Ústav klinické imunologie a alergologie

                    Lékařská fakulta  MU a Fakultní nemocnice u sv. Anny v Brně


                   656 91  Brno, Pekařská 53, tel. 543 183 126, fax 543 183 143,



                       Výuka v jarním semestru 2012/2013 (18.2.- 31.5. 2012)


Studijní program:  bakalářské studium – specializace ve zdravotnictví

Obor:                       zdravotní laborant

Předmět:                klinická imunologie


                                              CVIČENÍ


                                                              1. skup.: pondělí  10.00 – 12.30

                                                              2.skup.: pondělí   13.00 – 15.30

                                                        učebna ÚKIA, budova K (IV. poschodí)



1.                         Organizační struktura klinické imunologické laboratoře.

                             Zásady bezpečnosti práce v imunologických laboratořích.

                             Odběr, zasílání, uchovávání a evidence biologického materiálu

                             k imunologickému vyšetření.

                             Příprava séra, plasmy, buněčných suspensí.


2.                         Protilátky jako základní reagens při imunologických metodách.

                             Příprava diagnostických protilátek. Polyklonální imunoglobuliny:

                             imunizace zvířat, izolace imunoglobulinů ze séra, standardizace.

                             Monoklonální protilátky: základní principy přípravy, analytické

                             možnosti, příklady běžně používaných preparátů.

                             Základní charakteristika reakce antigen-protilátka. Avidita a

                             afinita protilátek.


3.                         „Klasické“ sérologické reakce.

                             Precipitace v roztoku a gelu. Ouchterlonyho technika, radiální

                             imunodifúze. Aglutinace přímá a nepřímá.

                             Průkaz komplementfixačních a neutralizačních protilátek.

                             Ředění séra, titr, arbitrární a mezinárodní jednotky (A.U., I.U.).

                             Sensitivita a specificita diagnostických testů.


4.                         Nefelometrie a turbidimetrie v imunologické laboratoři. Využití

                             při vyšetřování koncentrací imunoglobulinů, složek

                             komplementového systému, proteinů akutní fáze.


5.                         Vyšetřování monoklonálních gamapatií: Imunoelektroforéza.

                             Imunofixace.

                             Imunoblotové techniky (Western-blot) a jejich využití při analýze

                             protilátkové odpovědi (diagnostika infekce HIV,  boreliózy,

                             systémových chorob pojiva).


6.                         Imunoeseje:  RIA, EIA, FIA, LIA. Metodiky přímé a nepřímé.

                             Značené protilátky, detekční substráty. Hodnocení výsledků.




7.                         Praktické provedení ELISA testu: séra s nízkou koncentrací IgM,

                             specifické protilátky proti laktoglobulinu v IgG a v IgA.


8.                         Imunofluorescence přímá a nepřímá. Využití při diagnostice

                             autoimunitních chorob: obrazová demonstrace.

                             Imunofluorescenční průkaz „antinukleárních protilátek“.


9.                         Vyšetření komplementového systému: CH50, AH50, složky

                             komplementu (C3, C4, C2, C1-INH).

                             Spontánní aktivace C- systému u pacientů s HAE.


10.                       Průtoková cytometrie.  Imunofenotypizace lymfocytů.

                             Průkaz antigenů HLA (HLA-B27).


11.                       Funkční testy na průtokovém cytometru: fagocytóza, aktivace

                             basofilů.

                             Produkce protilátek in vitro -  ELISPOT.


12.                        Vyšetření fagocytózy:   NBT (INT)- test. Chemiluminiscence.

                              Mikrobicidní testy.


13.                        Vyšetření  funkčních schopností  lymfocytů in vitro: Izolace

                              lymfocytů  z periferní krve. Separace centrifugací na základě

                              vznášivé hustoty.  Proliferační testy. Cytotoxické testy.


14.                        Rekapitulace, závěrečný test.


15.                       Zápočet



Prof. J. Litzman, ÚKIA LF MU