MIKROBI A MAKROORGANISMUS, ZÁKLADY KLINICKÉ MIKROBIOLOGIE Logo Markéta Hanslianová Masarykova univerzita, Katedra laboratorních metod [USEMAP] Mikroorganismy jsou všude kolem nás a v nás [USEMAP] Organizační diagram symbióza komenzalismus mutualismus parazitismus [USEMAP] •Pouze určitá část mikroorganismů je schopna vyvolat onemocnění makroorganismu= mikroby patogenní [USEMAP] •Girolamo Fracastoro (1478-1553) - nemoc je způsobená neviditelnými zárodky, 3 cesty přenosu 1)Přímý kontakt 2)Kontakt s kontaminovanými předměty 3)Přenos vzduchem [USEMAP] •Ignác Semmelweis (1818-1865) • •Horečka omladnic •Přenos infekce kontaminovanýma rukama •Zásady antisepse [USEMAP] •Robert Koch (1843-1910)- německý lékař a mikrobiolog •Kochovy postuláty- lze stanovit, zda je mikrob původcem onemocnění: 1)Mikrob musí být vždy nalezen při onemocnění 2)Mikrob by měl být z hostitele izolován a kultivován in vitro v čisté kultuře 3)Takto vypěstovaným mikrobem je možno vyvolat onemocnění na jiném vnímavém hostiteli • [USEMAP] •PATOGENITA= schopnost vyvolat onemocnění •VIRULENCE= stupeň patogenity • •Patogenita je vlastnost mezi mikroorganismy poměrně vzácná! [USEMAP] 1.Mikroby nepatogenní 2. 2.Mikroby patogenní ¡ ¡ ¡ ¡Primární (obligátní) patogeny ¡ ¡Oportunní (fakultativní) patogeny ¡ ¡ o [USEMAP] Primární (obligátní ) patogeny Oportunní (fakultativní) patogeny •Vyvolávají onemocnění u předtím zdravých osob s nepostiženou imunitou •Corynebacterium diphtheriae, Salmonella typhi, Neisseria gonorrhoeae, Yersinia pestis, Streptococcus pyogenes…. •Vyvolávají onemocnění za určitých podmínek, většinou u jedinců se sníženou obranyschopností •Pocházejí většinou z endogenní mikroflóry nebo okolního prostředí •E.coli, enterokoky, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa… • [USEMAP] Nepatogenní mikroby •Existují nepatogenní mikroorganismy v současné době? [USEMAP] Vennův diagram Složky patogenity Kontagiozita= přenosnost Toxicita Invazivita [USEMAP] 1)Kontagiozita= přenosnost •Úspěch přenosu mikroba závisí na: • •počtu mikrobů vylučovaných z organismu •rezistenci vůči vlivům zevního prostředí •počtu mikrobů nutných k infekci nového hostitele [USEMAP] 2) Invazivita üAdherence- schopnost přilnout na povrchy – bakteriální adhesiny (fimbrie a nefimbriální adhesiny- biofilm) üSchopnost průniku do vnitřního prostředí- enzymy (Cl.perfringens, pyogenní streptokoky), aktivní průnik u některých parazitů [USEMAP] 2) Invazivita üSchopnost množit se ve tkáních hostitele üSchopnost šířit se organismem (krví, lymfou, podél nervů, per continuitatem) üSchopnost překonávat obranné mechanismy hostitele: • tvorba pouzdra- zábrana fagocytózy • zábrana aktivace komplementu (S.aureus- protein • A) iii. • [USEMAP] 3) Toxicita= schopnost poškozovat hostitele •Mikrobiální toxiny •Endotoxiny üsoučást buněčné stěny, do okolí se uvolňuje po • rozpadu baktérie •Exotoxiny – secernovány do prostředí üPrůnikové faktory- rozrušující mezibuněčnou hmotu (hyaluronidasa, streptokinasa) üCytolysiny- lýza buňky (lecithinasa, streptolysin, listeriolysin) ü [USEMAP] üToxiny brzdící syntézu bílkovin (záškrtový toxin, shiga toxin) üFarmakologicky účinné toxiny (cholerový toxin, pertussový toxin) üNeurotoxiny (tetanický toxin, botulotoxin) üSupeantigeny stafylokoků a streptokoků [USEMAP] Vennův diagram Složky patogenity Kontagiozita= přenosnost Toxicita Invazivita [USEMAP] Makroorganismus •Vnímavost vůči mikrobiálním druhům •Stav imunity jedince (nespecifická i specifická) •Celková zdatnost (věk, výživa, stres..) •Genetické faktory •Rasové a geografické faktory [USEMAP] Patogenní mikroorganismus Vnímavý makroorganismus !!! Infekce [USEMAP] Fáze infekčního onemocnění 1)Inkubační doba- od okamžiku vniknutí mikroorganismu do hostitele do prvních příznaků nemoci 2)Prodromální příznaky- nespecifické symptomy poruchy zdraví 3)Typický syndrom dané choroby 4)Rekonvalescence [USEMAP] Formy infekce §Podle vyjádřených příznaků èInfekce inaparentní= bezpříznaková- při dobré obranyschopnosti organismu èInfekce manifestní= s projevy nemoci- typicky probíhající, abortivní a subklinická forma infekce [USEMAP] §Podle rozšíření v organismu èInfekce lokální= pouze místo vstupu+ regionální uzliny (infekce fokální) èInfekce systémové= postižení celého orgánového systému èInfekce generalizované= celkové [USEMAP] §Podle průběhu èInfekce akutní= trvající dny až týdny (infekce fulminantní) èInfekce subakutní= trvající měsíce èInfekce chronické= trvající měsíce až roky • • • • manifestní bezpříznakové • (perzistentní, latentní) [USEMAP] èInfekce primární èInfekce sekundární è èInfekce komunitní èInfekce nozokomiální (infekce iatrogenní) è èInfekce exogenní èInfekce endogenní [USEMAP] Výsledek infekce I •Úplné uzdravení [USEMAP] Výsledek infekce II •Uzdravení s následky, perzistentní infekce [USEMAP] Výsledek infekce III •Úmrtí (exitus letalis) [USEMAP] Základy klinické mikrobiologie •Mirkobiologie= věda studující mikroorganismy (micron= malý, biologia= studium života) •Klinická mikrobiologie- poskytuje servis vyšetření klinickým lékařům v úzké spolupráci s nimi!! •Konzultace mikrobiologického nálezu •Konzultace antibiotické terapie •Vzájemná komunikace!! [USEMAP] Cesta biologického materiálu laboratoří 1)Transport a příjem materiálu 2)Zpracování biologického materiálu (mikroskopický preparát, kultivační půdy základní a selektivní) C:\Users\41720\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\F8021M09\IMG_8809.jpg [USEMAP] 54 NEISSER-GO [USEMAP] Cesta biologického materiálu laboratoří 3)Kultivace- půdy (základní, selektivní), teplota, atmosféra 4)Vyhodnocení nárůstu mikrobů na agarové plotně • [USEMAP] •Nález primárního patogena- většinou jednoznačná situace • •Nález oportunního patogena- nutné informace o pacientovi a komunikace s klinikem •častější situace • • [USEMAP] Běžná mikroflóra x patogen •Dutina ústní- nepatogenní viridující streptokoky, beta haemolytické streptokoky, neisserie, • haemofily vč. • H.influenzae, S.aureus, • četné anaeroby •(bakteroidy, aktinomycety, treponemy,peptokoky..) • •Streptococcus pyogenes, příp. jiné beta haemolytické streptokoky,Arcanobacterium haemolyticum, •pneumokoky, gonokoky, meningokoky vzácně, etiologická úlohy H.influenzae a S.aureus sporná!! •Tonzilitidy u viróz- EB viry, adenoviry, coxsackieviry • [USEMAP] Cesta biologického materiálu laboratoří 5)Určení patogenního mikroorganismu (původce infekce) 6)Stanovení citlivosti k antibiotikům [USEMAP] Cesta biologického materiálu laboratoří Disková difúzní metoda •Sestavy antibiotik: zohlednění baktérie a lokalizace infekce •Od antibiotik úzkého spektra k širokospektrým antibiotikům [USEMAP] Cesta biologického materiálu laboratoří Stanovení minimální inhibiční koncentrace (MIC) MIC= nejnižší koncentrace antibiotika, která je schopna zastavit růst baktérie [USEMAP] Cesta biologického materiálu laboratoří • Automatické přístroje •Výhody- rychlost, jednoduché provedení, široká škála antibiotik •Nevýhody- není přesná hodnota MIC [USEMAP] Cesta biologického materiálu laboratoří •Vyhodnocení testů citlivosti, porovnání se standardy: European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing- EUCAST, Clinical and Laboratory Standards Institute- CLSI •Zařazení do kategorií C/I/R •Konečný výsledek • [USEMAP] Shrnutí •Interakce mezi mikroorganismem a makroorganismem •Infekce •Typy infekce a jejich průběh •Klinická mikrobiologie •Vyšetřování biologického materiálu [USEMAP] •Při vyšetřování v klinické mikrobiologii je nutné si uvědomit: A. A.Mikrob je živý organismus B. B.Za vším je nemocný člověk [USEMAP] Děkuji za pozornost marketka 3