NA STOPĚ PACHATELE Díl první: Pachatelem je stafylokok Mikrobiologický ústav uvádí •L [USEMAP] Obsah •Klinická charakteristika: Staphylococcus aureus •Klinická charakteristika: koagulázanegativní stafylokoky •Mikrokoky: vsuvka pro zvídavé •Diagnostika stafylokoků •Diferenciální diagnostika stafylokoků I •Diferenciální diagnostika stafylokoků II •Testování antibiotické citlivosti a antibiotická léčba Klinická charakteristika: Staphylococcus aureus Příběh první •Paní J. K., kuchařka ve studentské menze. Má na ruce puchýř, naplněný žlutobílým hnisem. Nevěnuje mu však pozornost. Bere do ruky knedlíky, které se už nevaří, ale jen prohřívají •Student Miloš s přítelkyní si pochutnají na knedlících. Odpoledne mají schůzku … ale co to? Půl hodinu před schůzkou Miloše najednou rozbolelo břicho, má průjem a zvrací. Volá přítelkyni – ta má ale pochopení, je na tom stejně… Romantické odpoledne se nekoná… 34 Furuncle1500 •www.brooksidepress.org Kdo je vinen? •Vinen je (vedle oné kuchařky) i Staphylococcus aureus •název z řeckého σταφυλή (staphylé) = hrozen •Tento „zlatý stafylokok“ s oblibou způsobuje hnisavé infekce kůže a kožních adnex •Některé (velmi vzácné) kmeny produkují enterotoxiny, které fungují jako tzv. superantigeny •Intoxikace bakteriálním toxinem se, na rozdíl od střevní infekce (jako je salmonelóza), projeví velice rychle; obvykle také rychle odezní –Enterotoxikóza = situace, kde nemoc je způsobena pozřeným toxinem vyprodukovaným mimo střevo, nikoli tedy samotným mikrobem –Střevní infekce = situace, kdy se mikrob množí ve střevě (a buď proniká do jeho stěny, nebo produkuje toxiny uvnitř střeva) Příběh druhý •Studentka P. Z. je unavená. Má hodně učení, a navíc „své dny“. Nakonec usnula, aniž by si vyměnila tampón, ačkoli už ho měla dlouho… •Najednou ji chytila třesavka, mdloby, horečka. Spolubydlička ji našla ležící na koberci a volá 155. Objevila se vyrážka, leží na JIP infekční kliniky… •Kdo je vinen tentokrát? •Opět je viníkem Staphylococcus aureus, tentokrát kmen produkující toxin zvaný TSST-1 (toxin syndromu toxického šoku) •Také tento toxin je superantigenem •Způsobuje toxický šok, typicky se vyskytuje u uživatelek menstruačních tampónů Superantigeny 25 superantigeny •www.zuova.cz/informace/nrlpab16.php Staphylococcus aureus (zlatý stafylokok) •Jediný pro člověka běžně významný z tzv. koaguláza pozitivních stafylokoků •Původce infekcí kůže, chlupů, nehtů, otitis externa, zánětů spojivek, infekcí HCD •Někdy také původce abscesů ve tkáních •Některé kmeny, vybavené určitými neobvyklými faktory virulence, způsobují závažné, ale vzácné choroby •Na druhou stranu mikroba nalezneme i na kůži zcela zdravých osob Faktorů virulence, nalézaných u S. aureus, je veliké množství… •…ale jen některé jsou přítomny u téměř 100 % kmenů; jiné jsou produkovány třeba jen jedním kmenem z tisíce! 03 Virulence_factors Staphylococcus •http://www.ratsteachmicro.com Abscesy •Na rozdíl od streptokoků, které vytvářejí ve tkání zpravidla neopouzdřené flegmóny, tvoří stafylokoky spíše opouzdřené abscesy. •Vznik abscesu (pomocí tzv. clumping faktoru a plasmakoagulázy – viz dále!) ukazuje schéma, převzaté z německých internetových stránek – vizte zde: [USEMAP] Příklady infekcí způsobených zlatým stafylokokem: Impetigo… 15 stafylokokové impetigo •http://pathmicro.med.sc.edu/fox/staph-impetigo.jpg …bulózní impetigo… 37 BullousImpetigo3 …otitis externa s furunklem… 38 otitis externa with furuncle •www.merck.com/mmpe/print/sec08/ch088/ch088c.html. …či infekce kůže s krustami… 05 Infection_staphylococcus_crusting_chin_closeup •http://www.dermatology.co.uk/media/images/Infection_staphylococcus_crusting_chin_closeup.jpg …ale také např. mozkové abscesy 36 got10354_fm-2 [USEMAP] •http://www.mja.com.au/public/issues/176_12_170602/got10354_fm.html • Klinická charakteristika: Staphylococcus sp. (koag.-neg.) Příběh třetí •Mladík F. B. se zotavuje po těžké havárii. Do krevního řečiště má zavedeny dva žilní katétry pro infusní výživu a odběry krve •Náhle se stav prudce zhoršil, objevily se vysoké horečky, které kolísají – ošetřující lékař vyslovil podezření na septický stav, odebírá krev na kultivaci (hemokulturu) •Po vyměnění katetru a antibiotické léčbě se stav opět zlepšil 19 aureus v hemokultuře fluorescence •http://www.zuova.cz/informace/pic/ompovabac20b.jpg A kdo je vinen nyní? •Vinen je Staphylococcus epidermidis, nejběžnější z takzvaných koaguláza negativních stafylokoků •Koaguláza negativní stafylokoky patří do stejného rodu jako zlatý stafylokok •Jsou mnohem méně patogenní než on •V poslední době jsou však velice významnými původci infekcí u oslabených osob, zejména nemocničních •Na katétrech a jiných plastech často tvoří biofilm •Proč říkáme koaguláza negativním stafylokokům koaguláza negativní? Dozvíte se za chvíli… Staphylococcus epidermidis S.epidermidis - mikroskopie. Klikni! S.epidermidis - kultivace. Klikni! •Autor: Prof. MVDr. Boris Skalka, DrSc. •Autor: Prof. MVDr. Boris Skalka, DrSc. Koaguláza negativní stafylokoky •Koaguláza negativní stafylokoky (Staphylococcus epidermidis, S. hominis, S. haemolyticus a asi čtyřicet dalších druhů a poddruhů) jsou hlavní součástí běžné bakteriální mikroflóry kůže. •Mohou být ale původci močových infekcí, případně i infekcí ran, katetrových sepsí (hlavně S. saprophyticus) aj. •Jejich nález se tedy hodnotí jinak např. ve výtěru v nosu či ve stolici, jinak v moči, a zcela jinak v hemokultuře. •Vedle S. aureus a koaguláza negativních stafylokoků existuje i kategorie „koaguláza pozitivních stafylokoků jiných než S. aureus“. Tato kategorie má ale v humánní klinické mikrobiologii minimální význam, a proto často zjednodušeně rozdělujeme stafylokoky pouze na S. aureus a koaguláza-negativní druhy. Stafylokoků je dnes mnoho druhů •Např. S. simiae byl objeven moravskými vědci z řitních výtěrů kotulů veverovitých v ZOO na Svatém Kopečku u Olomouce 21a strom druhů stafylokoků inverze [USEMAP] •http://www.szu.cz/cem/zpravy/zpr0905/sse_soubory/image005.gif • Mikrokoky (vsuvka pro zvídavé) Pro zvídavé: něco o mikrokocích •Mikrokoky se dlouho považovaly za blízké příbuzné stafylokoků. Nyní se však soudí, že příbuzné nejsou. •Jsou to rovněž grampozitivní koky v malých shlucích, jsou však oxidáza pozitivní •Dřívější rod Micrococcus se rozpadl do rodů Micrococcus, Kytococcus, Kocuria, Nesterenkonia a dalších. Kocuria se jmenuje pro prof. Kocurovi, brněnském mikrobiologovi Mikrokoky mají krásné pigmenty •Micrococcus luteus je sírově žlutý (ne zlatý jako Staphylococcus aureus), Kocuria rosea je růžová •V klinickomikrobiologické laboratoři je nacházíme většinou jako kontaminaci. 2 [USEMAP] • •Foto: archiv Mikrobiologického ústavu Diagnostika stafylokoků Popis pachatele (diagnostika) •Mikroskopie: grampozitivní kok •Kultivace: na KA kolonie větší (2 mm), ploché, máslovité konzistence, bílé, anebo (hlavně u zlatého stafylokoka) nazlátlé •Biochemické testy: kataláza pozitivní, oxidáza negativní, biochemicky lze rozlišit jednotlivé druhy •Antigenní analýza a speciální testy mohou při pátrání velice pomoci Když pátráme po pachateli mikroskopicky ve vzorku •Prohlížíme mikroskopický preparát sputa, obarvený podle Grama •Pátráme po grampozitivních kocích ve shlucích a také po erytrocytech (a případně i jakýchkoli jiných útvarech) •Foto: O. Z. GPKS v hemo CZ Fotografie z databáze zločinců S2 S13 [USEMAP] Autor: Prof. MVDr. Boris Skalka, DrSc. Autor: Prof. MVDr. Boris Skalka, DrSc. • Diferenciální diagnostika stafylokoků I: od „neznámé bakterie“ po rodové určení „Staphylococcus“ Odlišení od ostatních podezřelých (diferenciální diagnostika 1) •Gramovo barvení odhalí všechny bakterie, které nepatří mezi grampozitivní koky •Pozitivní kataláza odliší stafylokoky od streptokoků a enterokoků. Oxidázu bychom případně využili k odlišení mikrokoků (v praxi výjimečně) •Stejnou službu (a ve směsi mikrobů ještě lepší) udělá kultivace na KA s 10 % NaCl •Orientačně můžeme využít i toho, že kolonie ostatních G+ koků nejsou bílé či nazlátlé a že mikroskopicky netvoří shluky Gramovo barvení (opakování) •Postup Gramova barvení: Uděláme nátěr, necháme uschnout, fixujeme plamenem, poté barvíme: Gram 30 s, voda, Lugol 30 s, voda, alkohol 15 s, voda, safranin 60 s, voda, osušit, imerzní objektiv 100×) •Nyní již můžeme odlišit vše co je gramnegativní a/nebo je to tyčinka, tj. vše, co nepatří mezi grampozitivní koky Katalázový test (pro připomenutí) •Foto: Veronika Holá Kataláza obě 02 Katalázový test + a – •Foto: Veronika Holá Kataláza neg Kataláza poz Popis kolonií na KA •Popis kolonií nemá konkrétní místo ve schématu algoritmu diferenciální diagnostiky stafylokoků. Přesto je užitečné si jej udělat. Můžeme „pojmout podezření“: například stafylokoky mívají oproti streptokokům bělejší (případně žlutavější) kolonie. Takové podezření je ovšem potřeba ověřit. Odlišení stafylokoků od jiných G+ koků •Ve směsi se stafylokok prozradí růstem na KA s 10 % NaCl, ostatní G+ koky tu nerostou •Máme-li čistý kmen, odhalíme stafylokoka i rychleji než kultivací na KA s 10 % NaCl a to katalázovým testem (kolonie vmícháme do kapky peroxidu vodíku). Pokud šumí, je to stafylokok •Pozor! Kdybychom přeskočili předchozí kroky, udělali bychom špatně. Pozitivní katalázu má spousta bakterií. Relativně průkazná je jen tehdy, víme-li, že náš kmen je G+ kok •p Přehled diagnostiky (zjednodušeně) •http://www.ratsteachmicro.com/Staphylococci_Notes/HCOE_CAI_Review_Notes_Staphylococci.htm 29 Gram_Positive_Flow_Chart zmenšeno a inverze [USEMAP] •Enterococcus či •(nebo další testy) • Diferenciální diagnostika stafylokoků II: kroky uvnitř rodu „Staphylococcus“ Rozlišení podezřelých stafylokoků (diferenciální diagnostika 2) •Volná plasmakoaguláza je pozitivní u zlatého stafylokoka, negativní u koaguláza negativních, proto se tak také jmenují •Clumping factor neboli vázaná plasmakoaguláza se používá stejně, ale je méně spolehlivá •Komerční testy na bázi antigenní analýzy jsou naopak velmi spolehlivé •Hyaluronidáza je nejen spolehlivá, ale i levná Méně spolehlivé testy: hodí se při pátrání, ale nejsou „důkazem pro soud“! •Hemolýza: Koaguláza negativní stafylokoky mohou produkovat jen delta hemolyzin, zlaté i alfa a beta, mívají proto mnohem výraznější hemolýzu •Nazlátlé zbarvení kolonií a jejich větší průměr může také napovědět •Větší shluky v mikroskopii • jsou také typické • pro zlaté stafylokoky S3 •Foto: archiv Mikrobiologického ústavu Clumping factor neboli také vázaná plasmakoaguláza – rychlé •Kolonie se vmíchají do kapky králičí plasmy na podložním sklíčku •Pozitivita se projeví jako tvorba „chuchvalců“ v kapce plasmy (viz obrázek na další obrazovce) •Nejde vlastně o KOAGULACI, ale o AGLUTINACI plasmy •Test není příliš spolehlivý 47 clumping •http://memiserf.medmikro.ruhr-uni-bochum.de Volná koaguláza – klasika •Nejklasičtější z testů pro odlišení zlatého stafylokoka (koaguláza pozitivního stafylokoka) •Kličkou nabrané kolonie vmícháme do králičí plasmy ve zkumavce •Pokud plasma koaguluje (má konzistenci želé), je kmen koaguláza pozitivní Pozitivní a negativní plasmakoaguláza •První zkumavka – pozitivní (gel, při naklonění nemění tvar) •Druhá a třetí zkumavka = negativní (tekutina, při naklonění si uchovává vodorovnou hladinu) • 44 coagulase-1 •http://microbiology.scu.edu.tw Komerční testy, např. Staphaurex (v praktiku je neprovádíme) •Provedením připomínají clumping factor, ale jsou spolehlivější než volná plasmakoaguláza •Jsou bohužel relativně dražší oproti předchozím 49 stafaurex •www.microbes-edu.org Souprava Staphaurex a výsledky 50 staphaurex 51a murex1 51b murex2 •http://www.pathologyinpractice.com •www.microbes-edu.org Hyaluronidáza (test dekapsulace – „odpouzdření“) •Elegantní test, jehož principem je skutečnost, že hyaluronidáza, produkovaná zlatým stafylokokem (ne však koaguláza negativními stafylokoky) rozpouští pouzdro (kapsulu) opouzdřených bakterií. Používá se druh streptokoka Streptococcus equii, pro člověka nepatogenní •Ztráta pouzdra se projeví změnou vzhledu streptokoka (ztráta „hlenovitosti“) Hyaluronidáza P1020006a P1020006ax •Foto: O. Z. P1020007a P1020007b •Foto: O. Z. Shrnutí testů k odlišení S. aureus •Clumping faktorový test: kolonie se vmíchají do kapky králičí plasmy na podložním sklíčku, pozitivní je aglutinace •Plasmakoagulázový test: kolonie se vmíchají do kapky králičí plasmy ve zkumavce, pozitivní je koagulace (koagulovaná tekutina). Odečítá se orientačně po 4 h a spolehlivě až po 24 h. •Hyaluronidázový test: K testovacímu opouzdřenému kmeni (koňský Streptococcus equi) se přiočkují testované kmeny. Pozitivní je kmen, který „rozpouští slizovitost“ pásu streptokoka (zbavuje ho pouzdra) Obávaný „zlatý“ to není: a co teď? •Ve většině případů se spokojíme s tím, že jde o koaguláza negativního stafylokoka a netrváme na druhovém určení •Pokud na druhovém určení trváme (např. u hemokultur), lze je provést biochemicky •V našich podmínkách se nejčastěji používá STAPHYtest 16 (Erba-Lachema) Vzájemné rozlišení stafylokoků •STAPHYtest 16 je tedy v Česku nejběžnější test k biochemickému určení (zejména koaguláza negativních) stafylokoků •Za normálních okolností zlaté stafylokoky STAPHYtestem neurčujeme, stačí nám testy dříve popsané, popřípadě komerční testy STAPHYtest 16 – jak ho odečíst •Pozor – i když se jmenuje STAPHYtest 16, zahrnuje ve skutečnosti 17 reakcí. Jako první se odečítá test VPT ve zkumavce. Červená tekutina ve zkumavce = pozitivní VPT, bezbarvá tekutina = negativní •První řádek STAPHYtestu = 2.–9. reakce •Druhý řádek STAPHYtestu = 10.–17. reakce •Vypočítejte kód a porovnejte s kódovníkem •Kód je šestimístný. Prvních pět číslic je ze trojic testů, šestá číslice je z posledních dvou Příklad výsledku (703 651 = S. aureus, 99,8 %, Tin=1,00) 1 2 H 3G 4 F 5 E 6 D 7 C 8 B 9 A 10 H 11 G 12 F 13 E 14 D 15 C 16 B 17 A První řádek panelu Druhý řádek panelu + S l l l l l l l l l l l l l l l l - S l l l l l l l l l l l l l l l l ? S l l l l l l l l l l l l l l l l + + + - - - + + - - + + + - + + - 1 2 4 1 2 4 1 2 4 1 2 4 1 2 4 1 2 7 0 3 6 5 1 Jiný příklad výsledku (703 241 = S. epidermidis, 97,95 %, Tin=1,00) 1 2 H 3G 4 F 5 E 6 D 7 C 8 B 9 A 10 H 11 G 12 F 13 E 14 D 15 C 16 B 17 A První řádek panelu Druhý řádek panelu + S l l l l l l l l l l l l l l l l - S l l l l l l l l l l l l l l l l ? S l l l l l l l l l l l l l l l l + + + - - - + + - - + - - - + + - 1 2 4 1 2 4 1 2 4 1 2 4 1 2 4 1 2 7 0 3 2 4 1 Api Staph – zahraniční obdoba našich STAPHYtestů 16 •Bez ohledu na provenienci konkrétního testu zůstává princip stejný – kombinace většího počtu enzymatických reakcí, které se projeví změnou zbarvení reakčního důlku apisapro •http://www.microbes-edu.org Jiná varianta testu API-Staph •Na předchozím obrázku byl API-Staph pro automatické odečítání ve fotometru, tato varianta je pro „okometrické“ odečítání 56 api ruční 1 57 api ruční 2 •http://www.microbes-edu.org Shrnutí mikrobiologické diagnostiky stafylokokové infekce •(Mikroskopie VZORKU – např. hemokultury) •Mikroskopie izolovaných KMENŮ •Nyní jsme odlišili grampozitivní koky od ostatních •(Popis kolonií na krevním agaru) •Katalázový test (odlišení strepto- a enterokoků) •Růst na KA s 10 % NaCl •Nyní jsme již odlišili stafylokoky od ostatních koků •Odlišení zlatého stafylokoka od koaguláza negativních druhů •Druhové určení stafylokoka (je-li nutné) •Testování citlivosti na atb •(pouze je-li stafylokok patogenem!) [USEMAP] • Testování antibiotické citlivosti a antibiotická léčba stafylokokových infekcí Léčba stafylokokových infekcí •Lékem volby pro infekce způsobené S. aureus je obecně oxacilin, ale existují výjimky •Makrolidy a tetracykliny lze použít jako druhou volbu (u alergiků) •Cefalosporiny 1. či 2. generace jsou na infekce močových cest vhodnější než oxacilin (který hůře proniká do močových cest) •Linkosamidy se používají u stafylokokových infekcí pohybového systému (mají lepší průnik do kostní dřeně) •Vankomycin či linezolid se používají u kmenů MRSA nebo u koaguláza-negativních staphylokoků (které jsou k oxacilinu citlivé mnohem méně často než S. aureus) •U MRSA nelze použít žádné betalaktamy, s výjimkou cefalosporinu 5. generace ceftarolinu •Ke zjištění sekundárních rezistencí zpravidla používáme difusní diskový test – měříme zóny a porovnáváme s referenčními •Samozřejmě, antibiotické testy se používají jen u stafylokoků jako patogenů (= ne pokud je považujeme za běžnou mikroflóru) Zóny citlivosti některých běžných protistafylokokových antibiotik Antibiotikum Zkr. „C“ je-li ≥ než (mm) „I“ je-li mezi (mm) „R“ je-li < než (mm) Cefoxitin (cefalosporin); interpretace: oxacilin a další CXT ≥ 22/25* 22/25** Erythromycin (macrolid) E ≥ 21 18–20 < 18 Clindamycin (linkosamid) DA ≥ 22 19–21 < 19 Ko-trimoxazol (směs) SXT ≥ 17 15–16 < 15 Tetracyklin (tetracyklin) TE ≥ 22 19–21 < 19 Chloramfenikol C ≥ 18 < 18 •*CXT: 22 mm S. aureus, 25 mm koagulázanegativní stafylokoky •Test citlivosti u zlatého a koagulázanegativního stafylokoka (zlatý stafylokok bývá v průměru citlivější) •Foto: Veronika Holá ATB STAU ATB STKN Kvalitativní a kvantitativní testy •Zpravidla tedy používáme kvalitativní testy (difusní diskový test). Lze však použít i kvantitativní testy (např. mikrodiluční test nebo E-test). Konkrétní provedení může být různé. 53 ab1 55 etest staf •Podle situace používáme buď ßkvalitativní, nebo •kvantitativní testy •http://www.microbes-edu.org Obvyklé pravidlo: horší patogen – lepší citlivost •Při srovnání výsledků testů citlivosti lze často zaznamenat, že horší patogen (zde zlatý stafylokok) je zpravidla citlivější než mírnější patogen (koaguláza negativní stafylokok). Toto pravidlo je logické: menší patogenita je znakem adaptace, schopnosti mikroba koexistovat s námi a nevyvolávat u člověka chorobný stav. à přivyknutí mimo jiné i antibiotikům, která používáme. •Neplatí ovšem vždycky! Existují výborně citlivé kmeny S. epidermidis, a existují kmeny MRSA mající zároveň rezistenci i na další skupiny antibiotik. MRSA a jejich detekce •Meticilin rezistentní stafylokoky (MRSA) jsou epidemiologicky závažné kmeny, často způsobující nozokomiální infekce •Příčinou je změna tzv. penicillin binding proteins (PBP), nikoli tedy produkce betalaktamázy! •Na MRSA upozorní malá nebo žádná zóna u antibiotického disku oxacilinu či cefoxitinu •Lze také použít screeningovou půdu (vizte téma J05), případně PCR k testování mecA genu, kódujícího rezistenci •Bonus v e-learningové verzi prezentace: rozšířené informace o MRSA zde [USEMAP] • Konec 24 oběť stafylokoků [USEMAP] •www.osel.cz •Oběť stafylokokové infekce • • Meticilin rezistentní stafylokoky (MRSA): více informací 07 mrsa •www.daikoh.net/service/creansysytem.html Historie MRSA •Původně byly i stafylokoky citlivé na penicilin, brzy však získaly rezistenci betalaktamázového typu •Meticilin poprvé použit 1959, o něco později byl použit příbuzný oxacilin (z různých důvodů ho používáme raději než původní meticilin) •První výskyt MRSA zaznamenán roku 1961, tehdy byl ovšem ojedinělý. Dnes se podíl MRSA na celkové populaci stafylokoků pohybuje v USA a většině evropských zemí v desítkách procent (vizte mapu na další stránce) •Podkladem je alterace „penicillin binding proteins“. Kmeny MRSA jsou rezistentní na všechna betalaktamová antibiotika s výjimkou zcela nové 5. generace cefalosporinů (ceftarolin) MRSA jako medicínský problém •Stárnutí populace •Používání imunomodulační terapie •Používání nitrožilních katetrů a nitrotělních implantátů •Používání (a nadužívání antibiotik) • •To vše jsou predisponující faktory, které ovlivňují riziko výskytu (nejen) MRSA MRSA není virulentnější než jiný kmen S. aureus •Oproti vžité představě je potřeba si uvědomit, že z hlediska schopnosti vyvolat infekci se kmeny MRSA chovají úplně stejně jako kterýkoli jiný zlatý stafylokok. Rezistence. k oxacilinu není faktorem virulence kmene! •Nejsou více, ale ani méně virulentní než jiné. • 01 staphonleg •www.metrowestcleangear.com/MRSA.htm • Staphylococcus aureus (MRSA) 09 0205_MRSA • www.aic.cuhk.edu.hk/web8/mrsa.htm Není MRSA jako MRSA •Mezi kmeny MRSA existují velké vzájemné rozdíly •Existuje populace tzv. EMRSA – epidemických MRSA, které se vyskytují především jako nemocniční kmeny. Jsou často polyrezistentní a například rezistence k erytromycinu je u nich téměř vždy doprovázena i rezistencí k linkosamidům •Naopak existují tzv. komunitní kmeny MRSA, které jsou většinou dobře postižitelné i běžnými nebetalaktamovými antibiotiky. V našich podmínkách zatím stále převažují. Rozdíly lze zmapovat i PFGE •Srovnání komunitních a nemocničních kmenů a kmenů od koní metodou PFGE ukazuje na časté podobnosti, ale i značné rozdíly mezi kmeny. •Zdroj: •http://www.eurosurveillance.org/em/v11n01/1101-227.asp • 14 MLST typy různých MRSA Genom jednoho z kmenů MRSA 10 040624_mrsa_300 genom •www.sanger.ac.uk/Info/Press/2004/040624.shtml •gen mec, podmiňující rezistenci Rozdíly jsou i v citlivosti na další atb •Zde jsou dokumentovány tři populace kmenů s různými vzorci rezistence 15 tabulka různých MRS •http://www.eurosurveillance.org/em/v11n01/1101-227.asp Aktuální situace v Brně •Vyskytují se sporadické případy MRSA ve všech nemocnicích, občas se vyskytne kmen MRSA i u ambulantního pacienta. Celkově v naší laboratoři tvoří kmeny MRSA 8 až 9 % všech diagnostikovaných zlatých stafylokoků (2011–12) •Naštěstí zpravidla nedochází k významnějším epidemickým výskytům, zejména díky obecnému povědomí o nutnosti dodržovat pravidla pro ošetřování pacientů s MRSA •Některé kmeny jsou dobře citlivé na jiná antibiotika, pouze část kmenů je polyrezistentních MRSA – přístup k výskytu •Protistafylokoková vakcinace (u nás se neprovádí) •Eliminace nosního nosičství zlatého stafylokoka (pouze u indikovaných osob, např. před chystanými operacemi; zpravidla mupirocinem) •Opatření k redukci infekce žilních vstupů •Omezení používání dialyzačních kanyl •Opatření k omezení katetrových infekcí, zejména u pacientů s hemodialýzou a peritoneální dialýzou •Podle www.ndt-educational.org/goldsmithslide.asp [USEMAP] •www.ndt-educational.org/goldsmithslide.asp Vakcinace •Dle informací z internetu (viz předchozí obrazovka) jediná dávka vakcíny signifikantně redukuje riziko bakteriémie v příštích deseti měsících, a to nejvíce u nosních nosičů •Vakcína je dobře tolerována, a to i u starších a oslabených •Kromě komerčně dostupných vakcín lze případně použít i autovakcíny od pacienta – jedině ty se používají i v našich podmínkách Vakcinace – úspěšnost 36 vakcinace účinnost •www.ndt-educational.org/goldsmithslide.asp Eliminace nosního nosičství •Má smysl pouze krátkodobě, např. před výkonem, a nelze použít celkově působící látky •Eradikace nosního nosičství má jen omezenou účinnost a je obvykle jen dočasná •Záleží také na predispozici té které osoby být nosičem (trvalým, či jen přechodným) •Provádí se lokálními antiseptiky, především mupirocinem •Dobré výsledky má údajně také použití extraktů z medu včel, pasoucích se na jisté australsko-novozélandské bylině • Prevence infekce žilních vstupů •I při ošetřování žilních vstupů lze použít lokální antibiotika (antiseptika), např. mupirocin, ale též např. jodové preparáty apod. 48 kanyly obr •www.ndt-educational.org/goldsmithslide.asp Omezení katetrových sepsí •Proplachování hemodialyzačních katetrů např. směsí gentamicinu s heparinem či gentamicinu s citrátem („antibiotic lock“) •Používání katetrů napuštěných určitým antibiotikem •Spolupráce mikrobiologů a makromolekulárních chemiků při vývoji nových plastů, které nepodporují tvorbu biofilmu •Při výběru nových katetrů by měl spolupracovat i mikrobiolog (v Nemocnici na Homolce to takto funguje) Hlášení a identifikace kmene •Všechny suspektní kmeny MRSA musí být pečlivě ověřeny a v případě pozitivity se hlásí jednak na oddělení, jednak ústavním epidemiologům •Součástí komunikace mikrobiologie s oddělením je konzultace vhodné a dostatečně dlouho trvající léčby infekce (jde-li o infekci a ne jen kolonizaci) •V případě výskytu kmene MRSA na oddělení se přistupuje k zavedení opatření, jejichž cílem je zamezit přenesení infekce na další pacienty Opatření na oddělení 06 creansystem200 • www.daikoh.net/service/creansysytem.html. Čím léčit? •U komunitních kmenů MRSA lze použít i ta nebetalaktamová antibiotika, na která je kmen in vitro citlivý (makrolidy, tetracykliny, ko-trimoxazol) •U polyrezistentních kmenů je nutno použít glykopeptidová antibiotika (vankomycin, teikoplanin). S tím také souvisí požadavek nepoužívat tato antibiotika zbytečně, aby zůstala zachována citlivost alespoň na tato antibiotika •U rezistence na glykopeptidy, či jejich kontraindikace z důvodu stavu pacienta, případně dalších zvláštních případů (kmeny produjující Panton-Valentinův leukocidin) lze použít linezolid či některá z dalších nových antibiotik Nová antibiotika •Streptograminová kombinace quinupristin/daflopristin (Synercid) •Lipopeptid daptomycin •Nové glykopeptidy – oritavancin, dalbavancin •Glykolipodepsipeptid – ramoplanin •U glykopeptidů a jim příbuzných látek lze ale očekávat vývoj rezistence i v souvislosti s užíváním stávajících glykopeptidů Hygienická pravidla •Nutno přerušit řetězec nákazy •Izolace pacienta nesmí znamenat přerušení jeho společenských kontaktů (etické zásady!) – návštěvy ovšem musí stejně jako personál dodržovat pravidla bariérového kontaktu •Existuje doporučený postup pro MRSA, který je dostupný na www.cls.cz, přičemž jednotlivá zdravotnická zařízení zpravidla mají svoje lokalizovaná pravidla 24 řetězec přenosu •http://www.infectioncontrol.on.ca/images/chart.jpg Jak si mýt ruce 25 hygienická desinfekce •http://www.labor28.de/igel/mrsa.html •Technika mytí rukou je neobyčejně podstatnou částí prevence výskytu MRSA a NN vůbec Vyšetřování na MRSA •U indikovaných pacientů se odebírá zpravidla výtěr z nosu a stěr z perinea, případně též z rány či jiného místa (tracheostomie apod.), kde lze předpokládat přítomnost MRSA •U takovýchto pacientů se také zpravidla provádí pravidelný screening během celé hospitalizace •Indikovaní pacienti = pacienti, kteří měli MRSA, přicházení z oddělení, kde se MRSA vyskytla, nebo přicházejí k provedení rizikové operace (pak není ani nutná „nebezpečná anamnéza“) Management nemocnice a MRSA •V rámci nemocnice musí být vytvořen systém, který dopředu určuje postupy ve všech situacích souvisejících s možným výskytem MRSA •Zpravidla existují dva týmy –koncepční tým (který zahrnuje ředitelství nemocnice, vedení oddělení či klinik apod.): určují dlouhodobé trendy a směřování opatření sloužících k potlačení MRSA a nozokomiálních infekcí vůbec –výkonný tým (epidemiolog, mikrobiologové, „styční důstojníci“ klinik) – řeší konkrétní aktuální případy Konec bonusového materiálu [USEMAP] • athlete's foot •Zdroj: MRSAInfections.Wordpress.com 45 jak vznikne furunkl [USEMAP] •http://www.autovaccine.de/abscess_formation/Abszess_b.jpg