny renálních arterií pﬁi nefrektomii ve vûku 12 5 ± 4 4 mûs u dûtí s diagnózou minimálních
zmûn ãi fokální segmentální glomerulosklerózy byly popsány ojedinûlé pﬁípady infarktu myokardu a pﬁedãasné aterosklerózy k hyperlipidémii u dûtí s ns se pﬁidruïují dal‰í rizikové faktory hypertenze obezita kortikoterapie inzulínová rezistence a hyperkoagulace vysoce rizikoví pro rozvoj aterosklerózy se jeví pacienti s perzistující proteinurií u kter˘ch je vhodná terapeutická intervence souâasné moînosti fyzikální terapie v léâbù pohybového aparátu
autoﬁi mudr barbora komárková mudr zuzana erösová kolitel prof mudr p kuna drsc úvod cílem v˘zkumného projektu bylo posoudit moïnosti roz‰íﬁení uznávan˘ch rehabilitaãních a fyzioterapeutick˘ch
léãebn˘ch postupû u vybran˘ch indikací o preparáty systémové enzymoterapie které jsou urãeny k dosaïení efektivnûj‰í
léãby a zkrácení rekonvalescence indikace ve kter˘ch jsme porovnávali úãinnost samotné fyzikální terapie s úãinností
kombinované fyzikální terapie se systémovou enzymoterapií byly vybrány dle ãetnosti s jakou byli nemocní na oddûlení
léãebné rehabiltace odesíláni v indikovan˘ch pﬁípadech byla prûbûïnû provádûna pﬁíslu‰ná laboratorní a rentgenologická
vy‰etﬁení sledovali jsme poúrazové stavy a onemocnûní pojivové tkánû volba fyzikální terapie vycházela z doporuãen˘ch
metodick˘ch postupû modifikovan˘ch dle vlastních zku‰eností systémová enzymoterapie byla podávána dle doporuãení
v˘robce metodika pacienti kteﬁí byli zaﬁazeni do projektu byli v 80 odesláni z ortopedick˘ch ãi chirurgick˘ch oddûleních zbytek na doporuãení praktického lékaﬁe ãi individuálnû mezi sledovan˘mi a nejãastûj‰ími indikacemi byly myalgie epicondylitis lateralis kontúze zápûstí a ruky distenze achillovy ‰lachy subluxace hlezenného kloubu pacienti byli na zaãátku a na konci léãby vy‰etﬁeni lékaﬁem popﬁ byla doplnûna laboratorní a rentgenologická vy‰etﬁení a vyplnili dotaz-
ník s vas visual analog scale zamûﬁen˘m na hodnocení bolesti v indikovan˘ch pﬁípadech byl stav objektivnû hodno-
cen goniometrem a legometrem nemocní byli dle pﬁíchodu na pracovi‰tû v sud˘ch a lich˘ch dnech rozdûleni do dvou 21
skupin u kaïdé indikace na skupinu léãenou vhodnou fyzikální terapií a ltv jako kontroní a skupinu léãenou fyzikální
terapií ltv a set z fyzikálních metod byly dle metodick˘ch doporuãení aplikovány elektroléãebn˘ pﬁístroj btl- 06 pﬁístroj pro pulsní magnetoterapii dimap ii pﬁístroj pro distanãní multiefektovou elektroléãbu vas 07 víﬁivá lázeà btl 3000 terapeutick˘ laser scan med 1000 btl 10 btl 2000 enzymové preparáty obsahující 48 mg trypsinu 90 mg bromelainu 100 mg rutinu v 1 tbl statistické hodnocení v˘sledkû jsme provedli fisherov˘m faktoriálov˘m testem p hladina statistické v˘znamnosti pﬁi porovnávání sledovan˘ch souborû v˘sledky myalgie- klid bolest p = 0 505 pasivní b p = 0 076 aktivní b p = 0 443 b pﬁi tlaku p = 0 203 noãní b p = 0 187 ranní b p = 0 513 epikondylitis lateralis rozsah pohybu p = 1 0 klid bolest p = 0 176 aktivní b p = 0 878 b pﬁi tlaku p = 0 032 noãní b p = 0 866 b pﬁi zátûïi p = 0 72 kontuze zápûstí a ruky rozsah pohybu p = 0 018 klid bolest
p = 0 106 aktivní b p = 0 896 noãní b p = 0 031 ranní p ménû 0 001 b pﬁi zátûïi p = 0 004 distenze achill ‰lachy otok p = 0 356 klid bolest p = 0 020 aktivní b p = 0 407 noãní b p = 0 895 ranní b p = 0 316 b pﬁi zátûïi p = 0 695 subluxace hlezna rozsah pohybu p = 0 508 otok p = 0508 klid bolest p = 0 418 aktivní b p = 1 0 ranní b p = 0 72 b pﬁi zátûïi p = 0 01 závûr v rámci v˘zkumného úkolu jsme ovûﬁili u vybran˘ch indikací správnost navrïen˘ch metodick˘ch postupû fyzi-
kální terapie a pohybové terapie a to jak u poúrazov˘ch stavû tak pﬁi postiïení pojivové tkánû celkem jsme o‰etﬁili 607 nemocn˘ch v pûti zvolen˘ch indikacích samostatnou fyzikální terapií vãetnû ltv bylo o‰etﬁeno 311 pacientû stej-
nou terapií roz‰íﬁenou o podávání preparátu set bylo 296 práce potvrdila vysokou úãinnost metodického postupu a ltv u postiïení pojivov˘ch tkání souãasné podávání set mûlo vy‰‰í analgetick˘ efekt zejména pasivní bolestivost bolesti pﬁi tlaku a zátûïi rovnûï u poúrazov˘ch stavû se potvrdila úãinnost fyzikální terapie a analgetick˘ efekt set pﬁi zátûïi
a na obnovu rozsahu pohybu kter˘ tak potencuje úãinnost pohybové terapie pohybová léâba stresové inkontinence
autoﬁi mudr jana kuãerová mudr eva houïviãková kolitel doc mudr leo‰ navrátil csc ústav biofyziky 1 lf
stresová inkontinence je dle mezinárodní spoleãnosti pro kontinenci definována jako nechtûn˘ únik moãi pﬁi zmûnû
intraabdominálního tlaku bez úãasti detrusoru moãového mûch˘ﬁe nejãastûj‰í pﬁíãinou vzniku stresové inkontinence je oslabené dno pánevní pﬁechod moãové trubice a moãového mûch˘ﬁe se dostane mimo kontrolu pánevního dna pﬁi neãe-
kaném zv˘‰ení intraabdominálního tlaku pak nedochází k facilitaci uzávûrového mechanismu moãového mûch˘ﬁe pohybová léãba je pﬁedstavována cviãením dle kegela cviãení bylo pﬁedstaveno americk˘m gynekologem a kegelem
s cílem korigovat mírné anatomické odchylky vznikající v oblasti pánevního dna v souvislosti s porodem cviãení je dûleno
do ãtyﬁ fází z nichï nejnároãnûj‰í pﬁedstavuje tzv identifikace svalû pánevního dna v˘sledkem snahy o usnadnûní této fáze je perineometr perineometr je intravaginální sonda která umoïàuje pacientce identifikaci pﬁíslu‰n˘ch svalû a následnû i objektivizaci
dosaïen˘ch v˘sledkû perineometr kter˘ mají moïnost vyuïívat na‰e pacientky pracuje na principu elastometru konstrukce tohoto tlakového snímaãe vychází z vyuïití závislosti zmûny elektrického odporu vodivého elastometru na pûsobícím mechanickém tlaku pﬁístroj byl sestrojen ve spolupráci s fakultou strojní na âvut cílem na‰í práce je objektivizovat sílu svalového stahu u ïen bez stresové inkontinence ïen s inkontinencí a následnû ïen které se 6 mûsícû
vûnovaly kegelovu cviãení souâasn¯ stav poziâního klonování mutantní alely hd potkana
autor mudr franti‰ek li‰ka kolitel doc mudr drahomíra kﬁenová csc ústav biologie a lékaﬁské genetiky 1 lf a vfn
hypodaktylní mutace u potkana hd je ar postiïení v˘voje konãetin a spermatogeneze projevuje se variabilní redukcí poãtu prstû a ãlánkû prstû na preaxiální stranû pﬁedních i zadních konãetin u obou pohlaví v‰ichni homozygotní
samci jsou infertilní mají zmen‰ená varlata a nadvarlata a zmen‰ené mnoïství morfologicky abnormálních a nepohybliv˘ch
spermií mutovan˘ gen jsme lokalizovali na chromozom 10 potkana pomocí zpûtn˘ch kﬁíïencû samice originálního kmene
wistar hd whd a samec f1 whdxbrown norway a nyní provádíme jemnûj‰í mapování pomocí populace f2 hybridû whdxbn brown norway technikou pcr s vyuïitím mikrosatelitních markerû kritick˘ segment chromosomu 10 s hd mutací se tak podaﬁilo zúïit z 6 5 cm na 1 8 cm mezi mikrosatelitními markery d10rat116 a d10rat80 zároveà byla pozorována úplná vazba hd se skupinou intragenov˘ch markerû d10mit8 v genu pro synap-
tobrevin 2 d10wox12 v genu pro sex hormone binding globulin d10wox14 v genu pro asialoglykoproteinov˘ receptor a d10wox39 v genu pro glukosov˘ transportér indukovan˘ insulinem glut4 pro stanovení poﬁadí tûchto genû v souãasné dobû pouïíváme i panel radiaãních hybridû rh potkan-kﬁeãek 22
neï pﬁistoupíme k vlastnímu poziãnímu klonování chceme kritick˘ segment zmen‰it na 1 cm na základû tûchto
v˘sledkû plánujeme sestrojení fyzické mapy kontigu klonû s vyuïitím komerãnû dostupn˘ch dna knihoven bac yac pac tento kontig bude dále analyzován na pﬁítomnost est expressed sequence tags potkana pﬁípadnû homo-
logick˘ch est my‰i a ãlovûka a tím bude zji‰tûno mnoïství a lokalizace genû v kritické oblasti pokud bude sníïena exprese nûkterého z tûchto genû chceme podrobit tento gen sekvenãní anal˘ze a tím nakonec zjistit specifickou mutaci jako pﬁíãinu hd pooperaâní zmùny pro a protizánùtliv¯ch cytokinò po resekci pankreatu
autoﬁi mudr david melechovsk˘ doc r gürlich p maruna i chachkhiani r fra‰ko kolitel doc mudr robert gürlich csc i chirurgická klinika 1 lf a vfn
rizikem rozsáhlého operaãního traumatu je rozvoj pooperaãní imunosuprese která je dûsledkem nespecifické neuro-
humorální odpovûdi operaãní stres zpûsobuje zmûnu adrenokortikální odpovûdi ve smyslu pﬁeváïení sekrece glukokorti-
koidû nad dehydroepiandrosteronem vlivem tûchto hormonû dochází k posunu rovnováhy th1 th2 lymfocytû ve pro-
spûch th2 odpovûdi jednotlivé subpopulace th1 a th2 se odli‰ují spektrem produkovan˘ch cytokinû a smûﬁováním imunitní odpovûdi inhibice th1 odpovûdi po operaãním traumatu je podkladem nerovnováhy cytokinové kaskády a hlav-
ním patogenetick˘m faktorem pooperaãní imunosuprese spektrum zmûn projevující se pﬁechodn˘m deficitem bunûãné i humorální imunity jiï bylo podrobnû charakterizováno ale patogeneze tohoto procesu na úrovni cytokinové a neuroen-
dokrinní nebyla dosud zcela objasnûna sledovali jsme dynamiku cytokinû po resekci pankreatu abychom nalezli v˘znamn˘ faktor pro zhodnocení míry rizika zánûtliv˘ch pooperaãních komplikací pacienti pﬁi resekãním v˘konu na pankreatu prodûlávají rozsáhlé operaãní trauma vynucené základním onemocnûním proto je vhodné právû u nich pozo-
rovat imunologické abnormality a jejich souvislost s v˘skytem pooperaãních infekãních komplikací z pozorování lze konstatovat ïe pro diagnózu a léãbu pooperaãních komplikací zûstává nejdûleïitûj‰í klinická zku‰enost chirurga il-6 pﬁi dynamickém monitorování hladin do 48 hodin dostateãnû specificky odli‰í poãínající sepsi od nekomplikovaného pooperaãního stavu pro il-6 il-1ra sil-2r il-8 a tnf-alfa platí ïe po kulminaci hladin mezi 16 36 hodinou nastává mezi 48 72 hodinou u nekomplikovaného pooperaãního prûbûhu návrat k v˘chozím hodnotám nebo alespoà v˘razn˘
pokles hladiny zvlá‰tní cena zdravotnick˘ch novin
prevalence ku¤áctví a znalosti t¯kající se tabáku zji tùné mezi noviná¤i âesk¯ch deníkò
autor mudr jiﬁí pe‰ina kolitel mudr eva králíková csc ústav hygieny a epidemiologie 1 lf a vfn
úvod kouﬁení je nejv˘znamnûj‰í preventabilní pﬁíãinou smrti na svûtû postoje mediálních pracovníkû ke kuﬁáckému
chování jsou zásadní pro pravdivou informovanost obãanû kaïdého spoleãenství a v na‰em státû ve srovnání s nûkter˘mi
západními státy jistû není situace v tomto smûru pﬁíznivá tyto postoje a znalosti jsem sledoval metodika data byla zji‰èována pomocí anonymních dotazníkû formou ﬁízeného rozhovoru v˘sledky dotazováno bylo 118 novináﬁû z toho poãtu bylo 53 kuﬁákû a 47 nekuﬁákû témûﬁ 97 zpovídan˘ch
novináﬁû znalo alespoà jednu nemoc kterou zpûsobuje tabák pouze 8 5 dotazovan˘ch vûdûlo ïe tabáková reklama je cílena na vûkovou skupinu 12-14 let pﬁekvapující je ïe pouze necel˘ch 47 redaktorû a editorû si o sobû myslí ïe mohou ovlivàovat názory ãtenáﬁû závûr prevalence kouﬁení byla mezi zpovídan˘mi novináﬁi o 21 vy‰‰í neï prevalence kouﬁení v populaci âeské republiky to je alarmující stejnû jako celková úroveà znalostí jedné z klíãov˘ch profesí ovlivàujících spoleãenskou pﬁija-
telnost závislosti která zpûsobuje kaïdé páté úmrtí v na‰í zemi ovlivnùní excitability korov¯ch neuronò po opakované aplikaci zinku u pot-
kanò vystaven¯ch v¯ kové hypoxii
autoﬁi mudr iveta valkounová doc mudr dana mare‰ová csc prof mudr stanislav trojan drsc kolitel prof mudr stanislav trojan drsc fyziologick˘ ústav 1 lf
úvod v˘znam zinku pro excitabilitu korov˘ch neuronû je nejist˘ je vyluãován na mnoha excitaãních synapsích v cns
a má schopnost mûnit vlastnosti membránov˘ch kanálû a neurotransmiterov˘ch receptorû metodika mláìata potkana byla spoleãnû s matkou vystavena v˘‰kové hypoxii 7000 m v hypobarické komoﬁe 23
po dobu 8 hodin dennû jedné skupinû zvíﬁat jsme aplikovali zncl2 v dávce 5 mg kg s c vïdy pﬁed umístûním do hypobarické komory epileptické záchvaty jsme vyvolávali opakovanou 5x nadprahovou elektrickou stimulací senzori-
motorické kûry u volnû pohybliv˘ch mláìat potkanû kmene wistar vlastního chovu star˘ch 12 25 35 dnû v˘sledky nadprahová elektrická stimulace senzorimotorické kûry vyvolala epileptick˘ záchvat korov˘ následn˘ v˘boj knv po opakované expozici hypobarické hypoxii se trvání záchvatû prodlouïilo u v‰ech vûkov˘ch skupin podání zinku pﬁed vystavením hypoxii zkrátilo trvání knv u 25 a 35 denních zvíﬁat závûr pﬁesn˘ funkãní mechanismus pûsobení zinku na synapsích nebyl ovûﬁen pﬁedpokládáme antikonvulzní úãinek exogennû podaného zinku blokádou nmda receptorû nebo presynaptick˘m pûsobením na gabaergních synapsích práce je podporována grantem gaâr 305 99 0976 a msm111100001 variabilita denzity rem spánku v pròbùhu dne u pacientò s narkolepsií-kataplexií
autor mudr jitka vaàková kolitel prof mudr soàa nev‰ímalová drsc neurologická klinika 1 lf a vfn
úvod tato studie navazuje na pﬁedchozí zji‰tûní zv˘‰ené denzity rem spánku u pacientû s narkolepsií-kataplexií která
byla zamûﬁena na hodnocení poãtu rychl˘ch oãních pohybû rems a svalov˘ch zá‰kubû brady tws v jednotliv˘ch periodách rem spánku v prûbûhu noci za vyuïití celonoãní polysomnografie cpsg pﬁedkládaná práce sleduje zmûny
denzity paradoxního spánku vyjádﬁené poãtem rychl˘ch oãních pohybû rems v prûbûhu dne za anal˘zy mikrostruktury
spánku s vyuïitím testu mnohoãetné latence usnutí mslt soubor mslt test navazoval na polysomnografické monitorování bylo vy‰etﬁeno 30 pacientû s diagnozou narko-
lepsie-kataplexie 7 muïû 23 ïen prûmûrn˘ vûk 37 ± 13 2 let s prûmûrn˘m zaãátkem onemocnûní 24 3 ± 9 8 let imperativní spavost a stavy kataplexie byly zji‰tûny u v‰ech vy‰etﬁovan˘ch hypnagogické halucinace u 18 osob 60 spánková obrna v 15 pﬁípadech 50 metodika vizuální skorování spánkov˘ch stádií bylo provedeno 1 osobou u v‰ech pacientû byl sledován poãet rems
za jednotku ãasu min v jednotliv˘ch periodách rem spánku v prûbûhu dne do statistického zpracování byly zahrnuti
pacienti s minimálnû 2 úseky iniciálního rem spánku v 5 mslt testech v˘sledky byla prokázána zv˘‰ená denzita paradoxního spánku v prvních 2 mslt testech která se signifikantnû neli‰í
od hodnot zji‰tûn˘ch v posledních spánkov˘ch cyklech noãního spánku dále byl zji‰tûn signifikantní pokles poãtu rems
v prûbûhu dne mslt ã 1 9 00 hod - prûmûrn˘ poãet rems = 12 97 vs mslt ã 5 17 00 hod - prûmûrn˘ poãet
rems = 8 52 p 0 05 hodnoty denzity rem spánku zji‰tûné v 5 mslt testu odpovídají denzitû paradoxního spánku
v prvním spánkovém cyklu noãního spánku hladiny necholesterolov¯ch sterolò v plazmù u mentální anorexie
autoﬁi mgr marek vecka a îák f novák h papeïová e tvrzická m konárková b staàková kolitel rndr eva tvrzická csc v˘zkumná angiologická laboratoﬁ 4 interní kliniky 1 lf a vfn
cílem studie bylo sledovat hladiny necholesterolov˘ch sterolû lathosterol kampesterol a β-sitosterol u mentální anorexie toto onemocnûní pﬁedstavuje nejen jednoduch˘ model hladovûní ale je i pﬁíãinou sekundární hypercholesterolémie na‰e experimentální skupina sestávala z 15 ïen s mentální anorexií v kontrolní skupinû bylo 20 zdrav˘ch ïen podobného vûku u v‰ech subjektû jsme zmûﬁili antropometrické parametry v˘‰ku tûlesnou hmotnost bioimpedanci a tlou‰èku ãtyﬁ koïních ﬁas biceps triceps subscapularis suprailiaca krev obsahující edta 1 mg ml byla odebrána
po celonoãním laãnûní koncentrace celkového cholesterolu tc triacylglycerolû tag a hdl-cholesterolu hdl-c byly stanoveny pomocí enzymaticko-kolorimetrick˘ch metod hodnoty ldl-c byly vypoãítány koncentrace sterolû lathosterolu β-sitosterolu a kampesterolu jsme stanovili s vyuïitím kapilární plynové chromatografie skupina mentální anorexie se li‰ila od kontrolní v hodnotách bmi 15 9 ± 2 9 vs 21 3 ± 1 9 kg m2 p 0 001 a za-
stoupením tukové tkánû 11 9 ± 6 3 vs 24 2 ± 5 2 p 0 001 ve skupinû pacientek byly nalezeny zv˘‰ené koncentrace
tc 5 52 ± 1 52 vs 4 51 ± 0 63 mmol l p 0 05 tag 1 40 ± 0 59 vs 0 86 ± 0 39 mmol l p 0 01 a hdl-c 1 58 ± 0 20 vs 1 18 ± 0 26 mmol l p 0 001 v koncentracích ldl-c 3 30 ± 1 61 vs 2 95 ± 0 62 mmol l lathoste-
rolu 254 ± 123 vs 191 ± 64 µg dl β-sitosterolu 3380 ± 1340 vs 3710 ± 1130 µg dl a pomûru lathosterol tc 1 25 ± 0 63 vs 1 09 ± 0 31 pomûr nebyly zaznamenány statisticky v˘znamné rozdíly mezi zkouman˘mi skupinami na druhé stranû byly zji‰tûny zv˘‰ené koncentrace kampesterolu 866 ± 257 vs 673 ± 198 µg dl p 0 05 u pacientek s mentální anorexií na základû tûchto v˘sledkû pﬁedpokládáme ïe zv˘‰ené hodnoty tc a tag u mentální anorexie nejsou zpûsobeny zv˘-
‰enou syntézou cholesterolu de novo ale zmen‰en˘m katabolismem cholesterolu z plazmatického kompartmentu 24
funkâní a spirometrické parametry u nemocn¯ch s roztrou enou sklerózou
mozkomí ní
autoﬁi mgr kamila záli‰ová p brandejsk˘ e havrdová m t˘blová kolitel as mudr eva havrdová csc neurologická klinika 1 lf a vfn
úvod v této práci jsme u nemocn˘ch s rs vy‰etﬁovali funkãní a spirometrické parametry a sledovali jejich závislost na stupni neurologického postiïení a stupni únavy metodika u 23 probandû náhodnû vybran˘ch z databáze ms centra kateﬁinská byl posuzován stupeà neurologického
postiïení dle ambulatory index stupeà únavy dle modified fatigue impact scale a byly vy‰etﬁeny funkãní parametry stupàovan˘m testem a metodikou anp na bicyklovém ergometru a statické i dynamické spirometrické hodnoty na spi-
rometru metodou prûtok objem vy‰etﬁené parametry byly porovnávány s hodnotami zdravé netrénované populace pro testování rozdílu mezi v˘skytem sledovaného znaku ve dvou rûzn˘ch skupinách respondentû byla pouïita normální
aproximace v˘sledky funkãní parametry probandû jsou signifikantnû sníïeny max v˘kon = 1 81 ± 0 61 w kg 59 67 ± 17 78 normy sf max = 147 47 ± 53 93 tepû min 78 36 ± 28 07 normy vo2 max kg-1 = 28 87 ± 9 67 ml min-1 kg-1 83 42 ± 25 22 normy v’e = 68 22 ± 35 06 l min-1 76 27 ± 27 52 normy r = 1 05 ± 0 07 95 80 ± 6 55 rpe = 13 69 ± 1 31 sniïují se se stupnûm neurologického postiïení a se stupnûm únavy nûkteré spirometrické parametry jsou v normû vc in = 4 12 ± 1 37 l 103 26 ± 17 17 vc ex = 4 12 ± 0 95 l 101 1 ± 13 1 fvc = 4 10 ± 0 93 l 103 56 ± 13 50 fev1 = 3 56 ± 0 72 l 106 73 ± 13 53 sniïují se se stupnûm neurologic- kého postiïení se a naopak se paradoxnû nesignifikantnû zvy‰ují s vy‰‰ím stupnûm únavy v˘dechové rychlosti pef = 6 69 ±1 69 l s 87 20 ± 16 79 jsou nesignifikantnû nezávisle na stupni neurologického postiïení a v závislosti
na stupni únavy sníïeny závûr fyzická kondice nemocn˘ch s rs je nízká a pravdûpodobnû se spolu se sníïen˘mi v˘dechov˘mi rychlostmi podílí na vzniku únavy 25
1 místo
srovnání cefalometrick¯ch parametrò nemocn¯ch se spánkov¯m apnoick¯m
syndromem s normou autor mudr simona dostálová zbynûk mahel doc mudr karel onka csc kolitel doc mudr karel onka csc neurologická klinika 1 lf a vfn
úvod kraniofaciální abnormity které predisponují faryngeální obstrukci mohou b˘t odhaleny cefalometrick˘m hod-
nocením cílem práce bylo porovnat cefalometrické nálezy pacientû se syndromem spánkové apnoe sas s nálezy u zdravé populace metody a v˘sledky cefalometrické vy‰etﬁení bylo provedeno u pacientû s sas 23 ïen 96 muïû a u kontrol 36 ïen 50 muïû u ïen s sas pﬁi srovnání s kontrolní skupinou byly nalezeny signifikantní zmûny mûkk˘ch tkání prodlouïení mûkkého patra p 0 001 a zúïení faryngeálního vzdu‰ného prostoru p 0 001 dále pak skeletální zmûny retrognacie p 0 05 mikrognacie p 0 001 a dorsokaudální rotace p 0 01 mandibuly zvût‰ení dolní ãásti gonio-
vého úhlu p 0 001 artikulárního úhlu p 0 05 a pﬁedních obliãejov˘ch v˘‰ek p 0 05 zúïení kostûného faryn-
geálníhoprostoru p 0 001 zmen‰ení hloubky horního obliãeje p 0 01 a zkrácení base lební p 0 01 u muïû
apneikû pﬁi srovnání s kontrolní skupinou byly nalezeny signifikantní zmûny mûkk˘ch tkání prodlouïení mûkkého patra p 0 001 a zúïení faryngeálního vzdu‰ného prostoru p 0 001 dále pak skeletální zmûny zkrácení hloubky maxilly p 0 001 zmen‰ení úhlu base p 0 01 úhlu selly p 0 01 a hloubky horního obliãeje p 0 01 zvût‰ení dolní
ãásti goniového úhlu p 0 01 artikulárního úhlu p 0 001 a pﬁední i zadní obliãejové v˘‰ky p 0 001 závûry orofaciální skelet i mûkké tkánû apneikû se v˘raznû li‰í od normy klíãová slova cephalometrie craniofaciální abnormity spánkov˘ apnoick˘ syndrom bez ocenùní osteosyntesa zlomeniny sakra kazuistika autoﬁi mudr karin kormanová prof mudr miroslav zeman drsc kolitel doc mudr z kr‰ka csc i chirurgická klinika 1 lf a vfn
nestabilní zlomeniny pánevního kruhu jsou s ohledem na ostatní poranûní skeletu vyjímeãná zranûní vzhledem k terapii a prognose jsou v traumatologii stále ﬁazeny mezi tzv problémové zlomeniny k terapeuticky a prognosticky nejzávaïnûj‰ím patﬁí zcela nepochybnû ty zlomeniny které postihují zadní sakroiliakální segment pánevního kruhu t j zlomeniny které jsou rotaãnû i vertikálnû nestabilní zlomeniny pánevního kruhu jsou klasifikovány podle pûvodního tileho klasifikaãního konceptu a souãasnû podle
mulerova klasifikaãního schématu ao k diagnostice jsou pouïívány jak základní pennalovy outlet inlet projekce tak pﬁedev‰ím ct nemocní jsou operováni
v poloze na bﬁichu v celkové anestezii pod rtg kontrolou se provádí repozice zlomeniny po kontrole repozice pod rtg zesilo-
vaãem se zavádí nejdﬁíve k dráty a poté kanylované spongiosní ‰rouby dal‰í moïností by bylo pouïití dlahové techniky nebo kombinace dlahové techniky a spongiosního ‰roubu v pooperaãním reïimu jsou pacienti obvykle do 1 t˘dne mobilizováni nejlep‰í stabilitu v místû osteosyntesy vykazuje spongiosní ‰roub kromû pevné stabilizace zaruãuje i vcelku dobré
repoziãní a tedy i rekonstrukãní moïnosti pﬁi vlastním operaãním postupu u vût‰iny zlomenin pánve je moïná konzervativní terapie u zlomenin typu b má obvykle dobr˘ v˘sledek ventrální stabilizace zevním fixatérem u zlomenin typu c se doporuãuje rekonstrukãní operaãní v˘kon vliv intravenozních imunoglobulinò na tvorbu imunoglobulinò in vitro
u nemocn¯ch s protilátkovou imunodeficiencí
autoﬁi mgr zuzana krátká o kry‰tûfková j bártová t fuãíková m prûcha l proke‰ová kolitel rndr jiﬁina bártová csc v˘zkumn˘ ústav stomatologick˘ 1 lf a vfn
úvod modulaãní vlivy infuzí intravenozních imunoglobulinû ivig jsou studovány pﬁedev‰ím k objasnûní jejich úãinkû pﬁi léãbû autoimunitních stavû a sekundárních imunodeficiencí ve snaze upﬁesnit indikaãní kritéria této léãby cílem této studie bylo posoudit úãinek léãby ivig v substituãních dávkách na tvorbu imunoglobulinû v kultuﬁe perifer-
ních mononukleárních bunûk pbmc in vitro po stimulaci t a b bunûãn˘mi aktivátory sekce posterò v doktorském studijním programu
26
metodika soubor vy‰etﬁovan˘ch osob tvoﬁilo 17 pacientû s protilátkovou imunodeficiencí pid jejichï stav vyïado-
val léãbu ivig ve skupinû nemocn˘ch bylo 8 klasifikováno jako cvid 9 jako deficience podtﬁíd igg odbûry periferní
krve jsme provedli den pﬁed infuzí a za 7 dní po infuzi tvorbu imunoglobulinû igm igg a iga jsme sledovali in vitro
po stimulaci mononukleárních bunûk izolovan˘ch z periferní krve gradientovou centrifugací pwm a bacillus firmus inhibici polyklonálnû tvoﬁen˘ch imunoglobulinû jsme sledovali po simultánní kultivaci bunûk pwm cona v˘sledky vlivem infuze se v porovnání se stavem pﬁed infuzí nízké hodnoty polyklonálnû tvoﬁen˘ch imunoglobulinû
zvy‰ovaly vysoké naopak sniïovaly infuze ovlivnila i cona indukovanou inhibici pwm stimulované tvorby igg u sku-
piny pacientû s deficiencí podtﬁíd do‰lo po infuzi ke zv˘‰ení inhibice polyklonálnû tvoﬁen˘ch imunoglobulinû u pacientû
s dg cvid naopak ke zv˘‰ené tvorbû imunoglobulinû dále jsme zjistili ïe podání ivig blokuje polyklonální aktivaci
stimulovanou bacillus firmus závûr prokázali jsme imunomodulaãní pûsobení ivig jak charakteru stimulace tvorby imunoglobulinû tak i inhibice
jejich tvorby studie byla podpoﬁena granty iga mz 4171-3 5006-3 a grantu m mt vs 96 149
vliv intravenózní imunoglobulinové infuse na in vitro tvorbu cytokinò u pacientò s protilátkovou imunodeficiencí autoﬁi mgr zuzana krátká j bártová k benetková o kry‰tûfková kolitel rndr jiﬁina bártová csc v˘zkumn˘ ústav stomatologick˘ 1 lf a vfn
úvod krátkodob˘ efekt podání intravenózních imunoglobulinû ivig má imunoregulaãní charakter ovlivàuje tvorbu imunoglobulinû proliferaci lymfocytû ale i tvorbu cytokinû a jejich antagonistû cílem studie bylo zjistit úãinek
ivig infuse na in vitro tvorbu il-4 a ifn-gama po mitogenní stimulaci imunokompetentních bunûk pacientû s proti-
látkovou imunodeficiencí metodika vy‰etﬁili jsme skupinu 15 pacientû s protilátkovou imunodeficiencí jejichï stav vyïadoval léãbu intravenóz-
ními imunoglobuliny ivig v substituãních dávkách ve skupinû bylo 8 pacientû klasifikováno jako bûïná variabilní imunodeficience cvid a 7 pacientû jako deficience igg podtﬁíd iggsd tvorbu il-4 a ifn-gama jsme sledovali po stimulaci plné krve kterou jsme pacientûm odebrali pﬁed aplikací infuse a t˘den po aplikaci krev ﬁedûná v pomûru 1 10 byla stimulována pokeweed mitogenem pwm 2 µl ml sigma a pwm spolu s concanavalinem a 2 µl ml cona10 µl ml sigma hladina cytokinû v odebíran˘ch supernatantech byla sledována metodou elisa zji‰èovali jsme jak celkové
mnoïství tak kinetiku produkce cytokinû v prûbûhu t˘denní kultivace v˘sledky pacienti s iggsd reagují na infusi v porovnání s cvid pacienty spí‰e produkcí ifn-gama jeho maximální
produkce byla u tûchto pacientû zji‰tûna jiï 4 den jeho hladina byla vy‰‰í neï u cvid pacientû pﬁed i po infusi buàky pacientû s cvid reagují na stimulaci mitogeny vysokou tvorbou il-4 která je v‰ak silnû sníïena po aplikaci infuse infuse ovlivnila i kinetiku reakce po stimulaci pwm do‰lo k posunu maximální produkce ze 4 na 7 den po stimulaci pwm cona z 5 na 7 den závûr zjistili jsme ïe modulace abnormální cytokinové produkce mûïe b˘t jedním z v˘sledn˘ch efektû aplikace ivig
a efekt infuse se projevuje je‰tû t˘den po její aplikaci nové metody identifikace streptokokò skupiny mutans a parodontálních patogenò
autor mgr martin krátk˘ kolitel mudr jana du‰ková csc v˘zkumn˘ ústav stomatologick˘ 1 lf a vfn
v souãasné dobû se v identifikaãních a epidemiologick˘ch studiích orálních mikroorganizmû stále ãastûji vyuïívají molekulárnû biologické techniky které mají mnohem vy‰‰í rozli‰ovací schopnosti neï metody biochemické a serologické pozornost je soustﬁedûna jak na streptokoky skupiny mutans tak na skupinu gramnegativních tyãek souhrnnû ozna-
ãovan˘ch jako parodontální patogeny techniky molekulární biologie jsou zaloïeny buì na anal˘ze celkové dna nebo na anal˘ze specifick˘ch oblastí bakteriální chromozomální dna anal˘za specifick˘ch oblastí dna se pouïívá k rozli‰ení bakterií na úrovni druhû a není schopná rozli‰it bakterie na poddruhové úrovni nejãastûji vyuïívaná je oblast rdna 16s rdna nebo úsek mezi
16s a 23s rdna anebo geny specifické pro dan˘ bakteriální druh dextranáza leukotoxin kolagenáza k rozli‰ení bakterií na poddruhové úrovni se pouïívá studium celkové dna buì chromozomálním dna fingerprintingem rflp
- restriction fragment length polymorphisms nebo pomocí ap-pcr arbitrarily primed pcr pro molekulární diagnostiku viridujících streptokokû pﬁi jejich epidemiologickém sledování v pﬁenosu dítû dûti matka 27
- otec jsme metodami pcr amplifikace 16s a 23s rdna dále ap-pcr a rflp dosud testovali streptokokové izoláty z plaku deseti rodin na základû stávajících v˘sledkû lze pﬁedpokládat genotypickou shodu streptokokû mezi matkou a dítûtem v 60 mezi otcem a dítûtem v 40 a mezi rodiãi v 15 poznání molekulárnû genetick˘ch vlastností viridujících streptokokû a parodontálních patogenû a od nich se odvíjející
virulence je základním pﬁedpokladem prohloubení poznání vztahu mikrobiálního agens a hostitele a to nejen pokud jde o stav dutiny ústní ale i pûsobení na dal‰í orgány nebo systémy molecular analysis of czech patients with 3-hydroxy-3-methylglutaryl coa lyase deficiency
autoﬁi ing lenka mrázová s kmoch e pospí‰ilová kolitel ing stanislav kmoch inst inherited metabolic disorders prague
mitochondrial 3-hydroxy-3methylglutaryl-coa lyase hl ec 4 1 3 4 31 6kda catalyzes the last step of leucine catabolism and the ketogenic pathway it catalyzes the cleavage of hmg-coa to form acetyl-coa and acetoacetate 3-hydroxy-3methylglutaric aciduria is an autosomal recessive metabolic disorder caused by a deficiency of hl the patients
present with acute episodes with vomiting hypotonia and lethargy which sometimes evolve to apnea and coma it usually
appears within the first year of life preliminary diagnosis is based on findings the characteristic organic acids in urine 3-hydroxy-3-methylglutaric 3-hydroxyisovaleric 3-methylglutatonic the gene for hl lies on chromosome 1p35-36 12 and contains 9 exons which are transcribed into the 1 7 kb in length
messenger rna to date more than 60 cases having hl deficiency have been diagnosed in the world among them 35 probands have been diagnosed at the molecular level and 21 mutations have been found we have diagnosed 2 patients with 3-hydroxy-3methylglutaric aciduria to confirm the diagnosis at molecular level we have amplified and sequenced hl cdna in one case we have found homozygous missense point mutation 698a→g
changing his233 to arg both parents were found heterozygous histidin 233 lies in catalytic site of hl is probably the main catalytic amino acid residue and we assume that this missense mutation leads to hl deficiency molecular analysis second of patient is carried out this study is supported by iga mz cr 6003-3 2000 vliv pozátùîové hyperhomocysteinémie na oxidaci a oxidovatelnost lipo-
proteinò a sloîení mastn¯ch kyselin
autoﬁi mudr sergej romaniv iv interní klinika 1 lf a vfn
m konárková iv interní klinika ústav klinické biochemie 1 lf a vfn
a písaﬁíková iv interní klinika 1 lf a vfn
a îák iv interní klinika ústav klinické biochemie 1 lf a vfn kolitel doc mudr a îák csc iv interní klinika 1 lf a vfn
v˘chodisko hyperhomocysteinémie hhcy je samostatn˘ rizikov˘ faktor ichs bûhem autooxidace homocysteinu hcy je generována ﬁada reaktivních kyslíkov˘ch substancí které mohou iniciovat peroxidaci lipidû oxidativní modifi-
kace ldl ke které dochází bûhem lipoperoxidace hraje v˘znamnou roli v ãasn˘ch stádiích aterogeneze v˘sledky ﬁady
studií zab˘vajících se vlivem hcy na peroxidaci lipoproteinû in vitro i in vivo v‰ak nejsou jednotné cíl studie zjistit vliv hhcy indukované zátûïí methioninem met 6 hod 100 mg kg tûl hm per os na nûkteré parametry lipoperoxidace vldl a ldl materiál a metody vy‰etﬁená skupina 19 muïû 12 ïen sestávala z 6 zdrav˘ch osob 8 pacientû z aterotrombotick˘mi
komplikacemi a 17 nemocn˘ch s hyperlipidémií prûmûrn˘ vûk osob byl 53 7 ± 16 0 roky prûmûr ± sd a bmi byl 26 6 ± 3 7 kg m2 koncentrace thcy byly analyzovány podle araki a sako 1987 oxidace vldl a ldl in vitro byla
mûﬁena podle esterbauera a spol 1989 pohyblivost ldl byla zji‰èována elektroforeticky na agaróze po in vitro inkubaci
frakce ldl v˘sledky zátûïí indukovaná hhcy 157 oproti hodnotám pﬁed zátûïí p 0 001 zvy‰ovala koncentrace konjugo-
van˘ch dienû v ldl 7 p 0 05 i vldl 23 p 0 01 rychlost oxidace ãástic vldl i ldl 5 22 resp obû p 0 05 i absolutní 11 p 0 001 a relativní pohyblivost ãástic ldl 12 p 0 05 ve spektru mastn˘ch kyselin ve tﬁídû fosfolipidû i esterû cholesterolu po met zátûïi zji‰tûny v˘znamnû niï‰í koncentrace
kyseliny dihomo-gama-linolové 20 3n-6 p 0 05 závûr na‰e nálezy svûdãí pro zv˘‰ení oxidace i oxidability ãástic ldl a vldl a prooxidaãní úãinky akutní hhcy in vivo 28
colour discrimination is preserved in early stages of parkinson's disease
autoﬁi mudr olga veselá e rûïiãka r jech j roth k tûpánková z solano e preclíková kolitel doc mudr evïen rûïiãka csc movement disorders centre departments of neurology and ophthalmology charles university in prague first faculty of medicine and general faculty hospital prague czech republic
disturbances of visual colour discrimination have been suggested as early markers of parkinson's disease pd presu-
mably due to retinal dopamine deficiency however in dopaminergic treated patients the findings might be biased we examined 16 de-novo pd patients mean age 55 1 sd 11 4 in hoehn & yahr stages 1 and 2 without l-dopa or any other medication that might influence colour vision 20 healthy volunteers of mean age 51 2 yrs sd 11 8 served
as controls all patients and controls underwent an ophthalmologic examination to exclude subjects with glaucoma retinopathy or other ocular diseases colour discrimination was measured using the farnsworth-munsell 100-hue test the examinations were performed under standard conditions in a room illuminated by a daylight lamp biolux osram
6500 °k the total error score tes and partial error scores in green-yellow and red-green axes were calculated for every person examined no significant differences were found between pd patients mean tes 71 3 sd 54 2 and
controls mean tes 44 6 sd 26 1 only four patients' tes exceeded the upper limit of normality control mean 2 sd the partial scores were not significantly increased in pd patients on the contrary a comparable study 1 showed significantly elevated tes in de novo pd patients mean age 58 hoehn & yahr stages 1 to 3 this discrepancy could be caused by either more advanced pd in büttner's et al patients or by their extremely well performing controls in conclusion visual colour discrimination is not disturbed in early untreated pd and doesn't appear as a reliable early
marker of pd study support cez 1998 reg no vz 206016-04 1 büttner th kuhn w müller th patzold t heidbrink k przuntek h - distorted color discrimination in de novo parkinsonian patients neurology 1995 45 386-387
29 vítùzné práce 2 studentské vùdecké konference in extenso
1 místo anal¯za teratogenního úâinku retinové kyseliny u rekombinantních inbredních kmenò laboratorního potkana
autor david kemlink václava jeﬁábková kolitel prof mudr vladimír kﬁen drsc ústav biologie a lékaﬁské genetiky 1 lf a vfn
úvod
kyselina retinová ra patﬁí mezi deriváty vitamínu a retinoidy jedná se o velmi v˘znamnou skupinu léãiv pouïí-
vanou pﬁeváïnû v hematologii onkologii hlavy krku a mléãné ïlázy jako chemoprofylaktika a v koïním lékaﬁství kde se
podávají celkovû i lokálnû teratogenní úãinek retinové kyseliny byl popsán jiï v roce 1973 u my‰i pozdûji i u potkana a nûkteré epidemiologické studie naznaãují tento úãinek i u ãlovûka v organismu retinoidy interagují s mnoha transport-
ními a regulaãními proteiny cílovou strukturou jsou oblasti dna tzv responsible elementy rare na nûï se ra spoleãnû se sv˘mi receptory váïe a reguluje tak genovou expresi mezi geny které ve sv˘ch regulaãních oblastech obsahují
rare patﬁí mimo jiné i homeoboxové geny které hrají klíãovou roli bûhem v˘voje konãetin 1 proto vyhledávání genû souvisejících s retinovou kyselinou doplàuje v˘zkum morfogeneze konãetin 2 3 4 tento
sloïit˘ regulaãní proces patﬁí mezi dûje vyuïívané pro objasàování funkce genû funkãní genomiku která je nedílnou souãástí projektu mapování savãího genomu 5 6 pro intensivní vyuïívání v biomedicínském v˘zkumu byl laboratorní
potkan zaﬁazen do programu genetického v˘zkumu pﬁi hugo a k úplné sekvenaci byl urãen kmen bn kmeny shr a bn laboratorního potkana se li‰í v mnoha genech a odli‰nosti tûchto genetick˘ch pozadí se projevují i v modifikaci úãinku mutantní alely lx která podmiàuje syndrom polydaktylie-luxace pls 7 zároveà tato mutace
zvy‰uje citlivost potkana k teratogenûm jako je ra 4 i teratogenní úãinky ra se u zvíﬁat nesoucích alelu lx rovnûï li‰í v závislosti na pûvodu genetického pozadí za tyto odli‰nosti jsou odpovûdné geny malého úãinku modifikátory které jsou rozmístûné po celém genomu potkana 8 sady rekombinantních inbredních ri kmenû odvozené od vysoce inbredních progenitorních kmenû s pozadími
shr a bn pﬁedstavují geneticky fixované kombinace genomû tûchto progenitorních kmenû jednotliví ãlenové urãitého
ri kmenu jsou témûﬁ geneticky identiãtí a proto je moïné pouïívat rûzné jedince pro rûzné experimenty ale jejich v˘sledky vztahovat k danému ri kmenu ri kmeny se pak mezi sebou li‰í rûzn˘mi kombinacemi progenitorních genetic-
k˘ch pozadí a spoleãnû pak jsou modelem populace s kontinuální distribucí sledovan˘ch projevû jako napﬁ morfotyp pls nebo modifikace úãinku ra v kombinaci s tímto syndromem 9 genetick˘ profil ri kmenû pak popisuje tzv sdp strain distribution pattern kter˘ je souborem dna markerû u jednotliv˘ch markerû je pro kaïd˘ kmen vyhodnoceno zda je daná sekvence pûvodu od jednoho nebo druhého proge-
nitora popﬁípadû zda je v této oblasti pﬁítomna heterozygocie sdp je základem pro vazebnou genetickou mapu ri kmenû a zároveà se pouïívá pro asociaãní anal˘zu ta se sestává z nûkolika statistick˘ch metod porovnávajících sdp s fenotypem jednotliv˘ch ri kmenû vyjádﬁen˘m buì mendelovsk˘m znakem podle korespondence s progenitorem nebo kvantitativním znakem qtl v˘sledkem jsou oblasti genomu které s nejvût‰í pravdûpodobností odpovídají za rozdíly mezi ri kmeny v zadaném fenotypu a mohou tedy obsahovat modifikující geny 9 v této práci porovnáváme úãinek ra na v˘voj zadních konãetin u nové sady ri kmenû pxo nesoucích alelu lx
a zároveà probíhá genotypizace tûchto kmenû s pﬁípravou pﬁíslu‰ného sdp tato sada doplàuje stávající systém ri kmenû hxb a bxh a obohacuje jej o nové kombinace genetick˘ch pozadí i fenotypové projevy spoleãnû jsou na základû
pls souãástí modelu poruchy v˘voje konãetin a budou se pouïívat k vyhledávání a identifikaci genû ovlivàujících tento syndrom i genû modifikujících teratogenní úãinek ra na v˘voj konãetin 10 materiál a metody
zvíﬁata
pro experiment je pouïívána nová sada ri kmenû pxo geneticky fixovaná f2 populace vzniklá kﬁíïením polydak-
tylního kmene shr lx p a oligodaktylního kmene bxh2 o kter˘ je rovnûï ri kmenem ze sady bxh vzniklé z vysoce inbredních kmenû shr h a bn lx b a také nese alelu lx podmiàující pls sada se sestává z 10 kmenû pxo1-pxo10 a jedné sublinie kmene pxo3 pxo3a a pxo3b samci pxo kmenû byli pﬁipou‰tûni se samicemi vysoce inbredního progenitorního kmene shr lx bylo prokázáno ïe tato kombinace modifikuje embryotoxicitu ra a umoïàuje kvantitativní hodnocení malformaãních projevû 10 sekce prací pregraduálních studentò âást teoretická
32
uspoﬁádání studie
samice byly cílenû pﬁipou‰tûny a den kdy byly ve vaginálním v˘tûru zji‰tûny spermie byl oznaãen 1 dnem gestace tﬁináct˘ den gestace bylo bﬁezím samicím podáno 100 mg kg tûlesné hmotnosti kyseliny all-trans retinové tretinoin v 10 ml kg 10 roztoku etanolu v kukuﬁiãném oleji p o ïaludeãní sondou v celkové inhalaãní anestézii tﬁináct˘ den byl zvolen pro podání ra podle pﬁedchozích pozorování která ukázala maximální malformaãní úãinek na zadní konãetiny 10 kontrolním skupinám byl stejn˘m zpûsobem podán pouze rozpou‰tûcí roztok dvacát˘ druh˘ den gestace den pﬁed
porodem byly plody odebrány zváïeny a byly vyhodnoceny poãty a tvar prstû zadních i pﬁedních konãetin dále byl vyhodnocen poãet resorpcí v jednotliv˘ch vrzích plody byly fixovány v 96 etanolu a obarveny diferenciálnû na chru-
pavku alciánovou modﬁí a na kost alizarin-sulfátovou ãervení po zprûhlednûní 10 roztokem hydroxidu draselného takto
pﬁipravené preparáty zadních konãetin budou vyhodnoceny pomocí digitální obrazové anal˘zy jejíï v˘sledky boudou pouïity pro asociaãní anal˘zy genotypizace
k sestavování sdp je pouïíváno komerãnû dostupn˘ch souborû mikrosatelitních markerû rat mit mgh a dal‰í a nûkolika znám˘ch genû igf2 lsn a dal‰í pomocí standardního protokolu pcr k vyhodnocení polymorfismu krátk˘ch sekvencí sslp pouïíváme elektroforetickou separaci v polyakrylamidovém gelu a detekci produktu po obarvení
ethidium-bromidem fluorescenãnû v uv svûtle v˘bûr a poﬁadí markerû je pﬁejímáno pﬁeváïnû ze stávajícího sdp ostatních ri kmenû dále pak z veﬁejnû dostupn˘ch vazeb˘ch map a z map radiaãních hybridû 9 10 11 protoïe jedním z progenitorû pxo kmenû byl kmen ze sady bxh kter˘ má pomûr genetick˘ch pozadí bn shr teoreticky 1 1 je u pxo kmenû které vznikly dal‰ím kﬁíïení s kmenem shr lx tento pomûr jiï 1 3 a v markerech které byly u kmene
bxh2 pûvodu shr není u pxo pﬁítomen polymorfismus v‰echny kmeny mají tyto oblasti pûvodu shr toto naﬁedûní genetického pozadí bn umoïàuje snadnûj‰í vyhledávání minor genû z tohoto pozadí pomocí asociaãní anal˘zy v souãasné je doplnûno 50 5 stávajícího sdp ri kmenû o informace o pxo kmenech pro správu sdp a asociaãní anal˘zu je pouïíván program mapmanager v29b v˘sledky a diskuse
v souãasné dobû jsou k dispozici pouze v˘sledky anal˘zy poãtu prstû zadních konãetin a poãtu resorpcí v˘sledky jsou
seﬁazeny do kontingenãní tabulky kategorie byly zvoleny podle poãtu trifalangeálních prstû auopodia zadních konãetin zatím nebyly zji‰tûny signifikantní pravolevé nebo mezipohlavní rozdíly proto byly vyhodnoceny v‰echny vzorky spoleãnû jednotlivé kmeny byly srovnávány se souhrnem od v‰ech kontrolních vrhû pomocí testu χ2 které se pﬁi tomto typu hodnocení od sebe rovnûï signifikantnû neli‰í hladina spolehlivosti byla zvolena 1 0 z tabulky vypl˘vá ïe v‰echny kmeny se signifikantnû li‰í od kontrol a je zﬁejmé ïe se projevy li‰í i mezi jednotliv˘mi
kmeny v následující tabulce jsou opût pomocí testu χ2 srovnány kmeny u kter˘ch byl získán dostateãn˘ poãet vzorkû hladina spolehlivosti byla zvolena 1 0 hodnoty kdy se vybrané kmeny signifikantnû neli‰ily jsou vyznaãeny tuãnû 33
p=3 05e-157 medián χ2 vs kontroly
kmen poãtu prstû resorpce 1 1 r 2 2 r 3 3 r 4 4 r 5 a více celkem hodnota p
pxo1 3 28 8 0 13 51 8 2 74 1 57928e-30
pxo2 3 41 2 0 14 66 0 0 80 6 78424e-35
pxo3a 4 19 0 0 0 15 15 4 34 4 49709e-20
pxo3b 3 15 4 0 0 18 4 0 22 1 42096e-21
pxo4 3 0 0 0 1 21 0 0 22 7 71679e-26
pxo5 3 52 6 4 2 12 0 0 18 3 874e-21
pxo6 2 70 0 16 15 16 1 0 48 8 598e-30
pxo7 2 40 0 29 20 11 0 0 60 6 99226e-37
pxo8 2 25 0 0 9 3 0 0 12 3 02839e-20
pxo9 4 53 3 2 0 0 11 1 14 1 00973e-19
pxo10 4 0 0 0 5 13 28 14 60 2 00891e-18
kontroly 10 9 7 2 6 0 0 0 0 0 2 96 98
skuteãnost ïe nûkteré kmeny se ve vyhodnocovan˘ch parametrech signifikantnû li‰í a jiné se neli‰í lze povaïovat za nepﬁím˘ dûkaz ïe genetické odli‰nosti v rámci sady pxo zahrnují téï geny ovlivàující teratogenní úãinek ra na zadní konãetiny existence párû kmenû které se signifikantnû neli‰í pﬁedstavuje náznak kontinuální distribuce projevû které jsou jedním z pﬁedpokladû následné asociaãní anal˘zy závûr
tato teratologická studie je aplikací zvíﬁecího modelu poruchy v˘voje konãetin zaloïeném na anal˘ze rûzn˘ch projevû
syndromu polydaktylie-luxace u geneticky definovan˘ch kmenû laboratorního potkana sada ri kmenû pxo je komple-
mentární k stávajícím sadám hxb a bxh a doplàuje je o dal‰í kombinace genetick˘ch pozadí progenitorních kmenû u pxo kmenû byla potvrzena pﬁedchozí pozorování a byla u nich prokázána variabilita projevû pls v kombinaci s podá-
ním retinové kyseliny v˘sledky anal˘zy autopodia zadních konãetin naznaãují ïe tento model je vhodn˘ k dal‰í morfo-
metrické anal˘ze a po dokonãení sdp bude moïné provést asociaãní studie a pokusit se odhalit oblasti potkaního genomu které obsahují geny odpovídající za rozdíly v interakci genomu jednotliv˘ch ri kmenû s ra literatura
1 j m brown c tickle 1992 retinoids and the molecular basis of limb patterning comp biochem physiol 103a 641-647 2 b robert a weydert 2000 from grenoble to grenoble 1972-2000 limb development and regeneration revisited dev dyn 2000 nov 219 3 426-8 3 l niswander 1997 limb mutants what can they tell us about normal limb development curr opinion genet devel 7 4 530-535 4 v bílá v kﬁen 1996 teratogenic action of retionic acid in rat congenic and recombinant inbred strains fol biol praha 42 167-173 5 h j jacob 1999 functional genomics and rat models gen research 9 1013-1016 6 j w innis d p mortlock 1998 limb development molecular dysmorphology is at hand clin genet 53 337-338 7 v kﬁen 1975 acta univ carol med monograph lxviii 1975 p1-109 8 v kﬁen v bílá r ka‰párek d kemlink d kﬁenová l edová m pravenec 2000 rat polydactyly-luxate sydrom in a series of recombinant inbred and congenic strains 7th international conference on limb development and regeneration aussois france may 21-24 2000 abstract in develop dynamics2000 viz cit 2 9 v kﬁen et al 1996 recombinant inbred and congenic strains of the rat for genetic analysis of limb morphogenesis fol biol praha 42 159-166 10 v kﬁen v bílá r ka‰párek d kﬁenová a new net of recombinant inbred strains complementary to hxb and bxh sets j exp anim sci 2000 41 54-56 11 m pravenec et al 1999 hxb ipcv and bxh cub recombinant inbred strains of the rat strain distribution patterns of 632 alleles fol biol praha 45 203-215 12 t k watanabe et al 1999 a radiation hybrid map of the rat genom containing 5255 markers nat genet 22 27-36 13 r g steen et al 1999 a high density integrated genetic linkage and radiation hybrid map of the laboratory rat gen research 9 ap 1-8 34
kmen pxo10 pxo6 pxo7 pxo2 pxo1 pxo3a
pxo10 2e-16 8 1e-10 0 04492
pxo6 2e-16 0 16282 1 1e-07 2 2e-09
pxo7 0 16282 1 8e-15
pxo2 1 8e-15 0 00831
pxo1 8 1e-10 1 1e-07 0 00831 2 6e-05
pxo3a 0 04492 2 2e-09 2 6e-05
2 místo amygdala v histologick¯ch ¤ezech a její zmùny v pròbùhu îivota
autor ale‰ hejãl kolitel prof mudr pavel petrovick˘ drsc anatomick˘ ústav 1 lf
úvod
rozvoj zobrazovacích metod v neurovûdách pﬁinesl zv˘‰en˘ zájem o morfologii centrálního nervového systému její dokonalé zvládnutí umoïàuje klinikûm porovnávat zobrazitelné zmûny ve strukturách cns které mohou v˘raznû napo-
moci ke stanovení diagnosy u indikovan˘ pacientû jednou z takov˘ch struktur je i amygdala amygdala am je subkortikální struktura mozku nacházející se v pﬁední mediální ãásti temporálního laloku promítá
se pod povrch uncus gyri parahippocampalis je jednou ze dvou hlavních sloïek limbického systému a k jeho ostatním
strukturám má velmi úzk˘ topick˘ vztah dorzálnû od amygdaly se nachází hipokampus ze kterého dorzokraniálnû odstupuje struktura tvaru c zvaná fornix ten je tvoﬁen vlákny vycházejícími z hipokampu laterálnû od amygdaly zasahuje temporální roh postranní komory a kraniálnû nacházíme bazální ganglia amygdala není homogenní strukturou n˘brï je sloïena z pﬁibliïnû 16 jader a podjader nejv˘raznûj‰ím jádrem je jádro laterální podmiàující v˘raznou ãást objemu amygdaly mediálnû od nûj se nachází jádro bazální a bazální akcesorní kraniomediálnû poté jádra centrální a mediální které v pﬁední ãásti pﬁecházejí kraniomediálnû v tzv extended amygdala nejmediálnûj‰í ãást amygdaly se naz˘vá kortikální a pﬁes cta tedy pﬁechodnou zónu pokraãuje do kortexu temporálního laloku amygdala má velké mnoïství spojû ze kter˘ch je moïno odvodit její funkce ty se dají rozdûlit do ãtyﬁ základních kategorií 1 emotivní sloïka na‰eho chování a to pﬁeváïnû pomocí spojû bazolaterálního jádra b-l s asociativními ãástmi kûry 2 emotivní vliv na pohyb pﬁes spoje s bazálními ganglii bg a frontální kûrou 3 facilitace aktivity hipokampálních spojû pﬁi tvorbû pamûèov˘ch stop 4 regulace vegetativního centra hypothalamu pﬁes stria terminalis a ventrální amygdalofugální systém cíl projektu
tento projekt probíhá v neuroanatomické laboratoﬁi prof petrovického na anatomickém ústavu 1 lf jiï tﬁetím rokem jeho cílem je vytvoﬁení rastru pro hodnocení amygdaly v ﬁezech nmr vlastní projekt je pﬁitom moïno rozdûlit do dvou základních krokû 1 urãení anatomick˘ch hranic am 2 zji‰tûní objemu normální am neuroanatomick˘mi metodami v jednotliv˘ch deceniích metody
mozky jeï jsou v laboratoﬁi zpracovány zís-
káváme z 1 a 2 ústavu patologické anatomie 1 lf jsou transportovány v 1 roztoku formolu
do laboratoﬁe a odtud po nezbytn˘ch úpravách
pﬁeneseny na neurologickou kliniku 1 lf na
oddûlení nmr nukleární magnetická rezonance po zpracování nmr se mozky vrací zpût do laboratoﬁe kde je nutno je nejménû pûl roku fixovat ve 2 roztoku formolu poté se z mozku
vykrojí blok nervové tkánû obsahující amygdalu ten je nakrájen na mikrotomu ve frontální rovinû ¤ezy jsou silné 100 µm kaïd˘ pát˘ ﬁez je poté
nabarven kresylvioletí nisslova metoda a za-
tmelen do podloïních sklíãek takto upravené
ﬁezy je moïno hodnotit v mikroskopu nebo pod
zvût‰ovacím zaﬁízením a poté planimetrem kvan-
tifikovat jejich velikosti grafická podoba tohoto
postupu je naznaãena níïe 35
fixace ve 2 formolu vykrojení am blocku
nakrájení na mikrotomu barvení
zakreslení am pod zvût‰ovákem planimetrie
patologie
nmr anatomie
fixace v 1 formolu
neuroanatomická laboratoﬁ
postup zpracování projektu amygdala v˘sledky
v souãasné dobû je zpracováno 13 mozkû u nich byly mûﬁeny amygdaly v obou hemisférách absolutní hodnoty objemû amygdal se pohybují v rozmezí od 1 1 cm3 do 2 3 cm3 tyto hodnoty byly vztaïeny k vûku mozkû a vyneseny do grafu z grafu je moïno pozorovat zﬁejm˘ pokles absolutních hodnot objemû amygdal zatímco prûmûrné hodnoty se
v deceniích kolem 40 50 let pohybovaly mezi 1 9 2 0 cm3 v nejstar‰ím deceniu 80 90 let to jiï bylo pouze kolem 1 5 1 6 cm3 pokles absolutních hodnot mezi 40 a 90 rokem ãiní v prûmûru 20 dal‰í faktor kter˘ jsme zahrnuli do na‰eho mûﬁení byl relativní objem amygdaly ten byl dán pomûrem mezi absolut-
ním objemem amygdaly a objemem bloku mozku ze kterého pﬁíslu‰ná amygdala pocházela v˘sledkem byl graf typu pﬁed-
chozího jen na ose y byly hodnoty objemu amygdaly v procentech ty se pohybovaly od 2 2 do 4 4 rozdíl hodnot
mezi jednotliv˘mi decenii byl je‰tû v˘raznûj‰í neï pﬁi mûﬁení absolutních hodnot zatímco v nejmlad‰ích deceniích byla
prûmûrná hodnota kolem 4 0 tak o 40 50 let pozdûji se její hodnota zmen‰ila na prûmûr okolo 2 5 pokles relativ-
ních hodnot mezi 40 a 90 rokem ãinil tedy v prûmûru 40 36
roky mozek ã vûk absolutní velikost relativní velikost prûmûr
r l r l
pod 40 71 38 1 73 3 15 1 73
3 16 40 50 4 49 2 30 4 40 30 44 1 80 1 85 3 80 3 84
1 98
4 10 50 60 59 50 1 70 2 89 74 58 1 35 1 54 2 40 2 64
73 54 1 93 1 92 3 95 3 78
78 58 1 80 1 39 3 00 2 03
1 71
2 96 60 70 8 62 1 90 1 90 3 77 3 87
1 90
3 80 70 80 9 71 1 60 1 60 2 94 3 11
1 60
3 00 80 90 3 84 2 27 4 01
22 84 1 50 1 10 2 88 2 23
31 89 1 16 2 38 57 82 1 66 1 79 3 38 3 91
1 58
2 50 závûr
pokles objemu amygdaly mezi 40 a 90 rokem mûﬁeno v absolutních hodnotách ãiní v prûmûru 20 pokles objemu
amygdaly mezi 40 a 90 rokem mûﬁeno v relativních hodnotách k ﬁezu cel˘m mozkem ãiní v prûmûru 40 je nutno
zdûraznit ïe se jedná o pﬁedbûïné v˘sledky a jejich upﬁesnûní bude náplní dal‰í práce podûkování
dûkuji mému ‰koliteli prof mudr pavlu petrovickému drsc za vedení tohoto projektu a za nesãetné rady které mi
poskytl v jeho prûbûhu a umoïàil mi tímto podílet se na jeho projektu zároveà dûkuji obûma laborantkám neuroanato-
mické laboratoﬁe anatomického ústavu 1 lf paní patkové a paní fulínové za zasvûcení do neroanatomick˘ch metod tento projekt je souãástí v˘zkumného zámûru vz cez j 13 93 1 lf 37
4
73 8
8
7830
30
71
59
74
74
78
9
9
57
57
22
31
22
2 0
1 5
1 0
0 5
40 50 60 70 80 roky 2 0
1 5
1 0
0 5
40 50 60 70 80 roky 8
5
4
3
2
40 50 60 70 80 roky 8
57 3
31
22
78
74
74
71
57
2278
73
73
4
30
9
9
5
4
3
2
40 50 60 70 80 roky 3
absolutní objem am v závislosti na vûku velikost v ccm relativní objem am v závislosti na vûku objem v absolutní objem am v závislosti na vûku velikost v ccm relativní objem am v závislosti na vûku objem v 38
3 místo disperze intervalu qt a projekce vektoru vlny t
autoﬁi jan kolaﬁík tûpán havránek kolitel doc mudr otomar kittnar csc fyziologick˘ ústav 1 lf
úvod
¤ada kardiologick˘ch prací se v poslední dobû zab˘vá vysvûtlením jevu zvaného disperze qt intervalu qt disperze qtd je rozdíl v trvaní nejdel‰ího a nejkrat‰ího qt intervalu mezi libovoln˘mi ekg svody daného svodového systému metoda
stanovování qtd vznikla jiï pﬁed 25 lety jednalo se o velmi populární metodu do které byly vkládány velké nadûje jako
do snadno a rychle stanovitelného parametru rizik vzniku závaïn˘ch poruch srdeãního rytmu vedoucích aï k náhlé kardiální smrti dnes se v‰ak uvaïuje o tﬁech moïn˘ch pﬁíãinách vzniku qt disperze interpretace qt disperze jako projevu repolarizaãní nehomogenity myokardu interpretace qt disperze jako projekce vlny t vysvûtlení qt disperze
jako dûsledku nepﬁesnosti jejího stanovení obr 1 vysvûtlení repolarizaãní nehomogenity
tato práce se zab˘vá moïn˘m vysvûtlením existence qtd rozdílnou projekcí sumárního repolarizaãního vektoru do pﬁíslu‰ného svodu to ïe se v nûkterém ze svodû objevila nulová amplituda dﬁíve neï v jiném znamená ïe svod mohl b˘t v daném okamïiku kolm˘ na vektor elektrického pole konec vlny t v daném svodu tedy nemusí odpovídat pﬁímo ukonãení akãního potenciálu a tedy i refrakterní fáze v korespondující oblasti srdeãního svalu zápis konce vlny t mûïe
b˘t zkreslen zejména v pﬁípadû ïe okamïit˘ vektor elektrického pole je kolm˘ k ose daného svodu pak se v tomto svodu zaznamenává nulová v˘chylka takto mûïeme vysvûtlit zaregistrování krat‰ího qt intervalu oproti skuteãné dobû trvání
repolarizace u intervalu qt to tedy prakticky znamená ïe na osu svodu by byla kolmá poslední ãást t-smyãky vektor-
kardiogramu v této souvislosti byl zkoumán vztah mezi morfologií vektorkardiografické t-smyãky a qtd teoreticky
mûïe b˘t velikost qtd ovlivnûna tﬁemi interagujícími faktory amplitudou t-smyãky její ‰íﬁkou a poãtem svodû ve kter˘ch nebylo z dûvodu nízké amplitudy vlny t moïné konec vlny t jednoznaãnû urãit cíl
v na‰í pﬁede‰lé práci jsme se posuzovali jeden z faktorû vzniku qt disperze reprodukovatelností stanovení qt disperze z v˘sledkû vyplynulo ïe chyba mûﬁení mezi hodnotiteli není vût‰í neï rozdíl mezi hodnocen˘mi skupinami v této jsme se zab˘vali dal‰ím faktorem vlivem morfologie vektorkardiografické t-smyãky na qtd metody
v poãítaãovém programu cardiag 112 2 jsme promûﬁovali vektorkardiografické smyãky vln t u souboru 12 zdrav˘ch
tûhotn˘ch ïen a u kontrolní skupiny 15 mlad˘ch zdrav˘ch netûhotn˘ch ïen v laboratoﬁi funkãních vy‰etﬁení fyziologic-
kého ústavu pouïívají tûhotenství jako fyziologick˘ model zmûny polohy srdce odebírali jsme data ze smyãek ve tﬁech na sebe kolm˘ch rovinách frontální sagitální a transverzální mûﬁili jsme ve tﬁech rûzn˘ch ãasech v první ãtvrtinû polo-
vinû a tﬁetí ãtvrtinû trvání t-smyãky v kaïdé rovinû jsme získávali amplitudu okamïitého vektoru a prostorov˘ úhel α charakterizující smûr okamïitého sumárního vektoru v trojrozmûrném prostoru z rozdílu úhlû v první a poslední ãtvrtinû smyãky t jsme pak vypoãítali ‰íﬁku této smyãky o tato data jsme roz‰íﬁili soubor s jiï promûﬁenou qt disperzí v˘sledky íﬁka smyãky t je v poslední fázi tûhotenství signifikantnû zv˘‰ena amplitudy okamïit˘ch vektorû ve v‰ech tﬁech v6
v5
v4
v3v2v1
39
uveden˘ch ãasech jsou statisticky v˘znamnû zmen‰ené v tabulce je amplituda vektoru z poslední 1 4 repolarizace a prostorov˘ úhel je rovnûï zmen‰en˘ je umístûn horizontálnûjí a míﬁí ménû dopﬁedu obr 2 tabulka v˘sledkû
diskuse
morfologie t-smyãky ovlivàuje velikost qtd âím je t-smyãka ‰ir‰í a její amplituda men‰í tím jsou rozdíly v délce
qt intervalû 12 svodového ekg v˘raznûj‰í a qtd vy‰‰í je-li t-smyãka úzká a velikost úhlu vektoru vlny t na osu pﬁíslu‰ného svodu je dostateãnû malá její projekce do tohoto svodu se projeví dobﬁe stanoviteln˘m koncem vlny t odpo-
vídajícím skuteãnému konci repolarizace a dostateãnou v˘‰kou vlny t která je tím pádem dobﬁe rozeznatelná âím více
se úhel mezi vektorem vlny t a osou daného svodu blíïí 90° nebo ãím men‰í je amplituda vektoru vlny t tím je vlna t v tomto svodu niï‰í a konec vlny t je hûﬁe identifikovateln˘ pokud je úhel mezi vektorem vlny t a osou svodu mal˘ ale smyãka je ‰iroká takïe koncov˘ úsek smyãky t se promítá na osu daného svodu v úhlu blízkému 90° je vlna t sice
dobﬁe rozeznatelná ale její konec v tomto svodu nastává dﬁíve a mûïe tak b˘t pﬁíãinou zv˘‰ené qtd osa svodu obr 3 vztah morfologie vektorkardiografické t-smyãky a vlny t na ekg záznamu
závûr
zmûny parametrû vektrokardiografické smyãky vlny t korespondují se zv˘‰ením qtd a naznaãují ïe mezi qtd a konfigurací smyãky t existuje úzk˘ vztah bylo by v‰ak pﬁíli‰ odváïné povaïovat tento vztah za pﬁíãinn˘ neboè elektrické
pole myokardu je velmi sloïit˘ a komplexní systém a jeho promítnutí do jednoho sumárního vektoru je velk˘m zjednodu‰ením v klinické praxi je toto zjednodu‰ení pﬁijatelné ale u podrobn˘ch experimentálních v˘sledkû mûïe znamenat podstatnou chybu srdce totiï není prost˘m dipólem a elektrick˘ signál se ‰íﬁí nehomogeními strukturami hrudníku kost krev kûïe plíce atd zv˘‰ení qtd v sobû prokazatelnû nese diagnosticky zajímavou informaci ta je v‰ak
ovlivnûna mnoha faktory jako je poloha srdce nehomogenita prostﬁedí mezi zdrojem elektrického pole a snímacími elektrodami atd takïe její v˘znam je v tuto chvíli nanejv˘‰e nespecifick˘ kontrola tùhotenství n=15 n=10 tûlesná hmotnost kg 60 6 5 8 74 2 7 22 tepová frekvence 1 min 75 2 11 5 102 1 18 2 qt disperze ms 34 12 73 18 qtc disperze ms 36 13 79 21 amplituda koneãného vektoru t smyãky µv 793 114 532 98 prostorov˘ úhel konce vektoru t smyãky deg 33 7 21 12 íﬁka t smyãky deg 6 3 18 11 a
b
c
a
b
c
a
b
c
a b
c
qtd
1 místo zánùt zubního lòîka u ku¤ákò incidence a mikrobiální obraz
autor muc martin tomeãek kolitel as mudr hana staàková stomatologická klinika 1 lf a vfn
úvod
hojení extrakãní rány a pﬁípadn˘ vznik zánûtliv˘ch komplikací ovlivàuje ﬁada faktorû jsou to jednak okolnosti vlastní
extrakce vasokonstrikãní pﬁísady anestetik technické provedení chirurgického v˘konu a jeho délka profylaktické podání antibiotik a dále ze strany pacienta jsou to predisponující onemocnûní napﬁ diabetes mellitus dm hypertenze poruchy koagulace aj úroveà ústní hygieny a závaïn˘m faktorem je pravdûpodobnû i kouﬁení jeho neblah˘ vliv na hojení rány po zubních extrakcích v implantologii ale i po parodontologick˘ch operacích byl
zkoumán a prokázán ﬁadou prací 1-8 jsou zkoumány i mechanismy pûsobení kouﬁení tabáku na hojení ran 9-11 jiné
studie si v‰ímají bakteriálního sloïení u poextrakãních alveolitid 12 13 a v souvislosti s kouﬁením u parodontologick˘ch
pacientû 14 na‰e prospektivní studie spojuje tyto aspekty a zadává si dva cíle vliv kouﬁení na 1 incidenci postextrakãních alveolitid a to s ohledem na kouﬁení a dal‰í okolnosti stav parodontu a orální hygieny prûbûh extrakce atb profylaxe 2 mikrobiální obraz alveolitid metodika
soubor je tvoﬁen pacienty o‰etﬁovan˘mi posluchaãi stomatologie na chirurgické ambulanci stomatologické kliniky 1 lf a vfn v praze z koneãného zpracovávaného souboru jsou vyﬁazeni ti pacienti u kter˘ch se vyskytnul jin˘ závaïn˘
faktor mimo kouﬁení kter˘ by mohl ovlivnit vznik zánûtu zubního lûïka tj dm hypertenzní nemoc poruchy koagulace recentní infekce orofaryngu resp nedávné uïívání antibiotik v posledních 3 t˘dnech endokrinní poruchy poruchy imunity systémové vaskulární choroby onkologické choroby aj sledujeme téï uïívání lékû u kaïdého pacienta s extrakcí jsou dále zaznamenány tyto údaje extrahované zuby stav ústní hygieny approximal plaque index stav parodontu a gingivy extrahovan˘ch zubû vïdy nejhor‰í nález a to ve stupních 1 klidné bez známek zánûtu 2 otok zarudnutí bolestivost 3 vytéká hnisav˘ exsudát zvlá‰è zaznamenáváme pﬁítomnost parodontálního chobotu 5mm rtg známky projasnûní 1 periapikálnû 2 laterálnû kouﬁení jsou zaznamenány celkem tﬁi údaje z toho 2 a 3 jen pﬁi rozvoji alveolitidy 1 kolik cigaret pacient obecnû vykouﬁí 2 kolik vykouﬁil v den extrakce 3 kolik vykouﬁil v následujících dnech koncentrace vasokonstrikãní pﬁísady pouïitého anestetika na na‰em pracovi‰ti vût‰ supracain 2 s adrenalinem 1 400 000 pﬁípadnû supracain 4 s adrenalinem 1 200 000 prûbûh vlastní extrakce ve stupních 1 snadná krátce trvající a bez traumatizace 2 protrahovaná se zhmoïdûním tkánû 3 chirurgická bez sná‰ení kosti 4 chirurgická s odstranûním kosti nutnost úpravy imediátního poextrakãního krvácení 1 spontánnû ustalo 2 stavûní suturou 3 aplikace lokálních hemostatik spongostan gelaspon aj 4 aplikací celkov˘ch pﬁípravkû pamba eac aj preskribci profylaktick˘ch atb tj typ a dávkování
v pﬁípadû ïe se v extrakãní ránû rozvinul zánût kter˘ pacienta pﬁivedl zpût do ambulance k o‰etﬁení byly uãinûny následné kroky zji‰tûno zda do‰lo k obnovû krvácení a po kolika dnech mûl-li pacient zv˘‰enou teplotu jiné subjektivní potíïe kouﬁení v den extrakce a v následn˘ch dnech viz v˘‰e stav koagula 1 rozpadlé 2 zachovalé vzhled extrakãní rány 1 jen bolestivost 2 zãervenání otok 3 exsudace z lûïka stanovena diagnósa alveolitis sicca purulenta provedeny bakteriální stûry 1 z lûïka zubu 2 ze sliznice protilehlé tváﬁe
sekce prací pregraduálních studentò âást klinická
40
v˘sledky
celkovû bylo v rámci studie o‰etﬁeno 139 pacientû z tûch jsme vyﬁadili 29 pacientû u kter˘ch se vyskytl jin˘ faktor
potencionálnû ovlivàující rozvoj zánûtu lûïka alveolitis viz tab 1 tab 1 dûvody vedoucí k vyﬁazení pacienta ze souboru
definitivnû je tedy zpracováno 110 pacientû z toho 38 muïû a 72 ïen pﬁeváïnû ‰lo o pacienty ve 3 a 4 deceniu 64 20 nejmlad‰ímu byly 3 roky nejstar‰ímu 73 let prûmûrn˘ vûk pacienta je 29 5 roku v‰echna následující data a srovnání se t˘kají jen této skupiny z celkov˘ch 136 proveden˘ch extrakcí ‰lo ve 108 pﬁípadech o extrakci tﬁetího molá-
ru 32 v maxille 76 v mandibule kde hlavní indikaãní diagnósou bylo dentitio difficilis ostatních extrakce 28 byly pro-
vedeny z dûvodû akutní ãi chronické parodontitidy pulpitid a ponechan˘ch koﬁenû radix relicta ze v‰ech 110 pacientû se zánût lûïka objevil u 41 tj ve 37 více neï dvojnásobn˘ rozdíl v incidenci mezi kuﬁáky a nekuﬁáky prokazuje tabulka 2a podle v˘sledkû indexu api hodnotícího úroveà ústní hygieny nejlep‰í úroveà 0 nejhor‰í 100 lze pacienty rozdûlit do pûti skupin a sledovat incidenci vzniku alveolitidy u kaïdé z nich viz graf 1 graf 1 procento rozvoje alveolitidy v závislosti na api
ze záznamû o stavu parodontu u zubu k extrakci lze získat údaje uvedené v tabulce 2b ze zhodnocení rtg snímkû vypl˘vá ïe u 86 pacientû do‰lo k resorbci kosti laterálnû ke koﬁeni ãi korunce u 20 peria-
pikálnû a ve 4 pﬁípadech laterálnû i periapikálnû u pacientû pﬁicházejících s alveolitidou jsme zjistili ïe pro obnovu kr-
vácení byl nejkritiãtûj‰í 2 - 4 den u 60 pacientû ale i po celém t˘dnu po extrakci byla tato známka vzniklého zánûtu
relativnû bûïná 6 a 7 den 24 pacientû s alveolitidou zv˘‰enou teplotu udalo nebo byla namûﬁena u poloviny pacientû 21 pac vïdy jen hraniãní subfebrilie s prûmûrem 37 2 °c subjektivnû pocièovali v‰ichni pacienti bolestivost v extrakãní ránû která nûkdy vystﬁelovala a byla
doprovázena kontrakturou krvácení bezprostﬁednû po extrakci ustalo spontálnû ve 40 pﬁípadech u 70 bylo stavûno suturou lokální hemostatika ani jiné systémové preparáty ve srovnávané skupinû pouïity nebyly pﬁi volbû anestetika byl
u 106 pacientû zvolen pﬁípravek s niï‰í koncentrací adrenalinu 1 400 000 u 3 s vy‰‰í koncentrací 1 200 000 a u 1 pacienta bylo pouïito anestetikum bez vasokonstrikce prûbûh vlastní extrakce mûl v˘razn˘ vliv na ãetnost následné alveolitis v˘sledky jsou nejmarkantnûj‰í po rozdûlení pacientû do dvou základních skupin bez chirurgického provedení a chirurgicky v˘sledky ukazuje tab 2c 41
pﬁíãina vyﬁazení ze souboru poãet pacientû
zv˘‰ená krvácivost 15
hypertenze 9
diabetes mellitus 7
thyreopatie 6
ichs 4
imunodeficience 1
infekce orofaryngu nebo atb 1
tumory ca tlustého stﬁeva 1
m crohn 1
drogová závislost pervitin 1
60
50
40
30
20
10
0
0-20 21-40 41-60 61-80 81-100
24
39 4 37 5
52 2
38 6 alveolitis
v závûreãné diagnóse byl zánût lûïka oznaãen u 27 pacientû jako such˘ alveolitis sicca a u 14 pacientû jako hnisav˘ alveolitis purulenta tomu odpovídá obligátnû rozpadlé koagulum s pouhou bolestivostí u 13 pacientû a navíc s exsudací u 24 pacientû u 4 pacientû byl zánût ve fázi otoku a zãervenání bylo podáno celkem 7 druhû antibiotik a to hlavnû u tûch extrakcí jeï vyïadovaly chirurgické ﬁe‰ení 68 pacientû protektivní úãinek atb obecnû a v podskupinách kuﬁákû a nekuﬁákû shrnuje tab 3 bez preskribce atb zûstali naopak
vût‰inou pacienti s nenároãnou nechirurgickou extrakcí 28 pacientû tab 2 incidence alveolitis dle jednotliv˘ch kriterií a-c
v˘sledky bakteriologického vy‰etﬁení dûlíme do skupin podle aerobních a anaerobních kultivace pﬁi aerobní kultivaci se v nejvût‰í míﬁe v lûïku i na bukální sliznici vyskytovaly bakterie rodu streptococcus viridans
a neisseria pharyngis ménû ãasto pak rody enterobacter sp a zcela ﬁídce rody escherichia coli staphylococcus aureus klebsiela sp aj âast˘ byl v˘skyt kvasinky candida albicans i pﬁes relativnû malé odchylky lze pﬁi rozdûlení bakteriolo-
gick˘ch vy‰etﬁení do podskupin kuﬁákû a nekuﬁákû nalézt jisté nápadné rozdíly nejvût‰í rozdíly byly nalezeny ve stûrech
z lûïka a t˘kají se zejména organismû neisseria pharyngis 30 pokles u kuﬁákû a candida albicans dvounásobn˘ vzestup u kuﬁákû detailnû vyobrazuje v˘sledky tab 4 data o zastoupení anearobních bakterií nejsou zatím ve zpracovávané skupinû kompletní proto je nevyhodnocujeme dûvodem je obtíïnûj‰í a déletrvající kultivace po dokonãení kolekce i tûchto údajû bude jejich vyhodnocení pﬁedmûtem
dal‰ího sdûlení diskuse
pﬁevaha mlad˘ch pacientû není pﬁekvapující vzhledem k nejãastûj‰í diagnóse pozoruhodná je takﬁka dvounásobná pﬁe-
vaha ïen mezi pacienty snad tento fakt souvisí s men‰ími proporcemi ïenské lebky které ïeny predisponují k ãastûj‰ím
projevûm obtíïí doprovázejících zaloïení a erupci archetypick˘ch zubû moudrosti není pﬁekvapující ïe jde ve dvou tﬁe-
tinách o tﬁetí moláry dolní ãelisti 8 pokud zohledníme pouze kouﬁení pacienta tab 2a pak je zjevné ïe u kuﬁákû je nutno po extrakci poãítat s více neï
dvounásobn˘m v˘skytem zánûtu lûïka z grafu 1 závislosti incidence alveolitis na api je patrné ïe dobrá ústní hygiena je pﬁízniv˘m faktorem naopak jiï pﬁi api
kolem 30 se riziko rozvoje zánûtu zhruba zdvojnásobí pokles v posledním sloupci grafu ve skuteãnosti nenaznaãuje ïe by
tato nejhor‰í úroveà hygieny byla ménû hendikepující jde v‰ak o chybu v této kategorii je velké zastoupení star‰ích pacientû u kter˘ch je mnoïství pﬁetrvávajících zubû v ústní dutinû znaãnû niï‰í a tak pﬁi v˘poãtu indexu api dostáváme
neadekvátnû vysoká ãísla neodráïející jinak relativnû dobrou ústní hygienu z tabulky 2b vypl˘vá ïe pacienti pﬁicházející k extrakci zubu v období akutních obtíïí následnû trpí vznikem alveoli-
tis dvakrát ãastûji neï ti pacienti u kter˘ch momentálnû zánûtlivé zmûny nejsou vyjádﬁeny tento fakt by tak mohl slou-
ïit jako argument ïe zejm zuby moudrosti o které jde ve skupinû nejãastûji je lépe extrahovat v období kdy pacient potíïe nemá a neãekat s jejich odstranûním aï na dobu kdy vzniknou údaje o vzniku alveolitis ve vztahu k nároãnosti chirurgického o‰etﬁení tab 3c jednoznaãnû potvrzují ïe extrakce se souãasnou intervencí do tkánû aè uï jde pouze o mûkké tkánû ãi kost je spojena s v˘razn˘m vzestupem v˘skytu po extrakãních zánûtû lûïka v na‰em souboru 5 násobn˘m k oslabení lokální obranyschopnosti vûãi infekci jistû nepﬁi-
42
2a skupiny dle kouﬁení celkem alveolitis v‰ichni pacienti 110 41 37 nekuﬁáci 53 11 21 kuﬁáci 57 30 53 2b stav okolí extr zubu celkem alveolitis klidné bez zánûtu 35 8 22 9 otok zarudnutí bolestivost
hnisav˘ exsudát 75 33 44 2c zpûsob extrakce celkem alveolitis snadná extrakce 29 2
protrahovaná extrakce 4 1 9 1 chirurgická bez osteotomie 13 5
chirurgická s osteotomií 64 33 49 4 spívá zastaralé instrumentárium s absencí pﬁímého chlazení a pouïívání kostních vrtákû a fréz jejichï ïivotnost uï mnohdy
byla pﬁekroãena zcela zásadní vliv kouﬁení na úspûch profylaktického podání atb u pﬁeváïnû chirurgick˘ch extrakcí prokazuje tabulka 4 jestliïe ze v‰ech 73 pacientû uïívajících atb se alveolitis rozvinula u 45 pak ve vybrané skupinû nekuﬁákû to bylo jen 27 zatímco u kuﬁákû tak tomu bylo v 60 tedy dvakrát ãastûji z toho vypl˘vá ïe atb profylaxe je sice schopna
redukovat v˘skyt zánûtliv˘ch komplikací chirurgické extrakce a to aï na prûmûrné hodnoty u extrakcí nechirurgick˘ch 22 ale jen pokud pacient nekouﬁí ve druhém pﬁípadû je pravdûpodobnost vzniku alveolitidy dvojnásobná zatímco v˘skyt bakterií kmene streptococcus viridans pﬁi zánûtu lûïka byl jen málo ovlivnûn pacientov˘m kouﬁením kmen neisseria pharyngis je jak se zdá na kouﬁení pomûrnû senzitivní a následkem je pokles v ãetnosti jeho v˘skytu asi o tﬁetinu naopak houby rodu candida albicans osidlují extrakãní ránu u kuﬁákû dvakrát ãastûji neï je tomu u nekuﬁákû jde pﬁitom zﬁejmû jen o skuteãnû lokální oslabení obranyschopnosti rány vûãi tomuto infekãnímu agens jelikoï na kon-
trolním stûru z tváﬁe je candida pﬁítomna u kuﬁákû i nekuﬁákû zhruba stejnû ãasto jelikoï pﬁi profylaktickém podávání
atb jsou bûïnû medikovány preparáty které ve své ‰íﬁi protibakteriálního pûsobení candidu nepostihují je pravdûpo-
dobné ïe právû tato ãastûj‰í candidová etiologie alveolitid u kuﬁákû je pﬁíãinou selhání profylaktického podání atb jak
o tom bylo pojednáno v˘‰e tab 3 pouïitá antibiotika a vzniklá alveolitis u v‰ech uïívajících atb u nekuﬁákû a u kuﬁákû stejnû u pacientû bez atb
tab 4 bakteriální obraz zánûtu zubního lûïka a sliznice tváﬁe u kuﬁákû a nekuﬁákû
43
zubní lòîko sliznice tvá¤e
nekuﬁáci kuﬁáci nekuﬁáci kuﬁáci nekuﬁáci kuﬁáci nekuﬁáci kuﬁáci celk 11 celk 30 celk 11 celk 30 streptococcus viridans 10 26 91 87 10 24 91 80
neisseria pharyngis 10 18 91 60 8 21 73 70
candida albicans 2 12 18 40 4 12 36 40
enterobacter sp 3 6 27 20 2 4 18 13
escherichia coli 1 1
klebsiela sp 1 1 2
staphylococcus aureus 2 2 4
streptococcus sk b 1 streptococcus epidermidis 1 corynebacterium sp 2 2
pseudomonas aeruginosa 1 1 1
acinetobacter sp 1 1 1
atb v ichni neku¤áci ku¤áci
68 chir extr 5 non-chir celkem alveolitis celkem alveolitis celkem alveolitis
amoclen a 500 41 16 19 2 22 14
dalacin a 150 23 10 12 6 11 4
tetrachel a 250 3 2 1 2 2
ampicilin a 500 2 2 2 2
amp oxa 2 1 2 1
pentabene 1 1 1 1
rulid 1 1 1 1 celkem 73 33 33 9 40 24 alveolitid 45 2 27 3 60 bez atb 37 8 20 2 17 6
28 non-chir 9 chir 22 5 35 závûr
ze zadan˘ch cílû se podaﬁilo objasnit následující ad 1 incidence poextrakãních alveolitid obecnû vliv kouﬁení bez ohledu na ostatní okolnosti je zﬁejmé ïe kuﬁáci jsou více neï dvakrát rizikovûj‰í skupinou pacientû pro vznik poextrakãního zánûtu zubního lûïka v závislosti na stavu parodontu pacienti pﬁicházející k extrakci zubu v období akutních obtíïí následnû trpí vznikem alve-
olitis dvakrát ãastûji neï ti pacienti u kter˘ch momentálnû zánûtlivé zmûny nejsou vyjádﬁeny vypl˘vá doporuãení ïe je lépe zuby moudrosti extrahovat v období kdy pacient potíïe nemá a neãekat s jejich odstranûním aï na dobu kdy vzniknou v závislosti na api dobrá ústní hygiena je pﬁízniv˘m faktorem kter˘ sniïuje riziko zánûtliv˘ch komplikací po extrakci aï na polovinu v závislosti na chirurgickém v˘konu chirurgická extrakce zubu aï pûtkrát zvy‰uje riziko vzniku zánûtu lûïka jelikoï nutnost pouïití chirurgie lze jen tûïko ovlivnit má-li b˘t zub extrahován je u tûchto pacientû zvlá‰tû dûleïité pokusit se eliminovat ostatní rizika co moïná nejvíce tj dbát na orální hygienu a nekouﬁit zejm v kritick˘ch 2-4 dnech po extrakci popﬁ plánovat extrakce zubû moudrosti na dobu bez akutních zánûtliv˘ch projevû v závislosti na atb profylaxi atb profylaxe je sice schopna redukovat v˘skyt zánûtliv˘ch komplikací chirurgické extrakce
a to aï na prûmûrné hodnoty u extrakcí nechirurgick˘ch 22 ale jen pokud pacient nekouﬁí ve druhém pﬁípadû
je pravdûpodobnost vzniku alveolitidy dvojnásobná moïné vysvûtlení viz dále ad 2 mikrobiální obraz
aerobní kultivace v závislosti na kouﬁení candida albicans osidluje u kuﬁákû extrakãní ránu dvakrát ãastûji neï u neku-
ﬁákû a je tak pravdûpodobnû pﬁíãinou poloviãní úspû‰nosti atb profylaxe bakteriální obraz se mezi kuﬁáky a nekuﬁáky
nijak dramaticky neli‰í aï na tﬁetinov˘ úbytek v ãetnosti v˘skytu kmene neisseria pharyngis u kuﬁákû nejãastûj‰ími
patogeny jsou viridujíci streptokoky v následující studii bychom rádi objasnili jak pozmûnit antibiotickou profylaxi u kuﬁákû a zmírnit tak negativní dopad
tohoto zlozvyku na rozvoj alveolitis dále je tﬁeba dokonãit kolekci údajû z anaerobní kultivace aby bylo moïno mít nejen pﬁehled o vlivu kouﬁení na celé bakteriální spektrum ale i obraz o dynamice zastoupení aerobních a anaerobních
bakterií zpûsobujících zánût zubního lûïka literatura
1 t i berge inability to work after surgical removal of mandibular third molars acta-odontol-scand 1997 55 1 64-9 2 t i berge complications requiring hospitalization after third-molar surgery acta-odontol-scand 1996 54 1 24-8 3 p capuzzi l montebugnoli m a vaccaro extraction of impacted third molars a longitudinal prospective study of factors that affect postoperative recovery oral-surg-oral-med-oral-pathol 1994 77 4 341-3 4 p chapnick l h diamond a review of dry socket a double blind study on the effectiveness of clindamycin in reducing the incidence of dry socket j-can-dent-assoc 1992 58 1 43-52 5 r qandil h s sandhu d c matthews tobacoo smoking and periodontal diseases j-can-dent-assoc 1997 63 3 194-5 6 p e larsen alveolar osteitis after surgical removal of impacted mandibular third molars oral-surg-oral-med-oral-
pathol 1992 73 4 393-7 7 j k jones r g triplett the relationship of cigarette smoking to impaired intraoral wound healig a review of evidence and implications for patients care j-oral-maxillofac-surg 1992 50 3 237-9 8 h preber j bergstrom effect of cigarette smoking on periodontal healing following surgical therapy j-clin-periodontol 1990 17 5 324-8 9 w g frick r r seals jr smoking and wound healing a review tex-dent-j 1994 111 6 21-3 10 p silverstein smoking and wound healing am-j-med 1992 93 1a 22s-24s 11 j a jensen w h goodson h w hopf t k hunt cigarette smoking decreases tissue oxygen arch-surg 1991 126 9 1131-4 12 b stiebe i poethe h bernahrdt the bacteriology of normal wound healing following tooth extraction with special reference
to anaerobic microorganism diagnosis zahn-mund-kieferheilkd-zentralbl 1990 78 3 247-51 13 l haisová h staàková a jedliãková v tûpánková mikrobiální spektrum ústní dutiny pﬁi zánûtu zubního lûïka âeskoslovenská stomatologie 1989 89 5 335-340 14 h preber l linder j bergstrom periodontal healing and periopathogenic microflora in smokers and non-smokers j-clin-periodontol 1995 22 12 946-52 44
2 místo bilirubin v krvi a nùkteré rizikové faktory ichs autor jan moravík kolitel mudr ladislav novotn˘ ústav hygieny a epidemiologie 1 lf a vfn
pﬁednosta prof mudr vladimír bencko drsc souhrn
bilirubin v krvi patﬁí mezi endogenní antioxidanty a je indikátorem celkové antioxidaãní kapacity krve tato vlastnost
se nyní zvaïuje pﬁi vysvûtlování pozorovaného niï‰ího v˘skytu ischemické choroby srdeãní ichs u mírné hyperbiliru-
binémie na souboru 167 muïû manaïerû bez manifestované ichs a nebo cévní mozkové pﬁíhody vy‰etﬁen˘ch rutinní
preventivní prohlídkou demonstrujeme vztah celkového bilirubinu k nûkter˘m rizikov˘m faktorûm ichs a dal‰ím parametrûm které ovlivàují hladiny bilirubinu a které je nutno vzít v úvahu pﬁi interpretaci vztahu bilirubinu k ichs celkov˘ bilirubin v˘znamnû negativnû koreloval p 0 05 s poãtem trombocytû -0 18 a diastolick˘m krevním tlakem -0 16 logaritmus bilirubinu a prevalencí diastolického tk ≥ 90 mmhg v˘znamn˘m pozitivním korelátem bilirubinu
byl stﬁední objem krevních destiãek 0 36 negativní korelace ale jen hraniãní p 0 10 byly nalezeny pro vûk systolick˘
tk poãet vykouﬁen˘ch cigaret odhad multivariaãního koronárního rizika a pro poãet leukocytû v jednoduché anal˘ze
byly ostatní sledované promûnné v nev˘znamném vztahu k bilirubinu v˘znamná souvislost stﬁedního objemu destiãek mpv s bilirubinem byla patrná i pﬁi víceãetné regresní anal˘ze v níï se zv˘raznil negativní vliv kouﬁení na hladiny bili-
rubinu práce naznaãuje ïe pﬁi zkoumání pﬁedpokládaného ochranného vlivu bilirubinu jako endogenního antioxidantu je nutno zváïit jeho moïnou spotﬁebu v pﬁítomnosti pro-oxidativních situací a poãítat s tímto fenoménem pﬁi anal˘zách
asociací bilirubinémie u chronicky nemocn˘ch pacientû kardiovaskulární onemocnûní kvo z hlediska zdraví na‰í populace pﬁedstavují nejzávaïnûj‰í problém protoïe se podílejí více jak polovinou na ãasné mortalitû a zneschopàování etiologie aterosklerózy a jejích komplikací je komplexní
a zahrnuje interakci genotypu fenotypu a prostﬁedí od mikro-rozmûrû aï po socioekonomické faktory v klinickém pohledu dominují tﬁi okruhy faktorû ovlivàující aterogenezi a její progresi 1 metabolick˘ faktor zejména metabolismus
tukû a glycidû 2 hemodynamick˘ faktor krevní tlak pulz smykov˘ stres a 3 hemostatick˘ faktor kter˘ sv˘mi trom-
botick˘mi projevy usmûrní klinick˘ obraz komplikace v‰echny tyto oblasti jsou ovlivàovány redoxními imunitními a zánûtliv˘mi dûji v posledních letech se prohloubilo poznání mechanismu oxidativního stresu kter˘ se ukazuje jako v‰udypﬁítomn˘ prvek patofyziologick˘ch mechanismû desítek nemocí vãetnû ichs v lidském organismu fyziologicky pûsobí ﬁada reaktivních forem biomolekul jako jsou radikálové a neradikálové formy kyslíku dusíku síry a dal‰ích k udrïení homeostázy tûchto potenciálnû nebezpeãn˘ch molekul pûsobí v organismu endogenní antioxidanty mezi nûï patﬁí i bilirubin kter˘ je také indikátorem celkové antioxidaãní kapacity krve tato vlastnost se nyní zvaïuje pﬁi vysvûtlování pozorovaného niï‰ího v˘skytu ischemické choroby srdeãní ichs u mírné hyperbilirubinémie v nûkter˘ch
populacích nebo u gilbertova syndromu 1 navíc údaje o charakteru vztahu bilirubinu k riziku ichs nejsou zcela jednoznaãné 2 moïn˘ ochrann˘ vliv bilirubinu mûïe b˘t zprostﬁedkován jeho vztahy k ostatním rizikov˘m faktorûm
kvo doposud v‰ak byla pozornost vûnována jen lipidové sloïce a kouﬁení proto jsme se zamûﬁili na ovûﬁení tûchto a dal‰ích souvislostí soubor a metody
soubor 167 pracujících muïû manaïerû velkého prûmyslového podniku kteﬁí byli vy‰etﬁení v rámci preventivních
programû a kteﬁí byli bez manifestní ichs a nebo bez cévní mozkové pﬁíhody sledované parametry kromû základní anamnézy osobní rodinné a farmakologické byly zji‰èovány návyky kouﬁení a pití alkoholu fyzikální vy‰etﬁení poskytlo údaje o tlaku krve s pﬁesností na 2 mmhg mûﬁeno v sedû základní antropometrie zahrnovala mûﬁení v˘‰ky a váhy z nichï byl vypoãítán bmi body mass index kg m2 plazmatické lipidy
a glykémie transaminázy kyselina moãová a kreatinin a krevní obraz byli stanoveny z venózní krve odebrané ráno nalaãno a vyhodnoceny v laboratoﬁích klinické biochemie standardními metodami vedle celkového a hdl cholesterolu
a triglyceridû tag byl vypoãten i ldl cholesterol dle friedewaldovy formule dále rizikov˘ index cholesterolu jako podíl hdl a celkového cholesterolu a aterogenní index plasmy jako pﬁirozen˘ logaritmus podílu tag a hdl v‰ichni
muïi byly podrobeni vy‰etﬁení ekg tyto údaje poskytly vstupní data do framinghamské rovnice která odhaduje budoucí
desetileté riziko vzniku ichs statistické zpracování stﬁední hodnoty sledovan˘ch promûnn˘ch byly vyjádﬁeny jako prûmûr a smûrodatná odchylka které byly porovnávány pomocí t-testu ve skupinách ãtyﬁ ãast˘ch fenotypû 1 hypertenze která podle nov˘ch kritérií postihovala 36 muïû krevní tlak ≥ 140 90 mmhg a nebo farmakoterapie hypertenze 2 hepatopatie kterou jsme pro
45
na‰e úãely definovali u 13 muïû jako stav po infekãní hepatitidû a nebo eb-viróze patﬁila tam i prokázaná steatóza jater ultrazvuk do této skupiny nebyli zaﬁazení muïi po cholescytektomii 5 osob protoïe nepﬁispûli k zv˘raznûní efektu hepatopatie na hladinu bilirubinu 3 kuﬁáci 19 osob u nichï byl sledován poãet vykouﬁen˘ch cigaret za den 4 diabetici 7 muïû kteﬁí byli urãeni podle glykémie na laãno ≥ 6 7 mmol l a nebo pﬁítomné léãby dietou perorálními
antidiabetiky nebo inzulinem prûmûry u kaïdé skupiny byly porovnávány proti zbytkovému souboru tj hypertonici s nor-
motoniky hepatopatie vs bez hepatopatie kuﬁáci vs nekuﬁáci a diabetici vs nediabetici dále byla provedena jednoduchá
regresní anal˘za bilirubinu a pﬁirozeného logaritmu bilirubinu protoïe jeho distribuce je rozpt˘lena doprava jako závislé
promûnné k ostatním shora uveden˘m vysvûtlujícím promûnn˘m za statisticky v˘znamnou hladinu jsme povaïovali p 0 05 a dále nás zajímala i hraniãnû v˘znamná hladina p 0 10 protoïe ta mohla upozornit na vhodnost zaﬁazení pro-
mûnné do víceãetné regrese míru asociace vysokého tk v tercilech bilirubinu jsme mûﬁili pomocí 'odds ratio' a lineární
trend proporcí podél kvantilové ‰kály bilirubinu testem χ2 tab 1 charakteristika souboru stﬁední hodnoty u celého souboru a v hlavních fenotypov˘ch skupinách
46
cel˘ soubor hepatopatie hypertenze kuﬁáci diabetes
promûnné n 167 n 22 13 n 60 36 n 32 19 n 12 7 1 x ± s x ± s x ± s x ± s x ± s
bilirubin celkov˘ µmol l 15 5 ± 6 2 19 7 ± 10 1 14 2 ± 4 9 14 0 ± 4 7 16 2 ± 5 9 ln bilirubin 2 7 ± 0 4 2 9 ± 0 5 2 6 ± 0 4 2 6 ± 0 3 2 7 ± 0 4 vûk roky 42 7 ± 10 3 41 7 ± 10 0 47 5 ± 10 7 44 3 ± 8 8 53 7 ± 5 6 cholesterol celkov˘ mmol l 5 5 ± 1 1 5 2 ± 1 2 5 6 ± 1 1 5 8 ± 1 1 5 4 ± 1 3
triacylglyceroly mmol l 1 87 ± 1 3 1 60 ± 0 9 2 28 ± 1 6 2 1 ± 1 7 2 32 ± 1 7
ln triacylglyceroly 0 5 ± 0 6 0 36 ± 0 5 0 62 ± 0 6 0 54 ± 0 6 0 63 ± 0 7
cholesterol hdl mmol l 0 84 ± 0 2 0 93 ± 0 3 0 89 ± 0 3 0 78 ± 0 2 0 76 ± 0 2
ln cholesterol hdl 0 2 ± 0 3 0 12 ± 0 3 0 17 ± 0 3 0 30 ± 0 3 0 33 ± 0 3
cholesterol hdl celkov˘ 7 15 ± 2 6 5 8 ± 1 6 7 0 ± 2 9 8 4 ± 3 7 8 14 ± 4 1
ln tag cholesterol hdl 0 63 ± 0 7 0 41 ± 0 7 0 71 ± 0 8 0 89 ± 0 8 0 84 ± 0 8
cholesterol ldl mmol l 3 81 ± 0 9 3 58 ± 0 6 3 84 ± 0 8 4 00 ± 0 8 3 68 ± 0 9
glykémie mmo l 5 23 ± 1 0 4 95 ± 0 5 5 6 ± 1 4 5 3 ± 0 8 8 0 ± 1 5 bmi kg m2 26 6 ± 3 3 27 5 ± 3 0 27 9 ± 3 4 25 9 ± 3 3 28 8 ± 3 9 tk systolick˘ mmhg 129 3 ± 10 9 127 9 ± 9 3 142 ± 8 6 127 4 ± 11 4 136 0 ± 11 tk diastolick˘ mmhg 81 9 ± 6 6 81 6 ± 4 2 87 4 ± 6 7 79 8 ± 7 1 85 5 ± 5 7
kuﬁáctví n u kuﬁákû poãet 32 19 4 18 7 12 12 7 ± 9 2 2 16 mkr za 10 let 12 3 ± 9 8 7 7 ± 6 0 16 5 ± 11 5 18 8 ± 12 3 25 0 ± 14 1 alt µkat l 0 78 ± 0 5 0 88 ± 0 9 0 87 ± 0 6 0 70 ± 0 3 0 71 ± 0 2
gmt µkat l 0 80 ± 1 0 1 42 ± 2 7 1 07 ± 1 5 0 72 ± 0 47 1 04 ± 0 9
ln gmt 0 48 ± 0 6 0 44 ± 1 1 0 28 ± 0 7 0 52 ± 0 59 0 19 ± 0 7
kyselina moãová µmol l 351 ± 75 334 ± 81 367 ± 93 348 ± 74 370 ± 145
kreatinin µmol l 99 ± 10 89 ± 12 89 ± 12 90 5 ± 10 8 85 ± 10
destiãky poãet 109 l 216 ± 48 204 ± 39 220 ± 52 224 ± 56 210 ± 61
destiãky objem fl 9 1 ± 0 9 9 9 ± 1 4 8 7 ± 0 9 9 1 ± 1 1 8 4 ± 0 6 leukocyty 109 l 6 8 ± 1 8 6 9 ± 2 5 6 9 ± 1 7 7 9 ± 2 6 6 7 ± 1 6
hematokrit 46 3 ± 2 9 46 2 ± 2 5 46 9 ± 3 6 46 5 ± 2 3 46 9 ± 3 0
hemoglobin g dl 15 2 ± 0 9 15 2 ± 0 8 15 4 ± 1 1 15 4 ± 0 8 15 4 ± 0 9
porovnáví prûmûrû vs bez hepatopatií normotenze nekuﬁáci nediabetici p 0 05 tag triacylglyceroly mkr multivariaãní koronární riziko alt alanin-aminotransferáza gmt γ-glutamyl-transferáza
v˘sledky
v tabulce ã 1 jsou uvedeny základní charakteristiky souboru celkov˘ bilirubin prûmûr u celého souboru 15 5 ± 6 2 µmol l minimum 5 0 a maximum 42 0 75 percentil 18 0 byl podle oãekávání nejvy‰‰í u hepatopatií pak u diabetikû nejniï‰í u kuﬁákû a hypertonikû v˘znamnû triglyceridy byly statisticky v˘znamnû nejvy‰‰í u hypertonikû hdl choleste-
rol byl v souboru mimoﬁádnû nízk˘ a rozdíly u skupin nebyly v˘znamné nejniï‰í pomûr celkového k hdl cholesterolu
vykazovaly hepatopatie v˘znamnû aterogenní index plasmy byl statistiky v˘znamnû nejvy‰‰í u kuﬁákû bmi u diabetikû a hypertonikû nejvy‰‰í oãekávané desetileté koronární riziko vykazovali diabetici aï na jednoho byly také hypertoniky transamináza alt byla ve v‰ech skupinách srovnatelná naproti tomu transamináza gmt byla nejvy‰‰í u hepatopatií a její logaritmus byl v˘znamnû niï‰í u skupiny hypertenze variace kyseliny moãové a kreatininu nepﬁekro-
ãily hranici statistické v˘znamnosti i kdyï poãet destiãek byl nejvy‰‰í u kuﬁákû a hypertonikû nepﬁekroãil kritickou mez
statistické v˘znamnosti naproti tomu stﬁední objem destiãek byl v˘znamnû vy‰‰í u hepatopatií a v˘znamnû niï‰í u skupiny
hypertenze a diabetikû poãet leukocytû byl podle oãekávání v˘znamnû vy‰‰í u kuﬁákû stejnû jako hemoglobin a hematokrit u skupiny hypertenze v tabulce ã 2 jsou uvedeny vztahy sledovan˘ch veliãin k bilirubinu hraniãním negativním korelátem p pro smûr-
nici 0 10 bilirubinu byl vûk poãet vykouﬁen˘ch cigaret za den systolick˘ i diastolick˘ tk a dále leukocyty tab 2 jednoduché korelace celkového bilirubinu p 0 10 p 0 05 jsou pro regresní koeficienty zkratky jako v tabulce ã 1
47
promûnné bilirubin ln bilirubin vûk roky 0 13 0 12 cholesterol celkov˘ mmol l 0 05 0 05
triacylglyceroly mmol l 0 04 0 06
ln triacylglyceroly 0 03 0 01
cholesterol hdl mmol l 0 03 0 05
ln cholesterol hdl 0 02 0 04
cholesterol hdl celkov˘ 0 03 0 05
ln triacylglyceroly cholesterol hdl 0 07 0 05
cholesterol ldl mmol l 0 11 0 08
glykémie mmo l 0 07 0 06
bmi kg m2 0 02 0 03
tk systolick˘ mmhg 0 10 0 12 tk diastolick˘ mmhg 0 13 0 16 cigarety poãet vykouﬁen˘ch za den 0 12 0 12 multivariaãní koronární riziko za 10 let 0 08 0 10
alt µkat l 0 00 0 01
gmt µkat l 0 01 0 05
ln gmt 0 01 0 03
kyselina moãová µmol l 0 04 0 07
kreatinin µmol l 0 04 0 05
destiãky poãet 109 l 0 18 0 17 destiãky objem fl 0 36 0 31 leukocyty 109 l 0 13 0 11 hematokrit 0 03 0 07
hemoglobin g dl 0 02 0 05
tyto promûnné vykazovaly podobnou relaci také k pﬁirozenému logaritmu bilirubinu k nûmuï mûl navíc diastolick˘
tlak statisticky v˘znamn˘ vztah r 0 16 p 0 05 viz graf 1 graf 1 vztah bilirubinu k systolickému vlevo a diastolickému krevnímu tlaku vpravo anal˘za prevalencí vysokého tk systolického ≥ 140 mmhg a diastolického tk ≥ 90 mmhg ukázala sestupn˘ trend
podél tercilové ‰kály bilirubinu v krvi trend v˘skytu vysokého systolického tk byl statisticky nev˘znamn˘ zato pokles
prevalencí vysokého diastolického tlaku v˘znamn˘ byl odds ratio pro v˘skyt diastolického tk ≥ 90 mmhg v horním tercilu distribuce bilirubinu bylo jen 0 14 95 interval spolehlivosti 0 04 0 51 viz obr 1 nejsilnûj‰ími prediktory hladiny bilirubinu v krvi i logaritmicky transformovaného byly morfologické parametry
krevních destiãek pﬁitom u sledovaného souboru s poãtem trombocytû bilirubin v˘znamnû klesal r 0 18 p pro smûrnici 0 05 a naopak pozitivnû koreloval se stﬁedním objemem destiãek r 0 36 p 0 05 viz graf 2 graf 2 vztah bilirubinu k poãtu plt vlevo a stﬁednímu objemu mpv vpravo trombocytû
48
160
150
140
130
120
110
100
1 5 2 2 5 3 3 5 4
sy
st
ol
ic
k˘ t
k m
m
h
g in bilirubin y = 138 46 3 39x
120
110
100
90
80
70
60
1 5 2 2 5 3 3 5 4
di
as
to
lic
k˘ t
k m
m
h
g in bilirubin y = 89 65 2 88x
400
350
300
250
200
150
100
0 10 20 30 40 50
p
lt
bilirubin
y = 238 6 1 39x 12
11
10
9
8
7
0 10 20 30 40 50
m
p
v
bilirubin
y = 8 37 0 045x
49
35 30 25 20 15 10 5 0 i 11 5 ii iii 16 0
bilirubin µmol l tk syst = 140 mmhg
tk diast = 90 mmhg
30 22 6 p
re
va
le
n
ce h
yp
e
rt
e
n
ze
prevalenãní odds ratios hrubé pro v˘skyt diastolického tk ≥ 90 mmhg v tercilech s-bilirubinu 167 muïû bilirubin µmol l or 95 limit i 11 5 reference
ii 11 5-15 9 0 66 0 28 1 55 iii 16 0 0 14 0 04 0 51 χ2 df 2 10 60 p = 0 005004
χ2 pro linearitu df 1 0 39 p = 0 530900
χ2 pro regresní koeficient 10 20 p = 0 001402
regresní koeficient 0 12
obr 1 vztah bilirubinu k vysokému krevnímu tlaku
pﬁedbûïnou víceãetnou regresí kde závislou byl bilirubin a testovan˘mi hlavními vysvûtlujícími promûnn˘mi byl poãet
a objem trombocytû se ukázalo ïe poãet destiãek mûl vliv na bilirubin nikoli zcela nezávisl˘ a vymizel po adjustaci dal-
‰ích promûnn˘ch naproti tomu stﬁední objem trombocytû zûstal v˘znamn˘m pozitivním prediktorem hladiny bilirubinu
v séru i po adjustaci ﬁady promûnn˘ch z nichï nûkteré jako mnoïství vykouﬁen˘ch cigaret za den se staly v kombinaci s dal‰ími faktory nezávisl˘m negativním prediktorem bilirubinu rovnûï cholesterol ldl kter˘ byl zamûniteln˘ ve smûru
a v˘znamnosti svého pûsobení s aterogenním indexem plasmy se objevil pﬁi simultánním modelu regrese jako statisticky
v˘znamn˘ faktor hladin bilirubinu mpv zûstal v˘znamn˘m faktorem i po zaﬁazení alt a stavu hepatopatie ãi glukózy a diabetu do modelu viz tabulka ã 3 diskuse
uvedené nálezy vybízejí k úvahám o souvislosti klinick˘ch stavû s v˘vojem a morfologií a funkcí krevních destiãek k hladinám bilirubinu v krvi kter˘ je uznávan˘m endogenním antioxidantem dûleïitost funkce destiãek je zﬁejmá pﬁi aterogenezi a zejména jejích komplikacích rovnûï se hledají souvislosti mezi funkcí destiãek a rozvojem diabetické tab 3 nûkteré regresní modely závislosti bilirubinu na poãtu a objemu trombocytû a mnoïinû dal‰ích vybran˘ch promûnn˘ch
a regresní koeficient a stﬁední chyba jeho odhadu b hodnota parciálního f testu je pro p 0 05 c je model jen s trombocyty d je model c promûnné vûk aï leukocyty e je model d promûnné alt aï bmi mikro- a makroangiopatie 3 produkce destiãek je komplexnû regulovaná a rûzné stránky jejich v˘voje polyploidie a vytváﬁení pretrombocytû a morfologie diskoidní a sférické destiãky jsou v souvislosti s ﬁadou patologick˘ch stavû viz obr 2 v organizmu je udrïována rovnováha celkové masy destiãek takïe poãet a objem trombocytû je v reciproãním
vztahu ale za jak˘ch podmínek megakaryocyty vytváﬁejí a uvolàují vût‰í mnoïství diskoidních nebo sférick˘ch destiãek
jasné není vût‰í destiãky jsou povaïovány za citlivûj‰í k protrombotick˘m stimulûm a mpv je nûkdy ﬁazen mezi hlavní
rizikové faktory infarktu myokardu velikost trombocytû souvisí s jejich vût‰í metabolickou kapacitou a aktivitou která by mohla souviset i s na‰í pozo-
rovanou korelací mezi stﬁedním objemem destiãek a bilirubinem nedávno byla totiï popsána pﬁítomnost v‰ech enzymû metabolismu hemu i v trombocytech 4 indukovatelná forma hemoxygenázy ho-1 je aktivována ﬁadou faktorû pro-
bíhajícího oxidaãního stresu pﬁechodné kovy reaktivní formy kyslíku dusíku a ﬁady dal‰ích biomolekul hemoxygenázov˘ systém je dûleïit˘m faktorem lokální odpovûdi organizmu na zátûï oxidativním stresem protoïe v˘sledkem zv˘‰eného katabolizmu hemu je tvorba biliverdinu a následnû i bilirubinu tento systém byl dﬁíve popisován
pouze v buàkách retikuloendotelu s následnou exkluzívní glukuronidizací bilirubinu v játrech a vyluãováním konjugova-
ného bilirubinu do ïluãe stejné enzymy v‰ak existují i v trombocytech vãetnû udp-glukuronyltransferázy která je v‰ak podle souãasn˘ch znalostí aktivní pouze po stimulaci odpovídající za aktivaci ho-1 tedy za mimoﬁádn˘ch podmínek
oxidativního stresu pﬁíspûvek konstitutivní formy ho-2 pro tvorbu biliverdinu je za klidov˘ch podmínek údajnû velmi
mal˘ uvedené mechanizmy poukazují na dal‰í funkce destiãek v pﬁípadû po‰kození tkání a jejich schopnost kontrolovat
lokálnû oxidativní stres prostﬁednictvím aktivace metabolické dráhy hemu na‰e nálezy vztahu kouﬁení a vûku k bilirubinu jsou v souhlase s ojedinûl˘mi studiemi které se problematice vûnovaly ale námi pozorovaná silná negativní závislost bilirubinu na diastolickém tlaku nebyla ve velké britské studii zachycena 2 britové nalezli negativní korelaci mezi celkov˘m cholesterolem a bilirubinem a pozitivní vztah k hdl cholesterolu 50
modely s trombocyty poâet trombocyty objem
β ± se a f test b β ± se f test
trombocyty c 0 023 ± 0 010 5 50 2 793 ± 0 946 8 70 trombocyty d 0 017 ± 0 011 2 45 2 588 ± 1 071 5 83 vûk 0 045 ± 0 049 0 83 0 140 ± 0 103 1 86
poãet cigaret den 0 095 ± 0 082 1 32 0 162 ± 0 142 1 30
tk diastolick˘ 0 109 ± 0 076 2 08 0 030 ± 0 142 0 04
leukocyty 0 120 ± 0 317 0 14 0 022 ± 0 684 0 00
trombocyty e 0 015 ± 0 012 1 43 2 367 ± 1 164 4 13 vûk 0 033 ± 0 060 0 30 0 102 ± 0 102 1 00
poãet cigaret den 0 149 ± 0 093 2 56 0 299 ± 0 128 5 42 tk diastolick˘ 0 160 ± 0 094 2 86 0 088 ± 0 150 0 34
leukocyty 0 402 ± 0 337 1 42 0 797 ± 0 682 1 36
alt 0 939 ± 1 144 0 67 0 651 ± 1 719 0 14
hepatopatie 3 303 ± 1 691 3 81 3 414 ± 4 118 0 68
glykémie 0 376 ± 0 857 0 19 0 109 ± 1 149 0 00
diabetes mellitus 1 749 ± 3 325 0 27 2 376 ± 4 272 0 30
cholesterol ldl 1 015 ± 0 635 2 55 2 552 ± 1 118 5 20 ln tag hdl 1 330 ± 0 829 2 57 0 952 ± 1 673 0 32
bmi 0 190 ± 0 174 1 19 0 128 ± 0 277 0 21
51
poâet masa = poãet x objem objem
cirhóza jater akohol tag dietní ω3nmk
diabetes porucha gt
preeklampsie
celkov˘ cholesterol
1 3 poolu je ve slezinû akutní stres adrenalin fyzická aktivita
mgdf il-1 3 6 11 scf gm-csf
trombocytopénie
diskoidní trombocyt polyploidie 16x 6-64x megakaryocyt
p r o t r o m b o c y t y
sférick˘ trombocyt
mikropartikule cd41 trombocyty asociace morfologie
nezávisl˘ rizikov˘ faktor trombózy
marker funkce a aktivace adhezivita koagulabilita - trombogeneze vwf fv pf3 ca vwf von willebrandûv faktor fv v faktor pf3 destiãkov˘ faktor 3 ω3nmk nenasycené
mastné kyseliny mgdf megakaryocyte growth and development factor il-1 3 6 11 interleu-
kiny scf stem cell factor gm-csf granulocyte-monocyte colony-stimulating factor cd41 - povrchov˘ antigen
u populace s 25 prevalencí ichs v na‰em souboru jsme nemohli potvrdit podobnou souvislost protoïe ïe ve srovnání s britskou populací byl prûmûrn˘ bilirubin u na‰ich muïû vy‰‰í interpopulaãní heterogenita obr 2 souvislosti v˘voje a morfologie destiãek
52
o
x
i
d
a
â
n
í
s
t
r
e
s
hem
ãerven˘ trombus
ihox1 nos
co no
gc
cgmp
aktivace
destiãkycholesterol
mpv
vazodilatace gtp
gc biliverdin reduktáza
udp-glukuronyltransferáza
udp-glukuronová
kyselina
biliverdin
bilirubin
konjugovan¯ b obr 3 metabolismus hemu v trombocytu
trombocyty a bilirubin
kompletní enzymatická v˘bava metabolismu hemu kontrola oxidativního stresu
chox2 kostitutivní forma hemoxygenázy ihox1 aktivovaná indukovatelná forma hemoxygenázy co oxid uhelnat˘ nos syntáza oxidu dusnatého no oxid dusnat˘ gc aktivovaná guany-
látcykláza gtp guanositrifosfát cgmp cyklick˘ guanosinmonofosfát mpv stﬁední objem
trombocytû udp uridindifosfát
53
omezení studie uvedené nálezy je tﬁeba posuzovat s ohledem na skupinové charakteristiky sledovan˘ch muïû lo o manaïery v psychicky velmi nároãném postavení jejich údaje o kuﬁáctví nemohly b˘t ovûﬁeny co nebo kotinin a mohly b˘t zatíïeny chybou v prostﬁedí kde kouﬁení cigaret je neïádoucí podobnû abstinentû alkoholu bylo jen 8 a ostatní
vypovídali uniformnû tak ïe kvantifikace vypitého mnoïství nevykazovala variabilitu kterou bylo moïno analyzovat typick˘m rysem souboru byl vysok˘ bmi velmi nízk˘ cholesterol v hdl a vysoké tag i pﬁi jinak pﬁijatel-
n˘ch hodnotách celkového cholesterolu tyto a dal‰í nepozorované faktory mohly ovlivnit na‰e zji‰tûní nicménû ‰lo o skuteãnou populaci a s reálnû existujícím spektrem potenciálnû rizikov˘ch stavû protoïe byly vy‰etﬁeni v‰ichni muïi
pﬁipadající v úvahu závûr
hladiny celkového bilirubinu v séru klesají s vikem poetem vykouﬁen˘ch cigaret a s krevním tlakem hraniãní statis-
tická v˘znamnost logaritmus bilirubinu v˘znamnû klesá se stoupáním diastolického krevního tlaku a se stoupající prevalencí vysokého diastolického tlaku bilirubin v souboru sledovan˘ch muïu klesá se stoupajícím poetem trombocytu
v krvi vztah poetu destiãek k bilirubinu je ovlivnûn interakcemi jaterní funkce krevního tlaku a lipidy naproti tomu bilirubin stoupá spolu s objemem krevních destiãek nezávisle na pﬁítomnosti hepatopatie hypertenze ãi diabetu jak˘ je
skuteãn˘ pﬁíspûvek trombocytu k udrïování hladiny bilirubinu a redoxní homeostázy v krvi není zdaleka jasné pﬁi zkou-
mání pﬁedpokládaného ochranného vlivu bilirubinu jako endogenního antioxidantu je nutno zváïit jeho moïnou spotﬁebu
v pﬁítomnosti pro-oxidativních situací a poãítat s tímto fenoménem pﬁi anal˘zách asociací bilirubinémie u chronicky nemocn˘ch pacientû literatura
1 l vítek m jirsa m brodanová m kaláb z mareãek v danzig l novotn˘ p kotal gilbert syndrome and ischemic heart disease a protective effect of elevated bilirubin levels atherosclerosis 2001 v tisku 2 l h breimer g wannamethee s ebrahim a g shaper serum bilirubin and risk of ischemic heart disease in middle-aged british men clin chem 1995 41 1504 1508 3 a s brown y hong de belder a h beacon j besco r sherwood m edmonds j f martin j d erusalimski megakaryocyte ploidy and platelet changes in human diabetes and atherosclerosis arterioscler thromb vasc biol 1997 17 802 807 4 s a nowell j e a leakey j f warren n p lang l t frame identification of enzymes responsible for the metabolism of heme in human platelets j biol chem 1996 273 33342 33346 3 místo cariogram moderní metoda predikce zubního kazu
autoﬁi tûpán gála jitka hrachová kolitel doc mudr jan handzel csc stomatologická klinika 1 lf a vfn
úvod
cariogram viz obr ã 1 je poãítaãov˘ program kter˘ graficky v procentech vyjádﬁí pravdûpodobnost onemocnûní
zubním kazem respektive pravdûpodobnost ïe kaz nevznikne v následujícím roce jeho hlavními autory jsou d bratthall g hänsel petersson a jr stjernswärd z lundské univerzity ve védsku vzhledem k tomu ïe graf je sestaven nejen z údajû po odborném posouzení chrupu lékaﬁem stomatologem ale i z údajû získan˘ch od pacienta je moïné po zhodnocení tohoto grafu cílenû edukovat a zapojit do aktivní spolupráce
jednotlivého pacienta zároveà je hmatatelnou ukázkou toho kterou oblast péãe o chrup má pacient zlep‰it materiál a metody
multifaktoriální pozadí vzniku zubního kazu je zúïeno pouze na 10 hlavních faktorû s nimiï program pracuje cariogram vychází z nûkolika údajû zji‰tûn˘ch stomatologem index kazivosti chrupu kpe mnoïství plaku na dentici kultivace ústní flóry se zamûﬁením na streptococcus mutans a lactobacillus acidophilus mnoïství vyprodukované sliny stanovení pufrovací schopnosti sliny a v neposlední ﬁadû také klinické posouzení stavu chrupu a ústní dutiny lékaﬁem dal‰í
údaje jsou získané od vy‰etﬁovaného a jsou to pﬁedev‰ím úroveà fluoridové péãe zubní pasty ústní vody fluoridové tablety sloïení a frekvence pﬁíjmu potravy anamnesa se zamûﬁením na pﬁidruïené onemocnûní ovlivàující kazivost diabetes mellitus sjögrenûv syndrom a uïívaná léãiva 1 index kpe urãuje dosavadní kazivost chrupu a stanoví se seãtením kaziv˘ch k a chybûjících e zubû a poãtu v˘plní p tﬁetí moláry jsou z vy‰etﬁení vylouãeny takïe riziku je vystaveno 28 zubû chrup se vy‰etﬁí sondou a zrcátkem 2 anamnesa zahrnuje zji‰tûní pﬁidruïen˘ch onemocnûní která mají vliv na vy‰‰í kazivost chrupu diabetes mellitus anorexie autoimunitní onemocnûní imobilita sjögrenûv syndrom slab˘ zrak nebo ovlivàují tvorbu skloviny získávají se i informace o uïívání lékû nûkterá léãiva mohou sniïovat imunitu produkci sliny event ovlivnit bakteriální osídlení ústní dutiny 3 sloïení potravy zji‰èujeme z dietetického dotazníku vyplnûného pacientem je zamûﬁen pﬁedev‰ím na obsah kario-
genních sacharidû glukosa fruktosa ‰krob sacharosa ovoce ovocné ‰èávy zeleniny mléka s˘rû jogurtû a nekariogenních sladidel sorbitol xylitol cyclamát v potravû 4 informace o frekvenci pﬁíjmu potravy v prûbûhu jednoho dne se získá taktéï z dotazníku kromû hlavních jídel bereme v úvahu i pití sladk˘ch nápojû ãi drobná zobnutí bûhem dne 5 stanovení mnoïství zubního plaku se provedlo pomocí qh quigley-hein indexu plak se obarví detekãním roztokem erytrozinu c26h6o5i4na2 a pro kaïd˘ zub se zaznamená náleïitá hodnota dle stupnice 6 v˘skyt bakterie streptococcus mutans ve slinû nebylo v rámci této studie provedeno vzhledem k chybûní dostateãného mnoïství pomûcek k vy‰etﬁení a ãasové a finanãní nároãnosti jde o tﬁídenní bakteriální kultivaci vzorku sliny na specifické pûdû dentocult 7 fluoridov˘ program vy‰etﬁovaného ohodnotíme podle toho zda pacient pouïívá pouze zubní pasty nebo i gely ústní vody a fluoridové tablety 8 mnoïství vyprodukované sliny se odeãítá po 5 minutovém ïv˘kání bloãku parafinu pﬁi souãasném shromaïìování vyprodukované sliny v kalibrovaném kelímku mnoïství se pak vypoãte v mililitrech za minutu ml min 9 pufrovací schopnost sliny byla zji‰èována indikátorov˘m papírkem ponoﬁen˘m do kelímku se slinou a hodnota ph byla odeãtena na pﬁíslu‰né stupnici 10 poslední faktor klinické posouzení dává lékaﬁi moïnost vyjádﬁit svûj vlastní názor na stav chrupu pacienta a na schopnost pacienta porozumût dávan˘m radám pro kaïd˘ tento faktor je bodové ohodnocení v rozmezí od 0 do 3 kdy 0 znamená nejlep‰í moïn˘ stav a 3 nejhor‰í
moïn˘ stav graf cariogramu se zaãíná tvoﬁit po zadání alespoà 7 hodnot pro nezadané faktory má program nastavenou
vlastní hodnotu podle jiï zadan˘ch a pﬁímo souvisejících údajû dal‰ího zpﬁesnûní pﬁi tvorbû grafu dosáhneme pomocí dal‰ích kolonek které jsou umístûny v pravém horním rohu 54
55
kolonka zemû oblast zahrnuje rozdílné stravovací klimatické a sociální podmínky v jednotliv˘ch zemích a komunitách
a kolonka skupina diferencuje napﬁ mezi mlad˘mi a star˘mi pacienty vlastní graf je tvoﬁen 5 v˘seãemi 1 tmavû modrá v tisku ãerná znamená podíl stravy dle jejího sloïení a frekvence na vzniku zubního kazu
2 ãervená v tisku zelená - urãuje podíl bakteriální flóry v ústech na vzniku zubního kazu dûleïité je mnoïství plaku a vykultivovaného streptococcus mutans
3 svûtle modrá v tisku svûtle zelená - udává vnímavost skloviny k tvorbû kariézní léze v tomto sektoru je rozhodu-
jící fluoridov˘ program mnoïství vytvoﬁené sliny a její pufrovací schopnost
4 v ïluté v tisku bílá neboli v okolnostech je zahrnut kpe index a pﬁidruïená onemocnûní
nejdûleïitûj‰í je zb˘vající zelená v˘seã v tisku ‰edivá která na rozdíl od pﬁedchozích urãuje pacientovu ‰anci ïe nebude mít v následujícím roce novou kariézní lézi pokud je zelen˘ sektor vût‰í neï 75 má pacient velkou ‰anci vyhnout se zubnímu kazu pokud je men‰í neï 25 je zde velmi vysoké riziko vzniku zubního kazu v˘sledky a jejich interpretace
vy‰etﬁili jsme 21 studentû 3 roãníku stomatologie kteﬁí jiï o prevenci vzniku zubního kazu nûco vûdí stanovili jsme
individuální cariogram u kaïdého z nich zároveà jsme se snaïili posoudit stav chrupu a riziko kazivosti v souvislosti s tím pochází-li z rodiny alespoà jednoho stomatologa nebo z rodiny zcela nestomatologické riziko ïe nevznikne kaz
v následujícím roce se u studentû pohybovalo od 19 do 70 podle cariogramu pravdûpodobnost ïe nevznikne kaz u studentû ze stomatologick˘ch rodin 12 byla 43 3 oproti 37 3 u studentû z rodin nestomatologick˘ch 9 oãekávali jsme vût‰í rozdíl mezi tûmito 2 skupinami a také vût‰í pravdûpodobnost ïe nevznikne kaz u studentû z rodin stomatologick˘ch jednou z pﬁíãin tohoto 6 rozdílu by mohly b˘t dﬁívûj‰í preventivní prohlídky u ‰kolního zubního lékaﬁe dal‰í pﬁíãinou by mohla b˘t obdobná preventivní v˘chova ze strany rodiãû nelze opomenout ïe vy‰et-
ﬁovan˘ soubor je mal˘ na to aby jej bylo moïno zobecnit viz obr 2 50 22 9 2 17 obr 1 c a r i o g r a m
56
c a r i o g r a m
- studenti ze stomatologick¯ch rodin x nestomatolock¯ch rodin
obr 2 obr 3 îena 22 let z nestomatologické rodiny zdravá nebere léky ra - pravidelnû nav‰tûvuje zubního lékaﬁe produkce sliny 2 5 ml min ph sliny 6 5 qh index 70 2x dennû f zubní pasta kpe 17 dosavadní kazivost frekvence pﬁíjmu potravy 7x dennû velmi vysok˘ obsah sacharidû coca-cola juice ãokoláda pro názornost pouïití cariogramu jsme vybrali 2 protikladné kazuistiky z této skupiny posluchaãû stomatologie kazuistika ã 1 viz obr 3 îena 22 let nar 1978 pochází z nestomatologické rodiny má zv˘‰enou kazivost a pravidelnû nav‰tûvuje zubního
lékaﬁe je zdravá nebere léky z rodinné anamnesy je zajímavé ïe sestra o 1 5 roku mlad‰í 20 let je bez kazu i pﬁi hor‰í ústní hygienû a péãi o chrup a naopak matka v 52 letech má dolní protézu namûﬁené mnoïství vyprodukované sliny bylo 2 5 ml min ph sliny bylo 6 5 qh index byl 70 dosavadní kazivost neboli poãet zubû s v˘plní je 17 index kpe dvakrát dennû si ãistí zuby fluoridovou zubní pastou jí 7x dennû pije coca-colu a dïusy a má ráda sladkosti podle
cariogramu má 19 ‰anci ïe nevznikne zubní kaz v následujícím roce tedy velmi vysokou pravdûpodobnost ïe se nov˘
kaz objeví v tomto pﬁípadû jsme doporuãili sníïení ãastosti pﬁíjmu potravy a omezení sacharidû v potravû nelze také vylouãit rodinou dispozici kazuistika ã 2 viz obr 4 muï 21 let nar 1979 jeden z rodiãû je stomatolog pravidelnû nav‰tûvuje zubního lékaﬁe je zdrav˘ nebere léky v dûtství uïíval 1 rok fluoridové naf tablety namûﬁené mnoïství vyprodukované sliny bylo 2 ml min ph sliny bylo = 4 qh index byl 61 kpe 4 v potravû má stﬁednû vysok˘ obsah sacharidû jí jen 3x dennû ãistí si zuby po kaïdém
jídle fluoridovou zubní pastou a navíc pouïívá 1x t˘dnû fluoridov˘ zubní gel nosí fixní ortodontick˘ aparát a proto také
pouïívá mezizubní kartáãek cariogram ukázal 62 pravdûpodobnost ïe u tohoto muïe nevznikne zubní kaz v následu-
jícím roce zda se na‰e pﬁedpoklady ohlednû vzniku zubního kazu splní si musíme jeden rok poãkat 57
obr 4 muï 21 let v rodinû 1 stomatolog zdrav˘ nebere léky dûtství 1 rok naf tbl produkce sliny 2 ml min ph sliny = 4 qh index 61 kpe 4 stﬁednû vysok˘ obsah sacharidû frekvence pﬁíjmu 3x dennû ãistí zuby po kaïdém jídle 1x t˘dnû gel mezizubní kartáãek
závûr
cariogram má velk˘ v˘znam pro motivaci pacienta kdy grafickou a lehce srozumitelnou cestou identifikuje etiologické
faktory zubního kazu slouïí také jako podklad pro rozhovor s pacientem usnadàuje klinické rozhodování lékaﬁe a zdûrazàuje preventivní péãi díky tomu ïe objasàuje nejdûleïitûj‰í aspekty a jejich vztah pﬁi vzniku zubního kazu se dá
pouïít ve v˘uce preventivní stomatologie na vysok˘ch ‰kolách historie a klinická zku‰enost s cariogramem v âeské republice není zatím ïádná takïe na interpretaci v˘sledkû je tﬁeba si poãkat cariogram má zapojit pacienta do programu prevence jednoho z nejãastûj‰ích lidsk˘ch onemocnûní vûbec
a motivovat ho tuto prevenci provádût cariogram je nová interaktivní metoda predikce zubního kazu a není vylouãeno ïe v budoucnosti se stane pomûckou kaïdého stomatologa literatura
1 cariogram manual version 1 0 1997 förlagshuset gothia d bratthall g hänsel petersson jr stjernwärd 2 dental caries intervened interrupted interpreted eur oral sciences 1996 104 202 4 part ii 3 âeské pracovní lékaﬁství bibliographia medica cechoslovaca ãíslo 4 2000 4 jan kilian et al prevence ve stomatologii druhé roz‰íﬁené vydání galen karolinum 1999 5 eva kovaºová orálná hygiena pre‰ov zurich 1994 6 http www db odont lu se car data cariogramgeneralinfo html 7 http www db odont lu se car data basic html 58
1 místo metabolic profile of pd cub chromosome 8 congenic strains shr-lx and bn-lx
autoﬁi mudr ondﬁej eda l edová l kazdová d kﬁenová v kﬁen kolitel prof mudr vladimír kﬁen drsc institute of biology and medical genetics first faculty of medicine
introduction
coronary heart disease hypertension non-insulin-dependent diabetes and obesity are major causes of ill health in in-
dustrial societies disturbances of carbohydrate and lipid metabolism are a common feature of these disorders reaven
1988 the complex nature of multifactorial metabolic disorders complicates their detailed analysis in human subjects therefore animal models expressing the particular phenotypical trait s are often used the rat has an unreplaceable position in the analysis of genetic influences in the determination of hypertension and multiple disorders of lipid and carbohydrate metabolism connected with it aitman et al 1999 pravenec et al 1999 the spontaneously hypertensive
rat strain shr is the most widely studied genetic model of human essential hypertension and recently it was proposed
as a model of insulin resistance syndrome aitman et al 1999 the brown norway bn rat inbred strain often serves as a control strain because it is normotensive and exhibits normal metabolic phenotypes the polydactylous pd cub rat
inbred strain is an established model of leg malformation kﬁen et al 1975 and metabolic syndrome x vrána et al 1993 edová et al 2000 methods
experimental strains
shr-lx congenic strain was derived by a selective breeding protocol in which a segment of chromosome 8 rno8 from the normotensive bn-lx strain was transferred onto the genetic background of the progenitor shr the bn-lx
sekce p¤ednesen¯ch prací v doktorském studijním programu
59
fig 1 schematic representation of differential segment of pd bn origin in rno 8 congenic strains bn-lx and shr-lx 60
donor strain was originally derived by introgressing the mutant lx gene of the pd cub rat onto the bn background kﬁen et al 1975 1997 shr-lx congenic strain displays substantially reduced systolic and diastolic blood pressure and cardiac mass in comparison with shr progenitor kﬁen et al 1997 genotyping and phenotyping
the lengths of differential segments of chromosome 8 in bn-lx and shr-lx were analyzed by method of pcr genoyping using microsatellite markers the metabolic parameters were measured under conditions of standard high-sucrose and high-cholesterol diets 8-month old male rats were subjected to the study six individuals per group the serum concentrations of triglycerides cholesterol non-esterified fatty acids nefa and glucose were determined
enzymatically using commercially available kits lachema czech republic boehringer mannheim germany results
genotyping of the rno8 differential segments
the length and location of the differential segment in bn-lx congenic strain was set by these microsatellite markers microsatellite markers of pd cub origin include d8arb12 d8arb23 d8bord1 d8mit2 d8rat35 d8rat36 d8rat37 d8rat38 d8rat39 d8rat40 d8rat44 d8rat84 d8rat85 d8rat111 d8rat113 d8rat156 d8rat157 d8rat158
and markers defining genes apociii and sm22 these primers approximately span 10 15 cm of chromosome 8 the differential segment in both congenic strains was characterized by extensive genotyping shr-lx carries a relatively
large 30 cm region of bn pd origin defined by d8mit5 d8mgh4 microsatellite markers fig 1 tab 1 plasma levels of triglycerides non-esterified fatty acids nefa glucose and cholesterol all values in mmol l and the area under curve of the oral glucose tolerance test auc ogtt in shr strain and shr-lx
congenic strain under different dietary conditions all values given as mean ± sem f fasted nf not fasted status ns not significant nqs not quite significant shr shr-lx p
standard diet
triglycerides nf 0 875 ± 0 060 0 870 ± 0 060 ns
nefa nf 0 298 ± 0 026 0 559 ± 0 028 p = 0 0111 cholesterol nf 1 994 ± 0 196 2 772 ± 0 092 p = 0 0328
glucose f 4 402 ± 0 104 4 946 ± 0 126 p = 0 0083
auc ogtt 734 ± 40 2 811 ± 37 0 ns
high-sucrose diet
triglycerides nf 1 536 ± 0 104 2 090 ± 0 243 p = 0 044
triglycerides f 1 141 ± 0 049 1 380 ± 0 074 p = 0 0224
nefa f 1 279 ± 0 038 1 581 ± 0 092 p = 0 0084
glucose f 4 672 ± 0 065 4 128 ± 0 095 p = 0 0012
auc ogtt 836 ± 17 0 860 ± 40 0 ns
high-cholesterol diet
triglycerides nf 0 918 ± 0 034 1 370 ± 0 016 p 0 0001
triglycerides f 0 725 ± 0 044 1 033 ± 0 119 p = 0 0258 nefa f 1 546 ± 0 089 1 111 ± 0 129 p = 0 024
cholesterol f 1 483 ± 0 055 1 683 ± 0 027 p = 0 024
cholesterol nf 2 722 ± 0 145 2 910 ± 0 246 ns
glucose f 3 992 ± 0 122 5 931 ± 0 755 p = 0 0078
auc ogtt 919 ± 24 4 980 ± 60 8 ns
influence of the introgression of pd cub rno8 differential segment on the genetic backgrounds of shr and bn strains metabolic profile of shr-lx and bn-lx congenic strains 1 shr lx
under conditions of standard diet levels of serum glucose nefa and cholesterol in not fasted animals were signifi-
cantly higher in shr-lx congenic strain compared to shr progenitor see table 1 for values and significance levels after 1 week of high-sucrose diet serum triglycerides both in fasted and not fasted status and nefa fasted were signi-
ficantly higher in shr-lx compared to shr while level of serum glucose fasted was significantly higher in shr after
3 weeks of high-cholesterol diet we observed significantly higher levels of serum tg cholesterol and glucose in shr-lx
and significantly lower levels of nefa in comparison to shr comparison 2 bn lx
under conditions of standard diet levels of serum tg and nefa in not fasted animals were significantly higher in bn-lx congenic strain compared to bn progenitor and the level of serum glucose and area under curve of oral glucose
tolerance test auc ogtt was significantly lower in bn-lx congenic strain see table 2 for values and significance
levels after 1 week of high-sucrose diet serum triglycerides both in fasted and not fasted status and nefa fasted were significantly higher in bn-lx compared to bn after 3 weeks of high-cholesterol diet we did not observe any significant difference between bn-lx and bn strains 61
bn bn-lx p
standard diet
triglycerides nf 0 617 ± 0 039 0 998 ± 0 099 p = 0 004
nefa nf 0 446 ± 0 026 0 721 ± 0 079 p 0 001
cholesterol nf 2 738 ± 0 178 3 045 ± 0 286 ns
glucose nf 4 391 ± 0 316 3 368 ± 0 151 p = 0 0233
auc ogtt 822 ± 33 2 700 ± 13 1 p = 0 0115
high-sucrose diet
triglycerides nf 1 275 ± 0 101 1 658 ± 0 140 p = 0 0493
triglycerides f 1 133 ± 0 050 1 310 ± 0 050 p = 0 0350
nefa f 0 848 ± 0 052 1 051 ± 0 028 p = 0 0103
glucose nf 4 100 ± 0 106 4 367 ± 0 226 ns
auc ogtt 898 ± 10 4 843 ± 24 4 nqs
high-cholesterol diet
triglycerides nf 1 015 ± 0 054 0 958 ± 0 066 ns
triglycerides f 0 864 ± 0 038 1 088 ± 0 129 ns nefa nf 0 386 ± 0 045 0 450 ± 0 036 ns nefa f 0 943 ± 0 074 1 106 ± 0 126 ns
cholesterol nf 2 453 ± 0 294 2 729 ± 0 244 ns
cholesterol f 0 864 ± 0 038 1 088 ± 0 129 ns
glucose f 5 057 ± 0 178 5 027 ± 0 142 ns
auc ogtt 875 ± 24 0 835 ± 27 9 ns
tab 2 plasma levels of triglycerides non-esterified fatty acids nefa glucose and cholesterol all values in mmol l and the area under curve of the oral glucose tolerance test auc ogtt in bn strain and bn-lx congenic strain under different dietary conditions all values given as mean ± sem f fasted nf not fasted status ns not significant nqs not quite significant
discussion
these results indicate that the introgression of rno8 differential segment of pd cub origin onto shr and bn genetic backgrounds influences the parameters of their lipid and carbohydrate metabolism as seen in congenic strains
shr-lx and bn-lx in fig 2 we can see that levels of serum triglycerides after high sucrose diet were significantly higher
in bn-lx and shr-lx congenic strains compared to their bn and shr progenitors but still significantly lower compared to pd cub strain fig 2 the levels of serum triglycerides tg and non-esterified fatty acids nefa after high-sucrose diets in bn pd shr and bn-lx and shr-lx congenic strains interestingly the nefa concentration in shr-lx congenic strain is higher in comparison with both progenitor strains pd cub and shr fig 2 shr was recently shown to carry the mutant allele of cd36 fat coding for the fatty acid translocase which was proposed to be a causative factor of the observed high level of nefa and insulin resistance in this strain aitman et al 1999 pd cub carries normal wild allele of cd36 fat edová et al 2000 hence it can be speculated that the combination of different genes determining the susceptibility to this pathological phenotype resulted in the elevation of nefa in shr-lx the fact that we did not found any difference in metabolic parameters between bn and bn-lx strains after high-cho-
lesterol diet is in consent with previous findings suggesting the bn strain to be susceptible to cholesterol-rich diets however all these hypotheses need to be verified by further research in summary it seems highly likely that genes present in the rno8 differential segment of pd cub origin are invol-
ved in observed carbohydrate and lipid metabolism disturbances among others the differential segment carries the apoai-apociii-apoaiv gene cluster of pd cub origin this gene cluster was shown to be of importance in several
pathological states of lipid metabolism so it can be considered a putative candidate for observed elevation of serum trig-
lyceride levels after high-sucrose diet in shr-lx and bn-lx congenic strains however as indicated from human studies more genes and gene-gene and gene-environment interactions are definitely
involved in determination of such complex trait so a more detailed genetic dissection is needed therefore we derived a segregating intercross population between pd cub and bn progenitor strains in order to identify possible candidates for particular attributes of metabolic syndrome x supported by grant gauk 7 2000 c from the grant agency of the charles university grants no 303 01 1010
and 204 98 k015 from the grant agency of the czech republic grant no 6367-3 from the internal grant agency of the
ministry of health of the czech republic 62
4 0
3 5
3 0
2 5
2 0
1 5
1 0
0 5
0
bn bn-lx pd shr-lx shr
tg nefa
serum tg and nefa after high-sucrose diet
m
m
ol l
1 t j aitman a m glazier c a wallace l d cooper p j norsworthy f n wahid k m al- majali p m trembling c j mann c c shoulders d graf e st lezin t w kurtz v kﬁen m pravenec a ibrahimi n a abumrad l w stanton j scott 1999 identification of cd36 fat as an insulin-resistance gene causing defective fatty acid and glucose metabolism in hypertensive rats nature genet 21 76-83 2 v kﬁen 1975 genetics of the polydactyly-luxate syndrome in the norway rat rattus norvegicus acta univ carrol med praha monogr 68 1-103 3 v kﬁen m pravenec s lu d kﬁenová j - m wang n wang t merriouns a wong e st lezin d lau c szpirer j szpirer t w kurtz 1997 genetic isolation of a region of chromosome 8 that exerts major effects on blood pressure and cardiac mass in the spontaneously hypertensive rat j clin invest 99 577-581 4 m pravenec v kﬁen e st lezin 1999a recombinant inbred and congenic strains for genetic analysis of spontaneous hypertension and other risk factors of cardiovascular disease in handbook of hypertension eds w h birkenhager j l reid series development of the hypertensive phenotype basic and clinical studies eds r mccarty d a blizard r l chevalier pp 193-211 elsevier science b v amsterdam 5 g m reaven and y -d i chen 1988 role of insulin in regulation of lipoprotein metabolism in diabetes diabetes metab rev 4 639-652 6 l edová l kazdová o eda d kﬁenová v kﬁen 2000a rat inbred pd cub strain as a model of dyslipidemia and insulin resistance folia biol praha 46 99-106 7 a vrána l kazdová z dobe‰ová j kune‰ v kﬁen v bílá p tolba i klime‰ 1993 triglyceridemia glucoregulation and blood pressure in various rat strains effects of dietary carbohydrates ann ny acad sci 683 57-68 literature
63
2 místo biochemical and molecular studies in five children with leigh disease and cytochrome c oxidase deficiency
autoﬁi mgr markéta âapková department of pediatrics first faculty of medicine charles university in prague
h hansíková department of pediatrics first faculty of medicine charles university in prague
c godinot ucb lyon france
j hou‰tûk institute of physiology and centre for integrated genomics ascr prague
j zeman department of pediatrics first faculty of medicine charles university in prague kolitel doc mudr jiﬁí zeman drsc department of pediatrics first faculty of medicine charles university in prague
introduction
leigh disease subacute necrotizing encephalopathy associated with cytochrome c oxidase cox deficiency the terminal enzyme of the mitochondrial respiratory chain is one of the most common mitochondrial disorders in childhood a large number of leigh disease patients with cox deficiency have been shown to belong to a single complementation group with mutations in surf1 gene 1 2 surf1 located on chromosome 9q34 is homologous to the yeast shy1 gene which encodes an inner mitochondrial membrane protein involved in the biogenesis and assembly
of cox complex as a result of mutations in surf1 gene the activity of cox and mitochondrial respiration are impaired the aim of the work was to analyse the molecular bases of leigh disease in five patients and to study the biochemical consequences of the mutations on cytochrome c oxidase patients
five children with typical clinical symptoms of leigh disease were investigated failure to thrive growth retardation incoordination of ocular movement progressive hypotonia psychomotor delay and hypertrichosis were observed in all affected children at age between 8 months and 2 years lactate was elevated in all patients in csf 3 7-5 8 mmol l controls 2 and in blood 2 3-8 7 mmol l controls 2 with increased lactate pyruvate ratio 20-55 controls 10-18 ct and or mri of the brain revelaed bilateral necrotic lessions in the brain stem and basal ganglia three of five patients
died between age of 2 to 6 years methods
biochemistry isolated lymphocytes platelets cultured fibroblasts muscle mitochondria and mitoplasts were analysed after informed
consent of parents specific activity of cox and citrate synthase cs were measured spectrophotometrically according
to wharton tzagoloff and srere 3 4 protein concentration was determined according to lowry 5 protein composi-
tion of mitochondrial chain complexes was studied by two-dimensional electrophoresis 2d-page 6 the presence of surf1 protein in mitochondria or mitoplasts isolated from cultured fibroblasts was analysed by western blot using specific anti-hsurf1 antibodies generous gift of dr e a shoubridge dna analysis dna was isolated from tissues by phenol extraction all 9 exons of surf1 gene were analysed in five fragments
by cycle sequencing using universal primers the sequenced fragments were amplified by pcr and purified by gel extraction results
generalised decrease of specific activity of cox was observed in all children table 1 2d-page of mitochondrial
proteins showed altered assembly pattern of cox figure 1 western blot analyses in cultured fibroblasts demonstrated
the absence of surf1 protein in all affected children figure 2 molecular analyses revealed the presence of a novel mutation c574t in surf1 gene in one patient three other pateints harboured previously described surf1 mutations table 2 figure 3 three children were compound heterozygotes one harboured homozygous mutation discussion and conclusions
cytochrome c oxidase deficiency is one of the most frequent biochemical defects in children with leigh syndrome the surf1 gene as a cause of leigh syndrom with cox deficiency was identified in 1998 more than 30 different mutations in surf1 gene have been reported so far in our group of patients we have identified surf1 mutations 64
in four children novel mutation c574t was found in one patient other patients harboured previously described mutations results of our study document altered stability and or amount of surf1 protein in children with surf1 mutations and
cox deficiency elucidation of etiopathogenesis of the mitochondrial disorders in childhood on biochemical and molecular
level fully depends on co-operation of clinicians and specialists in biochemistry and molecular biology acknowledgments
this work was supported by grants vz 111100003 gauk 8 2000 c and barrande 2001-028-1 65
cox cytochrome c oxidase cs citrate synthase
tab 1 enzyme activities in five patients with leigh syndrome due to defect of surf1 cox cs cox cs ratio
patient tissue patient controls patient controls patient controls nmol min mg proteinu lymphocytes 19 58 16 50 94 21 37 135 0 01 0 24 1 05
1 platelets 4 14 20 40 72 90 75 100 0 05 0 23 0 43
fibroblasts 1 71 30 90 41 65 50 150 0 04 0 17 1 11
muscle mitochondria 170 0 658 1552 503 435 1234 0 33 0 66 2 25
lymphocytes 8 6 16 50 80 6 37 135 0 11 0 24 1 05
2 fibroblasts 7 75 30 90 92 87 50 150 0 08 0 17 1 11
muscle homogenate 33 0 25 120 232 2 30 150 0 14 0 4 2
lymphocytes 18 3 16 50 25 3 37 135 0 72 0 24 1 05
3 fibroblasts 5 64 30 90 58 39 50 150 0 09 0 17 1 11
muscle mitochondria 217 658 1552 816 435 1234 0 27 0 66 2 25
lymphocytes 19 44 16 50 98 47 37 135 0 19 0 24 1 05
4 fibroblasts 5 10 30 90 56 7 50 150 0 09 0 17 1 11
muscle mitochondria 87 658 1552 665 435 1234 0 13 0 66 2 25
5 fibroblasts 13 24 30 90 97 14 30 150 0 14 0 66 2 25
fig 1 two-dimensional electrophoresis of the muscle mitochondria a patient with deficiency of complex i
b patient with deficiency of complex iv patient 3 i v iii iv i v iii iv
blue native page → blue native page →
a b
sd
s pa
g
e →
sd
s pa
g
e →
kda
94
67
43
30
20 1
14 4
66
patient localization mutations predicted mutations
in the protein sequence
1 ex 9 ex 9 841 delct 841 delct frameshift mutation frameshift mutation
2 ex 4 ex 8 312 ins at del 10 821 del 18 frameshift mutation splicing error
3 ex 6 ex 9 c 574 t 841 delct arg 192 trp frameshift mutation
4 ex 7 ex 7 c 688 t c 688 t arg 230 stop arg 230 stop
tab 2 mutations in surf1 gene in four patients with leigh syndrome references
1 zhu et al surf1 encoding a factor involved in the biogenesis of cytochrome c oxidase is mutated in leigh syndrome nature genet 20 1998 337 343 2 tiranti et al mutations of surf-1 in leigh disease associated with cytochrome c
oxidase deficiency am j hum genet 63 1998 1609 1621 3 d c wharton a tzagoloff cytochrome oxidase from beef heart mitochondria meth enzym academic press new york 10 1967 245 250 4 p a srere citrate synthase meth enzym academic press new york 13 1969 3- 11 5 o h lowry et al protein measurement with the folin phenol reagent j biol chem 193 1951 265-275 6 klement et al analysis of oxidative phosphorylation complexes in cultured human fibroblasts and amniocytes by blue-native-electrophoresis using mitoplasts isolated with the help of digitonin anal biochem 231 1995 218 224 fig 2 western blot analysis using anti-hsurf1 antibody in five patients with leigh syndrome and cox deficiency 15 µg of muscle mitochondria or mitoplasts are used fig 3 novel heterozygous mutaion c 574 t in surf 1 gene 5 k 1 2 k surf1 k 3 4 k surf1
surf1 30 kda 3 místo pouîití interfázické fish p¤i detekci hyperdiploidií u dùtí s akutní lymfoblastickou leukémií all autoﬁi mgr lenka indeláﬁová centrum nádorové cytogenetiky iii interní kliniky 1 lf a vfn
z zemanová centrum nádorové cytogenetiky iii interní kliniky 1 lf a vfn
p smí‰ek 2 dûtská klinika fn motol praha
j star˘ 2 dûtská klinika fn motol praha
k michalová centrum nádorové cytogenetiky iii interní kliniky 1 lf a vfn ústav hematologie a krevní transfuze kolitel doc ing kyra michalová drsc centrum nádor cytogen iii int klin 1 lf a vfn
akutní lymfoblastická leukémie je maligní lymfoproliferativní onemocnûní které v na‰í populaci pﬁedstavuje nejroz‰í-
ﬁenûj‰í formu leukémie u dûtí cytogenetické studie rozsáhl˘ch souborû dûtí s all prokázaly u vût‰iny z nich 75-90 v˘skyt nenáhodn˘ch klonálních chromosomov˘ch aberací které korelují s imunofenotypick˘m klinick˘m i hematologic-
k˘m obrazem onemocnûní na základû cytogenetick˘ch nálezû lze nemocné s all rozdûlit do rûzn˘ch diagnostick˘ch
skupin které se li‰í v odpovûdi na léãbu a v prognóze pui a kol 1990 pﬁesné urãení karyotypu leukemick˘ch bunûk a vãasná detekce chromosomov˘ch aberací je proto u dûtsk˘ch all velmi dûleïitá pro zvolení správného postupu léãby a stanovení prognózy onemocnûní k cytogenetick˘m nálezûm v kostní dﬁeni u dûtí s all patﬁí strukturní pﬁestavby chromosomû pﬁedev‰ím reciproké
translokace které nalézáme aï u 40 nemocn˘ch k nejãastûj‰ím a prognosticky nejv˘znamnûj‰ím patﬁí napﬁ t 12 21 p13 q22 t 9 22 q34 q11 t 1 19 q23 p13 a t 4 11 q21 q23 v souãasné dobû je známo jiï více neï 30 specifick˘ch
chromosomov˘ch translokací s pﬁím˘m vztahem k leukemogenezi trka a kol 1999 zemanová a kol 2001 kromû strukturních pﬁestaveb jsou dal‰ím velmi ãast˘m nálezem rovnûï zmûny v modálním poãtu chromosomû tzv heteroploidie které se vyskytují u 35-45 nemocn˘ch tabulka 1 tab 1 nenáhodné poãetní chromosomové zmûny u dûtsk˘ch all heteroploidie
v˘znamn˘ je nález zejména bunûãn˘ch klonû s tzv vysokou hyperdiploidií tj s více neï 50 chromosomy kter˘ b˘vá
spojován s nejlep‰í prognózou vysokou hyperdiploidii nacházíme u asi 25-30 dûtí s all dosud není zcela jasná biologická podstata vztahu mezi modálním poãtem chromosomû a dobrou odezvou na léãbu stﬁednû dobrou prognózu
dává nemocn˘m nález klonû s tzv nízkou hyperdiploidií tj s modálním poãtem 47-50 chromosomû kterou má asi 10-15 dûtsk˘ch nemocn˘ch s all dále patﬁí do skupiny pacientû s hyperdiploidiemi také asi 1 dûtí s tzv témûﬁ
triploidními ãi tetraploidními bunûãn˘mi klony u kter˘ch je znám˘ rozmanit˘ prûbûh onemocnûní vãasná detekce chromosomov˘ch zmûn v buàkách kostní dﬁenû dûtsk˘ch nemocn˘ch s all je z klinického hlediska
velmi dûleïitá protoïe detekce aberací spojovan˘ch s pﬁíznivou prognózou by mohla vést ke sníïení intenzity chemotera-
pie a tím i ke zmírnûní rizika pozdních následkû léãby klasické cytogenetické vy‰etﬁení je v‰ak u leukemick˘ch bunûk limitované hor‰í kvalitou mitos a nízk˘m mitotick˘m
indexem leukemické buàky mají sníïenou proliferaãní aktivitu v kultivaci takïe hyperdiplopidní bunûãné klony lze pﬁi tomto typu vy‰etﬁení ãasto tûïko zachytit nové moïnosti pﬁiná‰í vyuïití metod molekulární cytogenetiky zejména fluorescenãní in situ hybridizace fish princip fish spoãívá ve schopnosti vazby jednoﬁetûzcové dna sondy
pﬁímo znaãené fluorochromy ke komplementárním oblastem cílové dna fixované na cytogenetickém preparátu le beau 1993 k detekci heteroploidií jsme zavedli molekulárnû-cytogenetickou metodu interfázické fluorescenãní in situ hybridizace i-fish která umoïàuje pomocí specifick˘ch dna sond hodnotit i nekvalitní mitosy a detekovat poãetní i strukturní
zmûny chromosomû nejen v mitosách ale i v nedûlících se interfázních buàkách metodou i-fish získáme dûkaz o pﬁítomnosti hyperdiploidních klonû i v pﬁípadech kdy je konvenãní cytogenetické vy‰etﬁení neúspû‰né ãi neinformativní 67
cytogenetick¯ nález frekvence prognóza
hypodiploidie 46 chromosomû 3-9 ‰patná
hyperdiploidie se 47-50 chromosomy 15 stﬁední
hyperdiploidie s 50 chromosomy 27 dobrá
témûﬁ tri- aï tetraploidní poãet chromosomû 1 nejasná
pro urãování poãetních odchylek chromosomû pouïíváme α-satelitní dna sondy pro oblasti centromer a sondy lokus-spe-
cifické vhodné pro detekci jedineãn˘ch genov˘ch sekvencí na na‰em pracovi‰ti vy‰etﬁujeme v‰echny novû diagnostikované dûtské pacienty s all metodou vícebarevné i-fish podle strategie publikované moormanem et al 1996 která spoãívá v postupné hybridizaci kombinací jednotliv˘ch sond
pro chromosomy x 4 6 8 10 14 16 18 20 a 21 nejãastûji zmnoïené v hyperdiploidních klonech na základû v˘sledkû
i-fish lze pak nemocné podle modálního poãtu chromosomû zaﬁadit do jednotliv˘ch skupin s rûznou prognózou onemocnûní bûhem tﬁí let jsme metodou i-fish vy‰etﬁili 70 dûtí s all 25 dívek 45 chlapcû prûmûrn˘ vûk 8 4 let prûmûrná doba sledování pacientû byla 17 8 mûsícû u kaïdého pacienta bylo hodnoceno 200 interfázních jader a rozsah nalezen˘ch hyperdiploidních klonû byl 2 5 aï 95 5 stejn˘m zpûsobem jsme vy‰etﬁili i soubor 10 zdrav˘ch dárcû jako hraniãní neboli cut-off úroveà pro námi pouïité typy sond byla stanovena hodnota prûmûr 3sd která se v kontrolním souboru pohybovala do 2 5 v souboru nemocn˘ch jsme tedy za pozitivní povaïovali nález kter˘ se rovnal nebo pﬁevy‰oval hodnotu 2 5 z celkového
poãtu analyzovan˘ch bunûk rozdûlení pacientû podle stupnû ploidie do jednotliv˘ch prognostick˘ch skupin je znázornûno v grafu 1 graf 1 rozdûlení nemocn˘ch do jednotliv˘ch skupin podle modálního poãtu chromosomû
heh vysoká hyperdiploidie hel nízká hyperdiploidie
he nespecifikovaná hyperdiploidie tt témûﬁ tri aï tetraploidní klony hyperdiploidie nepotvrzena
graf 2 souãasn˘ klinick˘ stav nemocn˘ch
68
50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 celkov˘ poãet nemocn˘ch relaps
47 1 6 0 16 4 1 5 3 0 6 0 34 3 1 5 3 0 3 0 heh hel tt he 2 13 67 14 all v remisi
all
neznám˘
relaps all
exitus v indukci
4 údaje o souãasném klinickém stavu nemocn˘ch jsou uvedeny na pﬁedchozím grafu 2 relaps nastal u 9 pacientû 13 z toho u 4 ze skupiny s vysokou hyperdiploidií tedy s nejlep‰í prognózou onemocnûní u jednoho z tûchto pacientû v‰ak byl hyperdiploidní klon nalezen v rozsahu 2 5-3 bunûk v˘znam tûchto tzv mal˘ch
bunûãn˘ch klonû 2 5-10 bunûk pro prûbûh onemocnûní a odezvu na léãbu není dosud znám u dal‰ích 3 nemocn˘ch
z této skupiny byly zji‰tûny komplexní pﬁestavby karyotypu které povaïujeme za nepﬁízniv˘ ukazatel zemanová a kol 2001 a jsou ãasto spojeny s ãasn˘m relapsem závûr
molekulárnû-cytogenetickou metodou i-fish jsme vy‰etﬁili buàky kostní dﬁenû 70 dûtí s all a zji‰èovali jsme pﬁítomnost a rozsah hyperdiploidních klonû pouïívali jsme specifické dna sondy pro 10 chromosomû x 4 6 8 10 14 16 18 20 a 21 hyperdiploidní klony jsme zjistili u 66 nemocn˘ch a dal‰í cytogenetické zmûny komplexní pﬁestavby karyotypu u 16 22 nemocn˘ch s all porovnali jsme molekulárnû-cytogenetické nálezy s klinick˘mi uka-
zateli a zjistili jsme u vût‰iny nemocn˘ch s hyperdiploidií pﬁíznivou odezvu na léãbu v˘znam mal˘ch bunûãn˘ch klonû 2 5-10 s numerick˘mi zmûnami a klonû se strukturními pﬁestavbami které jsou pﬁítomny v kostní dﬁeni nemocn˘ch
s leukemiemi není zatím objasnûn metoda i-fish umoïàuje u dûtí s all detekci heteroploidních bunûãn˘ch klonû i v pﬁípadû kdy byla cytogenetická anal˘za neúspû‰ná ãi neinformativní a pﬁispívá ke zrychlení a zlep‰ení diagnostiky dûtsk˘ch all tato práce byla podpoﬁena granty iga mz âr 4744-3 gaâr 301-01-0200 a iga mz âr ne 6472-3 literatura
1 m m le beau fluorescence in situ hybridization in cancer diagnosis important advances in oncology j b lippincott philadelphia 1993 s 29-45 2 a v moorman r clark d m farrell j m hawkins m martineau l m secker-walker probes for hidden hyperdiploidy
in acute lymphoblastic leukemia genes chromos cancer 16 1996 s 40-45 3 c h pui w m crist a t look biology and clinical significance of cytogenetics abnormalities in childhood acute lymphoblastic leukemia blood 76 1990 s 1449-1463 4 j trka j zuna c ha‰kovec a brabencová m kalinová r muïíková r paukertová o hru‰ák z zemanová k michalová j star˘ detekce hybridních genû bcr abl mll f4 a tel aml1 a sledování minimální reziduální nemoci u dûtsk˘ch pacientû s akutní lymfoblastickou leukémií âas lék âes 138 1999 no 1 s 12-17 5 z zemanová k michalová j bﬁezinová l indeláﬁová kurková p smí‰ek j zuna j trka j star˘ fish v diagnostice dûtsk˘ch akutních lymfatick˘ch leukemií all pﬁijato k publikaci v âas lék âes 2000 69
4 místo vliv kainátu na poâet nadph-diaforáza pozitivních neuronò v hippocampu u potkanò vystaven¯ch chronické hypoxii
autor mudr petra bene‰ová fyziologick˘ ústav 1 lf kolitel doc mudr milo‰ langmeier csc fyziologick˘ ústav 1 lf
kainát je rigidní strukturální analog glutamátu s neurotoxick˘m efektem jeho úãinek je zprostﬁedkován vazbou na kainátové receptory subpopulaci non-nmda receptorû byl prokázán jeho selektivní toxick˘ úãinek na neuronální tûla pﬁiãemï axony zûstávají intaktní senzitivita limbick˘ch struktur ke kainátu je dána vysokou denzitou receptorû pro excitaãní aminokyseliny v tûchto oblastech pro ovlivnûní motorické aktivity laboratorních potkanû bûhem ontogeneze
je kainát pouïíván ve studiích modelu temporální epilepsie velí‰ková a ost 1988 nadph-diaforáza je enzym kolokalizovan˘ s nitric oxide syntázou nos tj enzymem produkujícím oxid dusnat˘ no prûkazem nadph-diaforázy tedy mûïeme nepﬁímo usuzovat na produkci vazodilataãnû pûsobícího oxidu dus-
natého montecot a ost 1997 cílem této práce byla histochemická anal˘za prûkaz nadph-diaforáza pozitivních neuronû vlivu kainátu podaného
intraperitoneálnû 1 den po skonãení pûsobení chronické hypoxie na jednotlivé oblasti hippocampu tj struktury uloïené v hloubce hemisfér pﬁedního mozku která je souãástí limbického systému metodika
experimentálními zvíﬁaty byli samci laboratorního potkana kmene wistar vlastního chovu od 2 do 17 dne vûku s v˘jimkou 6 7 13 a 14 dne byla mláìata spoleãnû s matkou vystavena vlivu chronické opakované dlouhodobé perinatální hypoxie v hypobarické komoﬁe v simulované v˘‰ce 7 000 m vïdy 8 hodin dennû 18 den tedy 1 den po skon-
ãení pûsobení hypoxie byl zvíﬁatûm i p aplikován kainát 2 5 mg kg k experimentûm byly pouïity 4 skupiny zvíﬁat 1 mláìata vystavená hypoxii
2 mláìata vystavená hypoxii kter˘m byl 18 den vûku aplikován kainát
3 mláìata nevystavená hypoxii
4 mláìata nevystavená hypoxii kter˘m byl 18 den vûku aplikován kainát
22 den vûku tj 4 dny po aplikaci kainátu byla zvíﬁata usmrcena v pentobarbitalové narkóze transaortální perfuzí 4 pufrovaného neutrálního paraformaldehydu mozky byly prosyceny 20 roztokem sacharózy kryoprotekce po nakrájení
40 mm tlust˘ch ﬁezû na kryostatu byly tyto ﬁezy obarveny na prûkaz nadph-diaforáza pozitivních neuronû poté byly nadph-diaforáza pozitivní neurony kvantifikovány v jednotliv˘ch ãástech hippocampu 1 v ca1 oblasti hippocampu
2 v ca3 oblasti hippocampu
3 v hilu gyrus dentatus
4 v dorzálním listu gyrus dentatus
5 ve ventrálním listu gyrus dentatus
v˘sledky
z v˘sledkû je patrné ïe chronická hypoxie zvy‰uje poãet nadph-diaforáza pozitivních neuronû v oblastech ca 1 ca 3 a v hilu gyrus dentatus v porovnání s kontrolní skupinou v dorzálním a ventrálním listu gyrus dentatus jsou rozdíly
oproti kontrole nev˘znamné kainát aplikovan˘ normoxick˘m zvíﬁatûm poãet nadph-diaforáza pozitivních neuronû v oblastech ca 1 ca 3 a v hilu gyrus dentatus rovnûï zvy‰uje a v dorzálním a ventrálním listu gyrus dentatus nemûní naproti tomu kainát aplikovan˘ hypoxick˘m zvíﬁatûm poãet nadph-diaforáza pozitivních neuronû v hilu dorzálním a ventrálním listu gyrus dentatus sniïuje v oblastech ca 1 a ca 3 je rozdíl oproti kontrole zanedbateln˘ obr 1 5 70
71
70
60
50
40
30
20
10
0
h h k c c k
n
o of n
eu
ro
ns
70
60
50
40
30
20
10
0
h h k c c k
n
o of n
eu
ro
ns
50
40
30
20
10
0
h h k c c k
n
o of n
eu
ro
ns
20
15
10
5
0
h h k c c k
n
o of n
eu
ro
ns
30
25
20
15
10
5
0
h h k c c k
n
o of n
eu
ro
ns
obr 1 5 72
diskuse
hypoxie pravdûpodobnû zvy‰uje produkci no ovlivnûním genové exprese nos kainát pak zﬁejmû vede k zv˘‰ení pro-
dukce no vazbou na kainátové receptory na‰e v˘sledky svûdãí pro to ïe hypoxie souãasnû sniïuje denzitu kainátov˘ch
receptorû a tím nepﬁímo produkci no po následné aplikaci kainátu to by mohlo vést k omezení po‰kození nûkter˘ch
subpopulací neuronû zpûsobeného dlouhodobou intermitentní hypoxií jones a ost 1998 podporováno grantem uk 32 2001 c 1 lf gaâr 305 99 0976 a msm 1111 00001 literatura
1 p a jones r a smith t w stone nitric oxide synthase inhibitors l-name and 7-nitroindazole protect rat hippocampus against kainate-induced excitotoxicity neurosci lett 249 75-78 1998 2 c montecot j borredon j seylaz e pinard nitric oxide of neuronal origine is involved in cerebral blood flow increase during seizures induced by kainate cereb blood flow metab 17 94-99 1997 3 j velí‰ková l velí‰ek p mare‰ epileptic phenomena produced by kainic acid in laboratory rats during ontogenesis physiol bohemoslov 37 395-405 1988 5 místo anal¯za napjatosti hlavice temporomandibulárního kloubu
autor mudr radek jirman kolitel pﬁednosta prof mudr jiﬁí mazánek drsc stomatologická klinika 1 lf a vfn
úvod
temporomandibulární kloub tmk ãelistní kloub je kloub sloïen˘ a ﬁadí se mezi jedny z nejsloïitûj‰ích kloubû celého tûla je to oblast kde dochází ke kraniomandibulárnímu spojení mezi kloubní hlavici a jamkou se nachází kloubní
disk kter˘ je tvoﬁen vazivovou chrupavkou která je zcela bez krevních cév a nervov˘ch vláken funkãní disk má v sagitální
rovinû bikonkávní tvar pﬁední a zadní okraj disku je zesílen centrální ãást disku tvoﬁí tenká intermediátní zóna tento
kloub je jedineãn˘ kromû jiného také tím ïe se na jedné kosti nacházejí dva stejné klouby a jak˘koli pohyb ãi funkãní odchylka jednoho tmk bezpodmíneãnû ovlivàuje kloub druh˘ téï se mûïeme setkat s oznaãením kloub ginglymoartrodiální tento jeho název vypl˘vá z jeho dvou rûzn˘ch pohybû kter˘mi jsou pohyb rotaãní v prostoru diskokondylární tzv ginglymoidní kloub a pohyb translaãní v prostoru diskotem-
porálním tzv artrodiální kloub âelistní kloub vzájemn˘ vztah obou ãelistí ïv˘kací svaly a koordinované svalové skupiny krku a ‰íje podílející se na ïv˘kacím aktu tvoﬁí spolu s nervov˘m systémem jednotn˘ harmonick˘ celek porucha jakékoli z v˘‰e uveden˘ch sloïek
mûïe b˘t pﬁíãinou obtíïí které mají podobnou klinickou symptomatologii a jsou oznaãovány jako poruchy temporoman-
dibulárního kloubu tmp asi 20-28 populace trpí urãitou formou funkãního po‰kození tmk tmp jsou charakterizovány základní trias klinick˘ch znakû bolestí v okolí tmk která se zvût‰uje pﬁi ãinnosti dolní ãelisti a palpaãní citlivosti ïv˘kacích svalû bolest tmk je po odontalgii druhou nejãastûj‰í faciální bolestí omezením pohyblivosti dolní ãelist nebo asymetrick˘m pohybem mandibuly bûhem otevírání úst a zvukov˘mi feno-
mény vázan˘mi na funkci ãelistního kloubu lupání cvakání vrzání s tmp mohou b˘t spojeny i dal‰í obtíïe jako bolesti
hlavy u‰í hypertrofie ïv˘kacích svalû porucha okluze tinnitus a závratû podle pûvodu obtíïí dûlíme poruchy tmk do dvou skupin na poruchy kloubního a mimokloubního pûvodu jednou z poruch mûïe b˘t tzv diskopatie kloubu která se obvykle dûlí na dvû podskupiny dislokace disku s redukcí a
dislokace disku bez redukce diskopatie patﬁí mezi intrakapsulární poruchy tmk jeï je definována jako poru‰ení funkãního vztahu mezi kloubním
diskem kondylem mandibuly a artikulaãním povrchem spánkové kosti podstatou diskopatií je tedy dislokace disku proã dochází k dislokacím disku nebylo zatím zcela objasnûno pﬁesto se v literatuﬁe za v˘znamn˘ etiologick˘ faktor povaïuje neuromuskulární dysfunkce ïv˘kacích svalû a bruxismus souvislost mezi bruxismem a dislokací disku je v katzbergovû studii vysvûtlena tak ïe síly vznikající pﬁi bruxismu jsou kondylem mandibuly pﬁeneseny na kloubní disk ten je kondylem mandibuly tlaãen cestou nejniï‰ího odporu do nefyzio-
logického postavení protoïe je kloubní pouzdro tmk laterálnû i mediálnû zpevnûné kolagenními vazy je kloubní disk
nejãastûji dislokován smûrem dopﬁedu dal‰í moïnou pﬁíãinou dislokace disku je dysbalance ïv˘kacích svalû pﬁedev‰ím hypertonus m pterygoideus laterális kter˘ mûní vzájemn˘ vztah mezi kloubním diskem a kondylem mandibuly materiál a metodika
cílem bylo ukázat povrchové rozloïení redukovaného napûtí pﬁi zatíïení na hlavici dolní ãelisti coï má bezesporu vliv na správnou funkci tmk a v pﬁípadû patologického zatíïení i na jiï zmínûnou diskopatii v˘poãet k zji‰tûní rozloïení napjatosti na hlavici kondylu probíhal ve spolupráci s fakultou strojní na âvut v praze ing j vtípil která nám poskytla potﬁebné technické zázemí projekt byl rozãlenûn do základních ãtyﬁech podbodû 1 zpracování vstupních ct dat
2 vytvoﬁení 3d modelu dolní ãelisti
3 vytvoﬁení mkp koneãnûprvkového modelu 4 v˘sledky v˘poãtu
73
ad 1 snahou bylo získat co nejpﬁesnûj‰í tvar ãelistního kloubu a proto jsme pouïili vstupní ct data z mezinárodní databáze
visible human project následnû jsme data zpracovali uïitím software mimics v 6 o3 v˘stupem jsme získali popis geometrie dolní ãelisti a disku prostﬁednictvím spline kﬁivek ve formátu iges obr 1 pracovní prostﬁední programu mimics
ad 2 pro vytvoﬁení 3d trojrozmûrného modelu jsme pouïili program unigraphics solution v 16 následnû jsme provedli
potaïení kﬁivkové spline geometrie bezierov˘mi plochami dále jsme vyhladili vytvoﬁené plochy s uïitím kﬁivostní anal˘zy
v˘‰e zmiàovaného software obr 2 koneãnûprvková síè dolní ãelisti
74
ad 3 pro vytvoﬁení sítû koneãn˘ch prvkû jsme uïili program pro post a pre procesing metody koneãn˘ch prvkû patran v 9 následnû byla vytvoﬁena síè hexagonálních elementû takzvan˘m mapováním v˘stupem byl kompletní geometrick˘ mkp
model v neutrálním formátu vlastní zatíïení mkp modelu bylo aplikováno dle následující tabulky a obrázku jeï byly pﬁevzaty z literatury síly jed-
notliv˘ch ïv˘kacích svalû odpovídají maximálním hodnotám pﬁi skusu na zub m1 tab 1 souﬁadnice úponû ïv˘kacích svalû dolní ãelisti a orientace odpovídajících svalov˘ch sil obr 3 zatíïení mkp modelu materiálové vlastnosti kostní tkánû byly pﬁejaty z literatury pro jednoduchost jsme uvaïovali youngûv modul pruïnosti
v tahu pro spongiosu 210 mpa a poissonovu konstantu pﬁíãná kontrakce 0 17 75
úpon smûrové kosiny síla n x mm y mm z mm cos α cos β cos γ
m masseter m 15 45 42 0 35 0 91 0 22 210
m temporalis t 23 6 37 0 24 0 96 0 12 167
m pterigoideus lateralis pl 3 7 41 0 7 0 14 0 7 52
m pterigoideus medialis pm 13 37 39 0 29 0 83 0 48 164
v˘slednice 0 236 0 967 0 098 496 807
moment nmm 6440 08
r
ly
x pi
t
pm
m
pm
mz
pi
t ve mz
ad 4 v˘poãet byl proveden softwarov˘m koneãnûprvkov˘m balíkem cosmos m v 2 0 na níïe uveden˘ch obrázcích je zobrazeno pole povrchové napjatosti kontaktních tlakû dolní ãelisti obr 5 pole povrchové napjatosti dolní ãelisti redukované napûtí v mpa
hodnoty maximální napjatosti jsou patrné v laterální ãástí kloubních ploch tyto hodnoty ukazují na oblast s nejvût‰í
potenciální moïností po‰kození intraartikulárního kloubu obr 6 redukované napûtí mpa pﬁi zmûnû rozsahu hodnot zobrazení je patrná roz‰iﬁující se oblast napjatosti smûrem
ke krãku dolní ãelisti 76
diskuse a závûr
z na‰eho v˘poãtu vypl˘vá ïe nejvût‰í hodnoty napjatosti se nacházejí v laterální oblasti kloubních ploch a to o veli-
kosti okolo 25 mpa z v˘sledkû tj obrázkû jsou sice patrné i vy‰‰í hodnoty ale tyto hodnoty nelze povaïovat vzhledem
k jejich lokálnímu charakteru za pﬁíli‰ smûrodatné z tûchto v˘sledkû lze pﬁedpokládat ïe nejkritiãtûj‰ím místem ãelistního kloubu pro pﬁenos zatíïení resp ïv˘kacích sil je právû zmínûná laterální oblast kondylu a disku pﬁi zmûnû rozsahu hodnot zobrazení je patrná roz‰iﬁující se oblast zv˘‰ené napjatosti kritické místo z hlediska pevnosti kaudálním smûrem aï ke krãku dolní ãelisti coï odpovídá klinické praxi co do ãetnosti fraktur v této oblasti tento v˘poãet lze povaïovat za startovací pro podrobnou anal˘zu ãelistního kloubu se zahrnutím kloubních deformací
disku kloubní jamky a dynamiky pohybu v kloubu literatura
1 biomechanika j valenta a kol praha 1985
2 biomechanika ãlovûka j valenta praha 1997
3 three-dimensional finite element analysis of the human temporomandibular joint disc m beek j h koolostra a kol amsterdam 1999
4 konzervativní léãba tmp j zemen praha 1999
5 the finite element metod o c zienkiewicz london 1989
6 diagnostika a terapie nejãastûj‰ích poruch ãelistního kloubu doktorská dizertaãní práce 1999 j krug 77
prevalence ku¤áctví a znalosti t¯kající se tabáku zji tùné mezi noviná¤i âesk¯ch deníkò
autor mudr jiﬁí pe‰ina kolitel mudr eva králíková csc ústav hygieny a epidemiologie 1 lf a vfn
òvod
kouﬁení je nejv˘znamnûj‰í preventabilní pﬁíãinou smrti na svûtû na nemoci zpûsobené tabákem umírá nyní v âeské republice kolem 22 000 osob roãnû to je 60 úmrtí dennû v na‰í zemi kouﬁí kolem 32 lidí star‰ích 15 let kouﬁení v˘raznû
stoupá u dospívajících a mlad˘ch lidí pﬁeváïnû u ïen alarmující je ïe 8-9 z 10 kuﬁákû zaãne kouﬁit pﬁed 18 rokem mnoho teenagerû se v tomto vûku je‰tû hledá a upravuje svûj ïivotní styl podle vzorû které vidí kolem sebe to si uvûdomují i tabákové firmy a jejich reklamy jsou zamûﬁeny jiï na dûti ve vûku 12-14 let postoje mediálních pracovníkû ke
kuﬁáckému chování jsou zásadní pro pravdivou informovanost obãanû kaïdého spoleãenství a v na‰em státû ve srovnání s nûkter˘mi západními státy jistû není situace v tomto smûru pﬁíznivá cíle projektu
1 zjistit prevalenci kouﬁení mezi novináﬁi ve tﬁech v˘znamn˘ch ãesk˘ch denících 2 zjistit znalosti o problematice tabáku a názory novináﬁû na kouﬁení 3 zjistit zda si novináﬁi uvûdomují ïe mohou ovlivàovat názory ãtenáﬁû metodika
v˘zkum probûhl ve tﬁech ãesk˘ch denících mladá fronta dnes lidové noviny hospodá¤ské noviny data byla získána pomocí anonymních dotazníkû formou ﬁízeného pohovoru kterého se zúãastnili v‰ichni
novináﬁi a editoﬁi pﬁítomní v jednotliv˘ch redakcích celkem bylo zpovídáno 118 osob dotazník byl rozdûlen na 3 ãásti v úvodní ãásti nás zajímal kuﬁáck˘ návyk dotazovaní tím byli rozdûleni na kuﬁáky a nekuﬁáky anonymní dotazník
pracuji pro název pracovní pozice interní zamûstnanec externí spolupracovník televize rozhlas pí‰ící novináﬁ ka vûk pohlaví ïena muï
kuﬁáck˘ návyk pravideln˘ kuﬁák kouﬁí dennû pﬁíleïitostn˘ kuﬁák kouﬁí ale ne dennû b˘val˘ kuﬁák dﬁíve kouﬁil dennû nyní nekouﬁí nikdy nekouﬁil nekouﬁil buì vûbec nebo ménû neï 100 cigaret bûhem svého ïivota b˘val˘ pﬁíleïitostn˘ kuﬁák nekouﬁil nikdy dennû ale vykouﬁil víc neï 100 cigaret bûhem svého ïivota práce ocenùna zvlá tní cenou zdravotnick¯ch novin
78 ve druhé ãásti odpovídali pouze kuﬁáci pro objektivizaci závislosti na nikotinu byl proveden fagerstroemûv test âást pouze pro kuﬁáky v kolika letech jste zaãal a kouﬁit kolik cigaret dennû vykouﬁíte zkou‰el a jste pﬁestat ano ne
kolikrát jak dlouho jste nejdéle vydrïel a nekouﬁit chtûl a by jste pﬁestat kouﬁit ano ne
kdy pﬁí‰tí mûsíc pﬁí‰tí rok pozdûji víte ïe existují poradny pro odvykání kouﬁení ano ne
nav‰tívil a by jste ambulanci pro odvykání kouﬁení ano ne proã máte pocit psychosociální závislosti ano ne
máte pocit drogové závislosti ano ne
povaïujete závislost na tabáku za nemoc ano ne
79
ftnd fagerstroemûv test závislosti na nikotinu 1 jak brzy po probuzení si zapálíte první cigaretu do 5 min 3 za 6 30 min 2 za 31 60 min 1 po 60 min 0 2 je pro vás obtíïné nekouﬁit tam kde to není dovoleno ano 1 ne 0 3 které cigarety byste se nejménû rád vzdal a té první ráno 1 kterékoli jiné 0 4 kolik cigaret dennû kouﬁíte 10 nebo ménû 0 11 20 1 21 30 2 31 a víc 3 5 kouﬁíte více v prvních hodinách dne po probuzení neï ve zbytku dne ano 1 ne 0 6 kouﬁíte i kdyï jste nemocn˘ á tak ïe strávíte vût‰inu dne na lûïku ano 1 ne 0 souâet 80 závûreãná ãást byla spoleãná pro kuﬁáky i nekuﬁáky otázky zji‰èovaly rozsah znalostí o problematice tabáku spoleãná ãást pro kuﬁáky i nekuﬁáky na jakou vûkovou skupinu je cílena reklama na tabák v kolika letech se vût‰inou zaãíná kouﬁit kolik procent kuﬁákû je podle vás drogovû závisl˘ch na nikotinu jak˘m zpûsobem lze podle vás léãit závislost na nikotinu kdo by mûl léãbu vést znáte nûkteré formy náhradní terapie nikotinem jaké nemoci zpûsobuje tabák o kolik let prûmûrnû zkracuje kouﬁení ïivot na jakou nemoc umírá vût‰ina kuﬁákû kolik úmrtí u nás zpûsobuje tabák myslíte si ïe ze své pozice máte moïnost ovlivnit názory lidí divákû posluchaãû ãtenáﬁû na kouﬁení do jaké míry 81
v˘sledky
z celkového poãtu 118 novináﬁû a editorû bylo 53 kuﬁákû a 47 nekuﬁákû n=118
z 62 kuﬁákû by 47 chtûlo pﬁestat kouﬁit n=62
82
nekuﬁáci
kuﬁáci
54 53 52 51 50 49 48 47 46 45 44 chce pﬁestat
nechce pﬁestat
54 53 52 51 50 49 48 47 46 45 44 pouze 8 5 dotazovan˘ch vûdûlo ïe tabáková reklama je cílena na vûkovou skupinu 12-14 let n=118
tﬁi procenta novináﬁû neznala ani jednu nemoc kterou zpûsobuje tabák n=118
83
vûdûli
nevûdûli
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 znali
neznali
120 100 80 60 40 20 0 pouze necel˘ch 47 redaktorû a editorû si o sobû myslí ïe mohou ovlivàovat názory ãtenáﬁû n=118
závûr
prevalence kouﬁení byla mezi zpovídan˘mi novináﬁi o 1 5 vy‰‰í neï prevalence kouﬁení populace v âeské republice nûkteﬁí novináﬁi si myslí ïe kouﬁení nemûïe ïádn˘m zpûsobem po‰kodit lidské zdraví více neï polovina redaktorû je pﬁesvûdãena ïe nemûïe ovlivnit názor ãtenáﬁe na dan˘ problém tím co ve sv˘ch ãláncích napí‰e tato zji‰tûní jsou velmi
alarmující neboè média mohou ovlivàovat postoje mládeïe i obyvatel na‰eho státu ke správnému chápaní závaïnosti problému kuﬁáctví a jeho vlivu na zdraví populace pozitivní je ïe v‰echny tﬁi deníky které se v˘zkumu zúãastnily projevily zájem o v˘sledky a chtûjí uspoﬁádat semináﬁe o problematice kouﬁení pro své novináﬁe a editory 84
mohou ovlivnit
nemohou ovlivnit
54 53 52 51 50 49 48 47 46 45 44 zpracovalo odd vnûj‰ích vztahû uk v praze 1 lf
mgr vlasta helekalová
ilustrace a návrh obálky ak mal ivan helekal
grafická úprava sazba a litografie pm reklamní a hudební agentura