Domácí práce 1) Uveďte příklady enzymů, které se využívají jako léčiva? 2) Vyhledejte krátkou informaci o patologickém vzestupu aktivity enzymů v plasmě aktivací či uvolněním enzymu z vazby, která ho v cirkulaci blokovala: 3) Během enzymové reakce bylo do roztoku substrátu v pufru přidáno 0,2 ml vzorku obsahujícího enzym. Po 5 minutách bylo stanoveno 0,02 mmol produktu. Jaká je katalytická koncentrace enzymu ve vzorku? 4) Vysvětlete, co je to falešně pozitivní výsledek, uveďte příklad. 5) Který analyt/marker slouží k diagnostice hyperurikémie? 6) Který reakční krok katalyzuje enzym sarkosinoxidáza, a který analyt/marker se touto metodou stanovuje? 7) Jaká metodika (princip) se rutinně využije při následujících stanoveních: ALT Katecholaminy NTpro BNP Bilirubin CRP Měď Estradiol Osmolalita Hyalinní válce Oligoklonální pásy Paraprotein Aminokyseliny 8) Uveďte čtyři významné výrobce automatických analyzátorů a diagnostik: 9) A. Seznamte se s pojmem nejistota měření - viz. Doporučení ČSKB (Doporučení pro určení odhadů nejistot výsledků měření / klinických testů v klinických laboratořích) nebo přednáška B. Na základě výsledků experimentů a IKK zjistěte všechny dílčí složky nejistoty (na 2 hladinách) potřebné pro výpočet C. Vypočtěte tzv. relativní kombinovanou nejistotu u[r,celk ](%) a rozšířenou relativní kombinovanou nejistotu U[r,celk] (%) dle následujícího postupu (odhady dílčích nejistot se slučují podle statistického zákona o propagaci nejistot): Podklady pro výpočet nejistoty měření Provedli jste následující laboratorní experimenty: 1. Za podmínek opakovatelnosti jste 10x změřili koncentrace vápníku ve dvou materiálech s certifikovanou referenční hodnotou (CRV) a udanou nejistotou této hodnoty. Získali jste tyto výsledky: Vápník Vápník materiál SEKK 3753 materiál SEKK 4351 CRV (mmol/l) 2,09 CRV (mmol/l) 3,60 Nejistota CRV % 0,75 Nejistota CRV % 0,75 1 2,13 1 3,58 2 2,14 2 3,56 3 2,14 3 3,57 4 2,13 4 3,58 5 2,14 5 3,60 6 2,14 6 3,58 7 2,13 7 3,61 8 2,12 8 3,63 9 2,11 9 3,59 10 2,14 10 3,57 2. Denně jste 2x prováděli interní kontrolu kvality ( běžný kontrolní materiál od dodavatele analytického systému) s těmito výsledky analyt Vápník analyt Vápník datum Kontrola 1 datum Kontrola 2 1.10.2016 2,24 1.10.2016 3,47 1.10.2016 2,17 1.10.2016 3,45 2.10.2016 2,22 2.10.2016 3,43 2.10.2016 2,22 2.10.2016 3,51 3.10.2016 2,23 3.10.2016 3,51 3.10.2016 2,22 3.10.2016 3,49 4.10.2016 2,22 4.10.2016 3,45 4.10.2016 2,24 4.10.2016 3,42 5.10.2016 2,25 5.10.2016 3,53 5.10.2016 2,25 5.10.2016 3,42 6.10.2016 2,27 6.10.2016 3,40 6.10.2016 2,24 6.10.2016 3,28 7.10.2016 2,28 7.10.2016 2,60 7.10.2016 2,22 7.10.2016 3,40 8.10.2016 2,29 8.10.2016 3,53 8.10.2016 2,23 8.10.2016 3,62 9.10.2016 2,25 9.10.2016 3,35 9.10.2016 2,29 9.10.2016 3,51 10.10.2016 2,19 10.10.2016 3,53 10.10.2016 2,20 10.10.2016 3,49 Odhad u[r,celk - ]relativní kombinované nejistoty (%) zahrnuje: · dlouhodobou přesnost (mezilehlou preciznost) · systematickou odchylku (bias) · nejistotu bias (nejistota CRV + nejistota hodnoty vámi zjištěného průměru) u[r,celk]…..celková relativní kombinovaná nejistota (%) u[r,repro]….dlouhodobá přesnost = mezilehlá preciznost (CV %) B[r]……...bias (%) u[r,ref]…....nejistota CRV (%) u[r,x]……..nejistota průměru (%) u[r,x] = 100.s / (x .√n) s…směrodatná odchylka měření CRV x…průměr měření CRV √n…druhá odmocnina počtu měření Odhad U[r,celk] - rozšířené relativní kombinované nejistoty (%) pro účely EHK: = relativní kombinovaná nejistota rozšířená koeficientem 2. Při výpočtu je eliminováno násobení příspěvku bias koeficientem rozšíření a díky tomu je výsledná nejistota menší než dvojnásobek relativní kombinované nejistoty: pro k=2