BC_Suchá chemie_2011 1 Principy suché chemie Petr Breinek Logo MU Využití •Močová analýza – diagnostické proužky • • •POCT – imunoanalytické kazety, diagnostické proužky • • •Automatické analyzátory – řada analyzátorů Vitros, Ortho • cartridges-large Chemické vyšetření močí •Močové proužky • PH, Glukosa, Ketony Bezpečná suchá chemie Standardní vlastnosti Praktické použití v laboratoři • Subjektivní odečet Kalibrace ? Manuální zpracování • Průběh reakce •Analyzovaný vzorek (moč, krev, sérum nebo plasma) je aplikován na povrch pevné fáze • •Difunduje do její matrice (u plné krve krevní elementy zůstanou na povrchu – filtrace) a rozpouští suché činidlo, které je v matrici dispergováno • •Rozpuštěné činidlo reaguje s analyzovanou látkou za vzniku barevného produktu • •Výsledné zbarvení na povrchu pevné fáze je sledováno vizuálně nebo instrumentálně Princip měření - reflektometrie Nosná vrstva Reakční vrstva 光学系AX Detektor (Fotodioda) LED Delší životnost ve srovnání s lampou, většinou není nutná výměna Odrazivost (Reflectivity) –Poměr intenzity odraženého světla k intenzitě světla zdroje. –Poměr 100% v případě nezbarvené reakční zony –Čím intenzivnější zbarvení, tím je menší odrazivos －　　 1＋　 2＋　 3＋　 4＋ ５５５nm LED Reflexní fotometrie •Impregnovaná vlákna mají vysokou opacitu (neprůhlednost) • •Ke stanovení jejich zbarvení nutno využít reflexní fotometrii • - měření reflexe plochy na kterou byl aplikován vzorek (Bayer – Siemens) • - měření ze stejné strany jako nanesen vzorek, ale na jiném místě (Roche, vhodné i pro plnou krev – přístroj Reflotron) • - měření z opačné strany než aplikován vzorek (vícevrstvé filmy) Reflotron (Roche) Reflotron (Roche) image002 Glukometry a lancety xceed_big omega_big autolanceta_freestyle_big autolanceta_easy_touch_big 2009-02-01_11-31-20-920 4 strips Patent: US#6,287,451;6,837,976;EP#1 212 609;CA 2,375,092 Vrchní krycí —Zjednodušuje manipulaci —Snižuje riziko infekce Vnitřní s kapilárou (Accufil System) —1.2 µL mikrokapilára pro aspiraci krve —Kapilární efekt Vnitřní se 4 měrnými komůrkami —Měření glukózy a interferencí —Měření pouze interferencí —Měření hematokritu —Referenční - 4. komůrka je tzv. spouštěčem měření Spodní pozlacená —Vzácný kov; velice stabilní —Odstraňuje problémy s kalibračními kódy —Převod elektrického signálu do glukometru See Talk Tracks Biosenzory: stanovení glukózy Glukózový senzor obsahuje většinou čtyři elektrody: • platinovou měrnou elektrodu potaženou glukózooxidázou • srovnávací argentchloridovou elektrodu • platinovou elektrodu určenou ke stabilizaci konstantního potenciálu • platinovou elektrodu bez enzymu sloužící ke stanovení interferujících látek i-STAT 2009-02-01_11-31-20-920 istat1-large cartridges-large üPoužití reagenčních a promývacích kazet üAutomatická kalibrace (jedno a dvoubodová) a kontrola kvality üMožnost automatické správy dat (RAPIDComm™) EPOCAL Epocal-Inc.png bgem_cards610.jpg results_inhand511.jpg MicroSlideTM TECHNOLOGIE Vitros Vícevrstvý film •Technika poprvé popsána v r.1978 • •Činidla neobalují vlákna – jsou uložena v tenkých plochých vrstvách • •Jako podkladová báze bílkovina – zpravidla želatina • •Činidla umístěna v matrici hydrofilního polymeru – ten nanesen na průhlednou plastovou fólii (během nasávání polymer zbobtná – tak reguluje množství séra) Analyzátory řady Vitros, Ortho •Pracují bez kapalných reagencií •Reakční zónu tvoří tzv. „slide“, na kterém je • zabudována suchá reagenční multivrstva na podložce z polystyrenu •Princip - reflexní fotometrie - výpočet koncentrace využívá Williams – Clapperova vztahu – pro kalibrační křivku nutné tři koncentrační hladiny • - potenciometrie •Doba analýzy - test do 5 minut J & J Vitros 950 J a J Vitros 950, Ortho Balení slidů Slidy jsou baleny do cartridgů po 18, 50 nebo 60 SuppliesGroupShot VITROS Clinical waste! Rozdělení slidů Substráty & Enzymy Økolorimetrické testy Øend-point Ødvoubodová kinetika Øvícebodová kinetika Elektrolyty Øpřímá potenciometrie Øionselektivní elektrody (ISE) Imunologické Testy Økolorimetrické testy Øsendvičová technika Økompetitivní technika Øvícebodová kinetika Složení slideu pro substráty Rozdělovací vrstva Reakční vrstva Indikátorová vrstva Nosná vrstva polyesterová folie rovnoměrné rozdělení vzorku místo chemické reakce vznik barevné reakce Složení slideu pro elektrolyty vzorek referenční tekutina ion selektivní membrána KCl AgCl Ag - Na - K - Cl - CO2 papírový můstek ion selektivní membrána KCl AgCl Ag - Princip ionselektivních elektrod - Rozdíl potenciálů referenční tekutiny a vzorku - Jednorázové elektrody - - Odpadá problém o péči o ISE Na jamce Princip detekce Oxidace luminolu První systém rodiny FUSION SERIES…. Vitros w Stripe 1 5,1_Logo Vitros 5600 VITROS%205600%20low-res