Datum jméno _________________ ____________________________ Téma praktika: Chemické a mikroskopické vyšetření moče, manuálně a na přístroji iChem Velocity + IQ200 (Beckman) Okruhy k nastudování a dotazy: 1. Reflexní fotometrie 2. Metody používané pro analýzu moči pomocí diagnostických proužků 3. Jaký je rozdíl mezi 1. ranní močí a náhodnou močí? V čem může být 1. ranní moč pro chemické a mikroskopické moče výhodnější? V čem je výhodnější náhodný odběr? 4. Proč se pro stanovení bílkoviny v moči používá mimo diagnostický proužek ještě zkouška kyselinou sulfosalicylovou i když je na proužcích zóna pro protein? Přístroje a pomůcky: Analyzátor moče iChem Velocity + IQ200 Centrifuga Mikroskop Nikon Destičky Fast Read 102 Laboratorní sklo Automatická pipeta 20ul, 3,6 ml, 4,0 ml Vzorky močí Močové proužky DekaPHAN, Velocity Úkoly: 1. Manuální vyšetření moče a. vyšetření moče chemicky multistripem s manuálním odečtem b. vyšetření moče mikroskopicky – močový sediment, nebarvený preparát c. vyhodnocení močového sedimentu – obrazový atlas, barvený preparát, vzorky SEKK Vyšetření moče chemicky a mikroskopicky na analyzátoru a. vyšetření moče chemicky na analyzátoru iChem Velocity b. vyšetření moče mikroskopicky na přístroji IQ200 – optická analýza nativní moče ad 1.a. Manuální vyšetření moče vyšetření moče proužkem Dekaphan, Velocity a manuálním odečtem · zpracujte 3 vzorky moče: do vzorku promíchané moče ponořte testovací proužek, v časovém intervalu proveďte odečet pracujte s použitím OOP (osobní ochranné pomůcky) stripy odkládejte na buničitou vatu · proveďte manuální vyhodnocení dle přiložené stupnice pro hodnocení · zapište výsledky do pracovního protokolu: Vzorek č. pH Prot Arb.j. Glu Arb.j. Ket Arb.j. Bil Arb.j. Ubg. Arb.j. Krev Arb.j. Leu Arb.j. Nit SG . . ad 1.b. Manuální vyšetření moče Vyšetření moče mikroskopicky – močový sediment, nebarvený preparát v Seznámení s jednotlivými elementy a jejich obrazem v nativní moči – močový atlas v Zpracujte 3 vzorky moče : · Vzorky močí důkladně promíchejte, používejte OOP · Do centrifugační zkumavky napipetujte automatickou pipetou 4,0 ml moče ( na každou moč nová špička) · Centrifugujte 5 min při 2000 ot/min · Automatickou pipetou odeberte 3,6 ml supernatantu nad sedimentem- zkumavku držte v úrovni očí a pracujte tak, aby nedošlo ke zvíření sedimentu ( pro odsátí supernatantu je možno použít jednu špičku pro více močí) · Sediment ve zbylém objemu moče (0,4 ml) zviřte poklepáním na zkumavku prstem · Do bočního otvoru destičky Fast Read napipetujte 20μl pipetou zvířený sediment · Při zvětšení 400x spočítejte částice v 16-ti malých čtvercích ( meandrovitý pohyb) · Výsledek odpovídá počtu částic / ul · Výsledky vyjádřete v rozmezí dle doporučení ČSKB (viz tabulka) · Proveďte zápis do pracovního protokolu: Vzorek ERY LEU Další elementy ad 1.c. Manuální vyšetření moče Vyhodnocení barveného močového sedimentu supravitálním barvením dle Sternheimera * Seznámení s jednotlivými elementy a jejich obrazem v barveném preparátu - obrazový atlas barvených preparátů * Vyhodnoťte 3 vzorky barveného močového sedimentu ( použijte obrazové materiály SEKK) a zapiště jejich hodnocení do protokolu: Vzorek Buňka A Buňka B * Vyhodnoťte 2 vzorky barveného močového sedimentu po obarvení dle přiloženého návodu Vzorek ERY LEU Další elementy ad 2.a. Vyšetření moče na analyzátoru vyšetření moče chemicky na analyzátoru iChem Velocity · seznámení s přístrojem · proveďte interní kontrolu kvality na analyzátoru s použitím výrobcem dodaných kontrol vyhodnoťte ji · zpracujte 3 vzorky moče: označte vzorky čárovým kódem promíchejte vzorky močí s použitím OOP vložte vzorky do měřícího stojánku spusťte analyzátor proveďte vyhodnocení výsledků a zápis do pracovního protokolu Vzorek č. pH Prot Arb.j. Glu Arb.j. Ket Arbj. Bil Arb.j. Ubg Arb.j. Krev Arb.j. Leu Arb.j. Nit Arb.j. SG barva zákal . · Seznamte se s použitím LIS při práci analyzátoru ad 2.b. Vyšetření moče na analyzátoru Vyšetření moče na přístroji IQ2000 – optická analýza nativní moče * Seznámení s přístrojem * Proveďte kontrolu kvality na přístroji IQ200 a vyhodnoťte ji s použitím softwaru přístroje * Zpracujte 3 vzorky moče na přístroji: označte vzorky čarovým kódem promíchejte vzorky močí s použitím OOP vložte vzorky do měřícího stojánku spusťte analyzátor proveďte vyhodnocení výsledků a zápis do pracovního protokolu Vzorek ERY LEU Další elementy · Seznamte se s použitím LIS při práci analyzátoru · Porovnejte výsledky analýzy chemicky a mikroskopicky a okomentujte