Lékařská mikrobiologie pro ZDRL Týden 16: Přehled gramnegativních bakterií Co nás dnes čeká § Není možné se během této přednášky naučit vše o gramnegativních bakteriích § Musíte se je tedy naučit z učebnic § Tato přednáška může jen pomoci udělat si v nich trochu přehled a pochopit základní charakteristiku jednotlivých skupin Gramnegativní bakterie 1.Enterobakterie Přehled enterobaktérií Na začátek báseň… Nemůžem vždy slepici kontrolovat stolici. Jednou projdem drůbežárnou a stolici najdem zdárnou. Přiletí však holub bělý zanese tam salmonely. Odnesou pak vejce pro cukráře – strejce Cukrář – strýček nevinný nadělá z ní zmrzliny Mládež sní ji s důvěrou a všichni se… Příběh první § Slečna Tereza je mlsná. Dnes si po obědě dala krémový zákusek. Odpoledne ji začalo bolet břicho, a pochopila, že vzdálit se na delší dobu z domu nelze. Navštívila lékaře, ten jí odebral výtěr z řitního kanálu. Za několik dní volali Tereze z územního pracoviště krajské hygienické stanice. Tereza si byla jistá, že za všechno může krémový zákusek. Ukázalo se však, že její podezření bylo falešné… Kdo je tedy skutečný viník? § Bakteriálním viníkem je Salmonella enterica serovar Enteritidis, zkráceně Salmonella Enteritidis § Viník – jídlo nemůže být krémový zákusek! Neodpovídá totiž inkubační doba, které je u salmonelóz zpravidla dva dny, někdy ale i týden § Viníkem – jídlem se nakonec ukázal být žloutkový věneček, který Tereza zbaštila o dva dny dřív § Lidským viníkem bude pravděpodobně někdo v.cukrárně „U hysterické cukrářky“, kde někdo něco nejspíš zanedbal. Právě teď po tom pátrá oddělení hygieny výživy KHS. Může jít o primární či sekundární kontaminaci jídla. Salmonela Salmonelová endokarditis Primární patogeny z řad enterobakterií § Enterobacteriaceae je klinicky nejdůležitější čeleď gramnegativních tyčinek (ale důležitá je i pro ne-klinická odvětí mikrobiologie) § Nejhorší patogeny způsobují celkové infekce: je to Yersinia pestis a tzv. antropopatogenní serovary salmonel (serovary Typhi, Paratyphi A, Paratyphi B a Paratyphi C) § Závažné jsou ale i obligátní patogeny působící zpravidla „jen“ střevní infekce. I u nich je však riziko sepse, hlavně u oslabených osob § Týká se to rodů Salmonella, Shigella a Yersinia Mor (Yersinia pestis) Příběh druhý § Paní Mokrá je v péči urologické kliniky pro přetrvávající potíže při močení § Paní Mokrá má podobné potíže opakovaně. Po třech porodech má narušenou svalovinu pánevního dna, léčila se i pro inkontinenci moče. Lékaři ji upozornili, že riziko močové infekce je u ní zvýšené, protože má narušené mechanismy normální obrany proti infekci. Je to trochu bludný kruh, protože opakované infekce stav sliznic dále zhoršují Kdo za to tentokrát může? Stěna močového měchýře s adherovanými escherichiemi Přehled enterobaktérií Co tropí klebsielly… Nepatogenní enterobakterie § Kromě obligátně patogenních enterobakterií, jako jsou salmonely, a potenciálně patogenních, jako jsou escherichie, existují také nepatogenní enterobakterie. § Některé z nich byly objeveny na území Česka, například Pragia fontium či Budvicia aquatica. Enterobakterie – metody § Přímé metody § Mikroskopie – v praxi má malý význam, protože je jich mnoho a v mikroskopu jsou všechny stejné. § Kultivace – používá se mnoho různých půd § Biochemická identifikace – velmi důležitá § Antigenní analýza – salmonely, shigely, EPEC § Nepřímé metody (protilátky) § Widalova reakce u tyfu, protilátky proti yersiniím Štěpení laktózy Endova půda rozliší bakterie fermentující a nefermentující laktózu. Obligátní patogeny zpravidla laktózu nefermentují, je to tedy i předběžný test, jestli „to vypadá, že by to mohl být patogen“. Salmonela Salmonela na MAL agaru Proteus mirabilis, P. vulgaris (dole) Proteus dle as. Petra Ondrovčíka Klebsiely a escherichie Escherichie Odlišení od ostatních podezřelých (diferenciální diagnostika) § Gramovo barvení odliší gramnegativní tyčinky od ostatních bakterií § Endova půda poprvé: rostou na ní z klinicky významných jen enterobaktérie, příslušníci čeledi Vibrionaceae a gramnegativní nefermentující tyčinky § Nefermentující odliší to, že nefermentují glukózu (např. Hajnova půda zůstává po kultivaci celá červená, nezmění vůbec barvu) Vibrionaceae odliší pozitivní oxidáza Shrnutí – jak rozlišíme bakterie, které rostou na Endově půdě § Enterobakterie jsou oxidáza negativní (s.výjimkou rodu Plesiomonas, který k nim byl nedávno přiřazen) a vždy fermentují glukózu § Vibria a aeromonády také fermentují glukózu, ale jsou vždy oxidáza pozitivní § Gramnegativní nefermentující baktérie (mohou to být tyčinky, ale i kokotyčinky či koky) nikdy nefermentují glukózu. Oxidázu mohou mít pozitivní i negativní Rozlišení enterobakterií navzájem § Endova půda podruhé: orientační rozlišení obligátních patogenů (většinou L-) a potenciálních patogenů (zpravidla L+) § Spousta dalších půd: XLD, MAL, DC, WB a další na salmonely, CIN na yersinie aj. § Biochemické testy: Hajnova půda, test MIU, Švejcarova plotna, ENTEROtesty aj. § Antigenní analýza zpravidla sklíčkovou aglutinací Příklad ENTEROtestu16 (530 063 = E. coli, 99,89 %, T[in]=1,00) Příklad ENTEROtestu16 (265 003 = Prot. mirabilis, 100,0 %, T[in]=0,59) Příklad ENTEROtestu16 (546 773 = Kl. pneumoniae, 98,83 %, T[in]=1,00) Použití antigenní analýzy § Antigenní analýza se nepoužívá zdaleka vždycky § Použití je v zásadě dvojí: § U obligátních patogenů (salmonely, shigely, yersinie) pro potvrzení diagnózy a pro epidemiologické účely § U střevních izolátů E. coli v případě, že je podezření na EPEC nebo STEC (ostatní skupiny se zpravidla takto neurčují) Aglutinace salmonel § Při aglutinaci kterékoli pohyblivé enterobakterie hodnotíme dva typy antigenů: tělové, tzv. O antigeny, a bičíkové, tzv. H antigeny (výjimečně i kapsulární K antigeny). § Tak i každá salmonela má svou specifickou antigenní strukturu. Například salmonela serovaru Enteritidis disponuje tělovými antigeny 9, 12 a bičíkovým H m. § Je-li tedy naše salmonela Salmonella Enteritidis, musí být pozitivní (aglutinace přítomna) jak při aglutinaci tělových, tak i bičíkových antienů. Testy antibiotické citlivosti § Antibiotická citlivost se zásadně neurčuje u kmenů ze stolice. Až na výjimky je tu totiž podání antibiotik kontraindikováno, neboť prodlužuje dobu, po kterou trvá dysmikrobie a paradoxně prodlužuje dobu vylučování patogena ze střeva § Určuje se tedy zpravidla u kmenů z moče, proto i antibiotika zahrnují léky používané k.léčbě močových infekcí (např. furantoin) Některá používaná antibiotika (u močových infekcí) Některá rezervní antibiotika (při rezistenci na základní řadu) 2. Vibrionaceae Příběh § Leo byl cestovatel. Vypravil se do Jemenu. Pobýval tu s místními obyvateli, jedl, co jedli oni, pil, co pili oni. Náhle ho přepadl těžký průjem – v podstatě z něj vycházela jen voda. Pochopil, že to nebude jen tak obyčejný cestovatelský průjem. § Jeden místní felčar mu radil bylinky, druhý antibiotika. Leo si však poradil – proléval se litry a litry pitné vody. A věděl, že kdyby nestačilo vodu pít, musel by ji dostávat v infuzích. § Leo tušil, že má choleru, nemoc způsobenou bakterií Vibrio cholerae. Čeleď Vibrionaceae § Jsou to gramnegativní tyčinky podobné enterobakteriím. Liší se od nich tím, že jsou oxidáza pozitivní. Morfologicky jsou často zahnuté a výrazně pohyblivé § Vibrio cholerae způsobuje choleru. Nejdůležitější jsou serotypy O139 a zejména O1. Ten se ještě dělí na biotypy; biotyp El Tor je nakažlivější, infekce biotypem Classic mají zase závažnější průběh § Halofilní vibria a příslušníci rodu Aeromonas způsobují občasné infekce ran např. při kuchání ryb nebo při koupání v poloslaných lagunách Diagnostika čeledi Vibrionaceae § Provádí se podobně jako u enterobakterií, ale jsou oxidáza pozitivní. § Mikroskopicky jsou vibria pohyblivé, zahnuté tyčinky § Používá se také speciálních půd, například alkalická peptonová voda a TCŽS (Thioglykolát, cystein, žlučové soli) § Používá se obdobných biochemických testů, jako u enterobaktérií (včetně Enterotestu 16) § Musí se ovšem vybrat správná matice 3. Gramnegativní nefermentující bakterie § Většina z nich jsou tyčinky, ale rod Acinetobacter jsou kokotyčinky až koky! Příběh § Pan Zápalka je pyroman. Nedávno na svou vášeň doplatil a nehezky se popálil. Nyní se mu popálenina zanítila. Leží na popáleninovém centru a je na tom velice špatně. Lékaři naštěstí pochopili, že běžná antibiotika jsou mu platná jako mrtvému zimník a provedli stěr. Díky tomu se podařilo najít cílenou terapii a pana Zápalku vyléčit – do doby, než zase něco zapálí a způsobí si další popáleniny. Kdo za to tentokrát může? U oslabených osob mohou způsobovat např. i zánět nehtového lůžka. Autokasuistika as. Zahradníčka Pseudomonády napadají i jinak zdravé lidi při porušení anatomické kožní bariéry. Infekce však bývá jen lokální. § 13. 1. 2006, pátek, Padang, Západní Sumatra, Indonésie: as. Zahradníček padá do nezakryté dešťové kanalizace s následkem poměrně velké rány sahající na tibiální okostici § O několik týdnů později: rána je intenzivně cítit pseudomonádou, která je následně z rány i vykultivována. Naštěstí je dobře citlivá § Terapie: lokální – ušní kapky otosporin (gentamicin + polymyxin B, obě složky účinné) § Terapie úspěšná Padang Nefermentující a cystická fibróza § Cystická fibróza je těžké, vrozené onemocnění plic s poruchou produkce normálního plicního surfaktantu. To vede ke změněným charakteristikám plic, včetně mnohonásobně zvýšeného rizika infekce § Nejčastějšími původci jsou Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia a Staphylococcus aureus. Kmeny zpravidla získají polyresistenci a mnohé děti umírají velmi mladé. Pár slov o metabolismu § Jak víte, klinicky významné bakterie používají zpravidla jeden ze dvou typů metabolismu: fermentaci a aerobní respiraci. § Escherichia coli, která má dost živin, ale málo kyslíku (i když jiných plynů si užije dost J) preferuje fermentaci glukózy i jiných cukrů. Je fakultativně anaerobní § Naopak pseudomonády mají kyslíku habaděj, ale živin málo. Volí tedy aerobní respiraci, která jim umožní to málo dostupných živin využít úplně. Bývají často striktně aerobní § Adaptace na vnější prostředí se projevuje i pigmenty – viz následující obrazovka. Přehled metod použitelných k dopadení dnes probíraných zločinců § Přímé metody § Mikroskopie – pokud ji potřebujeme pro odlišení od bakterií jiné morfologie § Kultivace – nefermentující rostou na většině půd § Biochemická identifikace – je založena na reakcích aerobní respirace, vyžaduje e teplotu a 2 dny kultivace Nepřímé metody se téměř nepoužívají Diferenciální diagnostika § Gramovo barvení odliší gramnegativní tyčinky od ostatních bakterií § Endova půda: jak již víme, rostou na ní z.klinicky významných jen enterobaktérie, příslušníci čeledi Vibrionaceae a gramnegativní nefermentující tyčinky § Nefermentující odliší to, že nefermentují glukózu (např. Hajnova půda zůstává po kultivaci celá červená, nezmění vůbec barvu) K diagnostice nefermentujících § Pseudomonády se zpravidla poznají: § Mají typickou vůni (mladé kultury) § Tvoří pigmenty, nejčastěji zelené, někdy modré či rezavé. Nejlépe jsou viditelné na MH, ale trochu i na KA či Endově agaru § Mají pozitivní oxidázu § Ostatní nefermentující, případně sporné pseudomonády, musíme rozlišit biochemicky, například NEFERMtestem 24 Pseudomonas aeruginosa Další „nefermentující“: Pseudomonas fluorescens Burkholderia cepacia Burkholderia pseudomallei Stenotrophomonas maltophilia Acinetobacter sp. Testy antibiotické citlivosti § Nefermentující bakterie rostou na nejrůznějších půdách včetně MH § Používají se speciální protipseudomonádová antibiotika § Samozřejmě i na atb testech pseudomonáda barví MH agar na zeleno Používaná antibiotika Šlo by to i E-testem 4. Kampylobakter a helikobakter Příběh první § Student František je častým návštěvníkem fast-foodů. Hlavně si rád a často pochutnává na jídlech z kuřecího masa. § Proto ani hygienici nepřišli na to, které konkrétní jídlo mohlo za jeho průjmové potíže. František si myslel, že má nejspíš salmonelózu. Hygienici mu však vysvětlili, že salmonelóza se přenáší hlavně z.vajíček, kdežto náš viník spíše z kuřecího masa. Viníkem je totiž § Campylobacter jejuni, gramnegativní zahnutá tyčinka. Nepatří mezi enterobakterie, ale kampylobakterióza je svým průběhem a závažností srovnatelná se salmonelózou § Počet případů u nás je v posledních letech přibližně stejný jako v případě salmonelózy. Těžko říci, do jaké míry kampylobakteriózy skutečně přibylo a do jaké je jen lépe diagnostikována než dříve Příběh druhý § Pan Žáha má problém: pálí ho žáha. § Pomalu už neví, jestli je víc doma doma, nebo na gastroenterologii, a fibroskopy polyká častěji než své dříve oblíbené utopence. § Při poslední gastrofibroskopii mu endoskopicky odebrali dva vzorky – jeden poslali na histologické, druhý na mikrobiologické vyšetření § Obě vyšetření potvrdila totéž: zločinec je tam. Tentokrát jen spolupachatel… § Peptické (tedy gastrické či duodenální) vředy jsou onemocněním, které vzniká souhrou více příčin. Takovým onemocněním říkáme obvykle multifaktoriální. § Dodnes se nejen mezi praktickými lékaři, ale i mezi odborníky liší názory na podíl bakterie Helicobacter pylori na vředové onemocnění. Jisto je, že jsou i zdraví lidé s helikobakterem, stejně tak je ale jisto, že helikobakter svůj, nikoli nevýznamný, podíl na onemocnění má. Jak zločinec přežívá v extrémně nepříznivém prostředí žaludku? § Upravuje si své mikroprostředí – alkalizuje si ho, štěpě močovinu § Močovina se rozštěpí na kyselý oxid uhličitý, který vyprchá, a zásaditý čpavek, který zůstane a alkalizuje prostředí § Štěpení močoviny probíhá podle reakce: NH[2]-CO-NH[2] + 3 H[2]O `a CO[2] + 2 NH[4]OH Několik poznámek k diagnostice kampylobakterů § Kampylobaktery vyžadují v zásadě čtyři věci: § Svoji černou půdu – nemá specifický název, říkáme jí „půda pro kampylobaktery“ § Zvýšenou teplotu na cca 42 °C. Jsou to totiž primárně ptačí patogeny a ptáci mají vyšší tělesnou teplotu [§ ] Zvýšenou tenzi CO[2 ]§ Prodlouženou dobu kultivace – nikoli 24, ale 48 hodin Několik poznámek k diagnostice helikobakterů § V jejich diagnostice se používají speciality: § Mikroskopický a kultivační průkaz § Průkaz ureázové aktivity přímo ve vzorku tkáně. Je to jediná výjimka z pravidla, že biochemické určení se vždy týká kmene a nikdy vzorku. Je to proto, že za ureázovou aktivitu ve vzorku zde nic jiného než helikobakter nemůže být zodpovědno. § Ještě obskurnější je tzv. urea breath test – jediné mikrobiologické vyšetření, na které potřebujete celého pacienta Urea breath test § Pacientovi se podá radioaktivně značená močovina § U zdravého močovina projde do dolní části trávicího traktu a vyloučí se stolicí § Je-li přítomen helikobakter, rozštěpí se už v.žaludku a značený CO[2] se objeví ve vydechovaném vzduchu. Čím více značeného CO[2], tím více helikobaktera § Pojišťovna proplácí jen u dětí (pokud víme) 5. Čeleď Pasteurellaceae Příběh § Kubík je hodný kluk, ale jeho rodiče jsou členy jakési sekty a nechtějí Kubíka nechat očkovat. Nejraději by ho měli pořád doma, ale nakonec ho přece dali do školky… § Po měsíci ve školce začal být Kubík nachlazený, smrkal, kašlal, a nakonec se začal dusit a sípavě dýchat. Volali RZP, ukázalo se, že Kubík má zánět příklopky hrtanové – nemoc, která se dnes už moc často nevidí… Kdo to Kubíkovi udělal? § Viník: Haemophilus influenzae serotyp b (Hib) § Hemofily jsou krátké gramnegativní tyčinky. Nerostou na Endu, ale dokonce ani na KA § Ze všech hemofilů je nejhorší H. influenzae. Ze všech kmenů H. influenzae jsou nejhorší kmeny opouzdřené. A ze všech opouzdřených pak ty, které vlastní pouzderný typ b § Způsobují epiglotitidy, meningitidy a sepse. Ale zároveň hemofily (zvlášť ty, které nepatří mezi „Hib“) jsou úplně běžně nalézány v krcích. Čeleď Pasterurellaceae: Pasteurely a hemofily § Pasteurella multocida je běžnou flórou v psích tlamách. U člověka způsobuje zejména zhnisání ran po pokousání psem či jiným zvířetem. Má podobný charakteristický pach jako hemofil, ale na rozdíl od něj roste na krevním agaru. Vypadá tam jako něco mezi streptokokem a enterokokem, ale je rezistentní na vankomycin, což obvykle mikrobiologa „trkne“. § Nejznámější hemofily jsou Haemophilus influenzae (často sekundární infekce při „chřipkovitých“ virózách), H. parainfluenzae a H. aphrophilus. Původcem měkkého vředu je H. ducreyi. Přehled metod použitelných k dopadení těchto bakterií § Přímé metody § Mikroskopie – teoreticky, pokud by byla potřeba; jsou to gramnegativní krátké tyčinky § Kultivace – pasterurelly rostou na krevním agaru, hemofily jen na čokoládovém, na Endově půdě neroste ani jedna z těchto bakterií § Biochemická identifikace – u nás není vhodná souprava, v zahraničí soupravy existují § Antigenní analýza – zejména u hemofilů (Hib) Nepřímé metody se téměř nepoužívají K diagnostice hemofilů a pasteurel § Pasteurely rostou na krevním agaru § Hemofily na krevním agaru růst neumějí, protože si neumějí „otevřít“ krvinku § Rostou tedy na čokoládovém agaru § Na KA rostou v přítomnosti takové bakterie, která jim krvinku „otevře“ (satelitový fenomén). Takovou bakterií je například zlatý stafylokok § Mají droboučké kolonie, proto se používá disk k.odclonění ostatních bakterií (bacitracin, ale ve vyšší koncentraci než v bacitracinovém testu) Fotografie z databáze zločinců: Hemofily Ještě jednou satelit Pasteurella multocida Hemofily a růstové faktory § Ne všechny hemofily potřebují stejné faktory. § H. parainfluenzae potřebuje faktor V (NAD) § H. aphrophilus faktor X (což je hemin) § H. influenzae potřebuje oba. Používáme disky napuštěné těmito faktory. Test růstových faktorů hemofilů Antigenní analýza § Antigenní analýza se u hemofilů provádí obdobným způsobem jako u jiných bakterií. Dnes jsou zpravidla k dispozici komerční soupravy, obsahující např. i latexové částice a další součásti § Dříve se využívalo jevu tzv. koaglutinace se stafylokokem, kdy aglutinát byl hustší díky navázání stafylokoka na Fc konec protilátky proti hemofilovi Testy antibiotické citlivosti § Hemofily nerostou na MH agaru § Zpravidla se používá Levinthalův agar (přefiltrovaný čokoládový agar), na kterém jsou zóny lépe viditelné než na klasickém čokoládovém agaru § V naší laboratoři se používá „hemofilový agar“, což je půda blízká agaru Levinthalovu § Případnou diskovou rezistenci k ampicilinu je třeba ověřit testem produkce betalaktamázy Upozornění § Hemofily tvoří velmi mrňavé kolonie. Pokud je očkujeme nahusto (jako při testování citlivosti na antibiotika), jsou ještě mrňavější. § Proto je na agaru není moc vidět. Je třeba najít vhodné úhly mezi vaším okem, miskou s hemofilem a dopadajícím světlem – zprvu se zdá, že tam nic není! Antibiotika používaná u hemofilů 6. Legionelly, brucelly, bordetelly a franciselly Příběh § Toho dne bylo v nemocnici velké hemžení: další tři pacienti, všichni senioři, onemocněli, a u všech to bylo totéž – problémy s dechem a horečka § Po důkladném vyšetření laboratoř nalezla patogena nejen ve vzorcích od pacientů, ale i ve vodovodním vedení nemocnice. Vodovod musel být předělán, a teprve pak se další infekce definitivně zastavily. Legionářská nemoc § Tuto nemoc působí Legionella pneumophila § Legionářská nemoc je těžší variantou nemoci; existuje ještě mírnější varianta, Pontiacká horečka. § Bakterie má často rezervoár ve vodovodech, klimatizaci, atd. § Při stavbě nových částí nemocnic (ale i domovů důchodců, hotelů, lázní…) se musí podniknout opatření na prevenci legionelózy, především při plánování vodovodní sítě (žádné slepé odbočky) Legionářská nemoc (anglicky: Legionaire‘s disease) Legionella a teplota Některé způsoby desinfekce vody „Další gramnegativní bakterie“ § Není to žádná skupina, natož čeleď. Jsou to ale všechno poměrně vzácnější bakterie, zpravidla nerostoucí na Endově agaru, některé z nich rostoucí na agaru krevním, a způsobující různé nemoci. § Vedle rodu Legionella zmiňme alespoň tři rody: Bordetella, Brucella a Francisella Rod Bordetella § B. pertussis a B. parapertussis způsobují černý kašel § B. bronchiseptica způsobuje různé patologické stavy u člověka i zvířat § Černý kašel je velmi vzácný díky očkování § Pernasální výtěr se používá v případě potřeby Bordetella byla izolována 1906 a podíleli se na tom Jules Bordet a Octave Gengou Bordetella bronchiseptica: infekce kočky Rod Brucella § Je to původce zoonóz § Brucella abortus je kraví patogen. Často napadá hovězí placenty, způsobujíc zmetání (potraty) skotu. U lidí způsobuje Bangovu nemoc (horečka, orgánová postižení atd.) § Dalšími brucelami jsou Brucella suis z prasat, Brucella mellitensis z ovcí a koz a Brucella canis ze psů Rod Francisella § Nejdůležitějším druhem je F. tularensis § Způsobuje tularemii – „zaječí mor“ § Myslivci, ale ještě více kuchaři připravující zvěřinu jsou v riziku infekce § Tento organismus může napadat rány, ale také je možné jej vdechnout, což vede k zápalům plic Francisella Legionella Bordetella Brucella „Další G- bakterie“ – charakteristika § Mikroskopie: G – tyčky, často krátké § Kultivace: zpravidla speciální půdy (BG pro bordetely, BCYE pro legionely atd). § Biochemická identifikace: některé znaky mohou být využity § Antigenní analýza: někdy užitečná § Nepřímé metody se využívají, nejspíš u tularémie Odečet aglutinačního setu u francisel § Používá se nepřímý průkaz aglutinací § Počítá se titr – tedy nejvyšší ředění, kdy ještě nalézáme pozitivní reakci 7. Neisserie a moraxelly Příběh první § Honza byl maminčin mazlíček a s holkami to neuměl. Tak se stalo, že ještě ve dvaceti neměl žádnou sexuální zkušenost. Kamarádi z něj měli legraci. Jednou se na něj domluvili, opili ho a zaplatili mu „společnici“ na večer. Honza měl pocit, že je konečně mužem… jenže pak přišlo svědění a odkapávání hnisu z močové trubice. Určitě tušíte, kdo je viníkem § Samozřejmě, je to Neiserria gonorrhoeae, (gonokok) původce kapavky. § Kapavka se projevuje jako zánět uretry, u žen také cervixu; asymptomaticky či symptomaticky se gonokoky vyskytují i ve faryngu a v rektu. § U žen naopak nejde o kolpitidu (zánět pochvy) a proto pochva není místem, odkud by bylo doporučeno odebírat u podezření na kapavku výtěry Příběh druhý § Lucie se už čtyři týdny učila na zkoušku z fyziologie. Vůbec nevycházela z domu a jen seděla na zadnici. U zkoušky měla pocit, že ze sebe nic nevydoluje, ale nakonec si na cosi vzpomněla a prolezla s E-čkem § Večer to s kamarádkami šla oslavit na taneční party. Bylo tam nakouřeno a tancovalo se do hluboké noci. Druhý den Lucce nebylo dobře, začala mít teploty a pak se objevila i vyrážka. (pokračování) § Až tehdy se nechala odvézt do nemocnice na infekční oddělení. V.sanitce upadla do bezvědomí a lékaři konstatovali rozvrat metabolismu. Po deseti hodinách marné snahy o zachování základních životních funkcí Lucka zemřela. § Takový průběh může bohužel někdy mít infekce způsobovaná velmi zákeřným pachatelem. Některé jeho kmeny jsou přítomny v krku zcela zdravých osob… A tímto viníkem je… Proč někdy infekce nastane a jindy se nic nestane § K invazivní infekci dojde pouze pokud je kmen vysoce virulentní (specifické klony mikroba) a hostitelský organismus je vnímavý § Meningokok se přenáší těsným kontaktem. Invazivní infekci napomáhá narušení sliznice, např. i kouřením či předchozí virovou infekcí. § Infekce propukne často tehdy, když je tělo oslabeno neúměrnou fyzickou námahou po předchozí inaktivitě Takto pronikají do tkání Meningokoková meningitida je celosvětově velmi závažnou nákazou Příběh třetí § Anička plakala a chytala se za ucho. Maminka jí změřila teplotu, a ta byla zvýšená § V ordinaci praktického lékaře pro děti a dorost byla vyšetřena a stanovena diagnóza zánětu středního ucha § Jelikož bubínek již byl prasklý, hnis byl zaslán k vyšetření § Okamžitě byl nasazen amoxicilin, následně byl vyukultivován citlivý patogen A tím patogenem byla • Moraxella (dříve Branhamella) catarrhalis • Tento organismus bývá přítomen u zdravých osob v malém množství ve faryngu • V čisté kultuře způsobuje sinusitidy, otitis media, faryngitidy a podobně. • Její původní jméno Branhamella je odvozeno od Sáry Branhamové, jedné z prvních žen-badatelek. Byla to jedna ze statečných žen, které ukázali mužům, že nejen oni mohou být dobrými vědci Fotografie zločinců: Gonokoky Gonokoky Meningokoky Moraxella (Branhamella) catarrhalis Neisserie – charakteristika § Mikroskopie: G – diplokoky tvaru kávového zrna, často intrecelulárně lokalizované § Kultivace: drobné, bezbarvé nebo nažloutlé (podle druhu) kolonie, rostoucí (podle druhu) na krevním či čokoládovém agaru § Biochemie: kataláza pozitivní, oxidáza pozitivní, vzájemně biochemicky rozlišitelné § Antigenní analýza: velký význam u meningokoka, seroskupina B není preventabilní očkováním! Mikroskopie kapavky § Všimněte si gramnegativních diplokoků tvaru kávového zrna, zejména intracelulárních. Intracelulární uložení je jejich typickou vlastností. Kultivace § Popište kolonie gramnegativních koků na různých půdách, a hlavně si všimněte, jestli tam vůbec rostou. Základní biochemické testy § Rychlé testy s diagnostickými proužky velmi usnadňují diagnostiku § Neisserie jsou oxidáza pozitivní, moraxely také, ale mohou mít opožděnou reakci. § Moraxely se poznají podle pozitivního INAC testu § U INAC testu se postupuje jako u oxidázy, ale proužek je nutno zvlhčit a je nutno pět minut počkat. Zbarvení je modrozelené. Druhové určení neisserií § K druhovému určení neisserií se používají biochemické testy různé provenience, u nás zpravidla NEISSERIAtest § Poměrně málo biochemicky aktivní jsou obě patogenní neisserie: gonokok štěpí jen glukózu, meningokok jen glukózu a maltózu. Testy antibiotické citlivosti § Antibiotická citlivost se u patogenních neisserií určuje na půdách, na kterých jsou schopny růst, tj. nikoli na MH agaru § Lékem volby u meningokoka je stále klasický penicilin. Ten se osvědčuji i u gonokoka. Další možností jsou makrolidy, chinolony či ceftriaxon. Antibiotika užívaná u meningokokových infekcí Někde používají i E-test Antigenní analýza 8. Ostatní § Existuje ještě spousta většinou kultivačně náročných gramnegativních tyčinek, jejich význam však není velký. Zmiňme aspoň § Gardnerella vaginalis se podílí na nehnisavých tzv. poševních vaginózách. Pěstuje se na speciálním typu krevního agaru, kde dělá typickou hemolýzu. Mikroskopicky je to gramlabilní pleomorfní kokobacil. § Spirillum minus je původce horečky sodoku § Actinobacillus actinomycetemcomitans, původce infekcí připomínajících aktinomykózu a někdy ji i doprovázející § Rody Eikenella, Kingella, Cardiobacterium a některé další jsou vzácní původci infekcí Děkuji za pozornost