•Rod Enterococcus (Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium aj.) • • •Morfologie: Mikroskopicky G+ koky ve dvojicích, drobných shlucích/krátkých řetízcích • kataláza negativní • •Kultivace: na KA rostou v drobných šedobílých koloniích se zónou viridace • Některé žlutý pigment či pohyb • selektivně diagnostická půda Slanetzova-Bartleyho - růžové až červené kolonie • na půdě žluč-eskulin: černé kolonie • •Biochemie a rezistence: pyrrolidonylarylamidasa (PYR-pozitivní) a leucinaminopeptidasa (LAP-pozitivní) •vysoce odolné, rostou na půdách s 6,5% NaCl, v širokém rozmezí teplot • •Patogenita: součást normální střevní flóry, infekce jsou časté u dlouhodobě hospitalizovaných pacientů se zavedenými katetry či léčených širokospektrými antibiotiky • •Infekce močových cest, ran, nitrobřišní záněty, endokarditida - u uživatelů injekčních drog nebo u starších osob, katetrové sepse, infekce žlučových cest a gynekologické záněty • • Foto Černohorská L. •Fotografie mikrobů byly pořízeny mikroskopem Leica DM 1000 LED, autor: Černohorská L. Faktory virulence: želatinasa (hydrolyzuje želatinu aj.) substance typu feromonu (láká neutrofily) kolonizační faktory (např. agregační substance, adhesiny) bakteriociny - inhibují růst jiných bakterií geny VanA, B, C jsou spojeny s rezistencí na vankomycin (C je nepřenosný gen přirozené resistence, VanA a B lze přenést plasmidy, původně citlivé bakterie se stanou rezistentní) Léčba: primární rezistence k cefalosporinům Lehčí infekce močového traktu : ampicilin, ampicilin s inhibitorem b–laktamas, nitrofurantoin, možná je i terapie glykopeptidy. Ranné infekce, sepse a endokarditidy: kombinace aminoglykosidů s penicilinem, ampicilinem nebo glykopeptidy (vankomycinem, teikoplaninem) VRE (vankomycin rezistentní enterokoky) – lze použít linezolid, quinupristin/dalfopristin Laboratorní diagnostika- přímý průkaz: mikroskopie, kultivace na KA, na půdě Slanetzově-Bartleyho Latexová aglutinace - odlišení od streptokoků, od jiných bakterií pomocí PYR testu a LAP Fenotypické testy (produkce žlutého pigmentu, pohyb) Biochem. testy: fermentační reakce jako štěpení arabinosy či pyruvátu, kterými lze rozlišit: E. faecium E. faecalis fermentuje arabinosu - změna barvy indikátoru nefermentuje pyruvát negativní pyruvát zkvašuje resistentní k ampicilinu citlivý k ampicilinu EN-coccus test • • IMG_2918.jpg 2014-07-04 14.29.35.jpg • Enterokok na KA Enterokok na SB 5 na žluč-eskulinu • IMG_2955.jpg •VRE na selektivní půdě G+ tyčinky Listeria monocytogenes Morfologie: Mikroskopicky G+ tyčinky, katalasa pozitivní Kultivace: na chromogenních půdách, rostou i v chladu, na KA tvoří šedé kolonie s náznakem hemolýzy - podobné enterokokům, streptokokům či difteroidům Patogenita: infekce ran, infekce novorozenců (meningitidy a sepse) Faktory virulence: lysteriolyzin, internaliny (umožnují intracelulární přežívání) Léčba: fluorochinolony Laboratorní diagnostika: mikroskopie, kultivace na chr. půdě/ KA a žluč-eskulinová půda a průkaz katalázy, biochemické testy C:\Documents and Settings\muprac\Dokumenty\Černohorská\LF MUas\1174404240.bmp •Nejezte Listerie Hysterie? • • • •Foto: Černohorská L. •Foto: Černohorská L. 26 Chromogenní půda na listerie •Existují různé chromogenní půdy k diagnostice listerií. Ta na obrázku se vyznačuje modrým zbarvením všech listerií; patogenní druhy navíc mají kolem sebe halo (odlišně zbarvené okolí kolonie). •ALOA •HALO • •www.oxoid.com Rod Corynebacterium Corynebacterium difteriae Morfologie: mikroskopicky G+ tyčinky s metachromatickými granuly, kyjovitý tvar připomínající čínské písmo (palisády), katalasa pozitivní Kultivace: nerostou na MH, ale na KA, na půdách s telurem (Claubergova) Patogenita: kmeny produkující toxin (mikrob napadený fágem) způsobují záškrt se vznikem pablán, které nelze odstranit bez krvácení, dotyčný se dusí, objevuje se myokarditida aj. Netoxické kmeny způsobují kožní záněty. Faktory virulence: difterický toxin Léčba: vakcinace, antidifterický globulin (utečenci!), PNC, tracheostomie, kortikoidy Laboratorní diagnostika: mikroskopie, barvení granul (Lebrancovo), Claubergova půda - redukce teluričitanu na kovový telur - kovově lesklé kolonie s modrým dvorcem, Loflerova půda, průkaz toxinu Elekovým testem, PCR, pokus na morčeti (vznik kokardy). Jiná Corynebacteria (C. jejkeium aj.) Morfologie: Mikroskopicky G+ tyčinky s metachromat. granuly, kyjovitý tvar přip. čínské písmo, kataláza pozitivní Kultivace: nerostou na MH, ale na KA Patogenita: infekce ran, sepse, moč. infekce Faktory virulence: hemolyziny Léčba: vankomycin, teicoplanin, rifampicin, lze-li PNC Laboratorní diagnostika: mikroskopie, kultivace na KA, biochemie, dourčení BBL… • • • • • • Elekův test •Jde o detekci toxinu Corynebacterium diphtheriae. Papírek se specifickým antitoxinem je položen na povrch agaru, poté se očkují testované kmeny. •Pozitivní výsledek = precipitační linie. Elekův test Rod Bacillus •B. antracis • •Morfologie: G+tyčinky připomínající bambusovou tyč, spory (centrálně) - jen na vzduchu •Kultivace: roste na KA – kolonie tvoří tzv. caput medusae, bez hemolýzy •Patogenita a patogeneze: člověk je v kontaktu s nemocným, mrtvým zvířetem či jejich produkty (kůže - hadrářská nemoc), po průniku spor do organismu spory vyklíčí a dojde k produkci toxinu. Dle místa vstupu se postižení dělí na tři formy. •1. kožní - pustula maligna, uhlák •2. plicní – po vdechnutí dochází k hemoragické nekróze uzlin s mediastinitidou až sept. šok •3. střevní - kontaminovanou potravou – způsobuje krvavé průjmy, horečku aj. • !! spory je snadné rozptýlit, proto se o nich diskutuje jako o biologických zbraních!! • •Faktory virulence: toxin (3složkový) •Terapie: PNC, ciprofloxacin, doxycyklin, chloramfenikol •Prevence: kontrola zvířat, vakcinace zvířat i lidí •Laboratorní diagnostika: mikroskopie, kultivace na KA •průkaz antigenů pomocí Ascoliho termoprecipitační reakce, test na zvířeti •!! Vymezeno laboratořím majícím biosafety level III., podezřelý materiál transportujeme tam. • • C:\Documents and Settings\muprac\Dokumenty\Černohorská\LF MUas\podzimní semestr\obalka.gif C:\Documents and Settings\muprac\Dokumenty\Černohorská\LF MUas\podzimní semestr\ompovabac13a.jpg • • • • • • • • C:\Documents and Settings\muprac\Dokumenty\Černohorská\LF MUas\anthrax2.gif •B. cereus • • • •Morfologie: G+tyčinky, pokud mají spory, jsou uloženy centrálně • •Kultivace: na KA plstnaté kolonie s β hemolýzou, PEMBA-modré kolonie • •Patogenita: součást běžné střevní flóry, kontaminují potraviny a způsobují průjmy, zvracení. Za průjmové onemocnění je zodpovědný termolabilní enterotoxin (zdrojem bývají omáčky), emetické obtíže způsobuje termostabilní toxin (zdrojem bývá rýže). Dále způsobuje infekce ran, oka • •Faktory virulence: enterotoxiny • •Terapie: rehydratace + linkosamidy. Prevence: vhodná úprava pokrmů •U infekcí oka linkosamidy + aminoglykosidy • •Laboratorní diagnostika: mikroskopie, kultivace na půdách, průkaz granul •průkaz toxinu metodou ELISA či latexovou aglutinací • D:\Documents and Settings\lenka\My Documents\My Pictures\ryze.jpg Další G+ tyčinky a bacily •Erysipelothrix rhusiopathiae •Patogenita: vyvolává červenku prasat. U lidí může vyvolat tzv. erysipeloid (na rozdíl od erysipelu, což je synonymum spály) – projevuje se infekcemi ran, ale i bezpříznakově • •Arcanobacterium haemolyticum •Diagnostika: reverzní CAMP test •Patogenita: angíny, infekce ran • •Geobacillus stearothemophillus, Bacillus subtilis •Přežívají při vysokých teplotách používají se jako indikátory účinnosti sterilizátorů • arhe •www.medmicro.info