Cytochemická vyšetření
Bourková L., OKH, FN Brno


•substrát
•↓
•inkubační roztok
•+
•
•enzym
•↓
•buňka
•
•è
•obarvené precipitáty
•↓
•v místech přítomnosti enzymu
•v buňce (v granulích)
•
•Cytochemická reakce
•hodnocení:
•intenzita zbarvení granulí (precipitátu)
je úměrná množství enzymu

Myeloperoxidáza
•Princip:
Peroxidáza přenáší vodík z vhodného donoru na peroxid. Donor  je oxidován a přeměněn na
nerozpustnou sraženinu.
•Hodnocení:
–v  primární granulaci leukocytů
–intenzita pozitivity: 0 až  +++
–také se sleduje přítomnost  Auerových tyčí (nemusí být při
  panoptickém barvení viditelné přes jádro).
–fyziologická pozitivita:
myeloidní buňky  0  /  +++
monocyty             0  / +
lymfocyty             0
•Klinický význam:
Rozlišení myeloblastické nebo monoblastické leukemie od lymfoblastické leukemie

POX-1AMMoL
•AMMoL
POX-2LYneg
•
•Lymfoblasty - negativní
POX-3AuerT POX-4AuerT
•Auerovy tyče

Nespecifické esterázy
•Princip:
Buněčná esteráza reaguje se substrátem (např. alfa-naftyl-acetát nebo alfa-naftyl-butyrát ) a nebo
je reakce blokovaná NaF.
•Hodnocení:
–pozitivita v granulích v cytoplazmě leukocytů
–intenzita pozitivity: 0 až  +++
–fyziologická pozitivita:
monocyty                               + až +++
myeloidní buňky, lymfocyty   0 až ++
–pozitivita po NaF:
monocyty zeslabení na          0 nebo +.
ostatních buňky:  pozitivita stejná nebo snížená maximálně o (+)
•Klinický význam:
–k rozlišení AML M4 a AML M5
–↑ NE  + ↓ NE/NaF → monocytární buňky
–NE  + NE/NaF – srovnatelná → myeloidní, lymfoidní buňky

NE-mono+++,gran+
•Mono: ++/+++
•Granulo: +
Esterase2-nespec s NaF
•
•NE+NaF: 0

PAS
•Princip:
Průkaz sacharidů
•Hodnocení:
–intenzita: 0 až +++
–vzhled (typ) pozitivity:
•fyziologická pozitivita:
myeloidní buňky: difúzní zbarvení cytoplazmy
monocyty: jemně granulární pozitivita
lymfocyty: negativní, ojediněle výraznější granula
trombocyty a megakaryocyty: výrazně pozitivní
NRBC : negativní
•patologická pozitivita.
lymfocyty - CLL: ve většině lymfocytů  výrazná zrnitá  pozitivita
blasty - ALL, nedif. leukémie: hrubozrná pozitivita
NRBC - patologické: hrubozrná – kapkovitá pozitivita
•Klinický význam:
leukémie, MDS, anémie

PAS-AMLM6
•AML - M6
PAS-difus,granul,MGK,seg
•pozitivita: difúzní, granulární
PAS 1-bloková poz
•ALL

http://media.mssm.edu/blood/morphology_tutorial_scigliano/images/2164.jpg
http://fce-study.netdna-ssl.com/images/upload-flashcards/948622/1210982_m.jpg
https://encrypted-tbn0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcT2P1uUCrHwC2I8zpMeHRhc9LLLkbHKyVJLXQbWYQlbPP2
ZFC7f
https://encrypted-tbn0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcRvNS8DdbYDGuh-uT1iRXU9j66aUgd6CFlPRLefeZXAxTr
O4G8s
https://encrypted-tbn0.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcREKwCLhdMeR9cA-UUzi0gInMV2WrYuEwzeQ3Me3NUHnhh
Hks2A
•Typy pozitivity PAS

Poznámky
•Cytochemická vyšetření hodnotit v souvislosti s:
•ostatním cytochemickým vyšetřením
•morfologickým hodnocením a rozpočtem kostní dřěně
•stádiem vyzrávání buněk
•

Cytochemické reakce
•Podpořeno MZ ČR – RVO (FNBr, 65269705)