Mikroskopické techniky MUDr. Jana Tůmová OKB FN Brno Historie mikroskopu •1590 – otec+syn Jansenovi (holand. brusiči skla, diamantů), 1610 G.Galilei •1670 – A.van Leeuwenhoek (holand. obchodník s textilem, amatér-otec mikrobiologie, krevní b.) •1665 – angl.fyzik R.Hooke, složený mikroskop •L.Pasteur (kvasinky), R.Koch (tbc,cholera) •1847 – C.Zeiss, 1.výrobce •1873 – něm.fyzik E.Abbe, teorie opt.přístrojů •1931 – něm.fyzik E.Ruska, elektronový mikroskop (1986 NC) • Mikroskopie •Rozlišovací schopnost oka (0,2 mm) •Světelná mikroskopie (0,2 μm) • lupa, světelný mikroskop •Elektronová mikroskopie (1-0,2 nm) • TEM, SEM, (AFM) •Paprsky (svět./el.) vystupují od předmětu do •čočky, lámou se a vytvářejí zvětšený obraz. Optika • • Světlo = úzká oblast elektromagnet. záření viditelná okem (vlnění, 300tis.km/s) • • Délka vln 380-780 nm (bílé/polychromat.světlo) • barva: 380nm fialová, 450nm modrá, • 500nm zelená, 550nm žlutá, 600nm oranž., • od 650nm červená • • Vlny kratší - UV,RTG,γ, delší - IR,rádiové • • • Záření – vlnové délky Optika •Amplituda (výška) vlny = intenzita světla •Rozhraní 2 prostředí • Odraz: • úhel dopadu=úhlu odrazu, ve stejné rovině • Lom: • vychýlení ke kolmici dopadu (do prostředí hustšího) • od kolmice dopadu (do prostředí řidšího) •Index lomu N (=opt. hustota prostředí): • vzduch 1,0 - voda 1,33 - sklo 1,46 – olej 1,5 – • diamant 2,42 • • Optika •Disperze (rozklad) • závislost indexu lomu na vlnové délce • bílé světlo se hranolem rozloží dle vln. délky na jednotlivé barvy (duha) •Interference (skládání) • rozdělení a násled. spojení 2 světel.toků • dle synchronizace je fáze vlnění stejná n. posunutá a intenzita +vyšší nebo -nižší Čočky Optická tělesa průhledná •Čočky • tvar: vypuklý/konvexní, spojky- svazek sbíhavý • vydutý/konkávní, rozptylky- sv.rozbíhavý • opt. střed O s osou, hl.rovina (kolmá na osu) • ohnisko F přední-obrazové, F' zadní-předmět. •Hranoly • broušené pod růz. úhly- změna chodu paprsků • nikoly z island. vápence k polarizaci paprsků • Čočky •Vytvoření obrazu spojkou pomocí 3 paprsků: • rovnoběžný s osou – lom do ohniska • hlavní (středem č.) – neláme se • v předmět.ohnisku – lom rovnoběžně s osou • •Druh obrazu dle polohy předmětu • skutečný (za čočkou, lze pozorovat okem/na filmu) • zmenšený a převrácený… předmět >2F • zvětšený a převrácený… předmět do 2F • neskutečný (před čočkou, lze pozorovat jen okem) • zvětšený a přímý… předmět