Téma 3 Přehled klinicky nejvýznamnějších bakterií 3.0 Úvod Smyslem této a následující kapitoly je, abyste měli základní přehled systematického rozdělení bakterií (a virů), a abyste při probírání infekcí jednotlivých orgánových soustav měli alespoň základní představu o jejich zařazení a rozdělení. Základní znalosti budou vyžadovány i u zkoušky. 3.1 Nejdůležitější grampozitivní koky 3.1.1 Staphylococcus Grampozitivní koky uspořádané zpravidla do malých či větších shluků. B_09.jpg B_43.jpg B_08.jpg První dva obrázky ukazují mikroskopický vzhled stafylokoků – první je nátěr kmene (čisté kultury), druhý je obarvený vzorek, obsahující stafylokoky – jde o vzorek mléka od ženy se zánětem mléčné žlázy. Třetí obrázek ukazuje kolonie bakterie Staphylococcus aureus na krevním agaru. · Staphylococcus aureus („zlatý stafylokok“) – výrazný patogen, způsobuje hnisavé záněty kůže, ale i abscesy ve tkáních, případně i další infekce (například záněty plic) · koaguláza-negativní stafylokoky, které nacházíme na kůži za fyziologických okolností, ale mohou způsobovat i močové infekce a infekce krevního řečiště. Stafylokoky jsou typické pozitivitou tzv. katalázové reakce – viz první obrázek. Další obrázek ukazuje plasmakoagulázovou reakci (nahoře pozitivní, dole negativní), podle které vzniklo právě pojmenování „koagulázanegativní stafylokoky“. B_05.jpg B_10.jpg 3.1.2 Streptococcus Grampozitivní koky uspořádané zpravidla do řetízků, ale někdy (pneumokok) i do dvojic. Rozlišují se podle toho, zda na krevním agaru zcela rozkládají červené krvinky (hemolýza/beta-hemolýza), nebo „jen“ jejich červené krevní barvivo mění na zelené (viridace/alfa-hemolýza), případně na krevním agaru nedělají žádný efekt. B_11.jpg B_12.jpg B_13.jpg První obrázek ukazuje streptokoky s hemolýzou, druhý streptokoky s viridací, třetí srovnání hemolýzy a viridace. (Černá barva na třetím obrázku je barva pozadí fotografie – agar se vlivem účinku hemolytického streptokoka stal zcela průhledným, takže je vidět černé pozadí). Další rozdělení pak existuje v rámci jednotlivých skupin: · hemolytické (betahemolytické) streptokoky o S. pyogenes neboli „streptokok skupiny A“ – způsobuje angínu, spálu, spálovou angínu, flegmóny ve tkáních, záněty fascií – fasciitidy („masožravý streptokok“) o S. agalactiae neboli „streptokok skupiny B“ – způsobuje močové infekce, infekce pohlavních orgánů a také novorozence (od matky) B_15.jpg Obrázek ukazuje test na průkaz Streptococcus agalactiae – úplná hemolýza na styku kmene testovaného streptokoka (vodorovná čára) a určitého speciálního kmene zlatého stafylokoka (svislá čára). Je-li testovaný kmen S. agalactiae, vznikne v místě kontaktu obou kmenů zesílená hemolýza ve tvaru trojúhelníka o takzvané „non-A-non-B“ streptokoky – způsobují např. nespecifické záněty hrtanu · viridující (alfahemolytické) streptokoky o S. pneumoniae = pneumokok – způsobuje záněty středního ucha, dutin (sinusitidy), záněty plic, mozkových blan, ohrožení jsou lidé, kteří přišli o slezinu. B_14.jpg Obrázek ukazuje kmen pneumokoka. Kolonie mají hlenovitou konzistenci. To svědčí o tom, že daný kmen pneumokoka je opouzdřený. Pouzdro pomáhá pneumokokům lépe se bránit lidské imunitě. Neopouzdřené kmeny (které se poznají tak, že jejich kolonie nejsou hlenovité) jsou méně nebezpečné. o takzvané „ústní“ streptokoky – dnes se ještě dělí do velkého počtu podskupin. Všechny se mohou vyskytovat v ústní dutině, jejich úloha je tam ale sporná (kdy se podílejí například na zubním kazu, a kdy jsou neutrální či prospěšné). Více o této skupině je uvedeno v tématech 12 a 13. · málo významné streptokoky bez hemolýzy (gamahemolytické) 3.1.3 Enterococcus Enterokoky byly dříve považovány za pouhou skupinu streptokoků. Tvoří krátké řetízky. Nejvýznamnější druhy jsou Enterococcus faecalis a E. faecium – oba dva jsou normálním nálezem ve střevě, ale způsobují močové infekce, někdy i sepse a další nákazy Zajímavost: existuje „moravský“ enterokok E. moraviensis, objevený brněnskými badateli. 3.2 Nejdůležitější grampozitivní tyčinky 3.2.1 Listeria Nejdůležitější druh je Listeria monocytogenes, způsobuje většinou bezpříznakové nákazy, ale nebezpečná je pro těhotné ženy. Zdrojem jsou sýry, sýrové saláty apod. B_20.jpg Listeria monocytogenes (vlevo) a příbuzný druh Listeria ivanovii (vpravo, typická výraznější hemolýzou) na krevním agaru 3.2.2 Corynebacterium · Corynebacterium diphtheriae – původce záškrtu B_16.jpg Corynebacterium diphtheriae – nátěr z kmene, Gramovo barvení · kožní druhy korynebakterií – prakticky nepatogenní, vzácně ale způsobují sepse 3.2.3 Bacillus Tato grampozitivní tyčinka je sporulující, tj. tvoří spory. Významný je · Bacillus anthracis – původce anthraxu (uhláku), možný nástroj bioterorismu B_22.jpg B_02.jpg B_21.jpg První dva obrázky ukazují mikroskopický vzhled Bacillus anthracis, třetí ukazuje kolonii ve tvaru tzv. Caput medusae – hlavy Medúzy (mytické Medúze z hlavy vycházeli hadi) · Bacillus cereus – způsobuje enterotoxikózy hlavně z potravin z mouky · Ostatní bacily se v klinickém materiálu zpravidla najdou jako kontaminace z okolí 3.2.4 Nocardia Je to větvená tyčinka způsobující nokardiózu (podobné aktinomykóze, viz dále) B_17.jpg Řez takzvaným hrudním granulomem, obsahující větvená vlákna bakterie Nocardia asteroides. Vpravo kolonie Nocardia asteroides na krevním agaru po kultivaci 96 hodin. B_42.jpg 3.3 Nejdůležitější gramnegativní koky: 3.3.1 Neisseria · N. gonorrhoeae – „gonokok“ – původce kapavky B_53.jpg Akutní kapavka – nátěr barvený dle Grama a klinický nález B_54.jpg · N. meningitidis – „meningokok“ – i zdraví ho mohou mít v krku, ale způsobuje zápaly mozkových blan s velice rychlým průběhem, často končící smrtí po několika hodinách. Gonokok i meningokok jsou uspořádány ve dvojicích. · Takzvané „ústní“ neisserie – navzdory názvu jsou spíše než v ústní dutině normálně přítomny v krku (v hltanu). Patogenní působení (mimo tato místa) je vzácné. B_35.jpg Nátěr Neisseria sp. 3.3.2 Moraxella – podrody Branhamella a Moraxella · Moraxella (Branhamella) catarrhalis – infekce HCD (ale i bezpříznakově v krku) · Moraxella (Moraxella) lacunata a podobné – oční infekce 3.4 Nejdůležitější gramnegativní tyčinky 3.4.1 Enterobakterie Jde o bakterie, které mají vztah ke střevu člověka a jiných obratlovců. Patří mezi nejvýznamnější klinicky významné bakterie, zároveň jsou ale významné i pro jiné oblasti mikrobiologie než je ta klinická. B_23.jpg Escherichia coli v nátěru z tkáně – podobný vzhled mají i jiné bakterie z čeledi Enterobacteriaceae. Lze je rozdělit například podle patogenity (viz kapitola 1.4.2): · Obligátně patogenní enterobakterie (způsobující nemoci běžně) o Salmonella – antropopatogenní (lidské) typy způsobují tyfus a paratyfy (sepse) o Salmonella – zoopatogenní (zvířecí) způsobují průjmové nemoci – salmonelózy B_26.jpg Salmonely a protey jsou typické tím, že metabolisují sirné sloučeniny. Na některých půdách, obsahující železo, vidíme černý sulfid železnatý. První obrázek ukazuja bezbarvé kolonie s černým středem u Salmonella enterica serovar Dublin na půdě XLD. Druhý obrázek porovnává vzhled salmonely (vpravo), protea (vlevo) a síru nemetabolizující klebsiely (nahoře), rovněž na půdě XLD. B_03.jpg o Shigella – způsobuje jinou průjmovou nemoc, tzv. bacilární úplavici o Yersinia pestis – původce moru o Yersinia enterocolitica, Y. pseudotuberculosis – původci průjmových nemocí · Oportunně patogenní enterobakterie (za normálních okolností se vyskytují ve střevě zdravých osob, jako náhodný nález je nacházíme i v ústní dutině) o Escherichia coli – nejběžnější, přítomná ve střevě, ale patogen v močových cestách i jinde, některé serovary nebezpečné i ve střevě o Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Proteus, Providencia, Morganella, Serratia – podobná charakteristika jako E. coli, některé (Klebsiella, Serratia) často způsobují nozokomiální (nemocniční) infekce B_25.jpg Bakterie rodu Proteus se vyznačují plazivým růstem na krevím i některých jiných agarech. Bakterie byla naočkována doprostřed Petriho misky a odtud se ve vlnách plazí směrem k okraji. Bílé a červené tečky jsou kontaminující kolonie jiných enterobakterií · Nepatogenní enterobakterie existují, ale nemají význam pro člověka 3.4.2 Gramnegativní nefermentující tyčinky · Pseudomonas aeruginosa – způsobuje popáleninové infekce, nozokomiální infekce, zápaly plic u dětí s cystickou fibrózou, ale nález může být i kontaminace z prostředí B_27.jpg Kolonie Pseudomonas aeruginosa jsou typicky zeleně zbarvené, některé kmeny ale mohou být pigmentovány i hnědě či modře. Produkci modrého pigmentu lze povzbudit i použitím speciální kultivační půdy jako v případě na obrázku. Druhý obrázek ukazuje Kolonie Pseudomonas aeruginosa na krevním agaru – pigment není vidět. B_48.jpg · Acinetobacter, Burkholderia, Stenotrophomonas – podobná charakteristika jako u Pseudomonas aeruginosa Poznámka: Acinetobacter je spíš kokotyčinka až kok, ne tyčinka, ale z praktických důvodů bývá řazen sem. B_34.jpg Jednou z mnoha dalších bakterií této skupiny je Flavobacterium sp. Jeho název je odvozen od produkce žlutého pigmentu (zde na krevním agaru) 3.4.3 Ostatní gramnegativní tyčinky: · Haemophilus (H. influenzae, H. parainfluenzae) – přítomen v dýchacích cestách i u zdravých, může ale působit infekce dýchacích cest. Haemophilus influenzae serovar b způsobuje vzácně zánět příklopky hrtanové a může způsobovat záněty mozkových blan, hlavně u batolat; v poslední době toho všeho ubylo, díky očkování. Haemophilus parainfluenzae je velmi běžná bakterie v hrtanu i v ústní dutině. Považuje se za součást běžné mikroflóry, i když při přemnožení se snad i podílí na infekcích · Pasteurella – nachází se v psích tlamách a infikuje rány po pokousání psem B_30.jpg Drobné gramnegativní tyčinky Pasteurella multocida · Campylobacter – původce průjmových onemocnění (podobné jako salmonelóza, ale zdrojem je spíš kuřecí maso než vajíčka) · Helicobacter – podílí se na vzniku žaludečních vředů · Vibrio – nejvýznamnější je Vibrio cholerae, původce těžkého průjmu – cholery, dnes spíše mimo Evropu; další druhy vibrií a příbuzných aeromonád způsobují také průjmy, nebo také infekce ran např. při kuchání ryb B_28.jpg Vlevo kolonie Aeromonas hydrophila na krevním agaru, vpravo zahnuté tyčinky Vibrio metschnikovii v Gramově barvení B_29.jpg · Legionella – původce legionářské nemoci (dýchací infekce seniorů, z vody a klimatizace) · Bordetella – význam má především Bordetella pertussis a Bordetella parapertussis, původci dávivého kašle · Francisella – především Francisella tularensis, původce tularémie neboli zaječího moru 3.5 Nejdůležitější anaeroby: 3.5.1 Clostridium Jsou to grampozitivní sporulující tyčinky. Ve stádiu spory vydrží i v prostředí s kyslíkem. · C. tetani – původce tetanu (produkuje tetanické toxiny) · C. botulinum – původce botulismu (produkuje botulotoxin – „klobásový jed“) · C. difficile – jeho toxin způsobuje enterotoxikózu, především po léčbě širokospektrými (hlavně linkosamidovými) antibiotiky · C. perfringens a jiná tzv. „klostridia plynatých snětí – působí plynatou sněť a enterotoxikózy. AN_01.jpg Vlevo Gramem barvený preparát ze sliznice tenkého střeva pacienta, který zemřel účinkem toxinu Clostridium perfringens. Velké grampozitivní tyčinky jsou právě tyto bakterie. Vlevo dole myš s obrnou svalů, způsobenou botulotoxinem, vpravo dole myš ve svalové křeči pod vlivem tetanického toxinu. AN_06.jpg AN_05.jpg 3.5.2 Actinomyces Jsou to grampozitivní dlouhé tyčinky až větvená vlákna – způsobuje aktinomykózu (pozor, neplést s houbovou infekcí – mykózou). Aktinomycety se běžně vyskytují v ústní dutině a podílejí se na patogenních procesech nejen zde (viz kapitoly 13 a 14), ale i v měkkých tkáních v okolí (tkáně krku) i jinde (například v oblasti hrudníku). Tradičně se aktinomycety považují za anaeroby, ale ve skutečnosti jsou mikroaerofilní. Ovšem nízká množství kyslíku v nedokonale anaerobním prostředí běžných anaerobních boxů mikrobiologických laboratoří jim vyhovují. AN_40.jpg AN_41.jpg Vlevo grampozitivní větvená vlákna Actimomyces bovis ve vzorku z tkáně, vpravo Actinomyces israelii, v obou případech barvení Gramem 3.5.3 Ostatní anaeroby Většinou působí ve směsi. Jejich názvy nejsou zvlášť důležité. Mohou to být grampozitivní tyčinky (Propionibacterium) či koky (Peptococcus), nebo také tyčinky (Bacteroides, Prevotella, Fusobacterium) či koky (Veillonella) gramnegativní. Anaerobní bakterie se běžně vyskytují v ústní dutině; nejdůležitější jsou zde rody Prevotella a Porphyromonas. Za zvláště významnou se považují bakterie Porphyromonas gingivalis a Tanerella forsythia, které jsou součástí takzvaného červeného komplexu (red komplex); tento komplex zahrnuje bakterie, které jsou pravděpodobně velmi rizikové z hlediska onemocnění závěsného aparátu zubů. AN_15.jpg AN_16.jpg Gramem barvené preparáty gramnegativních anaerobních tyčinek Fusobacterium sp. (vlevo) a Bacteroides sp. (vpravo). 3.6 Nejdůležitější spirochety: 3.6.1 Treponema Nejvýznamnější je druh T. pallidum – původce syfilis (pohlavně přenosná celková nemoc). Z hlediska orální mikrobiologie je velmi významným druhem Treponema denticola, která je třetím druhem z trojice, podílející se na „červeném komplexu“. 3.6.2 Borrelia Patří sem druh B. burgdorferi sensu lato, který se rozpadá na několik druhů „v užším slova smyslu“, u nás se vyskytuje hlavně B. afzelii a B. garinii. Všechny tyto druhy jsou původci lymeské boreliózy (klíšťaty přenášená infekce, projevující se v počátečních stádiích červenými skvrnami a postihující hlavně nervovou soustavu, případně klouby) 3.6.3 Leptospira Je to původce leptospirózy (infekce ran či dýchacích cest, zpravidla od potkanů a jiných hlodavců, člověk se nakazí přímým kontaktem nebo konzumací potřísněných potravin) B_38.jpg Erythema migrans – červená skvrna v místě přisátí klíštěte (vlevo); Leptospira interrogans ser. Icterohemorrhagiae v řezu ze psích jater B_36.jpg 3.7 Nejdůležitější z ostatních bakterií: 3.7.1 Mykobakteria Tyto bakterie mají atypickou buněčnou stěnu, obsahující vosky; špatně na ně proto působí všechno, co je rozpuštěno ve vodě (kyseliny, louhy, barviva, běžná antibiotika, mnohé desinfekční prostředky). Takovým bakteriím říkáme acidorezistentní. Částečně acidorezistentní jsou i aktinomycety a nokardie. · M. tuberculosis – původce tuberkulózy (TBC mohou vzácně způsobovat i jiné druhy) · M. leprae – původce lepry (nemoc, která stále ohrožuje obyvatelstvo tropů) · Atypická mykobakteria mohou způsobovat různé typy infekcí, především infekce ran například u akvaristů, plavců a podobně · Nepatogenní mykobakteria se nacházejí na různých místech těla (například M. smegmatis v předkožkovém vaku muže). Některá mykobakteria se podílí i na ústním biofilmu. T_02.jpg Vlevo preparát barvený Ziehl-Neelsenovým barvením. V prvním kroku se vše obarví karbolfuchsinem na červeno, ve druhém kroku ale etanol s kyselinou všechno zase odbarví, jedinou výjimkou jsou právě mykobakteria a jiné acidorezistentní tyčinky. Ve třetím kroku se vše dříve odbarvené (jádra bílých krvinek, ostatní bakterie apod.) obarví na modro nebo na zeleno (modří nebo zelení). Dole obrázky tuberkulosních plic a ledvin (u králíka) a sleziny (obrázek vpravo) T_04.jpg T_05.jpg 3.7.2 Mykoplasmata (a ureaplasmata) Tyto bakterie vůbec nemají buněčnou stěnu. Jejich diagnostika je obtížná, také léčbu je nutno přizpůsobit nepřítomnosti buněčné stěny · M. pneumoniae způsobuje atypické záněty plic · M. hominis a U. urealyticum jsou přítomny na pohlavních orgánech, jejich vztah k onemocnění je však nejistý, protože jsou často přítomny i u zdravých B_49.jpg U mykoplasmat jsou typické velmi drobné kolonie (nutné prohlížet lupou) vzhledu „sázeného vejce“ či volského oka. Vpravo rtg snímek s výrazným nálezem u pacienta s atypickou pneumonií. B_50.jpg 3.7.3 Rickettsie a chlamydie Potřebují k životu cizí buňku. To znamená, že i diagnostika je podobná diagnostice virů. · Chlamydophila pneumoniae – další původce atypického zápalu plic · Chlamydophila psittaci – způsobuje ptačí nebo papouščí nemoc · Chlamydia trachomatis – patogenita se liší podle serovarů. Některé způsobují tropickou slepotu (trachom), jiné tropickou pohlavní nemoc (lymphogranuloma venereum) a další pohlavní infekce ve vyspělých zemích · Rickettsia prowazeki je původcem skvrnitého tyfu · Rochalimea, Ehrlichia jsou příbuzné rickettsiím. Způsobují rozličné nemoci, často přenášené členovci. Totéž platí pro rody Bartonella a Coxiella,o kterých dnes již víme, že rickettsiím příbuzné nejsou (ale některými vlastnostmi se jim podobají) Téma 4 Přehled klinicky nejvýznamnějších virů, hub a parazitů 4.1 Nejdůležitější DNA viry 4.1.1 Poxviry · Virus pravých neštovic byl eradikován (vykořeněn) mimo jiné díky českým badatelům · Virus vakcinie se používal k očkování proti pravým neštovicím V_19.jpg Poxviry se pěstují na tzv. chorioalantoidní membráně oplodněného vejce, dělají tam bílé skvrny, tzv. poky. Zde vidíme poky u viru vakcinie · Virus molluscum contagiosum způsobuje průsvitné nebolestivé uzlíky (i v oblasti oka). 4.1.2 Herpesviry · Viry prostého a pásového oparu o Virus prostého oparu typ 1 (HSV 1) způsobuje především herpes labialis (opar rtu) o Virus prostého oparu typ 2 (HSV 2) způsobuje především herpes genitalis V_42.jpg Herpesvirové puchýřky o Virus pásového oparu a planých neštovic (VZV) způsobuje neštovice u dětí a pásové opary u dospělých · Ostatní herpesviry o EB virus způsobuje infekční mononukleózu a má vztah k některým nádorům o Cytomegalovirus je většinou bezpříznakový, ale mohou být neurčité příznaky o HHV6 a HHV7 – šestý i sedmý lidský herpesvirus způsobují tzv. šestou nemoc – roseola infantum neboli exanthema subitum (nemoc s vyrážkou) o HHV 8 se spolu s virem HIV podílí na vzniku Kaposiho sarkomu 4.1.3 Adenoviry Různé adenoviry způsobují různé infekce (dýchacích cest, močových cest, střevní nákazy). Velmi časté jsou adenovirové záněty spojivek, kombinované s „rýmou“. 4.1.4 Parvoviry Významný je parvovirus B19, původce páté dětské nemoci – megalerythema infectiosum. Dítě vypadá „jako by ho někdo zfackoval“ (oficiálně „syndrom zpolíčkovaného dítěte“). 4.1.5 Papovaviry · Papilomaviry způsobují bradavice na kůži a tzv. condylomata accuminata na pohlavních orgánech. Mají také vztah k rakovině děložního čípku. nyní se proti nim očkuje. Papilomavirové bradavice se mohou vyskytovat i v ústní dutině. V_46.jpg Condylomata accuminata · Polyomaviry způsobují některá vzácná onemocnění 4.1.6 Virus hepatitidy B Stejně jako viry ostatních hepatitid je popsán v kapitole 9.2 4.2 Nejdůležitější RNA viry 4.2.1 Pikornaviry Patří sem enteroviry, které na rozdíl od enterobakterií nemají tak těsný vztah ke střevu. Sice se přenášejí trávicími cestami, způsobovat však mohou infekce různého typu. Dále se dělí na: · Polioviry – viry dětské obrny, závažné neuroinfekce. Díky Salkově a Sabinově vakcíně se dnes v Evropě prakticky nevyskytují. · Coxsackieviry, echoviry a ostatní enteroviry – způsobují různé potíže, např. dýchací, nervové, někdy i horečky, krvácivé projevy apod. · Virus hepatitidy A už dnes přímo mezi enteroviry nepatří, ale je s nimi příbuzný. Rhinoviry jsou viry běžné rýmy. Ne každá rýma je ale způsobena právě těmito viry. V_60.jpg V_59.jpg Vlevo buněčná kultura, vpravo tatáž buněčná kultura s cytopatickým efektem rhinoviru 4.2.2 Rotaviry Jsou to nejdůležitější původci závažných průjmů u kojenců a malých dětí, ale i u seniorů. 4.2.3 Kaliciviry Nejvýznamnější jsou noroviry a sapoviry, v obou případech původci průjmů. Předpokládá se, že noroviry jsou zodpovědné za mnohé významné epidemie, zejména na velkých výletních lodích. Příbuzný kalicivirům (ale dnes už za kalicivirus přímo nepovažovaný) je virus hepatitidy E. 4.2.4 Togaviry Pro člověka je významný především virus zarděnek (dětská nemoc s vyrážkou, očkuje se). Kromě něj do této skupiny patři některé arboviry (= viry přenášené členovci). V posledních letech byly i do Evropy zavlečeny (z východní Afriky) viry způsobující horečky a neurologické příznaky s názvy chikungunya a o’nyongnyong. 4.2.5 Flaviviry · Virus středoevropské klíšťové encefalitidy – významná, klíšťaty přenášená nemoc, zánět mozku a mozkových blan. · Tropické flaviviry – Patří sem viry tropických nemocí – žluté zimnice a horečky dengue · Virus hepatitidy C 4.2.6 Koronaviry · Běžné respirační koronaviry se podílejí asi na čtvrtině případů infekční rýmy. · Virus SARS, objevený nedávno, způsobil epidemii těžké a smrtící respirační infekce v Asii 4.2.7 Paramyxoviry · Viry parachřipky způsobují takzvanou parachřipku, nemoc podobnou chřipce, ale lehčí a na rozdíl od ní postihující i horní dýchací cesty · Virus spalniček způsobuje spalničky, latinsky morbilli. Spalničky jsou ze všech dětských nemocí s vyrážkou nejzávažnější, děti mají vysokou teplotu a jsou plačtivé. Očkuje se. · Virus příušnic způsobuje dětské příušnice, nebezpečné u dospělých mužů (varlata) · Respirační synciciální virus (RS virus) napadá dolní cesty dýchací kojenců. V_61.jpg Paramyxovirový cytopatický efekt 4.2.8 Virus vztekliny Způsobuje závažné onemocnění. Když se rozvine, již není léčitelné, a pacient v bolestech umírá. 4.2.9 Filoviry a arenaviry Patří sem viry tzv. hemoragických horeček – vzácné, ale závažné. Mezi filoviry patří virus marburgské horečky a virus horečky Ebola. Mezi arenaviry zase původce horečky lassa. 4.2.10 Orthomyxoviry (viry pravé chřipky) Patří sem tři chřipkové viry: virus chřipky A, virus chřipky B a virus chřipky C. Chřipka je nemoc celého těla, ale především dolních cest dýchacích. Více v kapitole o dýchacích infekcích. 4.2.11 Retroviry Typická pro tuto čeleď je přítomnost reverzní transkriptázy, tedy enzymu, který přepisuje RNA do DNA. Patří sem zejména virus HIV, o kterém je řeč i ve třinácté a čtrnácté kapitole. 4.2.12 Viroidy Jde o nekompletní virové částice. K životu potřebují část jiného viru. Typickým viroidem je původce hepatitidy D: k životu potřebuje obal viru hepatitidy B. Více v kapitole o hepatitidách. 4.3 Původci mykóz, vyšetřovací metody v mykologii 4.3.1 Houby obecně Houby jsou eukaryotní organismy, tvoří samostatnou říši vedle říše živočišné a rostlinné. Z organel hub má význam buněčná stěna, tvořená chitinem a úplně jiná než buněčná stěna baktérií. Pro praxi hovoříme většinou o kvasinkách (spíše jednobuněčné, biochemicky hodně aktivní) a vláknitých houbách („plísních“). Není to ovšem přesné. M_01.jpg M_02.jpg Vláknitá houba Penicillium sp. – plíseň štětičková. Ze zástupců této plísně se získal penicilin, používají se také při výrobě plísňových sýrů. Vzácně jsou i patogenní, zejména Penicillium marneffei 4.3.1.1 Přenos hub Přenos hub může být různý, většinou se ovšem snadno přenášejí vzduchem ve formě spor a konidií. 4.3.1.2 Význam hub Houby způsobují: * mykózy (houbové záněty, ať už jsou způsobeny kvasinkami či vláknitými houbami) * mykotoxikózy (houbové otravy, v širším slova smyslu sem patří i otravy velkými houbami, např. muchomůrkami) * mykoalergózy (alergie na houby a jejich složky) * mycetismy (houba je přítomna v organismu, ale škodí jen mechanicky utlačováním okolních tkání). Mykózy dělíme většinou takto: Povrchové mykózy (kožní a slizniční – zejména rody Trichophyton, Epidermophyton) a podkožní mykózy (Sporothrix) Orgánové mykózy (Cryptococcus, Aspergillus, Mucor, Histoplasma, Coccidioides, Blastomyces, Paracoccidioides), M_12.jpg Cryprococcus neoformans má výrazné pouzdro. Při barvení tuší je pouzdro viditelné jako „prázdné místo“ mezi vlastním kryptokokem a pozadím (tuší) Kandidózy mají zvláštní postavení 4.3.1.3 Diagnostika mykotických onemocnění · Mikroskopie. Houby jsou asi desetkrát větší než baktérie, proto jsou dobře viditelné i v nativním preparátu. Houby (zejména kvasinky) se však také dají zpravidla dobře barvit i podle Grama. Barví se fialově, přestože jejich buněčná stěna nemá nic společného s buněčnou stěnou grampozitivních baktérií. · Kultivace. Základem je Sabouraudův agar. Většinou se nalévá jako šikmý agar do zkumavek, takže i při dlouhodobé kultivaci (vláknitých hub) půda nevyschne. · Biochemická identifikace využívá podobných typů testů jako při diagnostice baktérií · Nepřímý průkaz má význam u sytémových mykóz, např. aspergilózy. · Testování in vitro citlivosti na antimykotika připadá v úvahu u kvasinek, nikoli u vláknitých hub. Difusní diskový test se dělává, ale není spolehlivý. Spolehlivější je např. tzv. FUNGItest. 4.3.1.4 Léčba mykotických onemocnění Používají se antimykotika několika skupin: · Amfotericin B je vysoce účinné, ale zároveň také velmi jedovaté rezervní antimykotikum k léčbě velmi závažných infekcí. Menší toxicitu má zvláštní léková forma - amfotericin B v intralipidu. · Imidazolová antimykotika, jako je ketokonazol a mikonazol, jsou dobře snášená, ale méně účinná. Nehodí se k léčbě systémových a vůbec závažnějších mykóz. · Triazolová antimykotika, jako je itrakonazol (SPORANOX), flukonazol (DIFLUKAN) a novější vorikonazol (V-FEND) se hodí i pro léčbu závažných mykóz. U flukonazolu je problémem primární rezistence některých druhů kandid. · 5-fluorocytozin (flucytozin) je moderní rezervní antibiotikum, velmi drahé, hodí se pro léčbu v kombinacích. · Echinokandinová antimykotika, jako je caspofungin (CANCIDAS) a anidulafungin (ECALTA) jsou moderní antibiotika k léčbě invazivních infekcí. Zatím na ně nebývají rezistence. 4.3.2 Původci kožních mykóz jsou houbové organismy, způsobující onemocnění kůže, popřípadě sliznic. Zvlášť je probrán rod Candida – kandidy mohou vyvolat jak povrchové, tak hluboké mykózy. 4.3.2.1 Význam kožních mykóz Tyto houby mohou způsobovat onemocnění různých částí kůže. Používá se také pojmů dermatomykóza (dermatofytóza) pro onemocnění kůže, trichomykóza/fytóza pro onemocnění chlupů a onychomykóza pro onemocnění nehtů. Nejvýznamnější je tzv. skupina dermatofyt, tvořená třemi rody: Trichophyton, Epidermophyton a Microsporum. M_03.jpg Microsporum canis (nahoře vlevo), Microsporum gypseum (dole vlevo), Trichophyton mentagrophytes (dole vpravo). Vše barvení laktofenolem. Typické pro tyto houby jsou jejich člunkovité či doutníkovité makrokonidie (rozmnožovací útvary) M_04.jpg M_05.jpg 4.3.2.2 Diagnostika kožních mykóz Mikroskopie (obvykle v nativním preparátu). Dále se užívá kultivace na Sabouraudově agaru. 4.3.2.3 Léčba kožních mykóz K léčbě kožních mykóz se používají různá antimykotika ve formě mastí, emulzí a šamponů. 4.3.3 Rod Candida Kandidy jsou velmi běžnými kvasinkami. U člověka jsou běžné jednak jako původce onemocnění, ale ještě častěji jako bezpříznaková kolonizace (zejména střevo, ale i jinde). Člověk a Candida si na sebe v průběhu evoluce velice dobře "zvykli" – onemocnění vzniká při porušení rovnováhy. 4.3.3.1 Význam rodu Candida Nejvýznamnější je druh Candida albicans, důležité jsou ale i některé další – C. tropicalis, C. crusei, C. parapsilosis. U závažných onemocnění je druhové určení užitečné – některé druhy mají přirozenou rezistenci vůči některým antimykotikům. Všechny druhy bývají nalézány ve střevě, v ústech a krku, v močových cestách, na kůži, avšak u oslabených osob také ve tkáních (plíce, trávicí orgány aj.). S výjimkou nálezů ve tkáních nelze jednoznačně říci, kdy je Candida spíše patogenem a kdy kolonizací. Pomoci může mikroskopická charakteristika. Eliptické buňky jsou typické pro saprofytickou, neinvazivní formu, řetízky až vlákna pro invazivní. Velká většina kandidóz je endogenního původu, tj. že pacient je sám sobě zdrojem onemocnění (například žena si zanese kvasinky z řiti do pochvy, nebo vůbec nejde o přenos, jen o porušenou rovnováhu). V poslední době ale přibývá také nemocničních kandidóz, přenášených mezi pacienty navzájem. Kandidy jsou dosti odolné, zejména proti zásaditému pH. Milují cukry, a proto s oblibou osidlují pochvy diabetiček a mlsných žen, mimo to jsou častější u těhotných v závislosti na hormonálních změnách. 4.3.3.2 Diagnostika u rodu Candida Mikroskopicky v nativním nebo barveném (Gram) preparátu vidíme eliptické buňky, někdy pučící, nebo jejich řetízky až vlákna. Kultivace na krevním nebo Sabouraudově agaru (SA). Od kolonií Staphylococcus epidermidis nebo Corynebacterium sp. se odliší někdy kvasnicovou vůní, ale někdy teprve nátěrem. K rozlišení všech kandid lze použít biochemické vlastnosti. Průkaz antigenů a protilátek se provádí u těžkých forem a sepsí (precipitace, aglutinace) M_10.jpg Candida albicans – mikroskopie (Gramovo barvení) a kultivace na Sabouraudově agaru M_11.jpg 4.3.3.3 Léčba u rodu Candida U slizničních forem se užívá clotrimazol (Canesten) v různých lékových formách, u systémových forem pak klasická antimykotika, jako je nystatin, amfotericin B a imidazolová antimykotika (mikonazol, ketokonazol, novější flukonazol, itrakonazol a vorikonazol). 4.3.4 Původci systémových mykóz jsou houby, které zpravidla nepostihují člověka často a u zdravého člověka k infekci nedochází, nebo proběhne bez příznaků či mírně. Nákaza je častá u pacientů s postiženou imunitou včetně postižených AIDS. Mnozí původci se vyskytují běžně v prostředí (známe je jako "plísně" napadající potraviny), které ve výjimečných případech způsobují závažná onemocnění (Mucorales, Aspergilus) 4.3.4.1 Význam a rozdělení původců systémových mykóz Aspergillus (plíseň štětičková) je velmi běžný v prostředí. Může jednak produkovat jedy (aflatoxiny), jednak působí záněty plic, astma, nejrůznější dýchací i jiné komplikace. M_09.jpg Aspergillus fumigatus (kropidlák zakouřený) – mikroskopie (barvení laktofenolem) a kultivace na Sabouraudově agaru M_07.jpg Mucorales (zástupce Mucor = plíseň hlavičková) jsou pravé plísně (to se pozná podle toho, že jejich "podhoubí" není rozdělené přepážkami). Velmi rychle se šíří a mají afinitu k cévám. I v dnešní době končí naprostá většina onemocnění smrtí a diagnostika se provádí teprve na pitevně. M_22.jpg Mucor sp. – mikroskopie a výsledek kultivace Pneumocystis jiroveci. Dříve byl považován za parazita–prvoka. Přenáší se zřejmě i vzduchem. Častý je nález u imunokompromitovaných osob (včetně AIDS). 4.3.4.2 Přenos zpravidla vzduchem, zdrojem může být prach, zvířecí trus apod.; u aspergilů a Mucorales jsou spory všudypřítomné. 4.3.4.3 Diagnostika Vedle přímého mikroskopického a kultivačního průkazu se zpravidla provádí nepřímý (serologický) průkaz. 4.3.4.4 Léčba Antimykotika k celkové léčbě (viz Candida) 4.4 Paraziti a jejich vyšetřování Paraziti jsou mikrobiální patogeny živočišného původu. Někteří paraziti nesplňují definici mikroba (jsou pozorovatelní pouhým okem), ale z praktických důvodů se zařazují do mikrobiologie. Paraziti mohou způsobovat nemoci prakticky všech orgánových soustav. To je dáno mj. jejich různorodostí. Parazity je možno členit podle různých kritérií. Souhrnem nejběžnějších členění je následující schéma: * Paraziti vnitřní (působí jako patogeny uvnitř těla) * Prvoci (bičíkovci, výtrusovci, améby...) – např. toxoplasma * Červi ploší (ploštěnci) * Tasemnice (Cestoda) – např. tasemnice dlouhočlenná * Motolice (Trematoda) – např. motolice jaterní Červi oblí (oblovci) - Nematoda čili hlístice – např. škrkavka Paraziti vnější (hmyz a roztoči) – např. veš muňka Vnitřní parazity lze členit nejen systematicky, ale také podle orgánů, které napadají: * střevní paraziti – nejčastější (giardie/lamblie, entaméby, škrkavky, roupi, tasemnice apod.) * urogenitální paraziti – například trichomonády * krevní paraziti – například malarická plasmodia * tkáňoví paraziti – například toxoplasma 4.4.1 Diagnostika parazitárních onemocnění Nejčastěji mikroskopická (průkaz prvoků, vajíček červů), méně často kultivační (např. Trichomonas) či nepřímá (serologická – hlavně u tkáňových parazitóz, kupříkladu u toxoplasmózy). Bývají též zvýšené protilátky třídy IgE. Mikroskopie často zahrnuje nebarvené preparáty (objekty jsou dost velké), speciální barvení se používají u menších, převážně jednobuněčných parazitů (střevní améby, trichomonády). 4.4.2 Léčba parazitóz Bohužel, ne u všech parazitóz známe adekvátní léčbu. Až na výjimky se používají speciální léky, které neúčinkují na jiné mikroby (bakterie, plísně). 4.4.3 Prvoci Někteří způsobují velmi závažné choroby Giardia lamblia. Je to bičíkatý prvok. Šíří se fekálně orálně. Jde o průjmové onemocnění, celosvětově velmi časté. Ve vyspělých zemích je častost menší, ale o to horší bývají příznaky. Entamoeba histolytica. Jedná se o amébu – měňavku. Za určitých okolností napadá střevní sliznici a tudy se dostává do nejrůznějších orgánů těla. Vedle tohoto druhu existují i druhy nepatogenní, které je třeba odlišit. Trichomonas vaginalis. Je to bičíkovec stejně jako Giardia. Na rozdíl od giardií ale netvoří cysty. Postihuje pochvu, vulvu, děložní hrdlo, někdy močovou trubici. Typický je žlutozelený, sladce páchnoucí výtok a mikroskopický obraz. U mužů se často klinicky neprojevuje. Přenos zpravidla pohlavní, vzácně poševními sekrety či močí. Toxoplasma gondii. Tento parazit má dvě možnosti: buďto prodělá celý vývoj v kočce, nebo pro jeho část použije mezihostitele, přičemž nepohrdne člověkem. Bez kočky se ovšem neobejde. V přenosu hrávají roli i potraviny (zejména špatně tepelně opracované maso). Naprostá většina případů je bezpříznakových, ale mohou nastat komplikace oční, CNS aj. Nebezpečné je onemocnění těhotných. Malarická plasmodia. Jsou čtyři: jedno vyvolává tzv. tropickou malárii, dvě vyvolávají malárii třídenní a čtvrté čtyřdenní. Tropická je nejhorší. Přenáší se komárem Anopheles. Projevuje se bolestmi hlavy a svalů, nevolností, později mrazením, třesavkou, horečkou a pocením. Léčba. Na mnohé prvoky (včetně trichomonád) platí metronidazol (AVRAZOR) a podobné preparáty. U malárie se také doporučuje prevence. Ta spočívá jednak v ochraně před komáry (dlouhé nohavice aj.), jednak v užívání antimalarik preventivně. 4.4.4 Motolice jsou ploší „červi“ měřící několik mm až cm. Mají přísavky, někdy i trny. Schistosomy. Způsobují schistosomózy – dříve bilharziózy v subtropech a tropech.. Jaterní, plicní a střevní motolice. Člověk se nakazí od mezihostitele, což může být vodní rostlina, ryba, krab apod. Příznaky velmi různé (horečky, žloutenky, postižení CNS a různé jiné). – Diagnostika motolic: mikroskopická. Léčba: praziquantel. 4.4.5 Tasemnice Tasemnice dlouhočlenná – Taenia solium (2–3 m) a tasemnice bezbranná – Taenia saginata (3–10 m) jsou klasické tasemnice: dlouhočlenná prasečí, saginata hovězí. U svých hlavních hostitelů dělají ve tkáních boubele (cysticerky). Prasečí je může u dělat i u člověka, hovězí nikoli. Obě jinak žijí s mírnými příznaky ve střevě. Člověk se nakazí obvykle snězením boubele. Další tasemnice: Škulovec široký– rybí tasemnice, tasemnice dětská – Hymenolepis nana, měchožil zhoubný – Echinococcus granulosus. Diagnostika: mikroskopie, u měchožila serologie; léčba: speciální preparáty. 4.4.6 Hlístice Na rozdíl od „červů“ plochých (se kterými nejsou vůbec příbuzní) mají kruhový průřez. Nejsou článkovaní, mají oddělená pohlaví a mají ústa a střevo (na rozdíl od plochých červů, kteří přijímají potravu celým tělem). Roup dětský – Enterobius vermicularis. Jeden z nejčastějších parazitů i u nás. Samička klade vajíčka do řas v okolí řiti dítěte. Zde vajíčka rychle dozrávají. Jsou-li pozřena (dítě se škrábe a pak si cucá prsty – autoinfekce), dospívají pak ve střevě. Projevuje se hlavně neklidem a nespavostí. Komplikací mohou být dívčí poševní výtoky. Diagnostika Grahamovou metodou, kdy se lepicí páska nalepí na řiť (respektive na perianální řasy v jejím okolí) a pak na podložní sklíčko. V laboratoři se pak prohlíží sklíčko s lepící páskou, aniž by se jakkoli dále zpracovávalo. Při profylaxi nutná dekontaminace osobních věcí. Škrkavka dětská – Ascaris lumbricoides. Dlouhá 10 – 30 cm. Má složitý životní cyklus: člověk pozře vajíčko, larva se skrz stěnu střeva dostane do cév, jimi do plic, při kašlání pak do hltanu a odtud zpátky do střeva. Potíže mohou vznikat při migraci larev (kašel, bolesti hrudníku, krev ve sputu; event. postižení mozku, ledvin) či při pobytu ve střevě – možnost ucpání žlučovodů a vývodů pankreatu. Ve stolici se prokazují vajíčka. Háďátko střevní, měchovci, škrkavka psí a kočičí jsou další zástupci této skupiny. Někteří se vyskytují nejen ve střevě, ale i ve tkáních. Léčba nákaz vyvolaných oblovci. Na roupy se používá Pyrvinium, na ostatní mebendazol a jiné. 4.4.7 Ektoparaziti – členovci Členovci vlastně nepatří do mikrobiologie, protože jsou pozorovatelní pouhým okem nebo lupou. Z praktických důvodů jsou ale do učebnic zařazováni. Členovci mají význam 1) jako obtěžující 2) jako vyvolávající druhotně choroby (alergie, ekzémy, bakteriální infekce poškozené kůže, zhnisání rány pro přisátí), 3) jako přenašeči infekcí. Někteří členovci se projevují jako pasivní přenašeči infekce, aniž by byli parazity v pravém slova smyslu. Klíšťata – čeleď Ixodidae. Měří 5 až 10 mm. Larvy mají tři páry nohou, dospělci čtyři. I larvy a nymfy sají s oblibou krev. Vyskytují se zpravidla ve smíšených a listnatých lesích s křovinami. Zpravidla se nevyskytují na horách. Rezervoárovými zvířaty jsou drobní hlodavci. Odstranění klíštěte se dnes doporučuje provádět pinzetou se skosenými konci nebo opatrně nehty v gumových rukavicích. Vhodné je desinfikovat ránu jódovým preparátem. Následkem štípnutí může být drobné zarudnutí, které je třeba odlišit od (plošně mnohem většího) zarudnutí u lymeské boreliózy. Ta je klíšťaty přenášena stejně jako klíšťová encefalitida a klíšťová ehrlichióza. Vedle klíšťat existují také klíšťáci. Zákožka svrabová – Sarcoptes scabiei. Veliká 0,2 až 0,5 mm. Samičky si vyvrtávají chodbičky v kůži. Přenáší se mezilidským kontaktem (často v kolektivech – domovy důchodců, útulky pro bezdomovce apod.). Ekzém je prakticky nedílnou součástí choroby. Zákožky se s oblibou vyskytují na svraštělé kůži. Léčba: potíraní kůže Jacutinem. Vši – Anoplura. Veš dětská (hlavová) je běžná u dětí, které se snadno nakazí v kolektivu (školka, tábor). Veš šatní nežije na těle, ale v šatstvu. U nás se často vyskytuje v útulcích bezdomovců apod. Veš muňka (lidově filcka) se vyskytuje výhradně v pubickém ochlupení a její nákaza je vlastně pohlavně přenosnou chorobou. Vši vyvolávají pupence, otoky, muňka namodralé skvrnky. Některé vši přenášejí choroby. K léčbě a prevenci se t. č. používá Diffusil H Forte, Parasidose a Jacutin gel, ale může se vyvinout rezistence. P_01.jpg Veš Štěnice – Cimex lectularius. Je to vlastně ploštice. Ráda se ukrývá ve škvírách, za tapetami a obrazy podobně. Živí se výhradně krví. Dvoukřídlí – Diptera. Komáři, komárci, muchničky apod. působí jako přenašeči různých chorob, obvykle pasivní. Při prevenci je důležité zničení přirozených líhnišť (zejména u komárů). Některé mouchy kladou larvy do ran či tělních dutin (do ucha, do oka apod.). Tomu se říká myiáza Blechy – Siphonaptera. Blechy se významně uplatnily při morových epidemiích. Kromě typického lidského druhu Pulex irritans napadají někdy člověka i zvířecí druhy. 4.4.8 Kroužkovci Ke kroužkovcům patří např. žížaly. Parazitem je pijavka lékařská (Hirudo medicinalis), která se dříve používala k "pouštění žilou". Všechny obrázky v tomto materiálu pocházejí z archivu Mikrobiologického ústavu LF MU a FN u sv. Anny v Brně. Autorem většiny fotografií je prof. MVDr. Boris Skalka, DrSc., který vedle své hlavní profese veterinárního mikrobiologa na Fakultě veterinárního lékařství VFU Brno externě spolupracoval také s Mikrobiologickým ústavem LF MU a FN USA. Obrázky byly digitalizovány Mgr. Markem Stehlíkem. Digitalizace se uskutečnila v rámci projektu Evropského sociálního fondu – OP VK. logolink OP VK