Cviceni 2 - 23.4.2012 1. Identifikace druhu zastoupeneho v mikrobiomu z vysledku sekvenovani DNA Ve vzorku mikrobialniho druhu izolovaneho v samostatne kulture byly identifikovany sekvence: cttgttgactgagatacgcacacgcttgtga tgcggccggaactgaatcaattgccagcgcgcgcaaatgaa taactcagacatatcatgaactatatta O jaky druh se nejpravdepodobneji jedna? 2. Seznamte se s prohlizecem genomu Ensembl (http://www.ensembl.org; http://www.ensembl.org/info/website/tutorials/index.html) Vyhledejte informace o genu MYO6 - co je jeho biologickou funkci? - ktere geny jsou v genomu cloveka pobliz na 5´ a 3´ strane? - kolik alternativnich transkriptu je znamych pro lidsky MYO6? - exportujte sekvence jednotlivych transkriptu - pripravte vicecetne zarovnani jejich sekvenci (CLUSTALW a BOXSHADE, viz cv.1) - ktere useky genu jsou pro tyto transkripty spolecne? - o jaky typ alternativniho sestrihu se v jednotlivych pripadech jedna (srovnavejte s transkriptem MYO6-001)? == BONUS 1 bod == == Ziskejte sekvence 1.exonu genu BRCA2 u cloveka, mysi a tri dalsich organismu == Pomoci CLUSTALW a BOXSHADE zjistete pocet spolecnych nukleotidu a procento, == kterym se delky jednotlivych exonu lisi od teto hodnoty. Odevzdejte vicecetne == zarovnani a spocitane hodnoty 3. Proteomika (http://prospector.ucsf.edu) Byl analyzovan neznamy protein stepenim trypsinem a metodou MALDI-TOF. Vysledne spektrum obsahovalo nasledujici hodnoty m/z 801.0260 849.0024 873.0463 924.1379 977.0274 999.1779 1037.2984 1099.3342 1133.2100 1162.3991 1172.4222 1199.2235 1355.4121 1403.7347 1516.7126 1549.9036 1611.9094 1624.9082 1630.8088 1645.7798 1745.9416 1791.9674 1855.1278 1948.1747 1955.2755 1976.2053 2095.3338 2157.4549 2216.4899 2494.8162 2604.0620 3423.0156 3821.4537 Pomoci nastroje MSFit identifikujte neznamy protein. Jak vypada teoreticke spektrum pro identifikovany protein (pouzijte MSDigest, kolik ma fragmentu a jaka je jejich min. a max. molekulova hmotnost)? Jak s lisi zadane a teoreticke spektrum? Cim by se rozdily dali vysvetlit? == BONUS 1 bod == == Zobrazte dane spektrum graficky a vyznacte "peaky", ktere dle vysledku == z cviceni identifikuji dany protein. 4. Individualni domaci ukol: Seznamte se s programem Pymol (www.pymol.org) (existuji starsi verze ktere lze volne nainstalovat: http://sourceforge.net/projects/pymol/) Zobrazte protein 1A06 tak, aby byly barevne rozliseny sek.struktury (alfa modre, beta cervene, zbytek zelene) v rezimu "cartoon". Oznacte zlute vsechny cysteiny s vykreslenim postrannich retezcu a bilou vsechny postranni retezce aromatickych aminokyselin. == BONUS 2 body do 7.5.2011 == == Napiste skript ktery tento ukon automaticky provede na libovolnem proteinu. == poslete obrazek vygenerovany na Vami zvolenem proteinu odlisnem of 1A06