Praktické cvičení č.1          datum____________    jméno___________________



Téma praktika:

Seznámení se základními laboratorními pomůckami
  * Laboratorní sklo
  * Pipety
  * Dávkovače
  * Váhy (dem.)
  * Míchačky a třepačky (dem.)
  * Měření a monitorování teploty (dem.)


Okruhy k nastudování:
 1. Objemy skleněných pipet a čtení dílčích objemů na skleněné pipetě
 2. Výpočet koncentrace vodných roztoků a navážka, ředění vodných roztoků
 3. Směrodatná odchylka, variační koeficient, BIAS


Úkoly:

a)      Ověření přesnosti pipetování za použití různých laboratorních pomůcek

K ověření přesnosti pipetování bude použito ředění základního roztoku NaCl (1.540 mmol/l, ř
11x....140 mmol/l; navážka 9,0 g NaCl/100 ml), který se bude ředit (1+10)

100ul + 1,0ml …………..(skleněná pipeta 1,0ml a 5,0ml)

100ul + 1,0ml………..…(automatická pístová pipeta 100ul a pístoventilový dávkovač 5,0 ml, nebo pipeta
1 ml )

20ul + 200ul……………(programovatelný automatický dávkovač HAMILTON 1000)


Po nácviku jednotlivých pipetovacích technik provede každý 5x naředění základního roztoku NaCl výše
uvedenými třemi způsoby.


Ve zkumavkách s naředěnými vzorky se stanoví koncentrace Na  (Cobas 8000)

Zjištěné hodnoty koncentrace Na se z tištěného reportu analyzátoru přepíší do tabulky.


označení

        Skleněné pipety

                       označení

                               Pístová pipeta +

                               dávkovkovač

                                               označení

                                                       Automatický dilutor(Hamilton)































Průměr


                       Průměr


                                               Průměr


SD


                       SD


                                               SD


VK


                       VK


                                               VK



Vyhodnocení :


__________________________________________________________________________--_______________________
___________________________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________________________
____








b)     kontrola přesnosti a správnosti automatické pístové pipety vážkovým způsobem


Pracovní postup:


a)      Zjistit teplotu použité destilované vody ponořením teploměru na nejméně 3minuty a zapsat do
pracovního protokolu

b)      Předvážit čistou, suchou kádinku (50ml) a vynulovat display analytických vah

c)      Do kádinky napipetovat vždy novou špičkou deklarovaný objem pipety, hodnotu hmotnosti
odečíst, zaznamenat a vynulovat

d)      Postup dle bodu c)zopakovat 11x (t.j. získáme 12 hodnot)

e)      Vypočítat průměrnou hodnotu hmotnosti pipetovaného objemu, směrodatnou odchylku (SD) a
variační koeficient (VK)

f)       Vypočítat objem vody dávkované danou pipetou podle vzorce:


                  V=  průměrná hmotnost / hustota vody při dané teplotě

(hustota vody se odečte z tabulky)


g)      Vypočítat správnost pipetovaného objemu (výpočet BIAS) podle vzorce:


Bias (%)= [(průměrná zjištěná hodnota objemu – deklarovaná hodnota)/deklar.hodnota x100]


Vyhodnocení pro pipetu s objemem 200ul:

Vyhovuje:

                                    VK < 2%

                                    Bias <2%


(Pokud překročí kterákoliv hodnota uvedený limit není možné pipetu používat.)



Závěr:


___________________________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________________________
___________________________