ROZDĚLENÍ ANTIMIKROBIÁLNÍCH LÁTEK,
VYŠETŘOVÁNÍ CITLIVOSTI
M.Hanslianová
Antibiotické středisko
OKM FN Brno

Antimikrobiální látky
I.Antibiotika= léčiva používaná k profylaxi a terapii infekčních onemocnění
II.Antimykotika
III.Antiparazitika
IV.Antivirotika
o

Betalaktamová antibiotika
oObsahují betalaktamový kruh
oInhibice syntézy buněčné stěny- baktericidní
oZanedbatelná toxicita (lze podávat i novorozencům, těhotným a lidem s poruchami orgánových funkcí)
oAlergické reakce, zkřížené alergie

1)Peniciliny
2)Cefalosporiny
3)Karbapenemy
4)Monobaktamy
o

Makrolidy
oErythromycin, klarithromycin, azithromycin
oInhibice proteosyntézy- bakteriostatické
oLék volby u alergiků na penicilinová antibiotika
oÚčinek na tzv. „atypické mikroby“(mykoplasmata, ureoplasmata, chlamydie, legionely)

Linkosamidy
oLinkomycin, klindamycin
oInhibice proteosyntézy- bakteriostatické
oVýborný průnik do kostní tkáně
oMožnost vzniku pseudomembranózní kolitidy vyvolané Clostridium difficile
o

oTetracyklin, doxycyklin
oInhibice proteosyntézy- bakteriostatické
oÚčinek na tzv. „atypické patogeny“(mykoplasmata, ureoplasmata, chlamydie, legionely)
o KI u dětí do 8 let
oGlycylcykliny- nová řada tetracyklinů- tigecyklin
Tetracykliny

Aminoglykosidy
oGentamicin, tobramycin, amikacin
oInhibice proteosyntézy- baktericidní!
oPouze parenterální
oNefrotoxické, ototoxické- nutnost měření hladin
oProkázaná synergie s betalaktamy
o

Amfenikoly
ochloramfenikol
oInhibice proteosyntézy- bakteriostatický
oVýborné průniky do tkání včetně likvoru
oToxicita, zejména útlum kostní dřeně (reverzibilní, ireverzibilní)
oOmezený pouze na některé indikace

Polypeptidy
oKolistin
oPorucha funkce buněčné membrány- baktericidní
oToxické- nefrotoxicita
oV současné době jediné fungující antibiotikum u polyrezistentních kmenů gramnegativních baktérií

Glykopeptidy
oVankomycin, teikoplanin
oInhibice syntézy buněčné stěny- baktericidní
oRezervní antibiotika pro rezistentní stafylokoky a enterokoky
oNefro-, ototoxicita

Chinolony
oCiprofloxacin, ofloxacin, norfloxacin
oInhibice syntézy nukleových kyselin- baktericidní
oAntibiotika ohrožená v současné době výrazným vzestupem rezistence
oSelektory rezistentních kmenů
o

Ostatní antibiotika
1)Ansamyciny- rifampicin
2)Sulfonamidy- kotrimoxazol
3)Nitroimidazoly- metronidazol
4)Nitrofurany- nitrofurantoin
5)Streptograminy- Synercid
6)Oxazolidinony- Zyvoxid

Vyšetřování citlivosti k antibiotikům
1)Disková difuzní metoda
o     Stanoví se citlivost nebo rezistence podle toho, zda vyšetřovaná baktérie ve stanovené
koncentraci buněk na agarové půdě vytvoří nebo nevytvoří přípustnou inhibiční zónu kolem disku s
určitou koncentrací antibiotika po předepsané době inkubace




1) Půdy
oMueller Hinton agar (MHA)- nejpoužívanější, nízký obsah antagonistů antibiotik
oMHA+ 5% ovčí krve- pro náročnější baktérie (pneumokoky, streptokoky,meningokoky)
o    krev- ovlivňuje výsledky citlivosti!

Stafylokoky na půdě s krví- u OXA až o 3 mm menší zóny, krev zesiluje účinek cefalosporinů a
aminoglykosidů na enterokoky,příčina povlaků u disků se sulfonamidy




oObohacené půdy pro některé náročnější baktérie- haemofily- HTM, gonokoky
oPh půdy, výška půdy


2) Inokulum
oZásadním způsobem ovlivňuje výsledek diskové difuzní metody
oKoncentrace inokula- 0,5-1 McFarlandova zákalového  standardu (1,5-3x 10 na 8 buněk/ml)
oSprávné inokulum= splývavý růst kmene

oOčkování na suché půdy vytemperované na pokojovou teplotu
oOčkování přelitím
oOčkování roztěrem

3) Antibiotické disky
oSestavy antibiotik podle vyšetřované baktérie (doporučené sestavy-NRL pro antibiotika)
oZákladní a rozšířené řady
oSestavy antibiotik podle klinického materiálu
oTerapeutické disky, diagnostické disky

oInkubace 18-24 hodin při 36 st.C
oAerobní, anaerobní, mikroaerofilní (5% CO2) prostředí
oHodnocení inhibiční zóny- porovnání s hraničními hodnotami pro citlivé kmeny
oKvalitativní a kvantitativní hodnocení

oU některých kmenů a některých materiálů je disková difuzní metoda nedostačující, nutno vyšetřit
MIC- minimální inhibiční koncentraci!
oMIC= nejnižší koncentrace antimikrobiální látky, která je schopna zastavit růst baktérie
oMBC= nejnižší koncentrace antibiotika, která je schopna usmrtit baktérii

Vyšetřování citlivosti k antibiotikům
2)Diluční mikrometoda
o    hodnotí se MIC v jamkách mikrotitrační destičky, které obsahují zvolené koncentrace antibiotik
v bujónu
o    MIC= první nezkalená jamka mikrotitrační destičky







oInokulum (ředění 1:10)
oOčkování
oInkubace
oSestavy antibiotik

MIC- výhody
oKvalitativní metoda- číselná hodnota
oHodnota MIC důležitá pro některé kmeny a diagnózy
oKlinické breakpointy:
o   Streptococcus pneumoniae- meningitis x pneumonie

MIC- nevýhody
oObtížné stanovení různých typů rezistence a produkce betalaktamáz


E test
oPlastikový proužek napuštěný antibiotikem ve stoupající koncentraci
oMIC- odečítá se v místě, kde inhibiční zóna protíná proužek

oVyšetření citlivosti resp. rezistence k antibiotikům má řadu úskalí a vyžaduje erudici a přesnost
oIdeální je kombinace více metod v laboratoři