E N Z Y M Y SRÁŽKOVÁ TEORIE Rychlost chemické reakce zvyšuje zvýšená kinetická energie částic teplota tlak v organismu není možné BIOKATALYZÁTORY (enzymy) Urychlují průběh chemické reakce Nespotřebovávají se Jsou specifické k substrátu Dají se regulovat aktivace inhibice indukce KATALYZÁTORY (anorganické) Ano Ano Ne Ne Ne Ne Ne apoenzym (bílkovina) (specifita k substrátu) HOLOENZYM koenzym . . . . . . . . . . . (slabě vázaný) prostetická skupina. . .(silně vázaná) (typ chemické reakce) Aktivacni-energie.png (642×609) Snížení aktivační energie Enzym-substrát.jpg (1280×720) Substrátová specifita enzymu „zámek a klíč“ Faktory ovlivňující enzymovou aktivitu Teplota pH Koncentrace substrátu Iontová síla Enzyme-temperature.png (720×565) 37° denaturace koagulace 2,4 7,0 8,0 pH Pepsin Amyláza Trypsin Aktivita enzymu Enzymy%20Km 5 8 mmol/l V8 V5 glukóza E N Z Y M Y aktivita Mírou aktivity enzymu je přeměna substrátu nebo přírustek produktu za časovou jednotku tj. reakční rychlost - Δ / t substrát + Δ / t produkt µkat / L Měření End – point Kinetické měření A t OPTICKÝ TEST Opticky%20test 340 KONSTANTA MICHAELISE-MENTENOVÉ [Km] Km je koncentrace substrátu ,při které probíhá enzymová reakce polovinou maximální rychlosti Vmax 2 Enzymy%20Km Reakce prvního řádu Reakce nultého řádu Enzymy%20Km Reakce 0.řádu Enzymy%20Km Reakce 1.řádu 5 8 mmol/l V8 V5 glukóza Reakce nultého řádu pyruvát + NADH +H+ ↔ L-laktát + NAD+ (LD) 4-nitrofenylfosfát + H2O ↔ 4-nitrofenol + fosforečnan (ALP) L-alanin + 2-oxoglutarát ↔ pyruvát + L-glutamát (ALT) pyruvát + NADH + H+ ↔ L-laktát + NAD+ (LD) močovina + H2O + 2H+ → CO2 + 2NH4+ (ureáza) NH4++ 2-oxoglutarát + NADH → L-glutamát + H2O + NAD+ (GMD) β-D-glukóza + O2 → β-D-glukonolakton + H2O2 (GOD) H2O2 + 4-aminoantipyrin + subst.fenol → chinonmonoiminové barvivo + H2O (POD) Reakce prvního řádu I S O E N Z Y M Y Enzymy katalyzující stejný typ reakce, ale lišící se v některých fyzikálně-chemických vlastnostech : Ø Termostabilita Ø Elektroforetická pohyblivost Ø Afinita k různým substrátům Ø Antigenní vlastnosti Alkalická fosfatáza: jaterní; kostní; střevní; placentární Amyláza: slinná; pankreatická Kyselá fosfatáza: kostní; prostatická