1
BÍLKOVINY KREVNÍ PLASMY
© Biochemický ústav LF MU (V.P.) 2008
2
BÍLKOVINY KREVNÍ PLASMY
dělení podle funkce:
1/ transportní proteiny
21 proteiny (reaktanty) akutní fáze
3A proteiny srážení krve
4f proteiny imunitního systému
5/ regulační proteiny
6/ proteiny a jejich fragmenty uvolňované při degradaci nebo poškození buněk a tkání
Elektroforéza proteinů lidské plazmy
(acetylcelulosa, pH = 8,6)
elektroforeogram
denzitometrické vyhodnocení
Alb.    Alpha.] Alpha2 Beta Gamma
Proteinové frakce lidské krevní plazmy
Proteinová frakce	% z eelkovgjh D^otemů plazmy	Např.
albumin	59,2	prealbumin (transthyretin) PliEA albumin ALB
Otj-globuliny	3,9	a,-^Ivkoprolcin (kyselý) Ä1AG a,-antitrypsin AiAT a,-lipoprotein (HDL)
Oj-globuliny	, 7,5	ceruioplnsmin CPL haptoglobin řiPG a2-makroglobulin A2M
p-globuliny	12,1	kcmopexici IIPX transferrin TR1< fibrinogen FBG [^-lipoprotein (LDL)
y-globuliny	17,3 1	IgM, IgA, IgE, IgD, IgG
044-O,* 35-SO
6
Haptoglobin (Hp)
oc2-globulin krevní plasmy, glykoprotein (Mr= 86.000). Váže volný Hb, pokud se abnormálně vyskytuje v krevní plasmě. (2 Hb : 1 Hp) ® RES jater (Kupffe-rovy bb.)
[Existují 3 genetické varianty, složené ze 2 druhů bílkovinných řetězců („1 a 2" nebo „a a b"), které se kombinují ve dvou podjednotkách. Výsledek je Hp 1-1, Hp 2-1 a Hp 2-2].
Hemopexin (Hpx)
b1-globulin krevní plasmy (Mr= 57.000). Váže v krevní plasmě volný hem.
7
[J Norma! Pattern
Abnormal Cbanqes
Cystatin C, clearance:
Kreatininová clearance je nahrazována clearancí cystatinu C. Je to nízkomolekulární bílkovina, která má v extracelulárních tekutinách funkci inhibitoru cysteinových proteas (odtud název: Cys + statin).
Cystatin C je rovnoměrně uvolňován z buněk do krevního oběhu, kde jeho koncentrace je stálá (nezávislá např. na zánětlivých stavech).
[Cystatin C vykazuje větší intraindividuální variabilitu, ale menší
interindividuální variabilitu ve srovnání s kreatininem. To
umožňuje časnější odhalení poškozené ledvinové funkce.]
V ledvině je vylučován výhradně glomerulární filtrací (kreatinin
také v nepatrné míře tubulární sekrecí!).
Stanovuje se imunochemicky. Určitá omezení diagnostického
významu lze očekávat u některých onkologických pacientů a
u nemocných po transplantaci ledvin.) 13
Micral test (mikroalbuminemie)
diabetes:
neenzymová glykace kolagenu v bazálni membráně glomerulů
hypertenze:
zvýšený filtrační tlak
1							A.
i							
1 2 3     4        5       6 7
1. nosná fólie
2. „zásobník" moče
3. pufrovací zóna.
4. protilátka značená zlatem
5. zóna se zakotveným albuminem (k zachycení přebytku protilátky)
6. zóna barevné reakce
7. průsvitná fólie l4
Wiera I-Test
MICRO-JU.BUMINUR
I
„Albumin < 20 mg . l1 "
(v ranní moči)
15
16
17
18
Proteinurie
19
Proteinurie
20
Typy proteinurií				Elektroforeogram SDS-PAGE		
			1 i 1 i—< OD Sgji CA 1—1 a	c	Proteinurie	
	i—i	transferin albumin CCj -antitrypsin		di-Hb retinol vázající prote	mono-Hb ß2 -mikroglobulin	
-	1	1 ■ 1 1		1 1	1 [	
Mr	. 103 150	89         67 54 i i	44	32 22	16 12	
		i i glomerulární selektivní				
	> i neselektivní glomemlární i					
		tubulární nekompletní				
				tubulární		i
Mikroalbuminurie (20 ■		■ 300 mg/d) - časný indikátor začínající diabetické nefropatie				21
Proteinasy :
• hydrolasy (EC 3.4.....)
• podskupina proteas - „endopeptidasy"
• skupiny proteinas - dle svého aktivního centra:
1./2. Ser / Thr — trypsin, chymotrypsin, elastasa,
koagulační enzymy, proteasom kallikreiny
3. Cys — papain, kathepsiny, kaspasy, ..
4. Asp — pepsin, kathepsiny, renin
5. (Glu)
6. metallokomplex — ACE
22
Kallikreiny :
• serinové proteinasy, hormonálně regulované
• původ: hl. hormonálně závislé tkáně
(mléčná žláza, vaječník / prostata, varle)
• funkce: není zcela známá  ~ hemokoagulace
~ fibrinolýza ~ trávení
~ regenerace a remodelace
ECM   ( = extracelulární matrix )
~ aktivace receptoru
• onkologie: vztah mezi růstem mortality a aktivitou
kallikreinů
23
Kaspasv :	
Caspase = Cysteine-dependent ASPartate specific proteASE	
(akronym, zkratkové slovo)	
zv. neurovegetativní choroby,      sn. nádorové bb.	
infarkt,	
mozková mrtvice	
• proteinasy Cys typu	
• účastní se apoptózy	
• existují kaskády kaspas	
• v klidovém stavu v bb. přítomny jako zymogeny	
(pro-kaspasové molekuly)	
	24
25