Ing. Ivana Imrichová
i.imrichova@gmail.com
Výživová poradna Viviente

C:\Documents and Settings\Ivuska\Dokumenty\Stažené soubory\1-human-gi-tract.jpg
}Trávení a vstřebávání
}Obrana hostitele:
◦Mikroflóra
◦Bariéra střevní sliznice
◦Místní imunitní systém (GALT – gut associated lymphoid tissue)
◦

}Soubor MO, které jsou přítomny v trávicím traktu zdravého člověka a jsou v určité kvalitativní a
kvantitativní rovnováze
}GIT pravděpodobně obsahuje u dospělého člověka 1014 životaschopných buněk(= 10x více než
eukaryotických buněk ve všech tkáních lidského těla)
}Střevní trakt:1-2 kg mikroorganismů = 60% hmoty stolice
}Doba průchodu bakterií GIT u zdravých osob: 55 až 72h
◦z toho 4-6h od úst ke slepému střevu
◦54-56h v tlustém střevě.
}

(Holzapfel, a kol., 1998)
(Turek, a kol., 2009)
(Bourlioux, a kol., 2003)

}Střevní mikroflóra → vliv na funkci střev → možný vliv na fyzické a duševní zdraví hostitele
}Změna životního stylu, změna stravování, zvýšený stres, antibiotika  - způsobují porušení
rovnováhy střevní mikroflóry
}Snaha změnit složení mikroflóry, aby bylo potenciálně prospěšné

good-and-bad-bacteria.jpg
}Normobióza – stav, kdy převládají bakterie příznivé pro zdraví nad bakteriemi patogenními
}Dysbióza – pokud převládá nefyziologická mikrofóra a tím vytváří podmínky pro rozvoj nemocí
}

}
}
}
Bourlioux, a kol., 2003

}Z řeckého „pro bios“ = „pro život“
}
}Probiotika jsou živým doplňkem stravy, který příznivě ovlivňuje zdraví hostitele zlepšením
rovnováhy jeho střevní mikroflóry (Fuller, 1989).
}
}Probiotika jsou živé mikroorganismy, které mají při konzumaci v dostatečném množství prospěšné
účinky na zdraví konzumenta (FAO/WHO 2002).

}První zmínka o blahodárném působení KMV – stará více než 2 tis. Let.
}
}Ilja Mečnikov (1845 – 1916)
◦Autor teorie antibiózy – tj. potlačování růstu a jiných životních projevů jednoho MO jiným MO
◦Věřil, že konzumace kysaných výrobků (lactobacily) obnovuje prospěšnou skladbu střevní mikroflóry
a zlepšuje trávení
}Albert Siegmund Gustav Döderlain (1860 – 1941)
◦Navrhl použít vaginální bakterie produkující kyselinu mléčnou k inhibici růstu patogenních
bakterií.
◦Tento typ „přátelských bakterií“ dostal později název probiotika
}
◦

}Formy probiotických výrobků
◦Zakysané mléčné výrobky (jogurty, jogurtová mléka, zákysy, kefíry)
◦Dětská výživa
◦Některé fermentované masné nebo cereální výrobky, nakládaná zelenina
◦Funkční potraviny
◦Volně prodejné preparáty obsahující lyofilizované bakterie (doplňky stravy a léčiva)
◦
◦Mohou být jednosložkové nebo vícesložkové
}
}

}Jako probiotika jsou používány především bakterie rodu Bifidobacterium, Lactobacillus a kvasinky,
ale také další druhy
}

}Působit blahodárně na hostitele.
}Být nepatogenní a netoxická.
}Být schopna přežití a metabolizace v trávicím traktu – rezistentní vůči nízkému pH, organickým
kyselinám a trávicím enzymům.
}Být přilnavá k epitelovým buňkám.

}Být schopna se rychle množit a trvale nebo dočasně kolonizovat trávicí trakt.
}Obsahovat velké množství životaschopných buněk.
}Zachovat si životaschopnost během skladování a používání.
}Mít dobré senzorické vlastnosti.
}Být izolována ze stejného druhu jako jejich plánovaný hostitel.
}

}Probiotika zůstávají v GIT po různě dlouhou dobu
}
}Nejvhodnější podmínky pro růst a kolonizaci: terminální část kyčelníku a tlusté střevo

}Probiotický efekt se projeví, pokud zůstanou bakterie živé dostatečně dlouhou dobu a v dostatečně
velkém množství (106 – 108  KTJ/g intestinálního obsahu)
}
}Nutná pravidelná konzumace (denní dávka 109 – 1011 KTJ)
}
}Množství se snižuje s věkem
}

}1) kontinuální konzumace preparátů nebo potravin obsahující probiotické bakterie
}
}2) konzumace potravin nebo přípravků, které podporují růst probiotických bakterií ve střevě
(bifidogenní substráty nebo prebiotika)

probiotic_fate
University of Copenhagen, Diet and Health, Rikke Gobel, 2009


1)Modulací obrany hostitele (vrozené i získané imunity)
◦Probiotika chrání střevo kompeticí s patogeny o navázání na sliznici střeva, posílením těsného
spojení erytrocytů a zlepšením slizniční imunitní odezvy vůči patogenům
2)Přímým působením na jiné mikroorganismy, komenzální nebo patogenní
◦Produkcí SCFA, bakteriocinů
3)Inaktivace toxinů, detoxikace hostitele
}Pravděpodobně neexistuje probiotický organismus, který by působil všemi 3 mechanismy dohromady
}

Rod
Druh
Rod
Druh
Lactobacilli
Lactobacillus acidophilus
Bifidobacteria
Bifidobacterium bifidum
Lactobacillus rhamnosus
Bifidobacterium longum
Lactobacillus reuteri
Bifidobacterium breve
Lactobacillus casei
Bifidobacterium adolescentis
Lactobacillus gasseri
Bifidobacterium infantis
Lactobacillus plantarum
Enterococci
Enterococcus faecalis
Lactobacillus johnsonii
Enterococcus faecium
Lactococci
Lactococcus lactis subsp. lactis
Kvasinky
Saccharomyces boulardii
O´Grady a Gibson, 2005

}Osídlují trávicí trubici
}Gram-pozitivní, nepohyblivé, nesporulující tyčinky rozmanitého tvaru
}Většina z nich je striktně anaerobní
}Produkují převážně kyselinu octovou a mléčnou → snížení pH → antimikrobiální efekt
}Produkce vitaminů skupiny B
}Optima pro růst: 25–45 °C (bifidobakterie lidského původu 36-38 °C); pH 6,5-7,0
}
}

}I ve volné přírodě, často součástí potravy
}Gram-pozitivní, nepohyblivé, nesporulující tyčinky se zaoblenými konci
}Fakultativně anaerobní
}Produkce kyseliny mléčné
}Optimální růst: 30-40 °C; pH 5,5-6,2
L__acidophilus.gif

Prokázané účinky
Částečně prokázané účinky
Potenciální účinky
Idiopatický střevní zánět
Pouchitida4
Crohnova choroba2,4
   Chronická pouchitida1
Cestovní průjem2,3
Ulcerózní kolitida2
   Ulcerózní kolitida1
Epizodické průjmy3
Pouchitida2
Střevní infekce
   Akutní průjem2
   Klostridiová kolitida3
   Průjem způsobený antibiotiky3
1 Prevence recidivy
2 Léčba
3 Prevence
4 Pooperační prevence
Hutkins, 2006

Prokázané účinky
Potenciální účinky
Zmírnění symptomů laktózové intolerance
Zmírnění symptomů IBD
Léčba průjmu rotavirového původu
Zmírnění symptomů IBS
Léčba kojeneckých enteritid
Zlepšení zácpy
Léčba průjmu způsobeného antibiotiky
Antimutagenní/antikarcinogenní činnost
Zmírnění symptomů atopické dermatitidy u dětí
Léčba kandidových a bakteriálních vaginóz
Snižování biomarkerů (škodlivé fekální enzymy)
Snižování cholesterolu a krevního tlaku
Modulace střevní mikroflóry
Eradikace multirezistentních mikrobů
Modulace imunity
Kontrola infekce
Pozitivní efekt na rakovinu žlučníku a děložního hrdla
Prevence přenosu AIDS a sexuálně přenosných nemocí
Fondén, a kol., 2003

}Prevence zánětů horních cest dýchacích (2011)
}Prevence dětských průjmů způsobených antibiotiky (2011) – Lactobacillus rhamnosus a Saccharomyces
boulradii
}Možná prevence kolitid způsobených Clostridium difficile u dospělých (2008)
}Zkrácení doby akutních infekčních průjmů cca o 25 hodin, snížení počtu stolic, snížení rizika
průjmů trvajících 4 a více dní o 59 % (2010)
}Zkrácení doby perzistentních průjmů u dětí, snížení počtu stolic, zkrácení doby hospitalizace
(2010)
}

}Snížení výskytu nekrotizující kolitidy a úmrtí u předčasně narozených dětí s porodní váhou
1000–1500 g (2011)
}Možný efekt při léčbě pouchitidy (2010)

}Nedostatečná databáze nebo neprokázaný efekt při:
}Léčbě akutní formy Crohnovy choroby (2008)
}Udržení remise Crohnovy choroby (2008)
}Léčbě aktivního průběhu ulcerózní kolitidy (2008)
}Udržení remise ulcerózní kolitidy (2011)
}
}

}Nedostatečná databáze nebo neprokázaný efekt při:
}Prevenci alergií a hypersenzitivity na potraviny u dětí (2009)
}Léčbě ekzému (2008)
}Prevenci opakovaných vaginóz před, během nebo po užívání antibiotické léčby (2009)
}Hepatické encefalopatii (2011)
}

}Infekce
◦Bakteriémie (Lactobacillus): 12 případů
◦Fungémie (Saccharomyces boulardii): 24 případů
}Zdraví škodlivé metabolické aktivity
}Přehnaná stimulace imunitního systému
}Transfer genů

}Bakterie střevní mikroflóry produkují vitamíny řady B (B1, B2 ,B6, B12, niacin, kyselina listová a
panthotenová) a vitamin K.
}Proto je třeba opatrnosti hlavně u pacientů užívajících perorální antikoagulancia (Warfarin), u
kterých je nutný stabilní přívod vlákniny a opatrnost při antibiotické léčbě.

1)Identifikace a charakterizace kmene
–Poté uložen do mezinárodní sbírky MO
2)Testování in vitro a na zvířatech
–Rezistence vůči kyselinám, žluči, adherence
3)Prokázání bezpečnosti kultury
–In vitro, na zvířatech, dobrovolníci
–Dvojitě zaslepené randomizované placebem kontrolované studie, nejlépe 2 opakování
4)Výroba probiotické potraviny
–Skladování, doba trvanlivosti, koncentrace živých buněk
5)
}- Probiotické kmeny musí přežívat až do konce spotřební doby!!

}Výrobek získaný kysáním mléka, smetany, podmáslí nebo jejich směsi za použití MO mléčného kysání,
tepelně neošetřený po kysacím procesu (Vyhláška č. 77/2003 Sb)
}
}Laktóza se díky beta-galaktosidáze  (produkt BMK) za anaerobních podmínek přeměňuje na kyselinu
mléčnou

}Skladováním mléka v různých oblastech
}Mírné pásmo:
◦zakysané mléko (mezofilní BMK)
}Subtropy:
◦klasický jogurt (termofilní BMK)
}Východní Evropa, centrální Asie, Zakavkazsko:
◦kefíry, kumys (BMK + kvasinky)

Název kysaného výrobku
Použitá kultura
Mléčná mikroflóra výrobku v 1 g
Acidofilní mléko
Lactobacillus acidophilus a další mezofilní, příp. termofilní kultury bakterií mléčného kvašení
106 Lactobacillus acidophilus
Jogurty
Protosymbiotická směs Streptococcus salivarius subsp. thermophilus a Lactobacillus delbrueckii
subsp. bulgaricus
107
Kysané mléko vč. smetanového zákysu, podmáslí a kysané smetany
Monokultury nebo směsné kultury bakterií mléčného kvašení
106
Kefír
Zákys připravený z kefírových zrn, jehož mikroflóra se skládá z kvasinek zkvašujících laktózu
Sacharomyces unisporus, Sacharomyces cerevisiae, Sacharomyces exignus a dále Leuconostoc,
Lactococcus a Aerobacter, rostoucí ve vzájemném společenství
BMK 106 a kvasinky 104
Kefírové mléko
Zákys skládající se z kvasinkových kultur rodu Kluyveromyces, Torullopsis nebo Candida valida a
mezofilních a termofilních kultur bakterií mléčného kvašení v symbióze
BMK 106 a kvasinky 102
Kysaný mléčný výrobek s bifido-kulturou
Bifidobacterium sp. v kombinaci s mezofilními a termofilními bakteriemi mléčného kvašení
106 bifidobakterie

}Jogurt je kysaný mléčný výrobek získaný kysáním mléka, smetany, podmáslí nebo jejich směsi pomocí
mikroorganismů uvedených v předchozí tabulce
}
hollandia.jpg jogurt jihocesky.jpg jogurt klasik.jpg

}Úprava tučnosti mléka
}Homogenizace
}Pasterace (85 – 95 °C, 5 minut)
}Rychlé ochlazení na teplotu fermentace ( 30 – 40 °C)
}Přídavek jogurtových kultur
}Zrání (fermentace)

}Zrání ve spotřebním obalu
}Teplota  40 – 45 °C, 2 – 4 hodiny
}Ochlazení (zastavení fermentace)
}Expedice
}
}Pravý jogurt:
◦Bílá barva, hladký povrch, jemná konzistence
◦Při obrácení kelímku nevyteče
◦Po vložení lžíce si zachovává jemnou konzistenci

}Zrání ve zracím tanku
}Teplota 30 °C, 16 – 18 hodin
}Poté se koagulát rozmíchá, vychladí a plní se do obalů
images (2).jpg

stažený soubor.jpg hylak.jpg lepicol.jpg
}Perorální: Sirupy, roztoky, tobolky, prášky, kapky, cucavé tablety
}Pro lokální aplikaci: vaginální čípky a tablety
}

}Registrovaná probiotika:
◦Např. Enterol – ve 250 mg Saccharomyces boulardii = nejméně 1x109 CFU/v tabletě nebo sáčku
◦
}Doplňky stravy:
◦Většinou 1 až 10x109 CFU
◦Apo-Lactobacillus 10+ obsahuje 12x109 CFU/ tableta
◦Lepicol 2x109 CFU/dávka
◦
}Kysané mléčné výrobky:
◦Actimel 1x1010 CFU/1 lahvička (100 ml) (Lb. casei)
◦Activia 4,25x109 CFU/1 kelímek (120 g) (B. animalis)
◦Hollandia  2x1010 CFU/1 kelímek (200g) (Bifidobacterium, Lb. acidophilus)

}EFSA nepotvrdil tvrzení o pozitivním účinku probiotických mikroorganismů na trávicí trakt.
}Většina tvrzení se týká potlačování potenciálně patogenních střevních mikroorganismů, zlepšování
průchodu střevy, posilování imunitního systému, popřípadě jiných funkcí.
}Tvrzení byla zamítnuta převážně z důvodů nezřetelné identifikace příslušné látky a nedostatku
informací o látce,  proto panel NDA nemohl prověřit zda se vědecký důkaz poskytnutý EFSA týká
stejné látky, pro kterou se uvádí zdravotní prospěch.
}

}Léčba širokospektrálními antibiotiky → vznik dysmikrobie → průjem u 5 – 25 % nemocných
}Probiotika prokazatelně snižují výskyt průjmů, které jsou vyvolány antibiotickou léčbou
}Především u pacientů, kteří v minulosti prodělali průjem způsobený konzumací antibiotik, ale i u
pacientů, kteří problémy neměli
}Probiotika by se neměla podávat pacientům, kteří mají závažnou imunodeficienci
}Dlouhodobé užívání ATB - Saccharomyces boulardii - rezistentní na běžná ATB

}Probiotika by se měla užívat během léčby antibiotiky a týden po ukončení léčby
}Největší přínos probiotik: pokud bylo zahájeno užívání do 72 hodin od započatí léčby ATB
}Vhodná aplikace ve 2/3 doby mezi aplikacemi jednotlivých dávek ATB
}V množství nejméně 50 bilionu CFU
}

} = nestravitelné složky potravy, které příznivě ovlivňují hostitele selektivní stimulací růstu
a/nebo aktivity jedné bakterie nebo omezeného počtu střevních bakterií, a tím zlepšují stav
hostitele
}Fruktooligosacharidy – inulin, oligofruktóza
}Oligosacharidy mateřského mléka
}Laktulóza, galaktooligosacharidy, isomaltooligosacharidy, xylooligosacharidy

}Nesmí být hydrolyzovatelné ani absorbovatelné v horní části zažívacího ústrojí.
}Musí být selektivním substrátem pro jeden nebo omezený počet druhů střevu prospěšných komenzálních
bakterií, které jsou stimulovány k růstu anebo k metabolické aktivitě.
}Musí být schopné upravit střevní flóru ve prospěch zdravějšího složení.
}Musí vyvolat luminální nebo systematické efekty, které jsou příznivé pro zdraví hostitele

}V banánech, ječmeni, čekance, česneku, Jeruzalémském artyčoku, pórku, cibuli a ovsu.
}Extrahován bývá z kořene čekanky, Jeruzalémského artyčoku, jiřinek a pampelišek
}

Zdroj
Jedlá část
Inulin (g/100 g)
Oligofruktóza (g/100 g)
Čekanka
Kořen
35,7 – 47,6
19,6 – 26,2
Česnek
Cibulová hlíza
9,0 – 16,0
3,6 – 6,4
Pór
Cibulová hlíza
3,0 – 10,0
2,4 – 8,0
Cibule
Cibulová hlíza
1,1 – 7,5
1,1 – 7,5
Chřest
Listy
2,0 – 3,0
2,0 – 3,0
Pšenice
Zrno
1,0 – 4,0
1,0 – 4,0

5_INULIN.jpg
}
}
}
stažený soubor (1).jpg images (1).jpg

}Produkt, který obsahuje současně probiotika i prebiotika
}U produktů, kde prebiotické látky selektivně podporují probiotické komponenty
}Např. jogurt s obsahem probiotických bakterií společně s prebiotickou oligofruktózou

ovofit.jpg bifiplusinulin_MED.jpg lepicol.jpg



Bifidobacterium.jpg



hollandia.jpg
}Jogurt bílý selský s probiotickou kulturou BIFI, 200g/den (Bifidobacterium, Lb. acidophilus)
◦mléko, mléčná bílkovina, živá jogurtová kultura, probiotická kultura Bifidobacterium,
Lactobacillus acidophilus, obsah tuku nejméně 3,5 %.
◦Obsahuje nejméně 100 milionů živých mikroorganismů v 1 g.
}Výrobce udává, že pravidelná konzumace jogurtů s přídavkem probiotických kultur příznivě ovlivňuje
složení střevní mikroflóry.
}
}

5_INULIN.jpg
}Inulin 5g/den (90% inulin, 10% oligosacharidy)
}
}Použití: do kávy, čaje, džusu, nealkoholických nápojů, jogurtů, pudinků a polévek
}Výrobce graficky znázorňuje změnu střevní mikroflóry před užitím a po užití:
◦Před užitím: 30 % bifidobakterie,
◦   70 % patogenní bakterie
◦Po užití: 70 % bifidobakterie,
◦   30 % patogenní bakterie
}
}

}Vzorek lidských exkrementů dodaný ve sterilním plastovém kontejneru s lopatkou pro odběr stolice,
řádně označený.
}
}24 zdravých dobrovolníků
◦Ženy, 22 až 45 let
◦Bez zažívacích obtíží, nemocí střev, průjmů, laktózové intolerance, atd.
◦Bez užívání antibiotik v průběhu a měsíc před experimentem
◦Běžná výživa
◦Neužívat projímadla, nadměrné množství alkoholu
◦Bez velkých změn fyzické aktivity
◦
◦Poučení, souhlas
}

Bez názvu.bmp



}1 g vzorku + 99 ml sterilovaného fyziologického roztoku
}homogenizace (90 vteřin)
}ředění
}zalití inokula (1 ml) živnou půdou BSM se suplementem
}ztuhnutí půdy
}kultivace v anaerostatu 37°C,125 hodin
}odečítání kolonií
}vyhodnocení výsledků
}
}ANOVA – testování shodnosti středních hodnot jednotlivých výběrů (nárůstů v rámci skupiny)
}
}

foto bifi.bmp



}Během konzumace probiotických jogurtů, obsahujících rod Bifidobacterium, dojde ke zvýšení obsahu
těchto bakterií ve vzorcích stolice
}Po ukončení konzumace dojde k opětovnému poklesu
}Po přídavku inulinového prášku v množství 5 gramů denně by měl inulin selektivně podpořit růst
bifidobakterií v tlustém střevě → zvýšení počtu bifidobakterií ve stolici
}
}







}Po konzumaci probiotických jogurtů došlo k mírnému nárůstu počtu bifidobakterií, tento nárůst však
nebyl dostatečný na to, aby mohl být pokládán za průkazný.
}Po ukončení konzumace jogurtů došlo k poklesu množství bifidobakterií.
}Nepatrné zvýšení bifidobakterií po přídavku inulinu, které není statisticky průkazné.
}Po ukončení konzumace jogurtů s přídavkem inulinu došlo k poklesu bifidobakterií.
}Z této práce nevyplývá, že by měla konzumace jogurtů  nebo inulinu prokazatelně pozitivní vliv na
nárůst množství bifidobakterií ve střevě.
}
}

}
bakterie.bmp