Předtransfuzní vyšetření Plná krev Erytrocyty Plazma Trombocyty Čerstvě zmražená plazma Kryoprotein K plazma F lX* Imuno globulin Albumin Frakcionační produkty = KREVNÍ DERIVÁTY F Vlla* F Vlll* Granulocyty *existují také jako rekombinantní výrobky TRANSFUZNÍ PŘÍPRAVKY Předtransfuzní vyšetření • •soubor povinně prováděných sérologických testů před podáním přípravku obsahujícího erytrocyty •riziko transfuze – nikdy není garantovaná 100% bezpečnost = správná indikace transfuze •rizika infekční a imunologická (imunizace, potransfuzní reakce, imunosuprese – modulace…) •obvykle bezpečný proces: zvýšení hodnoty Hb (1TU (o 10-15g/l, přežívání erys cca 60 dní) • 9e8222f0619eb9617b69ed267c92cb95 Krevní vzorky • •krev s antikoagulačním roztokem/plazma •krev srážlivá/sérum •nepoužívat hemolytické vzorky – nelze detekovat protilátky • •skladování vzorků – riziko změny kvality (hemolýza, zeslabení igM Abs, vymizení komplementu) –plná krev při 2°- 8°C po 7 dní (k vyšetření reakce) –vzácně separované sérum/plazma při -30°C po 6 měsíců (opakované vyšetření protilátek) • Žádanka o transfuzi • •písemná/elektronická •telefonický požadavek - zaprotokolovat •vyvarovat se dvojí dokumentace • •kontrola archivovaných záznamů před výdejem erytrocytového transfuzního přípravku je povinná • • Souhlasné identifikační údaje •Údaje na zkumavce: – jméno a příjmení, rodné číslo nebo jiná – jedinečná identifikace pacienta + datum odběru – •Údaje na žádance: – jméno a příjmení, rodné číslo / jiná identifikace – imunohematologická anamnéza – razítko lékaře, podpis sestry provádějící odběr – počet TU a typ přípravku – datum a hodina transfuze – stupeň naléhavosti – diagnóza, pojišťovna, IČP – •Vyšetření nelze provést, pokud: • •chybí údaje o pacientovi •jsou diskrepance údajů na žádance a na • zkumavce •urgentní pacienti dtto • • •Administrativní chyby jsou nejčastější příčinou většiny •potransfuzních hemolytických reakcí • Komplex předtransfuzního vyšetření • • 1.stanovení krevní skupiny AB0 a RhD příjemce 2.vyšetření nepravidelných protilátek proti erys v séru příjemce 3.(výběr erytrocytového přípravku) 4.test kompatibility mezi sérem příjemce a erys dárce • • Platnost vyšetření • •předtransfuzní vyšetření platí 3 dny od času odběru vzorku •krevní skupinu poprvé vyšetřit celou, poté před každou novou transfuzí ověřit ABD antigeny z nového vzorku •screening protilátek opakovat z nového vzorku pacienta nejpozději za 3 dny = odpovídá platnosti celého testu • • • Stanovení AB0 skupiny příjemce •vyšetření antigenů na erys (aglutinogeny) –monoklonální anti-A a anti-B diagnostická séra •vyšetření séra/plazmy (aglutininy) –A1 a B erys (pro některé situace vhodné erys 0 nebo autoctl) •přímá aglutinace, solný test při laboratorní teplotě • •tento postup u příjemců starších 4 měsíců, musí být souhlasné reakce v obou řadách •u pacientů do 4. měsíce věku opakovaně vyšetřit A a B antigeny (2x) různými dg., bez detekce AB0 protilátek ABO_blood_type ABO Reciprocity Patient Reagent Red Cells and Anti-A Anti-B Serum and A cells B cells Patient blood type O - - + + A + - - + B - + + - AB + + - - Před vyšetřením – QC •Denní kontrola kvality • •Provádění kontrol pro zjištění účinnosti diagnostik – –Dg.sérum anti-A reaguje s ery A1 a nesmí reagovat s B a 0 –Dg. sérum anti-B reaguje s ery B a nesmí reagovat s A a 0 – –Dg. erytrocyty A1 a B reagují s odpovídajícími protilátkami (vzorek –krevní skupiny 0 s anti-A, anti-B) • •U dárců krve stejný postup pro vyšetření AB0 skupiny jako u příjemců • Možné problémy při určení AB0 • •Slabé/chybějící/méně obvyklé antigeny • •Slabé/chybějící/ méně obvyklé protilátky • •Jejich kombinace • Řešení •Upřesnit anamnezu, dg., léčbu, srovnat s posledními záznamy • •Přední řada: opakovat s promytými erys (teplý FR), došetřit zadní řadu, CQ, změnit inkubace a časy, DTT působení na erys, ficinovat erys •Zadní řada: přidat albumin, i erys, zvýšit poměr vyš.séra, změnit inkubace a časy, použít promyté typ.erys • •Rouleaux: stejná reaktivita všech erys včetně autoctl– doplnění FR k rozpuštění reakcí, je to neg.reakce Stanovení RhD příjemce •pomocí dvou anti-D (IgM) dg.sér přímou aglutinací (solný test, laboratorní teplota) •dg. sérum sérum nemá detekovat DVI variantu •rozliší RhD+,RhD-,RhD w/v –pacient se známou variantou D antigenu/ Dvar má být transfundován RhD negativní krví –pacient se známým slabým D antigenem/ Dweak může být dle typu antigenu považovaný za RhD pozitivního (Dweak 1–3) Stanovení RhD u dárce krve •povinnost testovat dárce na přítomnost všech variantních D antigenů •povinnost použít dg.sérum anti-D (IgG) pro NAT k došetření dárců stanovených jako RhD negativní •dárce Dw/v = dárce RhD pozitivní • •QC: Rh ctl kontrolní sérum (pokyny příbalového letáku) • erys RhD+ a RhD-. • • • • Diamed karty Screening nepravidelných protilátek • •vyšetření séra příjemce nebo dárce na přítomnost nepravidelných protilátek proti erys pomocí známých diagnostických erytrocytů skupiny 0 • •povinné zastoupení určitých antigenů včetně konkrétních haplotypů (Rh, Kel, Duffy, Kidd,MNSs, Lewis, Lutheran…) na dg. erytrocytech –pro dárce krve lze použití směs dg. erytrocytů –pro pacienty nemohou být ve směsi (tři a více typů) • •povinně test NAT (sloupc. aglutinace LISSNAT), pevná fáze, zkumavkové testy •doplnění enzymovým testem (lepší pro -Rh, -Jk) • • Vyšetření nepravidelných protilátek proti erytrocytům – screeningový test • • •pozitivní screening protilátek = patologie, nutno došetřit, identifikovat protilátku pomocí více typů diagnostických erytrocytů pro určení protilátky, stanovit klinický význam protilátky •rozlišení aloprotilátky, autoprotilátky, jiných typů reakcí •dle toho vybrat odpovídající transfuzní přípravek = kompatibilní transfuzi • • • • • •riziko zkráceného přežívání dárcovských erys včetně nežádoucí potransfuzní reakce při inkompatibilní transfuzi / při nálezu specifických protilátek u příjemce •výběr transfuze negativní pro daný antigen při protilátkách: anti-A,-B,-AB, -Rh, -Kell, -Duffy, -Kidd, -Ss, někdy -M/37° • • Transfuzní přípravky Štítky na konečném produktu obsahují všechny důležité údaje –Typ přípravku –Kód výrobce –Číslo odběru –Datum odběru –Datum expirace –Krevní skupina –Množství –Použité roztoky –Výsledky předepsaných testů –Skladovací podmínky EBR Výběr transfuzního přípravku • •AB0 a RhD shoda •pokud není, tak erytrocyty kompatibilní pro AB0 protilátky u příjemce / univerzální erytrocyty skupiny 0 •pro příjemce skupiny AB erytrocyty skupiny A,B nebo 0 •pro fertilní ženy rezervovat erytrocyty RhD negativní •erytrocyty 0 jsou tzv. univerzální •plazma AB je tzv. univerzální •co nejdříve přejít na skupinově shodné přípravky Test kompatibility •potvrdí (?) slučitelnost krve příjemce a dárce •reakce mezi sérem příjemce a erytrocyty dárce (z TU) •lze použít elektronický výběr (e-cross match při zavedeném SW s implementovanými kontrolními mechanismy) • •Sérologická zkouška kompatibility •NAT (LISSNAT) povinně při nálezu klinicky významné protilátky nebo problémech při vyšetření krevní skupiny, u AB0 inkompatibilního transplantátu solidního orgánu •type and screen – krátký test pouze u vybraných pacientů (rychlé ověření AB0 kompatibility) • Procesy při transfuzi •Zajistit bezpečnost transfuze –Zajistit a ověřit informace o •Pacientovi •Dárci/ transfuzním přípravku •Kompatibilitě plazmy pacienta a erytrocytů dárce –Zkontrolovat přípravek •Neporušenost obalu, vzhled •Kompatibilitu –Výsledek vyšetření z laboratoře –Číslo přípravku a krevní skupinu –Datum expirace –Bed side test –Podání transfuze + monitorování pacienta •TK,P, TT •Bez biologické zkoušky, prvních 15 minut důležitých •Dokumentace • Urgentní situace •Nedostatek času na jakékoli vyšetření / nebo chybí krevní vzorek pacienta / chyba v identifikaci pacienta • • •Vydávají se univerzální transfuzní přípravky, tj. •0- erytrocyty (pokud nejsou, tak 0+) •AB plazma •trc jakékoli skupiny (resuspendované, nízký titr 0) • •neprovádí se předtransfuzní vyšetření, ale dokončí se později •existuje imunohematologické riziko non-AB0 neshody • Čas alespoň pro vyšetření skupiny •Vzorek dodán, vyšetření začalo ale není úplné, •určena jen krevní skupina pacienta: • •Vydávají se AB0 RhD shodné přípravky •Bez ostatních předtransfuzních vyšetření (Abs, TK) – –došetřit co nejdříve skríning protilátek v séru příjemce –provést test kompatibility –vzniklé problémy hlásit odesílajícímu zařízení –výhoda postupu - šetří se nedostatkové univerzální přípravky • Masivní transfuze • •objem převedených transfuzních přípravků během posledních 24 hodin je větší než objem krve pacienta –přepočet: hmotnost (kg) x 69 (65 ženy) • ≥10 TU erytrocytů/24 hodin, ≥ 5 TU během 2-3 hodin •není nutné provádět předtransfuzní vyšetření •ověřuje se pouze AB0 skupina u přípravku Jiné specifikace transfuzí •fetální /intrauterinní transfuze •čerstvá krev do 5 dnů, skupiny 0, antigen negativní, •vysoký HTK (0,70-0,85), CMV neg, ozářená •chronicky transfundovaní pacienti •střední riziko imunizace, není nutné/je vhodné vybírat •fenotypově shodné krve (vs. srpkovitá anemie, AA, MDS) •příjemci alogenních HSCT a solidních orgánů •výběr přípravku dle typu neshody dárce a příjemce, •univerzálně erytrocyty 0, plazma AB • Exsanguinační transfuze při AB0 HON Výběr erytrocytů pro exsanguinační léčbu (AB0 HON) dítě matka erys* A 0,B 0 B 0,A 0 AB A A,0 AB B B,0 *RhD dle dítěte nebo RhD negat Tx HSC Neshoda dárce příjemce erytrocyty plazma a trombocyty Malá 0 A 0 A nebo AB 0 B 0 B nebo AB A AB A nebo 0 AB B AB B nebo 0 AB Velká A 0 0 A nebo AB B 0 0 B nebo AB AB 0 0 AB AB A A nebo 0 AB AB B B nebo 0 AB Kombinovaná A B 0 AB B A 0 AB RhD RhD+ RhD- RhD- po dobu přihojování RhD- po dobu přihojování RhD- RhD+ RhD- RhD- Tx orgánové orgán 0 orgán A orgán B orgán AB příjemce 0 ery 0 ery 0 ery 0 ery 0 plazma 0 (A, B, AB) plazma A (AB) plazma B (AB) plazma AB příjemce A ery 0 ery A (0) ery 0 ery A (0) plazma A (AB) plazma A (AB) plazma AB plazma AB příjemce B ery 0 ery 0 ery B, (0) ery B (0) plazma B (AB) plazma AB plazma B (AB) plazma AB •Deleukotizace pro pacienty s opakovanými FNHTR, CMV negativní, IUT a EXS, novorozence, imunizované leukocytárními antigeny, těhotné, polytransfundované a transplantované •Gamma záření pro pacienty s možnou reakcí GvHD, transplantované HSC, IUT a EXS, granulocyty, příbuzenské transfuze •Patogenní inkativace přípravky dtto •Promytí buněčných přípravků pro hyperreaktivitu s anti-IgA, anafylaktoidní reakce na plazmu Kontrola kvality v imunohematologii •důležitá součást laboratorních procesů - SLP •účast všech složek zapojených do fáze prenalytické, analytické, postanalytické •řízená dokumentace –Informovanost, verifikace metod, zavedení standardních pracovních postupů a jejich průběžná aktualizace, audity a analýzy, edukace a tréningy personálu, validace a kontroly přístrojů, kontroly dg. materiálu, SEKK, manipulace s materiálem, traceabilita všech procesů • • • •