Cytochemická vyšetření
Bourková L., OKH, FN Brno
substrát
↓
inkubační roztok
+
enzym
↓
buňka

obarvené precipitáty
↓
v místech přítomnosti enzymu
v buňce (v granulích)
Cytochemická reakce
hodnocení:
intenzita zbarvení granulí (precipitátu)
je úměrná množství enzymu
Myeloperoxidáza
• Princip:
Peroxidáza přenáší vodík z vhodného donoru na peroxid.
Donor je oxidován a přeměněn na nerozpustnou
sraženinu.
• Hodnocení:
– v azurofilní granulaci leukocytů
– intenzita pozitivity: 0 až +++
– také se sleduje přítomnost Auerových tyčí (nemusí být při
panoptickém barvení viditelné přes jádro).
– fyziologická pozitivita:
myeloidní buňky 0 / +++
monocyty 0 / +
lymfocyty 0
• Klinický význam:
Rozlišení myeloblastické nebo monoblastické leukemie od
lymfoblastické leukemie
Lymfoblasty - negativní
Auerovy tyče
AML
Nespecifické esterázy
• Princip:
Buněčná esteráza reaguje se substrátem (např. alfa-naftyl-acetát
nebo alfa-naftyl-butyrát ) a nebo je reakce blokovaná NaF.
• Hodnocení:
– pozitivita v granulích v cytoplazmě leukocytů
– intenzita pozitivity: 0 až +++
– fyziologická pozitivita:
monocyty + až +++
myeloidní buňky, lymfocyty 0 až ++
– pozitivita po NaF:
monocyty zeslabení na 0 nebo +.
ostatních buňky: pozitivita stejná nebo snížená maximálně o (+)
• Klinický význam:
– k rozlišení AML M4 a AML M5
– ↑ NE + ↓ NE/NaF → monocytární buňky
– NE + NE/NaF – srovnatelná → myeloidní, lymfoidní buňky
Mono: ++/+++
Granulo: +
NE+NaF: 0
PAS
• Princip:
Průkaz sacharidů
• Hodnocení:
– intenzita: 0 až +++
– vzhled (typ) pozitivity:
• fyziologická pozitivita:
myeloidní buňky: difúzní zbarvení cytoplazmy
monocyty: jemně granulární pozitivita
lymfocyty: negativní, ojediněle výraznější granula
trombocyty a megakaryocyty: výrazně pozitivní
NRBC : negativní
• patologická pozitivita.
lymfocyty - CLL: ve většině lymfocytů výrazná zrnitá
pozitivita
blasty - ALL, nedif. leukémie: hrubozrná pozitivita
NRBC - patologické: hrubozrná – kapkovitá pozitivita
• Klinický význam:
leukémie, MDS, anémie
AML - M6
pozitivita: difúzní, granulární
ALL
Typy pozitivity PAS
Poznámky
Cytochemická vyšetření hodnotit v souvislosti s:
• ostatním cytochemickým vyšetřením
• morfologickým hodnocením a rozpočtem kostní
dřěně
• stádiem vyzrávání buněk
Cytochemické reakce
MPOX NE NE+NaF PAS
myeloid. b. -/+++ -/+ -/+ -/+
monocyt. b. -/+ +/+++ -/+ -/+
erytrocyt. b. - - - -/+
lymfoc. b. - -/+ -/+ -/+
MGK b. - + + +
Podpořeno MZ ČR – RVO (FNBr, 65269705)