Praktikum 2
14. 4. a 15. 4. 2020
2.1 Mikroskopování organismů původem ze senného
nálevu
• Senné nálevy jsou tři, jeden je z trouchnivého dřeva, jeden ze sena a jeden z mokřadu.
V lahvích jsou pipety pro nabírání (nanasávat, jen zacpat prstem a vytáhnout.
• Vzorek kultury kápnete na kousek vaty, rozprostřený na podložním sklíčku. Nebo
použijete jednu dílčí vrstvu buničité vaty. Přikryjete krycím sklíčkem.
• Pozorujete při zvětšení cca 200 – 400 × (tj. dole objektiv 20 – 40) v kapce na Petriho
misce.
• Popište, co jste pozorovali, případně zdokumentujte
2.2 Mikroskopování Saccharomyces cerevisiae
• Droždí / čerstvou kulturu Saccharomyces cerevisiae (Petriho miska) rozptýlíte na
podložním sklíčku v kapce fyziologického roztoku (střička) a přikryjete krycím. Není
nutné dávat vatu.
Pozorujete jako nálevníky, ale na sklíčku. Buňky jsou velikosti asi jako erytrocyt a
nemají aktivní pohyb.
2.3 Mikroskopování bakterií
• Barvení podle Gramma
• Kličku kultury dáte do kapky fyziologického roztoku na podložním sklíčku
• Necháte perfektně uschnout
• Zahřejete na teplotu cca 40 – 50 ◦
C (= fixujete)
• Přelijete Gramm I na 20 sekund všechny barvy sléváte do kádinky na stole
• Slijete, zalijete Gramm II (Lugolův roztok)
• Slijete, vymýváte Gramm III (alkohol nebo aceton)
• Přelijete na 30 – 60 sekund Gramm IV
• Opláchnete vodou
• Necháte zcela uschnout
• Pozorování
• Na preparát dáte imerzní olej (malé kapací lahvičky)
• Imerzním objektivem (= 100×, černý proužek, nebo dva) sjedete až na sklíčko
• Mikrošroubem zvedáte a kontrolujete, dokud se neobjeví ostrý obraz
• Pokud objektiv zvednete moc, opakujete předchozí dva body
• Kultury (digestoř)
Provedete s G+ bakterií Bacillus subtilis a G- bakterií Proteus sp. – pozor! tohle je
patogen!
Můžete udělat i stěr z ruky (třeba kolem nehtů) vypálenou kličkou, nebo z úst (směsná
mikroflóra + další objekty)