Praktické cvičení č. datum____________ jméno___________________ Téma praktika: Seznámit se s příklady aplikace elektrochemických metod v laboratorní medicíně Okruhy k nastudování: 1. Elektroforéza sérových bílkovin 2. Konduktometrie 3. Potenciometrie, ISE 4. Amperometrie Přístroje a pomůcky: Průtokové konduktometry pHmetr (CYBERSCAN pH510) ISE modul analyzátoru MODULAR Elektroforetická aparatura BioRad Zdroj stejnosměrného elektrického proudu (3000Xi) Elektroforetický vana Kalibrační pufry pH 7 a pH 9 Koncentrátor Vivaspin 2 Centrifuga HETTICH Barbiturátový pufr 0,075M, pH 8,6 1,2% roztok agarózy Fixační roztok (1,2% kys.pikrová 5dílů, konc. kys. octová 1díl) Barvící roztok Odbarvovací roztok Úkoly: a) kontrola vodivosti upravené vody používané pro analytické účely v laboratoři b) změření pH pufru pro elektroforézu v agarózovém gelu c) zahuštění moči centrifugací za použití koncentrátoru VIVASPIN 2 (Sartorius) d) provedení elektroforetického dělení bílkovin krevního séra v agarózovém gelu (makro provedení na skleněné desce) e) konstrukce a funkce jednotlivých částí ISE modulu MODULAR, ISE check a) kontrola vodivosti upravené vody používané pro analytické účely v laboratoři Ø zaznamenat na začátku a na konci praktika hodnotu vodivosti upravené vody Úpravna vody vstup (uS) výstup (uS) Začátek cvičení Konec cvičení b) změření pH pufru pro elektroforézu v agarózovém gelu pomocí pH metru Seznámit se se standardním operačním postupem (SOP) pH-metru CYBERSCAN pH510 Ø Provést kalibraci Ø Změřit pH pufru podle pracovního postupu Naměřená hodnota pH:_________________ c) zahuštění moči centrifugací za použití koncentrátoru VIVASPIN 2 (Sartorius) Ø seznámit se SOP – výtah z dokumentu Zahušťování moči, likvoru a jiného biologického materiálu. Ø Provést zahuštění dvou vzorků moče podle pracovního postupu. d) provedení elektroforetického dělení bílkovin krevního séra v agarózovém gelu (makro provedení na skleněné desce) Ø seznámit se se SOP – výtah z dokumentu Elektroforéza séra na agaróze Ø provést elektroforetické dělení bílkovin krevního séra, nezahuštěné a zahuštěné moče podle pracovního postupu e) konstrukce a funkce jednotlivých částí ISE modulu MODULAR, ISE check Ø seznámit se s konstrukcí a funkcí jednotlivých částí ISE modulu provést ISE check