STANOVENÍ HORMONŮ
Mgr. Alice Hoffmannová, Ph.D.
HORMONY
 Látky specificky reagující na
metabolické děje v organismu
 Většinou tvořeny v endokrinních
žlázách
 Krví přenášejí informace do buněk
cílových orgánů (s receptory x
bez receptorů)
 V krvi často vázána na specifické
transportní bílkoviny
 Biologicky účinné jen formy volné
ROZDĚLENÍ HORMONŮ DLE
CHEMICKÉHO SLOŽENÍ
 Bílkovinné a peptidové
 Hormony pankreatu, hypotalamu,
hypofýzy, příštítné žlázy
 Steroidní
 Hormony pohlavních žláz a kůry
nadledvin
 Odvozené od aminokyseliny tyrosinu
 Hormony štítné žlázy a dřeně
nadledvin
 Odvozené od mastných kyselin
 prostaglandiny
METODY STANOVENÍ
 Chromatografické metody
(HPLC, GC, LC/MS/MS, IDGC/MS,
ID-LC/MS/MS, IDHPLC/MS)
– metody referenční.
Často vyžadují úpravu vzorku
(derivatizace, extrakce).
 Imunoanalytické metody
❖ S luminometrickou detekcí
(LIA, ILMA, CMIA, ECLIA)
❖ S fluorimetrickou detekcí
(MEIA, FPIA)
❖ S fotometrickou detekcí
(ELISA, EMIT)
❖ S detekcí radioaktivity (RIA,
IRMA)
 Multiplexové metody
HORMONY HYPOFÝZY A HYPOTHALAMU
 TYREOTROPIN (TSH)
 Speciální preanalytické požadavky: pokud je
to možné odběr ráno, nalačno, separaci séra
nebo plazmy provést do 4h po odběru
 Referenční hodnoty: 0,2-4,5 mU/l
 ADRENOKORTIKOTROPIN (ACTH)
 Speciální preanalytické požadavky: transport
v ledové lázni
 Referenční hodnoty: do 46 ng/l (pg/ml)
 odhalování příčiny nadměrné produkce
kortizolu (Cushingův syndrom),nebo
nedostatečné sekrece (Addisonova nemoc)
 stimulační a inhibiční testy syntézy ACTH
(např.dexametazonový test)
Uložení hypofýzy a hypothalamu
HORMONY HYPOFÝZY A HYPOTHALAMU
 FOLIKULOSTIMULAČNÍ HORMON (FSH)
 Referenční hodnoty pro ženy:
Folikulární fáze 2,5 – 10,2 U/l
Ovulační fáze 3,4 – 33,4 U/l
Luteální fáze 1,5 – 9,1 U/l
Postmenopauza 23 – 116,3 U/l
 Referenční hodnoty pro muže:
1,4 – 18,1 U/l
 LUTEINIZAČNÍ HORMON (LH)
 Referenční hodnoty pro ženy:
Folikulární fáze 1,9 – 12,5 U/l
Ovulační fáze 8,7 – 76,3 U/l
Luteální fáze 0,5 – 16,9 U/l
Postmenopauza 15,9 – 54 U/l
 Referenční hodnoty pro muže:
1,5 – 9,3 U/l
Graf vývoje
hodnot FSH a LH
během
menstruačního
cyklu ženy
HORMONY HYPOFÝZY A HYPOTHALAMU
 PROLAKTIN (PRL)
 Speciální preanalytické požadavky:
doporučuje se odběr 3h po
probuzení (optimálně mezi 8 a 10h)
 Referenční hodnoty: ženy: 59-619
mU/l, postmenopauza 38-430 mU/l,
muži: 44-375 mU/l
 základní diagnostická metoda pro
diagnostiku adenomu hypofýzy
(prolaktinom)
 RŮSTOVÝ HORMON (SOMATOTROPIN, STH
NEBO GH)
 Referenční hodnoty: 0,16-13,00 mU/l
HORMONY ŠTÍTNÉ ŽLÁZY A PŘÍŠTÍTNÝCH
TĚLÍSEK
 TYROXIN (CELKOVÝ A VOLNÝ, T4 A FT4)
 Speciální preanalytické požadavky:
separaci séra nebo plazmy provést
do 6h po odběru
 Referenční hodnoty: 60 -150 nmol/l
(T4) a 9,1 - 23,8 pmol/l (FT4)
 TRIJODTYRONIN (CELKOVÝ A VOLNÝ, T3 A
FT3)
 Speciální preanalytické požadavky:
separaci séra nebo plazmy provést
do 6h po odběru
 Referenční hodnoty: 1,21- 2,29 nmol/l
(T3) a 2,2-5,3 pmol/l(FT3)
 KALCITONIN
 Referenční hodnoty: Muži 8,31 – 14,3 pg/ml
Ženy 5,17 – 9,82 pg/ml
 PARATHORMON
 Speciální preanalytické požadavky:
transportovat při teplotě tajícího ledu,
centrifugovat co nejdříve v chlazené
centrifuze a oddělit sérum nebo plazmu
 Referenční hodnoty: 1,5 - 7,6 pmol/l
 stanovení slouží pro laboratorní diagnostiku
primární hyperparatyreózy
DALŠÍ ANALYTY SOUVISEJÍCÍ S
METABOLISMEM ŠTÍTNÉ ŽLÁZY
 TYREOGLOBULIN (THG)
 Referenční hodnoty: do 55 ug/l
 glykoprotein obsahující jod, prekursor tyroxinu a trijodtyroninu,
tvořený dvěma podjednotkami
 PROTILÁTKY PROTI TYREOGLOBULINU
 Referenční hodnoty: do 150 kU/l (U/ml)
 PROTILÁTKY PROTI TYREOIDÁLNÍ PEROXIDÁZE (ANTI-TPO, TPOAB)
 Referenční hodnoty: do 50 kU/l (U/ml)
 mohou se zúčastnit na poškození tyreocytů
 PROTILÁTKY PROTI RECEPTORŮM TSH (TRAK)
 Referenční hodnoty: negativní < 1 U/l (Brahms) < 1,5 U/l (Roche)
„šedá zóna“ 1 – 1,5 U/l 1,5 – 1, 75
pozitivní > 1,5 U/l > 1,75 U/l
Umístění štítné žlázy
HORMONY KŮRY NADLEDVIN
 KORTIZOL
 Speciální preanalytické
požadavky: kolísáni
koncentrace kortizolu během
dne - nejčastěji se odběr
provádí ráno mezi 7-9h a
večer mezi 16-20h
 Referenční hodnoty: sérum –
ráno 101 – 536 nmol/l, večer
79 -478 nmol/l, moč: 12 - 486
nmol/24h
 většina kortizolu v krvi je
vázána na transkortin, dále
na SHBG a albumin
 10 % je ve volné formě
 DEHYDROEPIANDROSTERON SULFÁT (DHEAS)
 Speciální preanalytické požadavky:
oddělit elementy do 30 min po odběru
 Referenční hodnoty: jsou závislé na
použité metodě, věku, pohlaví
 vzniká téměř výlučně v nadledvinách, u
mužů částečně i ve varlatech, u žen
v ovariích.
 zvýšené koncentrace u hyperplazie a
tumorů nadledvin
HORMONY DŘENĚ NADLEDVIN
 ADRENALIN, NORADRENALIN (KATECHOLAMINY)
 pro stanovení v plazmě nebo moči se používá HPLC
s elektrochemickou detekcí po vyextrahování
z bílkovinné matrice
 Speciální preanalytické požadavky: Sběr v chladu, za
přítomnosti konzervač. činidla (příjem OKB)
 3 dny dieta bez ovoce (citrusy,banány,ananas), ořechů,
čaje, kávy, kakaa, alkoholu, vanilky, těles. šetření, ev.
bez medikace
 Referenční meze v moči:
Adrenalin 9,4 – 123 nmol/24h Noradrenalin 71,4 – 504
nmol/24h
 stanovují se také O-methyl metabolity nazývané
metanefriny.
 Katecholaminy a metanefriny se stanovují především pro
diagnostiku nádoru chromafinních buněk
feochromocytomu
HORMONY PANKREATU
 INZULIN
 Referenční hodnoty: 6-27 mU/l
 ruší exogenní inzulin a protilátky proti
inzulinu
 GLUKAGON
 polypeptid složený z 29 aminokyselin,
stimuluje glykogenolýzu a
glukoneogenézu, zvyšuje glykémii
 C-PEPTID
 Referenční hodnoty: 0,78-1,89 µg/l
 C-peptid není hormon, je to jednoduchý
peptid vzniklý rozštěpením proinzulinu
 ukazatel endogenní syntézy inzulinu
POHLAVNÍ HORMONY
 ANDROGENY (TESTOSTERON)
 ESTROGENY (ESTRADIOL, ESTRON,
ESTRIOL)
 GESTAGENY (PROGESTERON)
 Sekrece pohlavních hormonů řízena
hypofyzárními gonadotropiny;
luteinizačním hormonem (LH) a
hormonem stimulujícím folikuly (FSH)
 Hlavním transportním proteinem
pohlavních hormonů je sexuální
hormony vázající globulin (SHBG)
POHLAVNÍ HORMONY
 TESTOSTERON
 Referenční hodnoty:
ženy 0,2-2,9 nmol/l,
muži 9,9-27,8 nmol/l
 v krvi vázaný na bílkoviny, část
je volná
 změny koncentrace
vazebných bílkovin mohou
ovlivnit výslednou koncentraci,
v praxi se používá index
volných androgenů (FAI),
vypočítaný jako poměr
testosteronu celkového a
SHBG
 ESTRADIOL (17-Β-ESTRADIOL)
 hlavní ženský steroidní pohlavní
hormon
 Referenční hodnoty pro muže:
<121 pmol/l
 Referenční hodnoty pro ženy:
Folikulární fáze 40 – 606 pmol/l
Ovulační fáze 536 – 1930 pmol/l
Luteální fáze 121 – 718 pmol/l
Postmenopauza < 136 pmol/l
❖ sledování indukce ovulace a
ovariální hyperstimulace, anomálií
menstruačního cyklu
POHLAVNÍ HORMONY
 PROGESTERON (PRG)
 Referenční hodnoty pro ženy:
Folikulární fáze 0,5 – 4,4 nmol/l
Ovulační fáze 14,1 – 89,1 nmol/l
Luteální fáze 10,6 – 81,3 nmol/l
Postmenopauza < 2,3 nmol/l
 Referenční hodnoty pro muže:
0,9 – 3,9 nmol/l
❖ u žen tvořen žlutým tělískem ovarií , v
menší míře kůrou nadledvin
❖ většina progesteronu je v krvi vázána
na bílkoviny (albumin, aj.)
❖ prudký nárůst koncentrace při ovulaci
❖ v šestém týdnu hlavním místem tvorby
stává placenta
 PLACENTÁRNÍ HORMONY
 Lidský choriový gonadotropin
(lidský choriogonadotropin,
hCG)
 Referenční hodnoty: do 5 U/l
❖ k potvrzení gravidity a k jejímu
sledování, zvýšené hodnoty jsou
u nádorů vaječníků, varlat, aj.
❖ stanovení je také součástí
screeningu vrozených
vývojových vad
❖ stanovení celkový β-hCG
(intaktní hormon + volná
podjednotka beta), intaktní
hCG(pouze intaktní hormon),
volná β-podjednotka
KLINICKÁ BIOCHEMIE
ANEMICKÝCH STAVŮ
DĚLENÍ PŘÍZNAKŮ ANÉMIE
 Příznaky vznikající v důsledku poklesu
transportu kyslíku do tkání ( únava,
dušnost, angina pectoris, orgánové
poruchy)
 Příznaky vyplývající ze snížení
plazmatického objemu (bledost,
hypotenze)
 Příznaky vyplývající ze zvýšeného
srdečního objemu (tachykardie,
srdeční šelest)
 Dle morfologických kritérií se anémie
dělí na základě objemu erytrocytu,
množství hemoglobinu v erytrocytu a
počtu retikulocytů
ANÉMIE SIDEROPENICKÉ
 Souvisejí se železem
 z nadměrné ztráty železa – časté
 nedostatečný příjem – vzácné
 spíše inhibice vstřebávání způsobena např.
fosfáty, oxaláty
 malabsorpce při celiakii, Crohnově
chorobě
 v těhotenství – zvýšené nároky na přívod Fe
 klinicky – únava, slabost, hučení v uších,
dušnost
ANÉMIE SIDEROPENICKÉ
 TŘI STÁDIA
❖ Prelatentní
❖ Latentní
❖ Manifestní
 Již v období prelatentního nedostatku železa se
uplatňují kompenzační mechanizmy organismu
 Zvýšená resorpce železa z GIT, snížení jeho výdeje a
útlum tvorby zásobního proteinu Fe – feritinu
 Zvýšena resorpce diagnostické dávky 59Fe z 25% na
75% a snížen výdej Fe močí po jednorázovém podání
desferioxaminu
 Terapie - léčba příčiny sideropenie, substituce Fe
Vazebná kapacita železa (TIBC) a Transferin - jsou u sideropenické anémie většinou výrazně
zvýšené (odlišení od anémie chronických chorob, kde je jejich hladina normální či snížená).
ANÉMIE MEGALOBLASTOVÁ
 Označují se takto dle morfologického
vzhledu erytrocytů
 Nejčastější příčinou nedostatku
vitamínu B12 je porucha vstřebávání
 Vnitřní faktor – glykopeptid nutný při
vstřebávání B12 v ileu
 Způsobená buď nedostatkem
vnitřního faktoru nebo výrazným
omezením resorpční plochy ve střevě
 Perniciózní anémie – nejčastější,
postihuje vyšší věkové kategorie,
genetické vlivy, autoimunitní
onemocnění (protilátky proti buňkám
žaludeční sliznice)
Vznik perniciózní anémie
ANÉMIE MEGALOBLASTOVÁ
 Vzniká i po resekci žaludku – většinou kombinace
nedostatku vitamínu B12 a kyseliny listové ( ta se
vstřebává v duodenu a horním jejunu)
 Vitamín B12 tvoří prostetickou skupinu enzymu
homocysteinmethyltransferázy, která demethyluje
tetrahydrofolát a přenáší methylovou skupinu
z homocysteinu na methionin
 Tetrahydrofolát je následně opět methylován a je
donorem methylové skupiny pro tvorbu thyminu
 Důsledkem nedostatku vit. B12 a kyseliny listové je
tedy porucha syntézy thyminových bází a tvorby
DNA
 Prodlužuje se S-fáze buněčného cyklu, při níž se
zdvojnásobuje množství DNA, výsledkem je velký
objem buňky s nezralým jádrem – megaloblast
Morfologický nález kostní dřeně
u pacienta s perniciózní anémií
ANÉMIE PŘI CHRONICKÉM ONEMOCNĚNÍ
 Chronické infekce (tuberkulóza,
AIDS), zánětlivá onemocnění,
nádory
 Aktivace imunitního systému
vedoucí k omezení nabídky
železa invadujícím patogenům či
nádorovým buňkám, pro něž Fe
představuje zásadní růstový faktor
 Stimulace tvorby feritinu spolu
s blokádou uvolňování železa ze
zásobárny
Produkce hepcidinu játry vede k zablokování
feroportinu uvolňování železa
ANÉMIE HEMOLYTICKÉ
 Charakteristická je zkrácená doba přežití
erytrocytů v periferní krvi
 Často ani maximálně stupňovaná krvetvorba
není schopna nahradit zvýšený rozpad krvinek
 Hemolytické anémie:
❖ Dědičná sférocytóza (porucha skeletu
erytrocytární membrány – deficit spektrinu)
❖ Anémie z poruchy enzymatické výbavy
erytrocytu – př. deficit pyruvát kinázy
❖ Anémie z poruchy tvorby hemoglobinu -
beta-thalasemie
❖ Autoimunitní hemolytické anémie – porucha
kooperace mezi pomocnými a supresorovými
lymfocyty T a B
Nátěr periferní krve u pacienta s dědičnou
sférocytózou
BIOCHEMIE ANÉMIÍ – VITAMÍN B12
 Molekula B12 obsahuje jako centrální
atom kobalt, který je umístěn
uprostřed porfyritového jádra
 Vitamín je nezbytný pro tvorbu
nukleových kyselin, tedy pro dělení
buněk
 Deficit je nejčastěji způsoben
poruchou absorpce při chronické
atrofické gastritidě, kdy žaludeční
sliznice netvoří mukoprotein nezbytný
pro vstřebávání vitaminu B12, tzv.
vnitřní faktor
 Ověření se provádí Schillingovým
testem, kdy se sleduje absorpce
vitamínu B12 po podání vnitřního
faktoru
Zdroje vitamínu B12
STANOVENÍ VITAMÍNU B12 (SÉRUM, PLAZMA)
 Imunochemické metody
 Elektrochemiluminiscence - Roche –
Elecsys – Vit. B 12 ze vzorku soutěží s vit. B
12 značeným biotinem o vazebná místa
na vnitřním faktoru značeným
rutheniovým komplexem
 Chemiluminiscence – Siemens – CentaurVitamín
B12 ze vzorku soutěží s vitamínem
B12 značeným akridinium esterem o
limitovanou koncentraci vnitřního faktoru
kovalentně vázaného na
paramagnetické částice. Po separaci
proběhne chemiluminiscenční reakce
s peroxidem vodíku a NaOH.
 Referenční rozmezí: 150 – 650 pmol/l
V současnosti se vitamín B12 stanovuje kompetitivním testem využívajícím vysoce čistého
vnitřního faktoru specifického pro vit. B 12 po uvolnění z endogenních vazebných proteinů.
Chemická struktura vitamínu B12
BIOCHEMIE ANÉMIÍ – VITAMÍN B9
(KYSELINA LISTOVÁ, FOLÁT)
 Tetrahydroderivát kyseliny listové je koenzymem
metabolismu jednouhlíkatých zbytků
 Uplatňuje se při řadě reakcí včetně tvorby nukleových
kyselin
 Nedostatek se projevuje podobně jako deficit vitaminu
B12, tj. megaloblastovou anémií
 Nedostatek velmi častý - je jednou z nejčastějších příčin
mírné hyperhomocysteinémie (vliv na sklerotické a
trombotické onemocnění periferních cév), u těhotných
může zvyšovat frekvenci defektu neurální trubice plodu
 Nedostatek může způsobit dieta bez čerstvého ovoce a
zeleniny, objevuje se u alkoholiků, drogově závislých,
nebo starších osob
Zdroje vitamínu B9
STANOVENÍ VITAMÍNU B9 (SÉRUM)
 Imunochemické metody:
 např. elektrochemiluminiscence
Roche – Elecsys
 Chemiluminiscence – Siemens –
Centaur, folát ze vzorku soutěží
s folátem značeným akridinium
esterem o limitovaný počet molekul
folát vázajícího proteinu značeného
biotinem. Tento protein se váže
k avidinu na paramagnetických
částicích. Po separaci probíhá
chemiluminiscenční reakce
s peroxidem vodíku a NaOH
 Referenční rozmezí: 10 – 50 nmol/l
Kompetitivní princip po uvolnění folátu z endogenních folát vázajících proteinů
Chemický vzorek kyseliny listové
BIOCHEMIE ANÉMIÍ - FERRITIN
 Zásobní vysokomolekulární bílkovina
obsahující železo
 Nachází se v játrech, slezině, kostní dřeni
a střevní sliznici
 Koncentrace ferritinu v séru odráží
tkáňové zásoby železa – její hladina klesá
dříve než roste koncentrace transferinu
 Zvýšení syntézy ferritinu je indukováno
nedostatkem železa v organismu
 Buňky některých nádorů, především
akutní myeloblastická leukémie nebo
mnohočetný myelom, produkují feritin koncentrace
ferritinu jako tumormarker
 Může být zvýšen rovněž u chronických
zánětů a onemocnění jater
Struktura ferritinu, bez přítomnosti Fe
apoferritin, H-podjednotka oxiduje Fe2+
na Fe3+
STANOVENÍ FERRITINU (SÉRUM, PLAZMA)
 Imunochemické metody:
 např. elektrochemiluminiscence - Roche – Elecsys
 Chemiluminiscence – Siemens – Immulite
Stanovení založeno na reakci jednoho epitopu
ferritinu s myší protilátkou navázanou na
polystyrénové kuličce a druhého epitopu
s polyklonální protilátkou konjugovanou s alkalickou
fosfatázou. Po promytí se přidá fosforečný ester
adamantyl dioxetanu - ten s ALP hydrolyzuje na
nestabilní meziprodukt. Meziprodukt se rozpadá za
produkce luminiscence
 Referenční rozmezí:
❖ Muži: 30 – 400 µg/l
❖ Ženy: 13 – 150 µg/l
Sendvičový princip
Analyzátor Immulite 2000 XPi
STANOVENÍ FERRITINU (SÉRUM, PLAZMA)
 Fluorescenční imunoanalýza
 BRAHMS – Kryptor
Dvě různé protilátky tvoří komplex
s feritinem. Jedna značena donorem
energie - kryptát europia, druhá
akceptorem energie – modifikovaný
protein XL 665. Po ozáření komplexu
dusíkovým laserem donor emituje
dlouhotrvající signál v ms, zatímco
nenavázaný akceptor generuje signál
v ns. Dochází rovněž k spektrálnímu
posunu. Velikost signálu je úměrná
koncentraci stanovovaného analytu.
Analyzátor Kryptor compact plus
BIOCHEMIE ANÉMIÍ – TRANSFERIN (Trf)
 Transportní protein pro železo
v séru
 Při anémii zvýšené hodnoty
 Při nedostatku železa velmi citlivý
indikátor saturace transferinu
 Využívá se i při monitorování
léčby anémie
 Stanovení transferinu (sérum, plazma):
 Imunoturbidimetricky
 Imunonefelometricky
 Např. Roche Diagnostics - Protilátky
proti transferinu reagují se
stanovovaným transferinem za
vzniku komplexu antigen-protilátka.
Reakce se provádí v přítomnosti
NaCl a PEG. Aglutinát se stanoví
turbidimetricky.
 Referenční meze: 2 – 3,6 g/l
Struktura transferinu
BIOCHEMIE ANÉMIÍ – SOLUBILNÍ
TRANSFERINOVÉ RECEPTORY - sTFR
 Transferinový receptor je integrální membránový protein
 Každá ze dvou podjednotek může vázat molekulu
transferinu nesoucí železo
 Účinkem proteolýzy vzniká rozpustná forma transferinového
receptoru
 sTFR je v plasmě přítomen v komplexu s transferinem
 Koncentrace sTFR je úměrná koncentraci receptoru na
membránách
 Při deficitu Fe se koncentrace sTFR v séru zvyšuje
 Na rozdíl od koncentrace ferritinu není koncentrace sTFR
ovlivněna reakcí akutní fáze, nebo maligními nádory
 Uplatňuje se v diferenciální diagnostice – rozlišení mezi
chronickým onemocněním a anémií z nedostatku Fe
Vznik sTFR
STANOVENÍ sTFR (SÉRUM, PLAZMA)
 Imunoturbidimetricky
 Např. Roche Diagnostics Částicemi
usnadněné
imunoturbidimetrické stanovení:
Lidský rozpustný transferinový
receptor aglutinuje s latexovými
částicemi, potaženými
s protilátkou proti rozpustnému
transferinovému receptoru.
Precipitát se stanoví
turbidimetricky
 Referenční meze: 2 – mg/l
ZDROJE OBRÁZKŮ
 https://www.internimedicina.cz/pdfs/int/2018/05/11.pdf
 https://www.denik.cz/veda-a-technika/umele-cervene-krvinky.html
 https://lekar.sk/clanok/anemia
 https://www.fit-day.cz/blog-a-recepty/mene-znamy-ale-zivotne-dulezity-vitamin-
b12/
 https://happybaby.cz/tehotenstvi/fit-v-tehotenstvi/kyselina-listova-b9/
 https://www.researchgate.net/figure/The-chemical-structure-of-vitamin-
B12_fig1_351055936
 https://www.naureus.cz/blog/detail/jaka-je-funkce-hormonu-a-jak-je-udrzet-v-
rovnovaze
 https://www.facebook.com/brainmarketcezet/photos/a.2032349100356709/2708563
999401879/?type=3
 https://www.labnetinternational.com/blog-tags/laboratory-trends
 https://www.rehabilitace.info/zdravotni/hypofyza-podvesek-mozkovy-funkce-a-
nemoci-poruchy-nadory/
 https://www.invitra.com/en/ovulation-induction-in-ivf/levels-hormonal-cycle-
menstrual/
 https://www.siemens-healthineers.com/en-us/immunoassay/systems/immulite-2000-
xpi-immunoassay-system
 https://shop.roche-diagnostics.ch/laboratoire/12148331122
 http://e-chembook.eu/vitaminy
ZDROJE OBRÁZKŮ
 https://www.lekarnickekapky.cz/nemoci-onemocneni/porucha-stitne-zlazy-a-
nadvaha.html
 https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/product/cerillian/d065
 https://is.muni.cz/th/qu9ah/DPvita-final.pdf
 https://postudium.cz/mod/book/view.php?id=6925&chapterid=2510
 https://is.vszdrav.cz/el/vsz/leto2021/PAOPG11211/um/osetrovatelstvi_v_gynekologii_-
_mudr_ondrej_vosta/4._Fyziologie_zeny__hormonalni_rizeni__menstruacni_cyklus.pdf?
lang=en
 https://www.biomol.com/search?sSearch=17beta-Estradiol
 https://preferredmedsupply.com/product/hcg-rapid-pregnancy-test-strip-urine/
 https://www.zdravizone.cz/co-obsahuje-zelezo-potraviny/
 https://www.drmama.cz/tehotenstvi/92-tehotenska-anemie-a-jak-ji-lecit
 https://www.axon-med.cz/2021/04/megaloblastova-anemie.html
 https://www.axon-med.cz/2021/04/anemie-chronickych-chorob.html
 https://www.researchgate.net/figure/Ferritin-structure-and-function-Ferritin-is-a-
major-intracellular-iron-storage-protein_fig1_256083480
 https://www.brahms.de/images/kryptor-analyzers/brahms-kryptor-compact-plus-
686.jpg