Praktické cvičení č.                            datum________________  jméno__________________



Téma praktika:

Instalace metody na analyzátoru; kalibrace; správnost, přesnost, nejistota


Okruhy k nastudování a dotazy:

1)      Přečtěte si protokol a přiložený příbalový leták

2)      Zopakujte si, co je to lineární a nelineární kalibrace

3)      Co jsou to interní kontroly kvality

4)      Jak se vypočítá bias a variační koeficient?


Přístroje a pomůcky:

Automatický biochemický analyzátor cobas 8000

Kazeta CRP L3 – Roche

Kalibrátor (Calibrator for automated systems - Roche),

Kontrolní materiál  (PC CC1, PC CC2 – Roche)


Úkoly:


1)      Prohlídka příbalového letáku k soupravě CRP L3 – princip metody, patologie (včetně
pacientských nálezů), referenční rozmezí, měřící rozsah a další analytické parametry.




2)      Seznámení se s parametry metod „Application“ biochemického analyzátoru cobas 8000 (význam
jednotlivých programovatelných položek, případně s celým analyzátorem. Objasnění rozdílů mezi
metodou s lineární kalibrací (end point i kinetickou) a metodou s kalibrací nelineární.



3)      Instalace metody a instalace nové šarže kalibrátoru (včetně nalepení čárového kódu na
zkumavku a zápisu o použití nové šarže kalibrátoru) s využitím webových informací i  manuálně.


4)      Připravit si z mrazicího boxu předem připravené alikvoty kalibrační a kontrolní materiály.
Lyofilizované materiály je nutno předem rozpustit dle informací v příbalových letácích (dodává
výrobce), rozpipetovat do označených zkumavek typu eppendorf a zamrazit na -20 ºC. Zamražený
materiál v alikvotech rozpustit při laboratorní teplotě, důkladně obsah zkumavky promíchat a
přepipetovat do označeného vzorkového kepu.


5)      Provést kalibraci metody „ CRP“ a zkontrolovat ji materiálem PC CC1 a PC CC2. Výsledky
vyhodnotit v analyzátoru i manuálně (chyba by měla být v rozmezí ±  16%, tzn. 2/3 nejistoty metody
CRP uvedené v systému externího hodnocení kvality).

6)      Provést n = 10 měření CRP s materiály PC CC1 s návazností na mezinárodní standard CRM-470
za podmínek opakovatelnosti a vyhodnotit správnost (bias), přesnost (CV) a nejistotu měření pomocí
tabulky připravené v programu Excel. Předem si připravte vzorec k výpočtu variačního koeficientu a
bias.


Výsledky:


analyt

                                                                                                     CRP

                                             materiál

                                             jednotky

                                                                                                   [mg/l]

          Target Value


nejist.TV (%)


1


2


3


4


5


6


7


8


9


10


průměr


sm.odch.opakovatelnosti


CV opak (%)


nejist.průměru


Bias


Bias (%)


CV repro (%)


U (komb,rel) (%)



7)      Za domácí úkol z parametrů uložených v analyzátoru vypočítat základní ředění (Normal)
prováděné v cobas 8000 pro tyto metody:


             Parametry                                Ředění

---------------------------------------------------------------------------------------------------
----

                ALT


                CRP


                KM


                Bil


                Prealb


                Ferritin


Závěr: