Automatické imunochemické analyzátory •Automatizace koncem 80. let •Uplatnění pro analyty s nízkou koncentrací (nmol/l, pmol/l) •Využití reakce antigen – protilátka •Značená protilátka (případně antigen) •Většinou heterogenní imunoanalýza (pevný povrch – paramagnetické částice, kulička) •Doba analýzy 15 – 60 min •Detekce s vysokou citlivostí (chemiluminiscence, elektrochemiluminiscence, fluorescence..) • • • • Automatické imunochemické analyzátory •Základní postup: • smíchání komponent • inkubace – vznik kompexu antigen - protilátka • separace (v případě heterogenní imunoanalýzy, • časté využití magnetu) • reakce značenky komplexu antigen – protilátka • s chemickou látkou startující reakci • s detekovatelným efektem • detekce (př. chemiluminiscence) Automatické imunochemické analyzátory • •Jsou opatřeny čtečkou čárového kódu, umožňují tak jednoznačnou identifikace pacienta • •Zpracovávají vzorky v primární zkumavce , práce po pacientech - Random Access • •Požadavky pro jednotlivé analýzy jsou přijímány z laboratorního informačního systému (LIS) • •Jedná se o uzavřené systémy – pouze pro reagencie výrobce přístroje • Automatické imunochemické analyzátory • •Kazetový systém reagencií - ready to use • •Detekce sraženiny patří ke standardní výbavě • •Cena imunochemických vyšetření poměrně vysoká - řádově mezi 50 – 200 Kč • •Principy jednotlivých firem se liší typem značenky, separace a detekce • Advia Centaur (Siemens - Bayer) centaur • •Pracuje s diagnostickými soupravami firmy BAYER Diagnostics • •Pracuje po pacientech při využití principu „RANDOM ACCESS „ • •Stroj se nemusí zastavovat pro doplnění reagencií a vzorků • Advia Centaur (Siemens) • ADVIA Centaur je plně automatizovaný chemiluminiscenční analyzátor • • Výkon: 240 stanovení za hodinu, první výsledek je po 15 minutách, dále každých 15 sekund • • Princip měření: Systém měří kvantitativní množství světla emitovaného během chemiluminiscenční reakce, pevná fáze jsou paramagnetické částice (Fe2O3), magnetická separace, značkovač je AE (acridinium ester), což je chemiluminiscenční látka, která emituje světlo při oxidaci H2O2v alkalickém prostředí. Reakce probíhá během jedné sekundy a je velice citlivá ( 10-15 ). • • • Advia Centaur (Siemens) •Reagencie: Kazetový chlazený zásobník s 30 pozicemi - jsou neustále promíchávány. Automatická kontrola hladiny reagencie • •Vzorky: Lineární podavač s kontinuálním přístupem totéž pro kontroly, standardy • •Kyvety: akrylové, na jedno použití • •Kalibrace: Kalibrační křivka se vkládá do analyzátoru pomocí čtečky čárového kódu načtením. Master křivky z příslušného setu. Advia Centaur (Siemens) •Optimální produktivita a výkonnost • •Doplnění reagencií, špiček, destilované vody, kyvet, vylítí odpadu, odstranění použitých špiček či kyvet za chodu •Analyzátor je 24 hodin připraven k práci • Attelica, Siemens • \\fnbrno.cz\tree\home\27232\My Pictures\Atellica ic.png Atellica, Siemens • •Integrovaný systém pro imuno i klinickou chemii – nová řada Siemens, jméno Atellica pro všechny analyzátory (hematologie, močová analýza) • •Mohou být spojeny až 3 Atellica IM analyzátory • •Atellica IM 1300 analyzátor : až 220 testů/ hod. • Atellica IM 1600 analyzátor: až 440 testů/ hod. • •Posun vzorků (Sample Handler) pomocí patentované Atellica Magline™ - posun vzorků na magnetickém polštáři • •Při pipetování se vytvoří vnitřní alikvot s objemem dle požadovaných testů a vzorek hned pokračuje dál k další analýze. • • Atellica, Siemens • •Kontroly a kalibrátory jsou chlazené na palubě, automaticky prováděné dle nastavení a mohou je využívat všechny spojené analyzátory • •Třídící plocha • •Připravuje se: odzátkovač • Cobas e411 (Roche) • •Systém je založen na technologii Elektrochemiluminiscence (ECL), dosahující mimořádné citlivosti, širokého měřícího rozsahu a rychlosti stanovení • •Jedná se o benchtop analyzátor s kapacitou 86 testů za hodinu • •Operační systém je založen na vkládání dat prostřednictvím unikátního dvourozměrného čárového kódu E2010 Cobas e411 (Roche) •přístroj je vybaven funkcí detekce hladiny, ale i detekce případné sraženiny či pěny • •promíchávání magnetických mikročástic • •jednorázové špičky - minimalizují kontaminace • •18 pozic pro reagenční soupravy, předzpracující reagencie a diluenty - maximálně 15 různých metod Cobas e411 (Roche) • •Inkubační jednotka 37 ·C ± 0,5 ·C • • Zde probíhá vlastní imunochemická reakce mezi vzorkem a reagenciemi • •Délka inkubace – 9 , 18 nebo 27 minut • •Po ukončení reakce je reagenční cup přemístěn na pozici pro dávkování reakční směsi do měřící cely. Cobas e411 (Roche) •Měřící jednotka • •Je klíčovou jednotkou analyzátoru ElecsysÒ 2010 • •Obsahuje fotonásobič, průtokovou měřící celu, magnetickou jednotku a zesilující obvod • •Teplota je udržována na hodnotě 28 ·C ± 0,5 ·C. • • Cobas e411 (Roche) •Elektrochemiluminiscence - proces při kterém vysocereaktivní látky reagují na povrchu elektrody a produkují světlo • •Protilátka (příp. antigen) je označena rutenium(II) tris-bipyridylovým komplexem • •K elektrochemiluminiscenci dochází po vložení napětí na elektrodu a reakci s tripropylaminem (TPA) • •Imunochemické moduly Roche – e601 (cobas 6000), e602 s výkonem 170 testů/hod. nebo e801(cobas 8000) – princip stejný • Modul e801, Roche • •• Imunochemický modul série • cobas 8000 • •• 48 pozic pro reagencie • •• Výkon až 300 testů/hod. • •• Doplňování reagencií za • provozu • • • Architekt i 2000 SR, Abbott sejmout0016 ARCHITECT i2000/i2000SR •Systémy ARCHITECT i2000SR/i2000 - plně automatizované systémy poskytující vysoký stupeň flexibility •25 metod, chlazený karusel •Velikost reagenčních souprav 100 a 500 testů •Automatické opakované testování, ředění a reflexe •Detekce kapalin, detekce sraženin •Použití čárových kódů •Možnost integrace s biochemickým analyzátorem ARCHITECT c8000 •Výkon systému je až 200 testů za 1 hodinu (400 pro i4000, 600 pro i6000 a 800 pro i8000) • • Architekt i 2000 SR, Abbott – detail distribučního systému sejmout0014 Architekt i 2000 SR, Abbott - detekce •Technologie ChemiFlex CMIA (chemiluminiscenční imunoanalýza na paramagnetických mikročásticích) •- značení patentovaným akridiniem •- měření vyzařovaných chemiluminiscenčních emisí v reakční nádobce • •Stručný postup: • 1. Změření pozadí po přídavku peroxidu vodíku • 2. Přidání NaOH do reakční nádobky • 3. Zachycení emitovaného světla a jeho odvedení světlovodem do fotonásobiče (PMT) • [USEMAP] Aliniti, Abbott •Integrovaný systém pro imuno (Aliniti i) i klinickou chemii (Aliniti c) • •Novinka firmy, dostává se na trh •Až čtyři moduly v jedné sestavě •Zabírá malou plochu \\fnbrno.cz\tree\home\27232\My Pictures\alinity-i-instrument-image-450x240.png \\fnbrno.cz\tree\home\27232\My Pictures\Abbott-Alinity-ci-crop640.jpg Axsym (Abbott) •Velmi rozšířený analyzátor •80-120 testů/ hod •Měřící principy – MEIA, FPIA, REA a ICIA •Robustnost, •Dotyková obrazovka •Doba analýzy 15 - 20 min •Technologie zabraňující tvorbě pěny image: AxSYM / AxSYM Plus 5.0 Axsym - procesní centrum Axsym (Abbott) •MEIA (Microparticle Enzyme Immunoassay) •- Enzymová analýza na mikročásticích • •Vzorek se smíchá s reagenciemi, pak se inkubuje •Separace na skleněných vláknech matrice •Přídavek konjugátu s alkalickou fosfatázou •Přídavek substrátu – 4-methylumbelliferylfosfát (MUP) •Hydrolýza MUP s ALP •Fluorescence methylumnelliferonu • Axsym - reakční nádobka Axsym (Abbott) •FPIA – Fluorizační polarizace • •Polarizační fluorescenční záření emitováno z indikátoru, kterým je značený analyt •Hodnota polarizace emitované fluorescence je úměrná rychlosti rotace molekuly •Rotace je úměrná velikosti molekuly – malé analyty rotují rychleji než komplexy •Měří se změna v polarizaci emitované fluorescence po vytvoření komplexu analyt-protilátka Unicel Dxl 800 (Beckman Coulter) • •kompaktní plně automatický uzavřený systém umožňující provádění imunoanalytických stanovení •založen na použití alkalické fosfatázy jako markeru •paramagnetických mikročástic jako nosiče protilátek resp. antigenů •luminiscenční detekci využívající přeměny dioxetanfosfátu na dioxetan DXI800 Unicel Dxl 800 (Beckman Coulter) •Výkon: Až 400 testů /hodinu Rychlé uvolnění vzorku ze systému - systém si vytváří vlastní interní alikvot. •Jednoduchá obsluha: Minimální „kontakt“ obsluhy s řídícím softwarem. •Nepřetržitý provoz Doplňování reagencií a spotřebního materiálu za plného provozu (bez nutnosti pauzy). Minimální údržba (5min.denně) Unicel Dxl 800 (Beckman Coulter) • • •Kontrola integrity vzorků – detekce sraženiny a bublin • •Až 50 metod na palubě •Kompatibilita s biochemickými analyzátory a s preanalytickou automatizací – Power Processor® •Široká nabídka testů Immulite 2000 (Siemens - DPC) • Účinnost: •Výkon 200 testů •Random Access •24 chlazených reagencií •Automatické opakování "out of range" vzorků • • Maximální integrace: •Primární zkumavky •LIS interface • • Immulite 2000 (Siemens) • •Detekce sraženin • •Enzymově zesílená chemiluminiscence • •Stanovení 3. generace • •Dotyková obrazovka • •Dlouhá doba inkubace – 35 nebo 70 minut • • Immulite 2000 (Siemens) • •Princip měření: • •Ke konjugátu vázanému na reakční kuličce a značenému alkalickou fosfatázou je přidán luminogenní substrát (adamantyl dioxetan fosfát) • •Dojde k odštěpení fosfátu a ze substrátu vzniká nestabilní anion, při jehož rozkladu dojde k emisi fotonů (chemiluminiscenční reakce) • Immulite 2000 - Chemická reakce substrátu LIAISON® XL, DiaSorin •Více než 100 metod •Chemiluminiscenční detekce •Separace na paramagnetických mikročásticích •Až 180 testů/hod •V poslední době rozšířený Kryptor (Brahms) •Využívá pouze homogenní imunoanalýzu •Odpadají promývací a separační kroky • •Princip měření: •Neradioaktivní přenos energie z donoru (kryptátová struktura s iontem europia v centru) na akceptor (chem. modif. protein) •Měření signálu emitovaného z imunokomplexu s časovým zpožděním •Měřený vzorek je ozářen dusíkovým laserem, následně donor (kryptát) emituje fluorescenční signál, po něm emituje signál akceptor Dimension Vista 1500 Intelligent Lab Systém - Siemens •Integrovaný systém - (klin. chem., ISE, imuno) •Technologie LOCI - založena na přenosu kyslíku • •První homogenní imunoanalýza s chemiluminiscenční detekcí – novinka • •Vysoká citlivost • /siemens/en_GLOBAL/gg_diag_FBAs/images/product_images/Dimension_Vista/DimensionVista1500_wBarcode_v 2_ca6.jpg /siemens/en_GLOBAL/gg_diag_FBAs/images/product_images/Drug_Testing_Diagnostics/Viva_E_Drug_Testing_ System_ca6.jpg VIVA-E (Siemens) systém na testování drog VIVA – E (Siemens) •Princip: •Technika Emit® II - homogenní enzymatická imunoanalytická technika - 10 min. test, 65 testů/hod •Slouží k analýze v moči a séru •Test založen na kompetici mezi látkou ve vzorku a látkou značenou enzymem glukoso-6-fosfát dehydrogenázou (G6PDH) o vazebná místa na protilátce •Aktivita enzymu klesá při vazbě na protilátku, proto lze koncentraci látky ve vzorku měřit podle změny aktivity enzymu •Aktivní enzym mění nikotinamidadenindinukleotid (NAD) na NADH --} změna absorbance (spektrofotometricky) •Endogenní sérová G6PDH neinterferuje, koenzym NAD působí pouze s bakteriálním enzymem (Leuconostoc mesenteroides) použitým v testu •Metoda je semikvantitativní – skupinový test Nabídka drog prováděných na přístroji VIVA-E •Syva® Emit® DAT Assays • Amphetamines 6 Acetyl Morphine* Barbiturate Benzodiazepine Cocaine Metabolite Cannabinoid Ecstasy Ethyl Alcohol LSD Methadone Methaqualone Opiate Phencyclidine Propoxyphene Elisys Quattro - HUMAN •Plně automatický ELISA analyzátor středního výkonu Elisys Quattro (HUMAN) Více než 40 ELISA testů Až 7 desek naráz 4 nezávislé inkubátory Čtečka čárového kódu zkumavek Automatická kontrola množství reagencií Noveos, Hycor \\fnbrno.cz\tree\Home\27232\My Pictures\Noveos.jpg Nový přístroj na alergeny •140 alergenů v systému současně •Balení každého alergenu po 75 testech •Princip ELISA