Klíč k určování běžně kultivovatelných bakterií a kvasinek Výchozí situace: neznámý kmen vyrostl na krevním, Endově či čokoládovém agaru za aerobních podmínek za 24 hodin. 1. Jakou barvu má ta potvora při Gramově barvení? Fialovou – 2 Červenou – 13 2. Jaký tvar a velikost má ta potvora při Gramově barvení? Kok – 3 Tyčinka – 11 Kvasinka – 12 3. Když se odebere pár kolonií a smíchá s peroxidem vodíku (kataláza): šumí, bakterie také roste na půdě s 10 % NaCl – 4 nešumí, bakterie také neroste na půdě s 10 % NaCl – 5 4. Další testy prokazují koaguláza, clumping faktor i hyaluronidáza je pozitivní – Staphylococcus aureus koaguláza, clumping faktor i hyaluronidáza je negativní – koaguláza negativní stafylokok (možné další rozlišení STAPHYtestem) 5. (3) Bakterie na Slanetz Bartleyho a žlučeskulinové půdě neroste, PYR test je negativní anebo jde o drobné kolonie s velmi výraznou hemolýzou – 6 roste, PYR test je pozitivní a nejde o výše popsaný případ – 10 6. Bakterie na krevním agaru vykazuje viridaci – 7 vykazuje hemolýzu – 8 nevykazuje žádný efekt – ahemolytický (gama-hemolytický) streptokok 7. Optochinový test je pozitivní, bakterie mají penízkovité kolonie, mikroskopicky jde o lancetovité diplokoky – Streptococcus pneumoniae negativní, bakterie mají jinou morfologii mikroskopickou i kultivační – ústní streptokoky (možné další rozlišení STREPTOtestem) 8. (6) PYR test a bacitracinový test jsou pozitivní – Streptococcus pyogenes negativní – 9 9. CAMP test je pozitivní – Streptococcus agalactiae negativní – non-A-non-B hemolytický streptokok (možné další rozlišení aglutinací) 10. (5) Arabinóza je pozitivní – Enterococcus faecium negativní – Enterococcus faecalis (Přesnější rozlišení je možné ENCOCCUS) 11. (2) Vzhled tyčinky je: robustní, sporulující, kultivačně plsťovitý – Bacillus sp. drobnější, řetízky, kultivačně připomíná enterokoky či streptokoky – Listeria sp. drobnější, palisády, kultivačně bělavé pleomorfní kolonie – Corynebacterum sp. 12. (2) Na chromogenní půdě je kvasinka zelená – Candida albicans modrá – Candida tropicalis fialová drsná – Candida krusei fialová hladká – Candida glabrata jiná – Candida sp. 13. (1) Jaký tvar má ta potvora při Gramově barvení? Kok – 14 Tyčinka – 18 14. Má to pozitivní oxidázu? Ano – 15 Ne – pravděpodobně Acintetobacter sp. 15. Má to pozitivní indoxylacetát? Ano – Moraxella (Branhamella) catarrhalis Ne – 16 16. Roste to na obyčejném krevním agaru? Ano – ústní neisseríe (bližší určení NEISSERIAtestem) Ne – 17 17. Roste to na obohaceném krevním agaru? Ano, štěpí glukózu a maltózu – N. meningitidis Ne, štěpí jen glukózu – N. gonorrhoeae 18. (13) Roste na Endově agaru? Ano – 19 Ne – 22 19. Mění nějak Hajnovu půdu? (Fermentuje glukózu?) Ano – 20 Ne – 21 20. Je oxidáza pozitivní? Ano – čeleď Vibrionaceae, rozlišení ENTEROtestem se speciální maticí Ne – čeleď Enterobacteriaceae, rozlišení ENTEROtestem a kultivací na různých půdách (všímáme si plazivého růstu – typický pro protey, kolonií s černým středem naXLD a MAL – typické pro salmonely) 21. (19) Je to zelené, voní po jasmínu/jahodách, oxidáza pozitivní – Pseuomonas aeruginosa Není to zelené, nevoní to, oxidázu to může a nemusí mít – jiné gramnegativní nefermentující tyčinky (rozlišení NEFERMtestem) 22. (18) Typické charakteristiky zahnuté, rostou na speciálních půdách, zahnuté, výrazně pohyblivé – Campylobacter či Helicobacter specifický „hemofilový zápach“ – 23 jiný vzhled – může být např. Bordetella, zpravidla nutné podezřejní na infekci a použití speciálních půd 23. Na krevním agaru roste – Pasteurella sp. neroste – 24 24. Vyžaduje faktory X – Haemophilus aphrophilus V – Haemophilus parainfluenzae Oba – Haemophlus influenzae Je třeba mít na paměti, že řadu bakterií (spirochety, anaeroby, mykobakteria, ale i např. legionely) tímto způsobem odhalit nelze, je nutno mít podezření a použít speciální postupy.