G-fermentující tyčinky Jana Juránková OKM FN Brno Čeleď Enterobacteriacae • Gram-negativní nesporulující tyčinky • Délka 2-3µm, tloušťka 0,5-0,8µm • Fakultativně anaerobní mikroby • Odolné vůči prostředí • Biochemicky aktivní • Komplexní antigenní struktura – Tělové O antigeny – Bičíkové H antigeny – Kapsulární K antigeny Čeleď Enterobacteriacae • Výskyt ve střevě obratlovců – Komenzálové – Saprofyté – Patogeny • Mimo střevo patogeny – Urogenitální systém – Dýchací systém – Rány – Sepse (urosepse) – Meningitidy Enterobacteriacae faktory patogenity • Endotoxin – Ukotven ve vnější membráně, uvolňuje se po rozpadu buňky • Fimbrie – Schopnost adheze • Exotoxiny – Hemolyziny – Enterotoxiny Enterobacteriacae laboratorní průkaz • Kultivace • Biochemická identifikace – Selektivní diagnostické půdy – Chromogenní agary – Biochemické testy • Antigenní analýza • Antibiogram • Diagnostika produkce betalaktamáz Enterobacteriacae epidemiologie • Přenos fekálně-orální cestou • Přenos potravinami • Endogenní infekce • Původci nozokomiálních infekcí Yersinia sp. • Obligátně patogenní • Gramnegativní tyčinky pohyblivá při nižších teplotách (25°C) • Množení při chladničkové teplotě • Kultivace půda CIN • Biochemické určení – štěpení močoviny • Antigenní struktura – určení typu O antigenů Yersinia pestis • Kultivačně nenáročná • Původce moru – Dýmějový mor – po štípnutí blechou morovou,zvětšené a kolikvované lymfatické uzliny – bubony, dýměje – Plícní mor – po vdechnutí yersinií – Septická forma – hematogenní šíření • Úmrtnost 75 – 95% Yersinia enterocolitica • Původce průjmů • Zdroj nejčastěji vepřové maso • Nejčastější sérotyp O3 Yersinia pseudotuberculosis • Afinita k lymfatickým tkáním kolem střeva • Imitace apendicitidy – bolesti břicha, horečky • Častěji u chlapů Rod Salmonella • Primárně antropopatogenní salmonely – S.Typhi – S.Paratyphi A, B, C • Primárně zoopatogenní salmonely – S.Typhimurium – S.Enteritidis – S.Infantis – atd., atd., atd. Antropopatogenní salmonely • Původce břišního tyfu a paratyfu • Vstupní brána GIT • Septické teploty • Bolesti hlavy (hlavnička) • Růžové skvrny na kůži • Průkaz přímý: hemokultivace • Průkaz nepřímý : Widalova reakce • Nosičství: žlučník Zoopatogenní salmonely • Nejčastější původce bakteriálních střevních nákaz • Velká odolnost vůči zevním vlivům • Inkubace 12 – 15 hodin • Časté průjmy bez krve • K infekci nutná vysoká infekční dávka (10^5-10^8). Diagnostika salmonelózy • Biochemické vlastnosti: štěpení manitolu, využívání citrátu, produkce H[2]S, štěpení glukózy za tvorby plynu • Kultivace – běžné půdy • Selektivně diagnostické půdy: biochemický klín,Endova půda, XLD, MAL,Hajnova půda • Pomnožení v selenitovém bujónu • Sklíčková aglutinace – určení sérovaru (pro epidemiologické studie) Rod Shigella • Čistě lidský patogen • Původce bacilární úplavice • Vodnaté průjmy s křečemi • Stolice obsahuje hlen, hnis i krev • Nízká infekční dávka (asi 100 bakterií) • Inkubační doba 3 – 7 dní Diagnostika shigelóz • Nepohyblivé gram negativní tyčinky • Rostou na běžných půdách • Biochemicky méně aktivní, při štěpení glukózy netvoří plyn • Antigenní identifikace podle O antigenů: – Shigella flexneri – Shigella sonnei – Shigella dysenteriae – Shigella boydii Rod Escherichia • Escherichia coli • Escherichia vulneris • Escherichia hermanii Escherichia coli • Dobře kultivovatelné • Biochemicky aktivní • Běžná součást střevní flóry • Symbiont: tvorba vitamínu K, produkce kolicinů • Podmíněně patogenní Diagnostika E.coli • Běžné kultivační půdy • Biochemie: produkce indolu, štěpí laktózu • Antigenní analýza (stolice novorozenců) aglutinací Patogenní působení ve střevě • Enteropatogenní E.coli: novorozenecké průjmy, sérotypy O55, O111, O126 • Enterotoxigenní E.coli: cestovatelské průjmy, produkce enterotoxinů, sekrece vody do střeva – vodnatý průjem • Enteroinvazivní E.coli: invaze do střevního epitele – krvavé průjmy Patogenní působení ve střevě • Shiga-like toxigenní E.coli – infekce podobná jako u shigel, vyvolávají krvácení ve střevě, vznik systémové infekce a hemolyticko uremického syndromu. Sérotyp O157:H7.Zdrojem infekce je hovězí dobytek. Antibiotická léčba vede k uvolnění toxinů.Kultivace McConkeyho agar se sorbitolem. Patogenní působení mimo střevo • Uropatogenní E.coli – nejčastější původce močových infekcí • Kmeny způsobující dýchací infekce • Sepse • Infekce ran • Novorozenecké meningitidy Rod Enterobacter • Součást střevní flóry – Enterobacter cloacae – Enterobacter aerogenes – Enterobacter sakazakii – Pantoea agglomerans • Infekce u oslabených pacientů Rod Klebsiella • Součást střevní flóry • Adaptovaná na život mimo střevo • Často opouzdřené • Časté nemocniční infekce – uroinfekce, infekce dýchacích cest • Polyrezistentní kmeny – Klebsiella pneumoniae – Klebsiella oxytoca Rod Serratia • Více ve vnějším prostředí • Typický původce nemocničních infekcí (dýchací cesty, infekce ran, sepse) – Serratia marcescens – Serratia rubidea (červený pigment) Rod Proteus • Mohutná biochemická aktivita • Výrazná pohyblivost – plazivý růst na pevných půdách (Raussův fenomén) • Výskyt ve střevní flóře, přizpůsobení k likvidaci organických zbytků • Při dysmikrobii ve střevě původce průjmů • Původce infekcí močových cest, infekce dekubitů, bércových vředů Rody Proteus, Providencia, Morganella • Proteus vulgaris • Proteus mirabilis • Morganella morganii • Providencia stuartii • Providencia alcalifaciens Rod Citrobacter • Podmíněný patogen ve střevě • Infekce močových cest, sepse – Citrobacter freundii – Citrobacter koseri Čeleď Vibrionacae Rod Vibrio • Rozšířené ve vodách v teplejším klimatu • Původce průjmových onemocnění (cholera) • Odolné vůči vyšším koncentracím NaCl (halofilní) • Odolné vůči vysokému pH (alkalofilní) pH10, v kyselém prostředí rychle hynou Vibrio cholerae • Původce cholerových průjmů • Pochází z Indie a Číny • Od r. 1962 probíhá 7. pandemie cholery • V našich zemích poslední r.1970 na východním Slovensku • V r.2002 2 importované případy z Indie a Thajska Vibrio cholerae • Krátké gramnegativní tyčinky, zahnuté do tvaru rohlíčku • Antigenní typizace podle O antigenu • Nejčastější O1 a O139 – vyvolávají epidemickou choleru • Všechna jiná vibria se označují jako nonO1/O139, neaglutinující vibria (NAG) Vibrio cholerae • Biotypy – liší se průběhem onemocnění – El Tor – asymptomatické případy, hemolyzuje – Klasický – cholera asiatica • Subtypy – Inaba, Ogawa, Hikojima • V.cholerae O1 způsobuje z plného zdraví objemné vodnaté průjmy s vločkami hlenu a sliznice (rýžová polévka), rychlá dehydratace, acidóza, smrt Vibrio cholerae • Diagnostika v akutním stadiu • Růst na běžných půdách – krevní agar • Selektivní půdy s thiosulfátem, citrátem, žlučí a sacharózou (TCŽS agar) • Množí se v alkalické peptonové vodě, růst v povrchové blance již za 6 hodin – mikroskopie • Aglutinace Rod Aeromonas • Izolovány z masa, mléka, ryb a plodů moře, z vody – Aeromonas hydrophila • Způsobují mírný průjem až po onemocnění podobné choleře • Infekce ran po kontaktu s vodou • Kultivačně nenáročná Rod Plesiomonas • Plesiomonas shigeloides • Izolace z vody, sladkovodních i mořských ryb • Způsobují průjmy a sepse Čeleď Pasteurellaceae • Gram negativní krátké tyčinky až koky • Nepohyblivé • Průkaz oxidázy Rod Pasteurella • Pasteurella multocida • Pasteurella aerogenes • Pasteurella canis Pasteurella multocida • Komenzál horních cest dýchacích u domácích zvířat • Lidské infekce spojené se zvířecím pokousáním nebo poškrabáním • Povrchové infekce kůže až abscesy a osteomyelitidy • Kultivace na krevním agaru Rod Haemophilus • Výskyt na sliznici nosohltanu, součást normální flóry • Gramnegativní drobné tyčinky pleomorfní • Fakultativně anaerobní, růst v atmosféře se zvýšeným obsahem CO[2 ](5-10%) • Závislost na růstových faktorech – X – hemin [– ]V - nikotinamidadenindinukleotid[] Rod Haemophilus • Růst na půdách s krví – čokoládový agar • Na krevním agaru – růst s čárou Staphylococcus aureus – satelitový fenomén – Haemophilus influenzae – Haemophilus parainfluenzae Rod Haemophilus Haemophilus influenzae • Původně považován za původce chřipky • Hlavní faktor virulence – pouzdro. Podle antigenní struktury pouzdra 6 sérotypů a-f. • Nejdůležitější H.influenzae b. Zavedeno očkování • Kolonizuje dýchací cesty, faringitidy, sinusitidy,epiglotitidy, sepse, meningitidy, otitidy, artritidy, perikarditidy Haemophilus influenzae • Diagnostika: • Odběr do transportní půdy, uchování při pokojové teplotě • Čokoládový agar, krevní agar s čárou Staphylococcus aureus • Disk s bacitracinem pro potlačení flóry HCD • Disky s růstovými faktory Haemophilus ducrey • Původce sexuálně přenosné choroby – měkkého vředu (ulcus molle)