Kalibrace Jednotky Referenční meze Cut off Ondřej Wiewiorka http://3.bp.blogspot.com/_ijVOsJdq68M/TSE_K0pEyUI/AAAAAAAAAG0/LmphTBOURCU/s1600/1-2UrineFlask.jpg http://i.dailymail.co.uk/i/pix/2012/09/10/article-2201221-14F06618000005DC-679_312x486.jpg Centralizované laboratoře http://www.upmc.com/locations/hospitals/east/patients-and-visitors/Picture%20Library/6_East_patinet care.jpg Decentralizované přístroje - POCT CRP315_YD GLC115_YD Standardizace metod ● Standardizace metod Standardizace metod IFCC/NGSP chart The DCCT took place from 1983 to 1993. The study involved 1,441 volunteers, ages 13 to 39, and took place in 29 medical centers in the United States and Canada. At the start of the DCCT, participants had type 1 diabetes for at least 1 year, but no longer than 15 years, and had no or only early signs of diabetic eye or kidney disease. Kalibrace ●Vztah mezi signálem a koncentrací analytu ve vzorku ●Materiál použitý pro kalibraci je odvozen od referenčního materiálu - etalonu Kalibrace ●Citlivost metody – míra změny signálu ke koncentraci vzorku ●Selektivita/Specificita – míra příspěvku jiných látek než analytu k signálu –Pouze minimum metod chemické analýzy lze označit za specifické. Proto doporučení IUPAC (2001) dává přednost obecnému používání termínu selektivita Referenční materiály a kalibrace ●Porovnání výsledků měření s referenčními materiály je zajištěna jejich pravdivost ●Referenční materiály jsou odvozeny řadou kalibrací k referenčním materiálům vyšší úrovně (čistoty, přesnější metodou stanovení) Referenční hodnoty ● ● – – 13 Analýza ●Rutinní / statimová vyšetření / vitální indikace ●Automatické analyzátory / speciální metody ●Různí výrobci přístrojů / dodavatelé reagencií / různé principy vyšetření ●Harmonizace vyšetření / referenční systém ● ● Zavedení nové metody ●Při přijetí nové metody je potřeba provést její validaci/verifikaci –Validace je proces ověřování, že specifikované požadavky jsou přiměřené pro zamýšlené použití. –Je třeba definovat preciznost, pravdivost, mez detekce, mez stanovitelnosti, selektivitu, rozsah, linearitu, robustnost –Verifikace je poskytnutí objektivního důkazu, že daná položka splňuje specifikované požadavky. –Ověření specifikací metod výrobce, především nejistota měření Parametry analytických metod –Mez detekce –Minimální množství analytu, které může být zachyceno danou metodou,výsledná hodnota ovšem nemusí odpovídat nejistotě měření meze stanovitelnosti (3s) –Mez stanovitelnosti –Minimální množství analytu, které může být stanoveno s danou nejistotou měření (10s) –Pracovní interval (rozsah metody) –Rozpětí koncentrace analytu uzavřené minimální a maximální mezí stanovitelnosti Chyby měření ●Chybou měření rozumíme rozdíl mezi skutečnou a naměřenou hodnotou ●Můžeme je rozdělit na chyby náhodné, systematické a hrubé ● Chyby měření hrubé chyby ●Chyby měření způsobené nepozorností, nesprávným postupem, chybou přístroje ●Lze je odhalit pouze opakovaným měřením ●Vybočují ze souboru ostatních opakování (outliers) a dají se odhalit a vyloučit pomocí testování odlehlých hodnot ●Q-test, Grubbsův, Studentův, Cochranův Chyby měření - náhodné chyby ●Složka chyby měření, která se v opakovaných měřeních mění nepředvídatelným způsobem ●Má normální (Gaussovo) rozdělení s nulovou střední hodnotou a rozptylem ●Její vliv na nejistotu výsledku lze zmenšit zvýšením počtu stanovení Chyby měření - náhodné chyby Nízká preciznost měření Vysoká preciznost měření Chyby měření systematické chyby ●Složka chyby měření, která v opakovaných měřeních zůstává konstantní nebo se mění předvídatelným způsobem ●Systematická chyba měření a její příčiny mohou být známé nebo neznámé. Ke kompenzaci známé systematické chyby měření může být aplikována korekce Chyby měření - systematické Vysoký bias Nízký bias Parametry analytických metod –Nejistota měření –Parametr přidružený k výsledku měření, který charakterizuje míru rozptýlení hodnot, které by mohly být důvodně přisuzovány měřené veličině –Parametrem může být např. směrodatná odchylka nazývaná standardní nejistota měření (nebo její specifikovaný násobek), nebo polovina šířky intervalu, který má stanovenou pravděpodobnost pokrytí. –Kombinovaná standardní nejistota se určí po identifikaci a vyhodnocení všech složek (dílčích nejistot), které k ní přispívají, jejich sloučením dle zákona o šíření nejistot. –Kombinovaná standardní nejistota násobená koeficientem rozšíření poskytuje kombinovanou rozšířenou nejistotu: –Uc = k . uc (k=2 odpovídá 95% hladině spolehlivosti ) – ● ● Chyby měření ●Jaká je maximální povolená chyba? ●Odvozená z biologické variability Referenční hodnoty pacientů ●Lze je získat analýzou zdravé populace pacientů, musí být dobře definovaní –Statistické rozlišení rozdílů mezi skupinami – muži, ženy, dospělí, děti…. –95% rozpětí (horní a dolní 2,5 % se vyloučí) ●Na základě odborného konsenzu –Zdravotní rizika začínají na nižší hladině, něž ukazuje populační rozpětí ●Data výrobce metody Pre-analytická chyba Analytická chyba Post-analytická chyba GIGO =>„Garbage in.... GIGO => ...garbage out“ Dodržovat postupy! ● ● ● ● Diagnostická efektivita analýzy –Specificita metody –Schopnost měřícího postupu detekovat pouze cílený analyt – – –Ceněna obzvlášť u testů pro stanovení konečné diagnózy a závažných onemocnění (intervence značně poškozuje pacienta) – – Diagnostická efektivita analýzy –Senzitivita metody (citlivost) –Schopnost měřícího postupu zachytit i malé množství analytu – – –Ceněna obzvlášť u screeningových testů pro včasný záchyt onemocnění a onemocnění kde by byl pacient bez intervence značně poškozen – ROC křivka (Receiver operating characteristic plot) ●Grafické vyhodnocení diskriminačních schopností testu. ●Sestrojuje se vynesením hodnot klinické citlivosti (osa y) proti hodnotám klinické nespecifičnosti (osa x) pro všechny rozhodovací úrovně. ROC křivka (Receiver operating characteristic plot) •citlivosti,specifičnosti, pozitivní a negativní prediktivní hodnoty a klinická věrohodnost •AUC kvantifikuje diagnostickou správnost zkoušky Likelihood ratio (věrohodnostní poměr) •Poměr sensitivity a nespecificity (směrnice ROC v cutoff hodnotě) •Poměr nesensitivity a specificity •Kolikrát je vyšší šance, že pacient s pozitivním testem má danou chorobu, než že se jedná o FP •Kolikrát je vyšší šance, že pacient s negativním testem má danou chorobu, než že se jedná o TN Prediktivní hodnoty ●Pozitivní prediktivní hodnota ●Pravděpodobnost, že osoba s pozitivním testem je opravdu nemocná ● ● ●Negativní prediktivní hodnota ●Pravděpodobnost, že osoba s negativním testem je opravdu zdravá ●Prevalence ●Míra zastoupení nemoci v populaci ● ● ●Diagnostická efektivita ●vyjadřuje počet správně určených stavů ke všem nesprávně určným Děkuji za pozornost ●