Praktické cvičení č.1          datum____________    jméno___________________

   

   

   Téma praktika:

   Seznámení se základními laboratorními pomůckami

     o Laboratorní sklo
     o Pipety
     o Dávkovače
     o Váhy (dem.)
     o Míchačky a třepačky (dem.)
     o Měření a monitorování teploty (dem.)

   

   Úkoly:

   a)      Ověření přesnosti pipetování za použití různých laboratorních pomůcek

   K ověření přesnosti pipetování bude použito ředění základního roztoku NaCl, který se bude
   ředit (1+10)

   100ul + 1,0ml ..............(skleněná pipeta 1,0ml a 5,0ml)

   100ul + 1,0ml..............(automatická pístová pipeta 100ul a pístoventilový dávkovač 5,0ml)

   20ul + 200ul...............(programovatelný automatický dávkovač HAMILTON 1000)

   

   Po nácviku jednotlivých pipetovacích technik provede každý 5x naředění základního roztoku NaCl
   výše uvedenými třemi způsoby.

   

   Ve zkumavkach s naředěnými vzorky se stanoví koncentrace Na

   Zjištěné hodnoty koncentrace Na se z tištěného reportu analyzátoru přepíší do tabulky.

   

   +--------------------------------------------------------------------------------------------+
   |označení |Skleněné pipety |označení |Pístová pipeta +|označení|Automatický dilutor(Hamilton)|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |         |                |         |dávkovkovač     |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |Průměr   |                |Průměr   |                |Průměr  |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |SD       |                |SD       |                |SD      |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |VK       |                |VK       |                |VK      |                             |
   +--------------------------------------------------------------------------------------------+

   

   Vyhodnocení :

   

   __________________________________________________________________________--_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   Výpočet přesnosti pipetování ze všech měření v jednotlivých skupinách.

   

   +--------------------------------------------------------------------------------------------+
   |označení |Skleněné pipety |označení |Pístová pipeta +|označení|Automatický dilutor(Hamilton)|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |         |                |         |dávkovač        |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |         |                |         |                |        |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |Průměr   |                |Průměr   |                |Průměr  |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |SD       |                |SD       |                |SD      |                             |
   |---------+----------------+---------+----------------+--------+-----------------------------|
   |VK       |                |VK       |                |VK      |                             |
   +--------------------------------------------------------------------------------------------+

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   

   b)      kontrola přesnosti a správnosti automatické pístové pipety vážkovým způsobem

   

   Pracovní postup:

   

   a)      Zjistit teplotu použité destilované vody ponořením teploměru na nejméně 3minuty a
   zapsat do pracovního protokolu

   b)      Předvážit čistou, suchou kádinku (50ml) a vynulovat display analytických vah

   c)      Do kádinky napipetovat vždy novou špičkou deklarovaný objem pipety, hodnotu hmotnosti
   odečíst, zaznamenat a vynulovat

   d)      Postup dle bodu c)zopakovat 11x (t.j. získáme 12 hodnot)

   e)      Vypočítat průměrnou hodnotu hmotnosti pipetovaného objemu, směrodatnou odchylku (SD) a
   variační koeficient (VK)

   f)        Vypočítat objem vody dávkované danou pipetou podle vzorce:

                   

                     V=  průměrná hmotnost / hustota vody při dané teplotě

   (hustota vody se odečte z tabulky)

   

   g)      Vypočítat správnost pipetovaného objemu (výpočet BIAS) podle vzorce:

   

   Bias (%)= [(průměrná zjištěná hodnota objemu -- deklarovaná hodnota)/deklar.hodnota x100]

   

   Vyhodnocení pro pipetu s objemem 100ul:

   Vyhovuje:

                                       VK < 2%

                                       Bias <2%

   

   (Pokud překročí kterákoliv hodnota uvedený limit není možné pipetu používat.)

   

   

   Závěr:

   

   _________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________