Patofyziologie nemocí kostí a kloubů 29. 3. 2017 Kostní remodelace  Aktivace osteoklastů  Resorbční fáze- v důsledku aktivace osteoklastů- krátká  Reverzní fáze- kostní povrch je pokryt mononukleáry, ale novotvorba kosti dosud nezačala- krátká  Formační fáze- produkce osteblastů ve vlnách v kostní matrix- dlouhá. Tyto buňky se postupně seřadí, proniknou do kosti jako osteocyty a podlehnou apoptóze. Místní a systémové růstové faktory  Nerovnováha v remodelaci, charakterizovaná zhoršenou tvorbou kosti, je podstatnou složkou patogeneze osteoporózy.  To je dáno alespoň zčásti poklesem kapacity replikační a diferenciační schopnosti osteoblastů způsobeným věkem.  Účast specifických defektů v produkci a aktivitě místních i systémových růstových faktorů. RANK RANKL Osteoprotegerin A: Oestrogen replete state. Osteoclasts are formed by interaction between macrophagic, monocytic precursor cells and cells of the osteoblast lineage, but might also be initiated by inflammatory cells, especially T cells. Osteoclasts express receptor activator of NFκB (RANK). The RANK ligand (RANKL) enhances each of these steps whereas osteoprotegerin, a decoy receptor, blocks this interaction. B: Oestrogen deficient state. Important bone sparing effects of oestrogen take place via modulation of bone cell lifespan and reduced cytokine-driven osteoclastogenesis. In the absence of oestrogen, the pool of T cells secreting tumour necrosis factor is expanded through a mechanism involving reduced transforming growth factor β. Additionally, monocytes secrete increased amounts of interleukin-1. Tumour necrosis factor stimulates M-CSF (macrophage colony-stimulating factor) and RANKL production and acts on osteoclast progenitors primed by RANKL, to heighten osteoclast generation. RANKL and interleukin-1 also act to increase osteoclast survival by preventing apoptosis. As a result, in oestrogen deficiency, the number of functional basic multicellular units in bone is substantially increased. This model is based predominantly on studies in ovariectomised animals. Receptor aktivátor NF-B (RANK), jeho ligand (RANKL) a osteoprotegerin (OPG)  Vyřešena interakce mezi osteoklastickými a osteoblastickými liniemi. Účastní se jí tři členové rodiny TNF a receptorů pro TNF. Osteoblasty produkují RANKL, ligand pro receptor aktivátor pro NF- B (RANK) na hemopoetických buňkách. Tento receptor aktivuje jejich diferenciaci a udržuje jejich funkci.  Osteoblasty produkují a sekretují osteoprotegerin (OPG), receptor, který blokuje interakci RANKL/RANK. RANK-RANKL signální cesta, inhibice vazby RANK-RANKL osteoprotegerinem (OPG) TNF receptor-associated factor Gene Mutation Disease RANK 18 bp duplication Familial expansile osteolysis 27 bp duplication Early onset Paget’s disease 15 bp duplication Expansile skeletal hyperphosphatasia RANKL Deletion of amino acids 145-177 Autosomal recessive osteopetrosis A single nucleotide change (596T-A) in exon 8 of both alleles Autosomal recessive osteopetrosis Deletion of two nucleotides (828_829delCG) Autosomal recessive osteopetrosis OPG Deletion making OPG inactive Juvenile Paget’s disease 20 bp deletion resulting in premature termination of OPG translation Juvenile Paget’s disease Molekulární charakteristiky triády OPG/RANK/RANKL  RANKL náleží k rodině TNF. Tři izoformy (RANKL1, RANKL2 a RANKL3-solubilní.  Membránově vázaný RANK a solubilní OPG patří do rodiny receptorů pro TNF. OPG je „lákající“ receptor pro zábranu vazby RANKL na RANK. Receptor aktivátor NF- B (RANK), jeho ligand (RANKL) a osteoprotegerin (OPG)  Stimulátory resorbce kosti zvyšují expresi RANKL v osteoblastech a některé také snižují expresi OPG. Kostní buňky exprimují membránově vázanou formu RANKL, a proto musí osteoblasty vstupovat do fyzikální interakce s osteoklastickými prekurzotry , aby došlo k aktivaci RANK.  Solubilní RANKL mohou produkovat aktivované T- lymfocyty.  Hladiny OPG rostou s věkem  Polymorfismy v genu pro OPG byly asociovány s osteoporotickými frakturami a rozdíly v kostní denzitě. RANKL a osteoprotegrin (OPG) jako konečné efektorové cytokiny u maligních nemocí skeletu (k předchozímu obrázku).  1) Interakce RANKL s RANK podporuje diferenciaci a aktivaci osteoklastů  2) Aktivované osteoklasty způsobují humorální hyperkalcémii u malignit, osteolytických metastáz, patologických fraktur a u bolestí spojených s malignitou  3) OPG funguje jako receptor, který neutralizuje RANKL, čímž zabraňuje jeho vazbě s RANK.  RANKL a osteoprotegrin (OPG) jako konečné efektorové cytokiny u maligních nemocí skeletu (k předchozímu obrázku).  4) Mnohé růstové faktory, cytokiny a hormony konvergují na úrovni RANKL a OPG a regulují diferenciaci a aktivaci osteoklastů. Il-1 a TNF podporují produkci RANKL a OPG, zatímco PTH, PTHrP a glukokortikoidy podporují produkci RANKL, ale snižují produkci OPG  5) V malém rozsahu jsou IL-1 a TNF schopny modulovat diferenciaci a aktivitu osteoklastů nezávisle na RANKL a RANK. Poměr RANKL k osteoprotegrinu (OPG) u pacientů s maligním kostním onemocněním  Normální stromální buňky zajišťují stabilní poměr RANKL/OPG, který je nutný pro adekvátní kostní remodelaci.  Stromální buňky odvozené z obrovských tumorózních buněk zvýšeně exprimují RANKL, což má za následek zvýšení poměru RANKL/OPG s následným excesivním vývojem velkých polynukleárních osteoklastů.  Myelom a některé formy karcinomu prsu produkují PTHrP, který indukuje RANKL a inhibuje OPG, což favorizuje osteolýzu a hyperkalcémii během maligního onemocnění.  Opačný vývoj u rakoviny prostaty, který favorizuje spíše možnost rozvoje osteoblastického potenciálu. OPG/RANK/RANKL jako společný efektor v kosti, imunitním systému a v cévním systému (k předchozímu obrázku.  OPG, RANK a RANKL jsou selektivně produkovány četnými buněčnými typy v různých tkáních: lymfocyty, osteoblasty a endoteliálními buňkami.  RANKL funguje jako faktor přežití pro dendritické buňky a jako osteoklastogenetický faktor po vazbě na RANK.  OPG inhibuje osteolýzu a blokuje interakci RANKL/RANK.  OPG/RANKL/RANK triáda se považuje za osteoimmunomodulační komplex. Parathyroid Hormone Relation Peptide (PTHrP)  PTHrP byl objeven jako mediátor syndromu "humoral hypercalcemia of malignancy" (HHM).  Při tomto syndromu dochází u různých typů rakovin, obvykle v nepřítomnosti kostních metastáz, k produkci látek podobných PTH, které mohou způsobit biochemické abnormality jako  Hyperkalcémie  Hypofosfatémie  Zvýšená exkrece cAMP močí  Tyto účinky se podobají účinku PTH, ale objevují se v nepřítomnosti detekovatelných cirkulujících hladin PTH. Účinky PTHrP  PTHrP působí na  Iontovou homeostázu  Relaxaci hladkých svalů  Buněčný růst, diferenciaci a apoptózu.  Normální kalciovou homeostázu ve fetálním období Většina fyziologických efektů se děje způsobem parakrinním/autokrinním. V dospělosti je homeostáza Ca a P pod vlivem PTH, zatímco hladiny PTHrP jsou u zdravých dospělých velmi nízké až nedetekovatelné. To se mění při vzniku neoplasmat konstitutivně produkujících PTHrP, kdy PTHrP napodobuje účinky PTH na kost a ledviny a rozvíjející se hyperkalcémie inhibuje endogenní sekreci PTH. Účinky PTHrP na  Buněčný růst, diferenciaci a apoptózu v mnohých fetálních i dospělých tkáních. Největší účinky má na kost. Největší změny na chrupavčitých růstových ploténkách, kde v nepřítomnosti PTHrP dochází k redukci proliferace chondrocytů s akcentací diferenciace a apoptózy chondrocytů  Normální vývoj chrupavčité růstové ploténky. Ve fetálním období PTH hraje dominantně anabolickou roli ve vývoji trabekulární kosti. PTHrP reguluje vývoj růstové ploténky.  Postnatálně PTHrP jako parakrinní/autokrinní regulátor přebírá anabolickou roli pro homeostázu kosti, kdežto PTH především udržuje hladinu Ca++ v ECT prostřednictvím resorbce kostí. Genetické rodiny PTH a PTHrP: PTHrP, PTH and TIP39 jsou zřejmě členy jedné genetické rodiny. Jejich receptory PTH1R a PTH2R jsou 7 transmembránovými G proteincoupled receptory. Produkce látek resorbujících kost nádorem. Nádorové buňky uvolňují proteázy, které mohou podporovat progresi tumoru přes nemineralizovanou matrix. Tyto buňky mohou uvolňovat také PTHrP, cytokiny, eikosanoidy a růstové faktory ( EGF), které mohou stimulovat osteoblastické stromální buňky k tvorbě cytokinů jako M-CSF a RANKL. RANKL se může vázat na svůj receptor RANK na osteoklastických buňkách a zvyšovat produkci a aktivaci mnohojaderných osteoklastů, které jsou schopny resorbovat mineralizovanou kost. Produkce PTHrP regulovaná růstovým faktorem (GF) v tumorózních stavech. Tumorózní buňky jsou schopny být na vzdálenost (mimo kost) stimulovány autokrinními růstovými faktory ke zvýšené produkci PTHrP. Ten se dostává cirkulací do kosti a podporuje resorbci kosti. Metastatické tumorové buňky v kosti jsou schopny sekretovat PTHrP, podporující resorbci kosti a sekreci parakrinních růstových faktorů, které dále udržují produkci PTHrP. Stavy spojené s hyperparathyreoidismem - osteodystrofie  Primární hyperparathyreoidismus je následkem onemocnění příštitných tělísek, nejčastěji adenomu.  Příznaky: chronická hypekalcémie, nefrokalcinóza, osteodystrofie jako projev excesivní kostní remodelace. Stavy spojené s hyperparathyreoidismem- osteodystrofie  Sekundární hyperparathyreoidismusis – obvykle u chronického onemocnění ledvin s tendencí k rozviji chronického ledvinného selhání v důsledku neschopnosti ledvin resorbovat kalcium- renální osteodystrofie jako projev excesivní kostní remodelace. .  Jiné příčiny-obvykle nutriční: deficit kalcia a fosfátů ve stravě, nadbytek fosfátů ve stravě. Stavy spojené s hypoparathyreoidismem  Hypoparathyreoidismus – vede k poklesu hladin kalcia a vzestupu fosfátů v krvi.  Příčiny: chirurgické odstranění příštitných tělísek, resp. thyreoidey.  Příznaky: tetanické křeče v důsledku poklesu hladiny ionizovaného kalcia v krvi Deficit vitaminu D  U dětí křivice-deformace dlouhých kostí v důsledků zvýšené měkkosti kostí.  U dospělých osteomalácie.  Genetické defekty ve VDR (syndromy hereditární resistence na vitamin D).  Vážná onemocnění jater a ledvin.  Nedostatečná expozice slunečnímu záření Copyright ©2006 American Society for Clinical Investigation Holick, M. F. J. Clin. Invest. 2006;116:2062-2072 Regulation exprese genů prostřednictvím VDR Osteoporóza Osteoporóza  Estrogeny jsou kritické pro uzavíraní epifyzálních štěrbin v pubertě u dívek i u hochů  Estrogeny regulují kostní obrat u žen i u mužů  Hladiny estrogenů udržujících kostní hmotu jsou nižší než hladiny pro udržení funkce klasických cílových orgánů pro estrogeny (prsní žláza a děloha). Tato vyšší senzitivita kostry na estrogeny zřejmě souvisí s věkem.  Osteoporóza u starých mužů je více asociována s nízkými hladinami estrogenů než androgenů.  Během menopauzy dochází k v důsledku poklesu estrogenů k akceleraci jak markerů destrukce, tak novotvorby kostí.  Deficit estrogenů narušuje novotvorbu během kostní remodelace reagující na mechanické zatížení, což vede v letech po menopauze k progresivní ztrátě denzity kostí.  Léčení estrogeny zvyšuje kostní masu i u 80letých žen. Incidence radiologických fraktur páteře, kyčle a distálního předloktí v závislosti na věku a pohlaví. Data derived from European Prospective Osteoporosis Study and General Practice Research Database. Základní patogenetické mechanismy osteoporózy  Fragilita skeletu může být způsobena  (a) neschopností produkovat kostru optimální masy a síly během růstu  (b) zvýšenou kostní resorbcí, která má za následek snížení kostní masy a porušení mikroarchitektury kosti  (c) neadekvátní novotvornou odpovědí kosti na zvýšenou resorbci během kostní remodelace.  Kostní remodelace představuje u dospělé kosti hlavní aktivitu. Kostní remodelace neboli BMU (=bone multicellular units). Příčiny osteoporózy  Nedostatek estrogenů  Nadbytek glukokortikoidů  Nedostatek vitaminu K2 Copyright ©2005 American Society for Clinical Investigation Raisz, L. G. J. Clin. Invest. 2005;115:3318-3325 Remodelace kostí. Místa pro akci estrogenů (i) Osteoporóza indukovaná kortikoidy  Modifikují proliferativní a metabolické aktivity kostních buněk.  Inhibují osteoblastogenezi  Redukují životní poločas osteoblastů, což vede ke snížené novotvorbě kostí. Předpokládaná reciproká endokrinní regulace funkcí kosti a tukové tkáně: Karboxylovaný osteoKalcin (OCN) je produkován osteoblasty a je následně vázán na hydroxyapatitový minerál vyzrálé kosti. Během resorbce kosti řízené osteoklasty se uvolňuje do cirkulace nekarboxylovaný osteokalcin (ucOCN), odkud významně podporuje produkci inzulínu pankreatem. Inzulín zvyšuje expresi OCN osteoblasty a zároveň podporuje jeho dekarboxylaci působenou osteoklasty. Inzulín má také pozitivní vliv na sekreci leptinu adipocyty, což vede k inhibici kostní produkce i resorbce hypotalamickým vlivem leptinu. Produkce ucOCN je tak snížena a dochází k modulaci orexigenních efektů ucOCN na produkci inzulínu pankreatem. Glukokortikoidy obecně působí jako antagonisté inzulínu … a) Několik endogenních faktorů podporuje osteoblastogenezi oproti adipogenezi. b) Nadbytek glukokortikoidů podporuje adipogenezu na účet osteoblastogeneze několika mechanismy: Low [GC] low (physiological) concentrations of glucocorticoids, GHgrowth hormone, IGF-1 insulin-like growth factor-1, FGF-2 fibroblast growth factor-2, IL-11 interleukin- 11, CT-1 cardiotrophin-1, OSM oncostatin M, OB osteoblast, AD- adipocyte Regulace selekce mezi osteoblastogenezí (OB) a adipogenezí (AD) pomocí endokrinních a parakrinních faktorů o Vitamin K2 je podstatným kofaktorem pro γ-karboxylázu, enzym, který katalyzuje konverzi specifických reziduí kyseliny glutamové kyseliny na rezidua Gla. o Vitamin K2 je potřebný pro γ-karboxylaci proteinů kostní matrix obsahujících Gla, jako je MGP (= matrix Gla protein) a osteokalcin. o Nekompletní γ-karboxylace osteokalcinu a MGP vede k při nedostatku vitaminu K osteoporóze a zvýšenému riziku fraktur. o Vitamin K2 stimuluje syntézu osteoblastických markerů a depozici kosti. o Vitamin K2 snižuje resorbci kosti inhibicí tvorby osteoklastů a jejich resorbční aktivity. o Léčení vitaminem K2 indukuje apoptózu osteoklastů, ale inhibuje apoptózu osteoblastů, což vede ke zvýšené tvorbě kosti. o Vitamin K2 podporuje expresi osteokalcinu (zvyšuje jeho mRNA), což je možno dále modulovat podáváním 1α,25-(OH)2 vitamin D3. Vitamin K a kosti Vitamin K2 je transkripčním regulátorem genů specifických pro kost, které působí prostřednictvím SXR zvýšení exprese osteoblastických markerů. Původně SXR znám jako xenobiotický senzor… Kloubní degenerativní onemocnění  Irreverzibilní destrukce chrupavky, šlachy a kosti, které postihují synoviální klouby je společným rysem revmatoidní artritidy a osteoartritidy.  Chrupavka: proteoglykany a kolagen typu II  Šlachy a kosti: kolagen typu I  RA je autoimunní nemoc  Podíl zánětlivých cytokinů u obou nemocí (interleukin-1 beta (IL-1 beta) a tumor necrosis factor-alpha (TNFalpha). Ty stimulují produkci matrix metalloproteináz (MMP), degradujících extracelulární matrix.. Chow et al., 2007 Clark, I. M., et al., The regulation of matrix metalloproteinas es and their inhibitors, Int J Biochem Cell Biol (2008), doi:10.1016/j.bio cel.2007.12.006 Clark, I. M., et al., The regulation of matrix metalloproteinases and their inhibitors, Int J Biochem Cell Biol (2008), doi:10.1016/j.biocel.2007. 12.006 Kloubní degenerativní onemocnění  Kolagenázy MMP-1 a MMP-13 hrají u těchto onemocnění dominantní roli, protože podstatně ovlivňují degradaci kolagenu.  MMP-1 je produkován především synioviálními buňkami, které lemují kloub  MMP-13 je produkována chondrocyty v chrupavce. Kromě kolagenu MMP-13 degraduje také molekuly proteoglykanů (aggrecan)  Další matrix metaloproteinázy (MMP-2, MMP-3 a MMP-9) jsou u těchto onemocnění zvýšeny a degradují nekolagenní komponenty extracelulární matrix kloubů. Revmatoidní artritida - patogeneze  Běžné onemocnění (1% populace), ženy 40-60 let (Ž/M 3:1)  Hlavním terčem imunopatologické reaktivity – synoviální membrána (hyperplastická, vaskularizovaná a infiltrovaná zánětlivými buňkami)  Genetická predispozice (HLA DRB) Krejsek et al., 2004 Krejsek et al., 2004 Revmatoidní artritida - patogeneze Krejsek et al., 2004 Revmatoidní artritida - patogeneze Revmatoidní artritida - patogeneze Krejsek et al., 2004 Patogeneze rheumatoidní arthritis. Ankylozující spondylitida (Bechtěrevova nemoc)  Postihuje zejména muže  Postižena páteř, intervertebrální, kostovertebrální a sakroiliakální klouby, příp. kořenové klouby (rizomelická forma) a klouby periferní (periferní forma)  Těsná asociace s HLA-B27  Pestrý obraz: usury, dekalcifikace, syndesmofyty, ankylóza (ztuhnutí v kyfózním postavení), entézy  Mimokloubní projevy: uveitis (iritis), perikarditis, uretritis, restrikční porucha plic Folsch et al., 2003 Patogeneze of osteoartritidy Osteoartritida Děkuji vám za pozornost