Automatické analyzátory chemické a morfologické analýzy moče Petr Breinek Logo MU Chemická analýza moče •Vývoj ü„Mokrá chemie“ (např. Bílkoviny-zkouška s kyselinou sulfosalicylovou, Redukující cukry-Fehlingova zkouška, Bilirubin-jodový roztok, Urobilinogen-Ehrlichova zkouška, Ketolátky- Lestradetovo činidlo, …..) – manuální postup, snaha o standardizaci, bez kontrol • üMočové (diagnostické) proužky (první pokusy: glukóza, později v ČR firma Lachema- pHAN®,…) – manuální postup, subjektivní odečet üAutomatizace od 80. let minulého století (původně pouze vyhodnocení s využitím reflexní fotometrie, nyní úplná automatizace) Chemická analýza moče • Semikvantitativní stanovení • pH • Specifická hmotnost • Bílkoviny • Glukóza • Ketolátky • Bilirubin • Urobilinogen • Hemoglobin • Leukocyty • Dusitany • • • Reflexní fotometrie •Zdroj světla - světlo emitující diody •Emitují světlo o různých přesně definovaných vlnových délkách – světlo pak dopadá v různých úhlech na reagenční zóny diagnostického proužku •Světlo je odráženo na fotodiodu , která slouží jako detektor •Intenzita odraženého světla závisí na vybarvení reakční zóny (od bílé zóny se odráží prakticky 100%, čím tmavší zóna, tím víc světla je absorbováno) Analyzátor Laura® üDiagnostické proužky • DekaPHAN Laura • HeptaPHAN Laura • PentaPHAN Laura • DiaPHAN Laura • MikroalbuPHAN Laura üSemikvantitativní reflexní fotometr (CCD kamera + LED) üKapacita: • 400 proužků/h (60) • nebo 240 proužků/h üExterní komunikace s LIS üKalibrace kontrolními proužky üMožnost připojení čtečky čárového kódu ü Analyzátor Urisys 2400 üZásoba 400 proužků ü15 stojánků (75 vzorků) üMinimální objem vzorku 1,5 ml üSTAT pozice üČtečka čárových kódů (identifikace vzorků) üKalibrace 1x měsíčně üPřipojení k LIS ü Analyzátor DIRUI H-500 üDiagnostické proužky • Uristik H10, H11, H11-MA üPrincip měření: reflexní fotometrie üVýkon: 514 testů/h • üExterní komunikace s LIS Analyzátor Arkray AX 4280 Aution Max Morfologické vyšetření moče •Vývoj üMikroskopické vyšetření močového sedimentu – manuální postup, snaha o standardizaci, bez kontrol • üAutomatické vyšetření • vPrůtoková cytometrie – manuální postup, subjektivní odečet v„Analýza obrazu“ v • •viz také: www.sekk.cz/atlas • Mikroskopické vyšetření močového sedimentu §Nativní mikroskopie močového sedimentu – a)koncentrovaná moč (10x), 2000g, 10 min, sediment, zvětšení 400x – b)Hamburgerův sediment §Supravitální barvení močového sedimentu • (podle Sternheimra : alciánová modř + pyronin B) • • • UX-2000 Analyzátor močového sedimentu a chemické analýzy üFluorescenční průtoková cytometrie pro analýzu močového sedimentu üReflexní fotometrie pro chemickou analýzu ü200 vzorů/h (chemická analýza) ü100 vzorů/h (sediment samostatně) ü150 vzorů/h (chemická analýza + sediment)) üPodavač: 60 vzorků üČtečka čárových kódů (identifikace vzorků) üPřipojení k LIS ü Fully Automated Integrated Urine Analyzer UX-2000 U:\Marketing_Diagnostic_Concepts\Urinalysis\UX\UX2000Photos\UX2000Photos\MeditapeEntry.jpg •Glucose (GLU) •Protein (PRO) •Blood (BLD) •Bilirubin (BIL) •Urobilinogen (URO) •Ketone Body (KET) •pH •Nitrite (NIT) •Leukocyte (LEU) •Albumin (ALB): only 10K •Creatinine (CRE): only 10U, 10K MEDITAPE Ⅱ Items UF-1000i •Princip: •Fluorescenční průtoková cytometrie a konduktometrie ü100 vzorků/h ü1200 µl (podavač) ü 800 µl (manuálně) üPodavač: 60 vzorků üČtečka čárových kódů (identifikace vzorků) üPřipojení k LIS üKategorizace částic podle vnějšího tvaru, vnitřní stavby, povrchové struktury,…místo pouhé velikosti a vzhledu üVyhodnocení kvality erytrocytů üFluorescenční barvení bakterií • Průtoková cytometrie •Vzorek moče je automaticky naředěn a obarven a obklopen kapalinou neobsahující žádné buňky •Prochází měřící celou, kde je ozářen argonovým laserem •Fluorescence a rozptyl světla vznikající po ozáření se detekuje a je specifická pro jednotlivé buňky •Buňky lze rozlišit podle jejich velikosti (FSC), granularity (SSC), obsahu DNA, značením Mab,..) •Výsledky jsou vydány jako počet buněk /µl (erytrocyty, leukocyty atd.) •Nevýhoda - jednotlivé částice nemůže obsluha prohlížet UF 1000i Grafický výstup z přístroje UF 100 (Sysmex) IQ 200 (IRIS) – analýza obrazu •Plně automatizovaná analýza moče pracující s technologií průtokového snímání vzorku •60 vzorků/hod •Možnost prohlížení částic na obrazovce •Možnost přeřazení do jiné kategorie •Přístroj rozlišuje 12 základních kategorií (např. erytrocyty, leukocyty, epitelie, válce) a umožňuje tvorbu podkategorií •Archivace zobrazení IQ 200 (IRIS) - princip přístroje •Tenká vrstvička vzorku uzavřená mezi vrstvy suspendované tekutiny se dostává do mikroskopu, který je spojen s digitální kamerou. •Kamera s využitím stroboskopu zachytí 500 obrázků z jednoho vzorku - výsledný obraz je digitalizován •Jednotlivé obrazy částic jsou izolovány do rámečků – každá částice zvlášť Erytrocyty – zobrazení z IQ 200 Kompletní systém močové analýzy •IQ 200 (Iris) v kombinaci s Aution Max AX-4030 (Arkray) • • zjednodušení provozu • vložíme vzorek a získáme kompletní výsledek IQAX System Front view Kompletní systém močové analýzy •iRICELL®2000 ( iQ200ELITE + iChemVELOCITY) • • zjednodušení provozu • vložíme vzorek a získáme kompletní výsledek •210 + 101 výsledků /h LabUMat and UriSed • LabUMat - UriSed UriSed •Hlavní výhody přístroje: •není potřeba žádných drahých reagentů, pro provoz stačí pouze destilovaná voda k promývání pipety •každý vzorek je prohlížen v jednorázové kyvetě •pokud analýza proběhne standardní cestou, výsledky mohou být jednoduše porovnány •výsledkem jsou jasné, ostré obrázky jednotlivých částic močového sedimentu. Obsluha si může prohlédnout obrázky libovolného vzorku pro kontrolu. •lze si prohlížet obrázek jednotlivé částice nebo celého zorného pole. Mohou být prohlédnuty všechny částice, nejen ty, které přístroj rozpoznal. •všechny obrázky jsou pak uloženy v databázi, odtud mohou být kdykoli vyvolány •