LÉKAŘSKÁ FAKULTA MASARYKOVY UNIVERSITY Interní hematoonkologická klinika LF MU a FN Brno Centrum molekulární biologie a genové terapie Moderní metody analýzy genomu Aplikace II 28.4. 2011 Boris Tichý Aplikace nových technologií Protein kódující RNA Nekódující RNA – miRNA, snoRNA, lincRNA Analýza RNA Počet = digitální genová exprese Sekvence, struktura – mutace, sestřihové varianty Microarrays vs. NGS Pro NGS není bezpodmínečně nutné znát sekvenci RNA (microRNA) Expresní profily Soubor exprese všech/vybraných genů v určité tkáni (orgán, nádor,...) Porovnání vzorků navzájem Posouzení vlivu externího faktoru Reálné využití expresních profilů v medicíně Omezené Technické i interpretační problémy MammaPrint (70 genů) OncotypeDX (21 genů) – už > 150.000 pacientek Breast Cancer GC vs. ABC DLBCL Lymfomy Využití výzkum Integrace s dalšími metodami Chromatinová imunoprecipitace (ChIP) Bioinformatika (motivy, protein-protein interakce) Interpretace dat UP/DOWN geny Asociace mezi geny (transkripční faktory, miRNA, protein-protein,...) Příklad Gen TP53 → protein p53 Transkripční faktor, buněčný cyklus, apoptóza, DNA repair Otázka: Rozdíl mezi wt a mut TP53