Viry
•Mají jednu NK
•Jsou malé
•Syntetizují své složky
C:\Documents and Settings\lenka\My Documents\prace\LF MU\jarní semestr\aids-hiv.jpg

Průkaz virů      Nepřímá dg.
• Přímá
•Mikroskopie      světelná (pouze velké viry –POXVIRY)
•
•elektronová (neg. znázornění kys. fosfowolframovou)
•celý virion (Rotavirus)     inkluze (Negriho tělíska – vzteklina)
•PCR
•Imunofluorescence – v souvislosti s kultivací (shell vial, úkol 4)
•Izolace – na zvířeti, kuř. zárodku (10ti denní), tk. kultuře
•ELISA (Rotavirus)
•

Pokusná zvířata ve virologii
ØMyš (HSV)
Ø
Ø
ØSající myšata (Coxsackie viry, kl. encefalitida)
Ø
Ø
ØKrálík (rohovka- herpes virus)
Ø

Kuřecí zárodek obr.(úkol 2)
C:\Documents and Settings\lenka\Desktop\vajicko.jpg


Tkáňové kultury (úkol 3)
•Použitelné 1x 2x a vícekrát
•Primární kultury Diploidní k.
•Opičí ledviny Lidské embryon. plíce (LEP)
•
• Nezničitelné z nádorů
• Bb. linie (HELA bb.)

Příprava tkáňových kultur
  MEM (médium)
 + ATB+ bb. z nějaké    tkáně
Kultivace v Roux láhvi
+ Materiál
Změna vzhledu buněk (i barvy média)
CPE (cytopatický efekt)
Jiné – neuvidíme v mikroskopu
I. Plaky (díry)
II. Zakulacení +olupování buněk
III. Syncitia (soubunní)
I.
I.
Opičí bb.
fibroblasty
Další dourčení viru
Vizualizace
Interference
Hemadsorbce   navážeme krvinky
1.Musíme mít virus s CPE tvorbou
2. Náš virus
Zábrana CPE , bb. rostou dál

Nepřímá dg. virů (průk. p.l.)
•KFR (ag+pl + C + Indikátorový systém
•
•Zábrana hemolýzy v + případě       hemolýza
•                      (nutno odebrat 2 vzorky) – úkol 5
•ELISA
•Imunofluorescence
•Western blott
•HIT (p.l. se váže na virus a brání mu v aglutinaci) – platí pouze pro hemaglutinační viry – úkol 6
•Neutralizace

Shell vial (úkol 4)-rychlá kultivace – v ohrožení života
TK na skle v lahvičce
+ materiál (likvor)
centrifugace
Kultivace 1 den při 37 °C
Vyjmutí krycího skla, přilepení na podložní sklo
Nepřímá IF (CMV)
Přímá IF (Herpesviry 1,2)
         Podložní sklo
     Krycí sklo + Ag
p.l. značená fl. tzv. konjugát
Monoklon. p.l.
Konjugát
Preparát září