Státní závěrečná zkouška program Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví - Bioanalytik 1) Klinická biochemie Bioanalytické metody · Dusíkaté látky nebílkovinného charakteru; močovina, kreatinin, kys, močová, NH3 Principy stanovení, chemické a enzymové metody, referenční meze, POCT metody · Na, K, Cl, Ca, Mg, P, Fe Principy metod, plamenová fotometrie, ISE · Žlučová barviva; hemoglobin, interference Principy metod, celkový a přímý bilirubin, novorozenecký bilirubin, žlučová barviva v moči, celkový hemoglobin, volný hemoglobin v plazmě, formy hemoglobinu · Celková bílkovina – sérum, moč, mozkomíšní mok, Specifické plazmatické bílkoviny Metody stanovení v séru,moči,mozkomíšním moku, referenční meze, neanalytická fáze, plazma/sérum, albumin v moči, specifické proteiny, monoklonální gamapatie, Reibrova rovnice, intrathekální systéza imunoglobulinů, oligoklonální pásy · Glukóza, glykovaný hemoglobin Principy stanovení, referenční meze, preanalytická fáze, POCT-glukometry principy, · Cholesterol, triacylglyceroly, lipoproteiny Principy stanovení, referenční meze, preanalytická fáze, celkový cholesterol, HDL, LDL stanovení/výpočet, lipoproteiny, Lpa, ELFO, ultracentrifugace, lipnické sérum · Enzymy; transaminázy, cholestatické enzymy, pankreatické enzymy Obecná enzymologie, působení enzymů,ovlivnění enzymové reakce, reakce nultého a prvního řádu, K[m],, popis enzymových reakcí, end-point metoda, kinetické stanovení, linearita, projev vyčerpání substrátu · Kardiomarkery Markery srdeční ischemie, markery srdečního selhání · Chemické vyšetření moče, Morfologické vyšetření moče Diagnostické proužky, principy měřených parametrů, močový sediment-manuální provedení, barvení; automatizované mikroskopické metody, nativní moč, digitální fotografie, flow-cytometrie, mikroskopie po sedimentaci/centrifugaci · Homogenní a heterogenní imunoanalýza, ELISA Principy imunoanalýzy, antigen,protilátka polyklonální, monoklonální,kompetitivní a nekompetitivní imunoanalýza, homogenní, nehomogenní, značky, mikročástice, příklady řešení v automatických imunochemických analyzátorech · Interní kontrola kvality, externí kontrola kvality, chyby náhodné a systematické, kontrolní materiály, opakovatelnost, reprodukovatelnost, přesnost, správnost, bias. mez detekce, mez stanovitelnosti, validace, verifikace metod,lékařská kontrola, delta check, Westgardova pravidla Laboratorní diagnostika – klinika · Ledviny a močové cesty funkce, nefron, glomerulární funkce (MDRD, CKD EPI, Cystatin C), tubulární funkce (adiuretinový test), význam stanovení močoviny a kreatininu v séru a v moči, dusíková bilance, renální a prerenální selhání, uroinfekce, chemické a morfologické vyš. moče, proteinurie · Játra, žlučový trakt, žaludek a střevo anatomie jater a žlučových cest, funkce, diferenciální diagnostiky ikteru (prehepatální, hepatální, posthepatální), akutní a chronická hepatitida, jaterní cirhóza, jaterní enzymy indikátorové a cholestatické, intrahepatální a extrahepatální cholestáza, funkce žaludku, žaludeční sekrece, Helicobacter pylori, střevní propustnost, tlusté střevo-kolorektální karcinom, okultní krvácení · Pankreas-zevní sekrece, -vnitřní sekrece zevní sekrece-funkce, složení pankreatické šťávy, akutní a chronická pankreatitida, insuficience zevní sekrece pankreatu, klin. a laboratorní projevy · vnitřní sekrece-regulace metabolismu glukózy, inzulin, glukagon, diabetes melitus, o-GTT, glykemický profil, glykovaný hemoglobin, hypoglykémie, diabetická ketoacidóza · Srdce, Plíce srdce a krevní oběh, ischemická choroba srdeční, akutní koronární syndrom (IM), srdeční selhání, kardiomarkery. Anatomie a funkce plic a dýchacích cest, metabolismus kyslíku, pO2 , příčiny hypoxie, ventilace, mrtvý prostor, perfuze, alveolokapilární difuze pO2 , pCO2 , plicní zkraty, hemoglobin, saturační/disociační křivka, p50 , efektivní hemoglobin, minutový srdeční výdej, centralizace oběhu, šokový stav. · Vnitřní prostředí-voda, ionty, osmolalita, acidobazický metabolismus Definice vnitřního prostředí, otevřený systém, tělesná voda a její regulace, klin. a laboratorní příznaky dehydratace a hyperhydratace, úloha osmolality a její regulace, změny koncentrace Na, K, Cl, Regulace acidobazické rovnováhy, Henderson-Hasselbachova rovnice, nárazníkové systémy, metabolické a respirační poruchy ABR a jejich kompenzace · Hypotalamus, hypofýza, nadledviny a regulace endokrinního sytému Endokrinní regulace, zpětné vazby na ose hypotalamus-hypofýza-žláza s vnitřní sekrecí, releasing hormony,hormony neurohypofýzy a adenohypofýzy, nadledviny kůra-dřeň, fysiologické funkce hormonů, laboratorní a klinické projevy hypo- a hyperfunkce · Štítná žláza a příštitná tělíska Tyroxin, trijodtyronin –syntéza, regulace, funkce. Klinické a laboratorní projevy hypotyreózy, hypertyreózy, diagnostika. Parathormon, hypoparathreóza, hypoparathyreóza. · CNS anatomické poměry, mozkomíšní mok, hematoencefalická bariéra, meningitida, encefalitida, mozkové krvácení, degenerativní onemocnění CNS (roztroušená skleróza), intrathekální syntéza. Biochemické vyšetření (glukóza, bílkovina, laktát…albumin, imunoglobuliny, oligoklonální pásy, spektrofotometrická křivka); kvantitativní cytologie, oligocytóza, pleocytóza · Kosti Funkce, stavba, osteoklasty, osteoblasty, osteocyty, biochemické ukazatele novotvorby a resorpce, osteoporóza, křivice, parathormon, vit. D · Plazmatické bílkoviny Funkce, diagnostický význam plazmatických proteinů, albumin, prealbumin,transferin, ceruloplasmin, haptoglobulin, bílkoviny akutní fáze pozitivní/negativní, CRP, prokalcitonin, imunoglobuliny, monoklonální gamapatie, CDT, · Ateroskleróza, rizikové faktory Klinické projevy AS, cholesterol celk., HDL-, LDL-, lipoproteiny-třídy, apolipoproteiny · Biochemický screening; novorozenecký screening, vrozené vývojové vady (vvv) 1. a 2. trimestr obecné zásady pro aplikaci screeningu, kongenitální hypotyreóza, fenylketonurie, kongenitální adrenální hyperplazie, cystická fibróza pankreatu Laboratorní instrumentální a analytická technika · Spektrofotometrie; turbidimetrie, nefelometrie Lambertův-Beerův zákon, platnost zákona, zdroje světelného záření, monochromátory, absorbční prostředí, inkubační lázně, detektory, dvoupaprskové spektrofotometry, kalibrační graf, mez detekce, mez stanovitelnosti Princip turbidimetrie a nefelometrie, konstrukce přístrojů, · ELISA Protilátky, antigeny, enzymové konjugáty, používané enzymy, kompetitivní/nekompetitivní, homogenní/heterogenní imunoanalýza, ELISA-reader · Fluorimetrie; chemiluminiscence Druhy luminiscence, fotoluminiscence (fluorescence, fosforesecence), chemiluminiscence, luminofory, imunochemické analyzátory, elektrochemiluminiscence, MEIA, FPIA, DELFIA, Stokesův posun. · Atomová emisní spektrofotometrie (AES), Atomová absorpční spektrofotometrie(AAS)-plamenová atomizace; elektrotermická atomizace Princip AES, konstrukce plamenového fotometru, použité plyny, vnitřní standard, pseudohyponatrémie. Princip AAS, Kirchhofův zákon, způsob atomizace, zdroje záření, výbojka s dutou katodou, plamenová technika, nebulizér, hořák, stechiometrie plamene. Elektrotermická atomizace, dávkovač, grafitová kyveta, teplotní režim, kontrola teploty, izotermická atomizace, korekce pozadí (deuteriová výbojka, Zeemanova korekce, Smith-Hievtje). · Reflexní fotometrie; denzitometrie Princip, popis měřícího zařízení, aplikace v rámci suché chemie. Konstrukce denzitometru, výstupy denzitometrie elektroforeogramu, · Hmotnostní spektrometrie Hmotnostní spektrometr, iontový zdroj, elektronová/chemická ionizace, ESI, MALDI, TOF, kvadrupól, iontové pasti, detektor · Osmometrie Princip osmotického tlaku, koligativní vlastnosti roztoku, osmolarita, osmolalita, kryoskopie, ebulioskopie, konstrukce osmometru, kalibrace, ideální roztok, osmolální okno · Elektroforéza Princip dělení sérových bílkovin, elektrický zdroj, elektroforetická vana, dělící média, elektroendoosmóza, pH a iontová síla pufru, agaroforéza, PAGE, nativní/denaturační elektroforéza, frakce sérových bílkovin, isoelektrická fokusace, M-gradient, monoklonální gamapatie, imunofixace, kapilární elektroforéza, 2-DE, elektroforeogra-vyhodnocení, elektroforéza bílkovin moče, mozkomíšního moku · TLC, LC, HPLC, GC Principy chromatografického dělení, zařízení pro tenkovrstevnou chromatografii, provedení a vyhodnocení TLC, konstrukce chromatografu pro HPLC, technické řešení a funkce jednotlivých částí, isokratický a gradientový systém, reverzní fáze, · Plynový chromatograf konstrukce a funkce jednotlivých částí, · Automatické biochemické analyzátory historie, analyzátory kontinuální a diskrétní, random Access analyzátory, hlavní součásti a jejich technická řešení, modulární systémy · Analyzátory ABR a krevních plynů, Iontově selektivní elektrody Anaerobní odběr, bilogický materiál,měřené parametry: pH-potenciometrie, pO2 –ampérometrie-Clarkova el., pCO2 –modif.potenciometrie-Severinghausova el. , dopočítávané parametry, další měřené analyty · Iontově selektivní elektrody Na, K, Cl, Ca · Elektrochemické metody - Coulometrie, Polarografie, Konduktometrie Elektrická vodivost, jednotky, konstrukce, využití. Princip polarografie, konstrukce polarografu, polarografická křivka, aplikace. II.Faradayův zákon, aplikace coulometrie v KB. · Preanalytická laboratorní fáze-manuální; robotizovaná Automatizované a robotizované procesy, perianalytická automatizace a robotizace, 2) Klinická hematologie Bioanalytické metody · Krvetvorba a její vývojová stádia jednotlivých leukocytárních, erytrocytárních a trombocytárních buněčných elementů. · Vyšetření krevního obrazu včetně diferenciálního počtu leukocytů na hematologických analyzátorech: jednotlivé klinické i laboratorní parametry krevního obrazu, používané jednotky, souvislost měřených a počítaných parametrů erytrocytů a trombocytů s morfologií buněk · Morfologické hodnocení panopticky obarvených nátěrů periferní krve a kostní dřeně: principy barvení a způsob hodnocení jednotlivých preparátů · Morfologické abnormality červené krevní řady · Morfologické abnormity leukocytů včetně prekurzorů · Morfologické abnormity trombocytů a jejich prekurzorů · Principy cytochemických vyšetření a vyhodnocování nálezů u jednotlivých hematopoetických buněčných elementů v souvislosti s diagnostikou hematologických malignit · Vyšetření anémií: retikulocyty stanovené mikroskopicky a na analyzátoru, morfologické změny v nátěrech periferní krve, cytochemické vyšetření zásobního železa · Vyšetření hemolytických anémií: obecné testy, testy na průkaz abnormálních hemoglobinů, testy na průkaz nedostatku enzymů · Základní hemokoagulační vyšetření, principy, vyhodnocení výsledků a klinický význam · Diferenciální diagnostika prodlouženého aPTT, principy vyšetření koagulačních faktorů a patologických inhibitorů · Diferenciální diagnostika prodlouženého PT, principy vyšetření koagulačních faktorů a specifických inhibitorů · Diagnostika poruch primární hemostázy, testy screeningové a speciální · Vyšetření u von Willebrandovy choroby, testy screeningové, speciální a diskriminační · Diagnostika vrozených a získaných rizikových faktorů trombózy · Fibrinolýza a metody jejího vyšetřování · Antitrombotická léčba a metody jejího sledování, komplikace a jejich diagnostika Laboratorní diagnostika – klinika · Erytrocyty, patologie – anémie, polyglobulie - definice, klasifikace, diferenciální diagnostika · Hemoglobin, anémie z poruchy tvorby hemoglobinu · Metabolizmus železa, anémie spojené s poruchami železa (sideropenie, sideropenická anémie, anémie chronických chorob) · Membrána erytrocytů, hemolýza, vrozené hemolytické anémie · Přežívání a rozpad erytrocytu intravaskulárně a extravaskulárně, získané hemolytické stavy, trombotické mikroangiopatie · Poruchy metabolizmu nukleových kyselin, megaloblastová přestavba, metabolizmus vitamínu B12, kyseliny listové · Syndromy dřeňového selhání (vývoj krvetvorby z kmenové buňky a její řízení; vrozené a získané poruchy krvetvorby) · Leukocyty, kvantitativní a kvalitativní abnormality bílých krvinek, příčiny a chorobné stavy · Primární hemostáza, poruchy cévní stěny, trombocytopathie, Morbus von Willebrand · Plazmatická koagulace, vrozené krvácivé stavy plazmatických faktorů · Stavy spojené s náchylností k trombóze, definice trombofilie · Diseminovaná intravaskulární koagulopatie · Imunopatie spojené s poruchou krevního srážení · Neimunitně podmíněné získané poruchy krevního srážení choroby jater, hypovitaminóza K, nádorová onemocnění, urémie, sepse · Akutní leukémie · Myeloproliferativní neoplázie, WHO klasifikace · Myelodysplastický syndrom, neklonání příčiny myelodysplázie · Lymfoproliferativní onemocnění, WHO klasifikace · Vyzrálé neoplazie z B-řady Laboratorní instrumentální a analytická technika · Principy impedanční a optické analýzy na hematologických analyzátorech · Systém kontrol kvality a preventivní činnost při vyšetřování krevních obrazů na hematologických analyzátorech. · Principy mikroskopie – světelná, elektronová, digitální zobrazovací technika · Principy detekce abnormálních hemoglobinů (izoelektrická fokusace, HPLC, elfo hemu, elfo globinových řetězců) · Základní principy testů hemostázy: metody detekce koagula, metody fotometrické (end point a kinetické), metody imunochemické (aglutinace, LIA, ELISA, EID) a jejich vyhodnocení. · Principy vyšetřování primární hemostázy – agregometrie, PFA ev. jiné · Nové globální metody popisující krevní srážení – TEG, Rotem, TGA · Preanalytická fáze pro hemokoagulační vyšetření: příprava pacienta, odběr, transport, zpracování biologického materiálu, skladování, zásady zamrazování a rozmrazování · Kalibrace v koagulační laboratoři: kalibrační materiály, provedení kalibrace u rutinních a speciálních vyšetření · Interní kontroly kvality v koagulační laboratoři: kontrolní materiály, typy kontrol (preciznost v čase a v sérii, pravdivost, porovnatelnost a jejich vyhodnocení · Molekulárně genetická diagnostika v hematologii, PCR · Kultivace hematopoetických kmenových buněk. 3) Povinně volitelný předmět (výběr: Klinická mikrobiologie; Klinická imunologie; Transfuzní lékařství; Patologie) Klinická mikrobiologie Bioanalytické metody · Diagnostika stafylokoků a streptokoků, kultivace na půdách, identifikace rychlými metodami (latexová aglutinace, hmotnostní spektrometrie), případně biochemickými metodami. · Diagnostika enterokoků a grampozitivních tyčinek, kultivace na půdách, identifikace hmotnostní spektrometrií, případně biochemickými metodami · Diagnostika enterobakterií, kultivace na selektivně diagnostických půdách, identifikace, případná antigenní analýza. · Diagnostika gramnegativních tyčinek kromě enterobakterií, využití selektivních kultivačních půd, identifikace · Diagnostika gramnegativních koků, specifické podmínky kultivace, biochemická identifikace, hmotnostní spektrometrie, případně antigenní analýza · Diagnostika anaerobních bakterií, specifické podmínky kultivace, nejčastější klinicky významné anaerobní baktérie a jimi vyvolané infekce · Diagnostika acidorezistentních bakterií, specifické barvení preparátů, selektivní kultivační média, specifické podmínky kultivace, využití automatických systému, využítí PCR metod. · Diagnostika spirochet – borrelie, treponema, leptospira. Metody přímého a nepřímého průkazu, screeningové a konfirmační testy, treponemové a netreponemové reakce. · Diagnostika mykoplasmat, chlamydií a rickettsií. Metody přímého a nepřímého průkazu, kultivace, biochemická aktivita, serologické a molekulárně biologické metody. · Diagnostika virů – mikroskopie, izolace virů, průkaz virových antigenů, průkaz virových nukleových kyselin, serologický průkaz virových infekcí. · Diagnostika parazitů, rozdělení parazitů podle buněčné stavby, nejčastější zástupci, nejčastější parazitární onemocnění v našich podmínkách, tropická parazitární onemocnění. · Diagnostika kvasinek a plísní- metody identifikace, nejčastější klinicky významné kvasinky a vláknité houby, oportunní infekce Laboratorní diagnostika – klinika · Bakteriální a virové infekce HCD, infekce nosu a nosohltanu, infekce orofaryngu včetně tonzil, záněty zevního a středního ucha, záněty vedlejších nosních dutin. Nejčastější etiologická agens. · Bakteriální, virové infekce DCD, infekce bronchů a bronchiolů, komunitní a nozokomiální záněty plic, aspirační pneumonie, plicní abscesy, plicní tuberkulóza a mykobakteriózy. · Infekce trávicího traktu. Infekce jícnu a žaludku. Bakteriální, viroví a parazitární původci průjmů. Otravy z potravin. Infekce Clostridium difficile. · Infekce močových cest a sexuálně přenosné infekce. Patogeneze močových infekcí, cystitidy, pyelonefritidy, bakteriologická diagnostika a interpretace nálezu. Klasické sexuálně přenosné choroby (gonorrhoea, syphilis, ulcus molle, lymphogranuloma venereum, granuloma inguinale). Gardnerella vaginalis, mykotické a parazitární STD. Chlamydia trachomatis a viroví původci STD (lidské papillomavory, HSV, HIV). · Infekce CNS. Akutní a chronické meningitidy, purulentní a aseptické meningitidy, nejčastější etiologická agens, encefalitidy, mozkové abscesy. · Infekce plodu a novorozence. Bakteriální, parazitární a virové kongenitální infekce. Perinatální a postnatální infekce novorozence. Nejčastější etiologická agens. · Infekce ran, měkkých tkání, kostí a kloubů. Ranné infekce, infekce svalů – myositidy, infekce kloubů – artritidy, infekce kostí – osteomyelitidy, nejčastější etiologická agens. · Oční infekce. Bakteriální, virové, mykotické a parazitární záněty spojivek a rohovky. Infekce očního víčka, infekce slzního ústrojí, infekce očnice, nitrooční infekce – endophtalmitida. · Infekce krevního řečiště. Definice sepse, druhy bakteriémie a jejich příčiny. Katetrové sepse, endokarditidy. Odběr krve na hemokulturu a interpretace hemokultivačních nálezů. · Infekce spojené se zdravotní péčí (ISZP), dříve nozokomiální infekce, jejich definice. Hlavní druhy infekcí: močové, ranné, respirační, gastrointestinální, katetrové sepse. Laboratorní instrumentální a analytická technika · Mikroskopické techniky v mikrobiologii. Optický mikroskop. Imunofluorescenční mikroskop. Nativní preparát. Barvený preparát, jeho fixace. Nejčastější diagnostická barvení v mikrobiologii. · Příprava mikrobiologických kultivačních půd. Půdy základní, obohacené, selektivní, diagnostické, selektivně diagnostické. Půdy ke stanovení citlivosti na antibiotika, transportní půdy. Kontrola sterility a kvality půdy. · Zpracování mikrobiologických vzorků z dýchacích cest. Nejčastější druhy materiálů: výtěry, sputa, odsátý materiál, bronchoalveolární laváž a jejich zpracování. Zhodnocení mikroskopických a kultivačních nálezů. · Zpracování mikrobiologických vzorků z trávicích cest. Metody mikroskopické, kultivační, imunochromatické, serologické a jejich využití při detekci etiologických agens. · Semikvantitativní kultivační zpracování močí a interpretace nálezů. Zpracování vzorků z genitálií na mikrobiologické vyšetření. Druhy materiálu, mikroskopické, kultivační vyšetření, vyšetření PCR. · Zpracování vzorků z ran, aerobní a anaerobní kultivační vyšetření, význam mikroskopie. Zpracování hemokultur na bakteriologické vyšetření, využití automatických systémů. Zpracování likvoru na bakteriologické vyšetření. Serologické metody ve zpracování likvoru. · Metody identifikace kmene v mikrobiologii. Mikroskopie, selektivně diagnostické kultivační půdy, biochemické identifikační testy, antigenní analýza kmene, identifikace pomocí MALDI TOF. · Testování citlivosti k antimikrobiálním látkám- disková difuzní metoda, metody stanovení minimální inhibiční koncentrace (MIC), nejčastější mechanismy rezistence a jejich průkaz. · Metody průkazu antigenu a protilátky v mikrobiologii. Vyšetřovací metody v serologii – precipitace, aglutinace, KFR, neutralizační reakce, reakce se značenými složkami. Průkaz bakteriálních antigenů. · Preanalytická fáze u mikrobiologických vzorků. Specifika odběru jednotlivých druhů materiálu. Podmínky a doba transportu klinického materiálu. Klinická imunologie Bioanalytické metody · Alergie a atopie, alergeny, fáze alergické reakce, druhy alergických chorob, možnosti vyšetření pacienta s alergií · Systémová autoimunitní onemocnění, příklady onemocnění, metody vyšetření, vyšetřované autoprotilátky · Orgánově specifické autoimunitní onemocnění, příklady onemocnění, metody vyšetření, vyšetřované autoprotilátky · Protinádorová imunita, možnosti laboratorní imunologie při léčbě a diagnostice nádorů, imunologická léčba nádorů · Imunodeficience buněčné, laboratorní vyšetření při podezření na buněčný imunodeficit · Imunodeficience protilátkové, laboratorní vyšetření při podezření na protilátkový imunodeficit · Poruchy fagocytózy, laboratorní vyšetření při podezření na poruchy fagocytózy · Imunodeficience komplementu, laboratorní vyšetření při podezření na deficit komplementu · Sekundární imunodeficience, laboratorní vyšetření při podezření na sekundární imunodeficit Laboratorní diagnostika – klinika · Antigeny, antigenní specifičnost a imunogennost, Antigen prezentující buňky, HLA- systém, zpracování a předkládání antigenu, imunologická paměť, vakcinace, druhy vakcín, laboratorní vyšetření odpovědi na vakcinaci. · Regionalizace imunitní odpovědi, lymfatický systém, primární a sekundární lymfatické orgány, slizniční a kožní imunitní systém, funkce mikrobioty, možnosti vyšetření · Buněčná nespecifická imunita, příklady buněk a jejich funkcí, PRP receptory buněčné nespecifické imunity a odpovídající PAMP motivy, fagocyty, fagocytóza, vyšetřovací algoritmus, funkční testy, onemocnění spojená s fagocytózou · Humorální nespecifická imunita spojená s komplementovým systém, PRP receptory humorální nespecifické imunity a odpovídající PAMP motivy, cesty aktivace komplementu, regulace komplementu, vyšetřovací algoritmus, funkční testy, onemocnění spojená s poruchami komplementu · Zánět, jako součást vrozené i specifické imunitní reakce, cytokiny a zánět, sepse, laboratorní monitorování zánětu, proteiny akutní fáze · T-lymfocyty: druhy, vývoj, TCR receptor - molekulárně-genetická podstata specifičnosti, funkce – Th1,Th2, Th17, T-reg, cytotoxické T-lymfocyty, homing lymfocytů v tkáních, druhy vyšetření, funkční testy · B-lymfocyty: vývoj, BCR receptor - molekulárně-genetická podstata specifičnosti, imunoglobuliny struktura, funkce imunitní reakce založená na protilátkách, druhy vyšetření, funkční testy · Regulace imunitních reakcí, funkce receptorů, cytokinů, regulačních buněk, regulace protilátkami, poruchy regulace a jejich vyšetření · Antiinfekční imunita, obrana proti bakteriím, virům, parazitům, mechanismy úniku mikroorganismů před imunitním systémem, buňky NK a NKT, interferon, sepse · Protinádorová imunita, imunitní systém a nádory, Nádorové antigeny, možnosti laboratorní imunologie při léčbě a diagnostice nádorů, imunologická léčba nádorů · Transplantace, základní pojmy, alogenní reakce, orgánové transplantace, rejekce, transplantace hematopoetických kmenových buněk, reakce štěpu proti hostiteli, reakce proti leukemickým buňkám, využití transplantací, laboratorní vyšetření v souvislosti s transplantacemi · Imunopatologická reakce I. – IV. typu, příklady onemocnění · Autoimunitní onemocnění, princip autoimunitní reakce, centrální a periferní tolerance, příčiny onemocnění a fáze vzniku autoimunitních onemocnění, možnosti laboratorního vyšetření autoimunitních onemocnění Laboratorní instrumentální a analytická technika · Monoklonální protilátky – příprava a využití v léčbě a laboratorní diagnostice, polyklonální protilátky - příprava a využití v laboratorní diagnostice; Imunofixace · Využití průtokové cytometrie v imunologických vyšetřeních (princip, grafické znázornění – histogram, dotplot, stanovení základních lymfocytárních subpopulací, funkční testy) · Separační metody v buněčné imunologie a jejich využití (hustotní centrifugace, magnetická separace, sortry, počítání buněk) · Imunofluorescence: princip, reagencie, metodika přímé a nepřímé imunofluorescence, fluorescenční mikroskop. Využití imunofluorescence v imunologických vyšetřeních, používané substráty pro stanovení ANA, ANCA, RET, ASMA, GPC, AMA EMA, výstupy vyšetření; Westernblot a jeho využití v diagnostice autoprotilátek Transfuzní lékařství Bioanalytické metody · Předtransfuzní vyšetření · Laboratorní vyšetření antierytrocytárních protilátek · Laboratorní vyšetření krevní skupiny - AB0, Rh(D) · Laboratorní vyšetření u dárců krve · Imunohematologické vyšetření AIHA · Imunohematologické vyšetření v těhotenství Laboratorní diagnostika – klinika · Dárcovství krve – základní principy, posouzení způsobilosti dárce · Typy odběrů, nežádoucí reakce na odběr · Zásady hemoterapie · Rizika hemoterapie · Typy transfuzních přípravků · Krevní skupiny - AB0 a Rh systém · Ostatní krevní skupiny · Hemolytické onemocnění novorozence · HLA systém · Autotransfuze Laboratorní instrumentální a analytická technika · Zpracování plné krve v zařízení transfuzní služby · Odběry plazmy k frakcionaci, výroba krevních derivátů · Kontroly kvality v zařízení transfuzní služby · Přístroje v zařízení transfuzní služby · Deleukotizace , ozařování, promývání a dělení transfuzních přípravků Patologie Bioanalytické metody · Význam histologického vyšetření tkání · Cytologie plic · Gynekolologická cytologie (zpracování, barvení, Bethesda klasifikace) · Význam imunohistochemie u diagnostiky tkání a buněk, prediktivní markery · Význam a typy „in situ“ hybridizace u diagnostiky tkání a buněk · Peroperační biopsie (princip, využití, možnosti) · Metody průkazu svalových dystrofii v patologii · Interní a externí kontrola kvality v patologii · Průkaz enzymů · Anorganické látky + pigmenty Laboratorní diagnostika – klinika · Epitelová tkáň (stavba a dělení epitelů, intermediální filamenta), epitelové nádory · Mesenchymální tkáně · Svalová a nervová tkáň · Progresivní změny ve tkáních (regenerace, reparace, hypertrofie, metaplazie, dysplazie) · Regresivní a metabolické změny ve tkáních (nekróza, apoptóza, atrofie, dystrofie, pigmentace) · Nespecifické záněty (definice, projevy, formy, záněty alterativní, exudativní, proliferativní) · Prekancerózy děložního hrdla · Hormonální poruchy (štítné žlázy, příštítných tělísek, nadledvin, Langerhansových ostrůvků) · Gastritidy, nefritidy · Cytodiagnostika Laboratorní instrumentální a analytická technika · Barvení pojivové tkáně · Histologická barviva a principy barvení · Imunohistochemie – metody průkazu · Metody molekulární patologie · Průkaz mikroorganismů · Rychlé zhotovování histologických preparátů · Využití a typy mikroskopů · Znázornění amyloidu · Zpracování tkání – preanalytická + analytická část · Zpracování tvrdých tkání