Chemická analýza moče • •automatizace od 80. let minulého století •přístroje využívají stanovení parametrů pomocí diagnostických proužků (suchá chemie) •semikvantitativní stanovení bilirubinu, urobilinogenu, bílkoviny, ketonů, hemoglobinu, leukocytů, dusitanů, pH, glukosy a specifické hmotnosti •standardizace měřící procedury •namáčení proužků x pipetování na jednotlivé reakční zóny •analýza na principu reflexní fotometrie Diagnostické proužky •Matrice pro suchá činidla - Impregnovaná vlákna • •Analyzovaný vzorek (moč) je aplikován na povrch pevné fáze •Difunduje do její matrice a rozpouští suché činidlo, které je v matrici dispergováno • •Rozpuštěné činidlo reaguje s analyzovanou látkou za vzniku barevného produktu • •Výsledné zbarvení na povrchu pevné fáze je sledováno vizuálně nebo instrumentálně Celulózová impregnovaná vlákna •Celulózová matrice (firma Bayer – Siemens) porézní či polopropustná • •Reagencie v suché formě distribuovány - do matrice - na povrchu matrice •Postupná impregnace a zasoušení jednotlivých činidel • •Činidla oddělena separační vrstvou polymeru (ta při hydrataci praskne) Reflexní fotometrie Impregnovaná vlákna mají vysokou opacitu (neprůhlednost) Ke stanovení jejich zbarvení nutno využít reflexní fotometrii - měření reflexe plochy na kterou byl aplikován vzorek (Bayer – Siemens) - měření ze stejné strany jako nanesen vzorek, ale na jiném místě (Roche, vhodné i pro plnou krev – přístroj Reflotron) - měření z opačné strany než aplikován vzorek (vícevrstvé filmy) Chemická analýza moče •Reflexní fotometrie: •zdroj světla - světlo emitující diody •emitují světlo o různých přesně definovaných vlnových délkách – světlo pak dopadá v různých úhlech na reagenční zóny diagnostického proužku •světlo je odráženo na fotodiodu , která slouží jako detektor •intenzita odraženého světla závisí na vybarvení reakční zóny (od bílé zóny se odráží prakticky 100%, čím tmavší zóna, tím víc světla je absorbováno) Chemická analýza moče •Příklady analyzátorů: •pro malé laboratoře - • Miditron Junior, Urisys 1800 (Roche Diagnostic) • Aution Mini (Arkray) • •vysokokapacitní – • Urisys 2400 (Roche Diagnostic) • Aution Max (Arkray) Urisys 2400 (Roche Diagnostic) • •plně automatický močový analyzátor pro střední a velké laboratoře •kazety s 400 vyšetřovacími proužky •snadné vkládání vzorků ve stojanech, posuv po pásovém dopravníku •identifikace vzorků integrovanou čtečkou čárového kódu •pozice pro statimové vzorky •minimální objem vzorku 1.5ml •https://www.mylabonline.com/products/urinalysis/2400.php Urisys 2400 (Roche Diagnostic) strip Průtoková cytometrie •UF 100 (Sysmex) •vzorek moče je automaticky naředěn a obarven a obklopen kapalinou neobsahující žádné buňky •prochází měřící celou, kde je ozářen argonovým laserem •fluorescence a rozptyl světla vznikající po ozáření se detekuje a je specifická pro jednotlivé buňky •výsledky jsou vydány jako počet buněk /ul (erytrocyty, leukocyty atd.) •nevýhoda - jednotlivé částice nemůže obsluha prohlížet IQ 200 (IRIS) – mikroskopická analýza •plně automatizovaná mikroskopická analýza •60 vzorků/hod •možnost prohlížení částic na obrazovce •možnost přeřazení do jiné kategorie •přístroj rozlišuje 12 základních kategorií (např. erytrocyty, leukocyty, epitelie, válce) a umožňuje tvorbu podkategorií •archivace zobrazení IQ 200 (IRIS) •Princip přístroje: •tenká vrstvička vzorku sendvičovitě uzavřená mezi vrstvy suspendované tekutiny se dostává do mikroskopu, který je spojen s digitální kamerou. •kamera s využitím stroboskopu zachytí 500 obrázků z jednoho vzorku - výsledný obraz je digitalizován •jednotlivé obrazy částic jsou izolovány do rámečků – každá částice zvlášť Erytrocyty – zobrazení z IQ 200 Kompletní systém močové analýzy •IQ 200 (Iris) v kombinaci s Aution Max AX-4280 (Arkray) • • zjednodušení provozu • vložíme vzorek a získáme kompletní výsledek IQAX System Front view FUS-2000, DIRUI http://www.dirui.com.cn/Y02/zyj_img_cp/s2000_1b.jpg •Přístroj je hybridní močový analyzátor • •Provádí chemickou analýzu i automatizované mikroskopické vyšetření moče • •Princip je stejný jako u systému iQ 200 – Aution Max, ale zařízení je umístěno v jednom přístroji •Pro obě metodiky je využit jeden pipetor • •Čínský výrobce LabUMat and UriSed 2, Elektronika – dodává DOT diagnostic a Biovendor • LabUMat - UriSed UriSed •Hlavní výhody přístroje: •není potřeba žádných drahých reagentů, pro provoz stačí pouze destilovaná voda k promývání pipety •každý vzorek je prohlížen v jednorázové kyvetě •pokud analýza proběhne standardní cestou, výsledky mohou být jednoduše porovnány •výsledkem jsou jasné, ostré obrázky jednotlivých částic močového sedimentu. Obsluha si může prohlédnout obrázky libovolného vzorku pro kontrolu. •lze si prohlížet obrázek jednotlivé částice nebo celého zorného pole. Mohou být prohlédnuty všechny částice, nejen ty, které přístroj rozpoznal. •všechny obrázky jsou pak uloženy v databázi, odtud mohou být kdykoli vyvolány •