Petr Breinek Nové metody Logo MU.jpg Nové metody_2012 2 Myeloperoxidáza (MPO) —Hemoprotein uskladněný v leukocytech —Je součástí obranného systému —Uplatňuje se v oxidaci lipidů obsažených v částicích LDL —Katalyzuje vznik oxidačních produktů kyseliny chlorné (HClO) z H2O2 a Cl- —Tyto produkty způsobují kromě poškození v místech nestabilitu aterosklerotického plátu — — Macrophage-01 neut1 a 3 Myeloperoxidáza c 4 Racek MPO10.jpg 5 6 PAPP-A(pregnancy associated plasma protein A) —Patří do skupiny inzulinu podobných růstových faktorů —Má metaloproteinázovou aktivitu —Podílí se na destrukci fibrózního krytu aktivovaného plaku 7 Cholin —Vzniká při lipolýze fosfolipidů v aktivovaném aterosklerotickém plaku —produkt aktivity fosfolipázy D (A2) v ischemické tkáni s hemodynamickou nestabilitou (štěpí membránový fosfatidylcholin na cholin a kyselinu fosfatidovou) —Koncentrace cholinu v krvi je úměrná aktivitě fosfolipázy D a aktivaci trombocytů —K vzestupu koncentrace cholinu v séru dochází při srdeční ischemii [Diagram of Phospholipases and Lipid Kinases] 8 Albumin N terminus Lidský Albumin v séru je protein s vazebným místem pro kovový kation na N-terminálním konci IMA Ischemií Modifikovaný Albumin Bar Or et al, European Journal of Biochemistry, 2001 N-terminální konec podléhá změnám během ischemie, dochází k jeho modifikaci, vzniká Ischemií Modifikovaný Albumin (IMA), který není schopen vázat kovové kationty na N-terminálním konci. Ischemia Modified Albumin = IMA HSA is the most common protein in blood. There is a metal binding site at the N-terminus of IMA – for transition metals copper, cobalt and nickel. It was discovered that exposure to ischemic tissue alters the end terminus of HSA in such a way that it can no longer bind metals. The conversion of HSA to IMA is mediated by free radical production (see later slides). The organ specificity (ie: to myocardial ischemia) is not well understood. 9 IMA —K vzestupu dochází již po několika minutách ischemie myokardu(ale i jiných orgánů), pokles k normě během 6 až 12h —Časné vyloučení ischemie u nemocných se stenokardiemi a nízkou prevalencí AKS —Analýza musí být dokončena do 2h po odběru krve —Fotometrická metoda:ACB test — 10 h-FABP srdeční typ proteinu vázajícího mastné kyseliny —Cytosolový protein, Mr=15kDa —Váže a transportuje mastné kyseliny (intracelulárně) —9 typů FABP —Srdeční forma (H-FABP) není orgánově specifická (také kosterní sval, střevo) —Diagnostická senzitivita a specifita je podobná jako u myoglobinu 11 sCD40L rozpustný CD40 ligand — —Protein buněčné membrány trombocytů —Při jejich aktivaci v destabilizovaných aterosklerotických placích je uvolňován do krve —Receptorový ligand je schopen spouštět zánětlivou reakci v cévním endotelu prostřednictvím sekrece cytokinů a chemokinů —Marker aktuální trombogenní aktivity cellular_platelets 12 sCD40L —Zvýšení sérového sCD40L je asociováno se zvýšeným rizikem budoucích možných kardiálních komplikací —Koncentrace sCD40L může identifikovat pacienty s narůstající nestabilitou plátu u diagnosy AKS současně s dalšími markery ischemie myokardu cellular_platelets 13 GP-BB Glykogenfosforyláza Isoenzym BB —3 izoenzymy: MM svalový — LL jaterní — BB mozkový (také v myokardu) —Vzniká v endoplazmatickém retikulu —Časný, ale nespecifický marker nekrózy —Při ischemii je intenzivnější glykolýza i glykogenolýza —Při AIM se uvolňuje z myokardu podobnou rychlostí jako myoglobin 14 Lp-PLA2 Fosfolipáza asociovaná s lipoproteiny — —Produkována makrofágy a pěnovými buňkami —80% na LDL a 20% na HDL —Podílí se na kaskádě zánětu —PLAC test (diaDexus) 15 LOCI 16 17 18 19 20