Spirochety Jana Bednářová OKM FN Brno Spirochety •řád Spirochaetales •dvě čeledi s osmi rody, medicínsky důležité tři rody: Borrelia, Treponema, Leptospira •spirálovité gramnegativní bakterie, mikroaerofilní nebo anaerobní, aktivně pohyblivé Rod Borrelia •gramnegativní spirálovité mikroaerofilní bakterie • • a) původce lymeské borreliózy (Borrelia burgdorferi) • b) původce návratných horeček (Borrelia recurrentis, Borrelia hermsii) Lymeská borrelióza - etiologie •Etiologické agens: • Borrelia burgdorferi sensu lato • - Borrelia garinii (neurologické projevy) • - Borrelia afzelii (kožní projevy) • - Borrelia burgdorferi sensu stricto (kloubní projevy) • - Borrelia spielmanni, B. valaisiana, B. lusitaniae Borrelia burgdorferi s.l. borrelia Lymeská borrelióza - historie •1883 – acrodermatitis chronica atrophicans •1909 – erythema migrans (Afzelius) •1922 – Garin-Bujadoux-Bannwarthův syndrom •1975 – epidemická juvenilní oligoartritida (Steere) •1982 – izolace spirochet z klíštěte Ixodes scapularis (Burgdorfer) •1985 – izolace borrelií z kůže (Asbrink, Hovmark) Epidemická juvenilní oligoartritida Old Lyme, USA, 1975 •39 dětí + 12 dospělých •1/4 předchozí EM • lymeOrt lyme2 Lymeská borrelióza - epidemiologie •Přenos: klíšťata rodu Ixodes • vajíčko - larva - nymfa – imago • • • • •Rezervoárová zvířata: ptáci, hlodavci, lesní zvěř • • • Infekce s přírodní ohniskovostí corps Ixodes ricinus Tick-suck_preview Průběh borreliózy •asymptomatický (self-limited): 80 – 90% • •kožní forma: 70 – 75% •nervová forma: 12 – 20% •kloubní forma: 5% •srdeční postižení: 1% Klinické formy borreliózy (dle Asbrinkové) •časná lokalizovaná forma: • ID 3 – 30 dní, erythema migrans, nespecifické příznaky • •časná diseminovaná forma: • ID týdny až měsíce, neurologické projevy, borreliový lymfocytom, erythema multiple, arthralgie, a-v blok • •pozdní chronická forma: • ID měsíce až léta, ACA, chronická encefalitida a polyneuritida, lymeská arthritida Časná forma: lymfadenopatie, chřipkové příznaky, cefalea, myalgie, migrující artralgie; neurologické příznaky: meningitida, parézy hlavových nervů, Bannwarthův sy, myelitida, neuritida, oko – uveitida, konjunktivitida, pohybový aparát – tendovaginitida, myozitida, migrující artralgie Erythema migrans em mullegger-1 mullegger-5 Erythema multiple, erythema duplex (2), erytém se zvětšuje (centrifugální šíření spirochet v kůži), laboratorní dg. není nutná Borreliový lymfocytom fig5a fig5b Převážně B.afzelii, nebolestivvý uzlík na akrálních částech, nejčastěji na uchu, častější u dětí, delší ID (týdny až měsíce), minimální celkové projevy Acrodermatitis chronica atrophicans fig3b fig4c Neuroborrelióza – paréza n.facialis borrelia II[1] facialschwartz Serózní meningitida, kraniální neuritidy, Bannwarthův sy (meningoradikuloneuritida), periferní neuropatie a neuritidy, radikuloneuropatie, vzácně fokální meningoencefalitida Lymeská artritida 3_05_01_abb11 Opakující se krátké ataky s otokem jednoho nebo několika málo kloubů, asymetrické, bolestivé, s akutním začátkem, trvání dny až týdny Lymeská borrelióza - diagnostika •Přímý průkaz: • - kultivace: BSK médium, 7 – 14 dní • - elektronová mikroskopie • - PCR: kožní biopsie, synoviální tekutina/tkáň • • • nízká senzitivita • • Lymeská borrelióza - diagnostika •Nepřímý průkaz: metoda volby • - ELISA – screeningová metoda • B.burgdorferi s.lato IgG, IgM • - Western blot – konfirmační metoda • B.burgdorferi s.lato IgG, IgM • • • Materiál: sérum, CSF, synoviální tekutina Diagnostika - ELISA Obrázek1 Obrázek2 Diagnostika – Western blot Snímek 004 Autoblot 6000, Medtec Vyšetření 60 vzorků naráz. Diagnostika – Western blot WB02 Terapie borreliózy •peniciliny, aminopeniciliny, cefalosporiny II. a III. generace, tetracykliny, makrolidy •pouze klinické projevy •dostatečně dlouho v dostatečné dávce •neopakovat, pouze u nových klinických projevů •neléčit titr protilátek ! Rod Treponema •Treponema pallidum subs. pallidum – původce syfilis • - mikroaerofilní až anaerobní gramnegativní spirálovitá bakterie • • Nevenerická treponemata (tropy, subtropy): •Treponema pallidum subs. endemicum – endemická syfilis (bejel) •Treponema pallidum subs. pertenue – framboesie (yaws) •Treponema carateum – pinta • •Nepatogenní treponemata: sliznice dutiny ústní, genitálu T.pallidum subs. pallidum Trep Historie • Pre-kolumbovská teorie • •popis vyrážky a vředů ve starověké Číně •popis projevů terciárního stádia Hippokratem ve starověkém Řecku •kosterní pozůstatky se známkami pokročilých stádií syfilis nalezené v anglickém Kingstonu Historie • Kolumbovská teorie • •syfilis zavlečena do Evropy Kolumbovými námořníky (objevení Ameriky 12. října 1492) •1493: španělští námořníci neapolské nevěstince francouzští vojáci rozptýlení po Evropě (výprava krále Karla VIII.) •syfilis v českých zemích: první zmínka v kronice z roku 1493, kdy se v Čechách objevil „venerický mor nazývaný galská nemoc“ _44357368_columbus_cred203 V Novém světě mělo onemocnění mírný průběh, nenašly se pozůstatky na kostech, naopak v Evropě smrtící průběh, 1494-1495 pandemie Název onemocnění •Kolem roku 1500: morbus gallicus (galská nemoc), francouzská nemoc, neapolská nemoc, španělská nemoc, polská nemoc, německá nemoc, uherská nemoc, nemoc křesťanů • •1527: francouzský lékař Béthencourt navrhl název lues venerea – mor venerický • Název onemocnění •1530: syfilis – podle hlavní postavy básně italského renesančního lékaře a spisovatele Girolama Frascatoriho, pastýře ovcí Syphila. • •Český název příjice odvozen od jména bohyně lásky Prije (A.Jungmann, profesor porodnictví v Praze) • 2296262 Francouzi – Mal de Naples, Poláci – německé nemoc, Rusové – polská nemoc, Arabové – nemoc křesťanů. Girolamo Frascatori – báseň Syphilis sive morbus gallicus; pastevec potrestaný touto nemocí Apollonem za to, že nestavěl oltáře bohům, ale svému králi. Choroba slavných •Politici: • • Rudolf II. • Jindřich VIII. • Albrecht z Valdštejna • otec Winstona Churchilla • V.I.Lenin • Klement Gottwald • • •… a mnoho dalších • •Umělci: • • Jaroslav Vrchlický • Karel Hynek Mácha • Josef Mánes • Franz Schubert • Ludwig van Beethowen • Guy de Maupassant • Paul Gaugin • • Rudolf II. – terciární orgánová syfilis, Albrecht z Valdštejna – tabes dorsalis, Beethoven – kongenitální syfilis Epidemiologie • Přenos: •pohlavním stykem (koitální, orální, anální) • •nepohlavně (transplacentárně, kontakt s lézí, krevní transfúzí, kontaminovaným předmětem) • •ID: 10 – 90 dnů Klinické formy •Časná syfilis: -primární -sekundární -časná latentní - •Pozdní syfilis: -pozdní latentní -terciární Primární syfilis •obvykle za 3 týdny po přenosu infekce •ulcerace v místě vstupu infekce – tvrdý vřed •(ulcus durum) syph1 AH4IHCAGF2SZXCAQMDB2ECA1DAFTNCAYJ07UFCAA786WBCAXFK8WNCARPZA65CA552ZMDCAGCLW6YCA5KU12QCACNQMVXCA4DHU 31CABPME0CCAXMM43QCAUVMFIFCA3MNQCFCAUJVE12CA2D1H9ICAHEZTJ3 primary-syphil Tvrdý vřed nebolestivý, s množstvím treponemat na spodině vředu – možnost průkazu mikroskopií v zástinu nebo přímou IF. Spontánní zhojení. Protilátky se objevují 1 – 4 týdny po vzniku vředu. Sekundární syfilis •za 1 – 5 týdnů po zhojení primární léze •nespecifické symptomy: horečka, cefalea, bolest v krku, artralgie, anorexie •kožní a slizniční léze: generalizovaný rash, condylomata lata I6TDKCAEZL6ZUCA3A8GPFCAPANMSVCA29ZBIMCAP27IVTCA80BJ3KCA2D6RB6CA1LC2V9CA1KKJDUCAO8GV7ECAIWX1MJCA0QOO 6NCAHT40PFCAV212G0CANE0MNDCA3VOI1NCAUR5I7DCAZ27FMRCAR2V18A 70033-article-qkidd Y412PCALQAHDKCA2T2V6NCA52M92NCAY7917MCARNEO23CAGAHGRDCADA7QS3CAIKT7I9CATDNIW4CAUXERENCA5VUAUBCAUCWH 4ECA2480U1CA9CYW6MCA8B4J9JCAZCZODBCA2WK16ICAJF958NCA5BPVZ4 Výrazná protilátková odpověď, spontánní zhojení. Následuje latentní syfilis, během prvního roku časná, poté pozdní; asymptomatická. Terciární syfilis •10 – 20 let po úvodní infekci •gummata v kůži, kostech, orgánech •kardiovaskulární syfilis – endarteritis, angina pectoris, aneurysma aorty •neurosyfilis – progresivní paralýza, tabes dorsalis gumma1 images Tabes dorsalis – léze zadních provazců míšních, spinální ataxie, vrávoravá chůze, chůze po mechu, tj. porucha hlubokého čití, progresivní paralýza – granulomatozní zánět v mozku vedoucí k demenci Kongenitální syfilis •Časná kongenitální syfilis: • profuzní rhinitida, mokvavé pláty a exantém v obličeji, makulopapulózní a vesikobulózní exantém na dlaních a chodidlech nozka1 rucky1 •Pozdní kongenitální syfilis: • sedlovitý nos, zkrácená maxilla, protrudující mandibula, Hutchinsonovy řezáky, morušovité moláry, hluchota, slepota • hutchin1 morus1 zkrac1 sedlnos1d Terapie •15. – 19. století: • koupel v jelení krvi • koupel v krvi netopýrů • léčba hladem, pocením • rtuťové masti • guajakové dřevo • •1917 naočkování malarických plasmodií (Julius Wagner von Jauregg, 1927 Nobelova cena) •ATB – penicilin, doxycyklin, azithromycin aids_syphilis Rtuťové masti – časté otravy rtutí, guajakové dřevo – dovoz od r. 1508 ze Santo Dominga, Julius von Jauregg – rakouský lékař, léčba neurosyfilis naočkováním malarických plasmodií. Neurosyfilis se léčí pouze PNC. Přímý průkaz • •nelze kultivovat na umělých kultivačních médiích •mikroskopie v zástinu •přímá imunofluorescence •PCR – • www.helid.digicollection.org C:\Users\27958\Desktop\p060.jpg Mikroskopie v zástinu Nelze kultivace ani na TK, pouze na králičích varlatech PCR – lze real-time PCR, na našem pracovišti v minulosti ano, nyní jako součást multiplex panelu PCR-STD – viz. další obr. Ukázka výsledku hybridizační metody PCR-STD (GenID) STD OKM FN Brno Diagnostika syfilis = nepřímý průkaz •screening: netreponemový a treponemový test •konfirmační vyšetření: Western blot, imunofluorescence • •zákon č.267/2015 Sb. o ochraně veřejného zdraví •vyhláška MZ ČR č.306/2012 Sb. o podmínkách předcházení vzniku a šíření infekčních onemocnění Screeningové testy vyšetřují celkové Ig, falešně pozitivní zejména netreponemové testy Vyšetření u všech gravidních ve 3. a 7. měsíci těhotenství, všech novorozenců z pupečníkové krve, každé ženy před provedením interrupce, všech osob ve věku 15 až 65 let přijímaných k první hospitalizaci na venerologické oddělení, všech osob ve věku 15 až 65 let přijímaných na jiná než venerologická oddělení, pokud to lékař považuje za odůvodněné Reakce netreponemové •antigen kardiolipin •VDRL, RRR, RPR •pozitivní za 2-3 týdny po začátku onemocnění • • protilátky v séru + kardiolipin precipitace P5280008 Immutrep RPR, Omega Diagnostics OKM FN Brno Reakce treponemové •antigen T.pallidum •hemaglutinační test TPHA •EIA IgG, IgM •Western blot IgG, IgM •nepřímá imunofluorescence IgG, IgM P5280004 TPHA, Bio-Rad OKM FN Brno Obrázek2 Autoblot 2000, Medtec P5280005 Western blot MarDx IgG,Trinity Biotech OKM FN Brno Vyšetření CSF •kvantitativní a kvalitativní cytologie •stav hematolikvorové bariéry •oligoklonální IgG pásy •intratekální syntéza specifických protilátek • P1010134 Cytologický nález u neurosyfilis – lehká lymfocytární pleocytóza OKB FN Brno Test Elecsys® Syphilis •elektrochemiluminiscenční imunoanalýza s vysoce imunogenními rekombinantními antigeny TpN 15, TpN 17, TpN 47 •detekce celkových protilátek proti T.pallidum •doba stanovení 18 minut •výsledek vyjádřen jako cutoff index: < 1,00 – negativní • ≥ 1,00 – pozitivní • •klinická senzitivita: 100 % •klinická specificita: 99,88 % C:\Users\op\AppData\Local\Temp\notesAF3A78\~5053309.jpg Analyzátor cobas e411, Roche Rod Leptospira •bakterie spirálovitého tvaru, pohyblivé, špatně barvitelné •kultivace 1 týden ve speciálním tekutém médiu při pokojové teplotě Leptospiróza •antropozoonóza •Etiologie: serotypy L.grippotyphosa, L.pomona, L.icterohaemorrhagie, L.copenhageni, L.sejroe •Epidemiologie: přenos močí infikovaných zvířat (hlodavci, prasata, skot) po kontaktu s vlhkou půdou, vodou… •letní a podzimní období Klinické projevy •ID: 1 – 2 týdny •Ikterická forma = Weilova nemoc – renální selhání, krvácivé příznaky, hemoragická pneumonie, mortalita 10% •Anikterická forma = polní, žňová, blaťácká horečka – necharakteristické horečnaté onemocnění, serózní meningitida leptospir3 leptospir1 leptospir2 Leptospiróza Diagnostika •Anamnéza: pobyt v přírodě, pití vody ze studánek, práce na poli… •Přímý průkaz z krve, moči, likvoru: kultivace v tekutém médiu 1- 2 týdny, PCR •Nepřímý průkaz – průkaz protilátek v séru: mikroskopický aglutinační test – hodnocení mikroskopicky v zástinu