Katedra laboratorních metod Bakalářské studium – Laboratorní diagnostika ve zdravotnictví LF MU Klinická biochemie – cvičení Praktické cvičení datum:............................ jméno:.......................................................... Téma: Carryover (zavlečená chyba měření) - příklad stanovení Okruhy k nastudování a dotazy: 1) Přečtěte si protokol a zopakujte vzorec pro výpočet navážky z údajů v úkolu 1). 2) Připravte si vzorec potřebný při ředění roztoků (úkol 2). 3) Co je to carryover? 4) Bude-li na přístroji carryover přítomno – ve které skupině naměříme vyšší koncentraci – C nebo D? Přístroje a pomůcky: Automatický analyzátor cobas 8000 (Roche) Diagnostická souprava Gluk 3 (Roche) Standardní roztok glukózy Stojánky, zkumavky, mikropipety, dávkovače, špičky, odměrné baňky, Úkoly: 1) Vypočítejte navážku glukózy na přípravu 500 ml standardního roztoku glukózy s koncentrací glukózy 200 mmol/l. Mr (glukóza.H[2]O) = 198,18 Navážka glukózy je: ......................... g 5,00 mmol/l roztok N 22,00 mmol/l roztok V Objem standardního roztoku ................. ml Objem standardního roztoku ................. ml Objem destilované vody ................. ml Objem destilované vody ................. ml 2) Vypočítejte kolik ml standardního roztoku glukózy s koncentrací glukózy 200 mmol/l a kolik ml destilované vody je potřeba na přípravu dvou roztoků s koncentraci glukózy 5,00 mmol/l a 22,00 mmol/l (označené N a V), aby výsledný objem byl 100 ml a roztoky připravte. . 3) Připravte 61 vzorků glukózy do vzorkových nádobek (cup) - objem 250-300 µl, podle následující tabulky: Vzorek č. Vzorek glukózy Vzorek č. Vzorek glukózy Vzorek č. Vzorek glukózy Vzorek č. Vzorek glukózy Vzorek č. Vzorek glukózy 1 V 13 V 25 V 37 V 49 V 2 V 14 V 26 V 38 V 50 V 3 V 15 V 27 V 39 V 51 V 4 N 16 N 28 N 40 N 52 N 5 N 17 N 29 N 41 N 53 N 6 N 18 N 30 N 42 N 54 N 7 V 19 V 31 V 43 V 55 V 8 V 20 V 32 V 44 V 56 V 9 V 21 V 33 V 45 V 57 V 10 N 22 N 34 N 46 N 58 N 11 N 23 N 35 N 47 N 59 N 12 N 24 N 36 N 48 N 60 N 61 V 4) Vzorky vložte do analyzátoru a stanovte koncentraci glukózy v jednotlivých vzorcích na dvě desetinná místa. Výsledky zapište do tabulky: Vzorek č. Glukóza (mmol/l) Vzorek č. Glukóza (mmol/l) Vzorek č. Glukóza (mmol/l) Vzorek č. Glukóza (mmol/l) Vzorek č. Glukóza (mmol/l) 1 13 25 37 49 2 14 26 38 50 3 15 27 39 51 4 16 28 40 52 5 17 29 41 53 6 18 30 42 54 7 19 31 43 55 8 20 32 44 56 9 21 33 45 57 10 22 34 46 58 11 23 35 47 59 12 24 36 48 60 5) Výsledky nyní uspořádejte do čtyř skupin označených A - B - C - D A B C D Vzorek č. Glukóza (mmol/l) Vzorek č. Glukóza (mmol/l) Vzorek č. Glukóza (mmol/l) Vzorek č. Glukóza (mmol/l) 3 7 6 4 9 13 12 10 15 19 18 16 21 25 24 22 27 31 30 28 33 37 36 34 39 43 42 40 45 49 48 46 51 55 54 52 57 61 60 58 6) Data uspořádejte pomocí počítačového programu Excel a statisticky vyhodnoťte a rozhodněte, zda se hodnoty ve sloupcích A a B liší. Stejným způsobem vyhodnoťte hodnoty ve sloupcích C a D. Postup: * Otevřete Excel * Data - Analýza dat ( v případě, že tato položka není v nástrojích: Soubor – Možnosti – Doplňky – Anal. nástroje – přejít – Anal. nástroje – OK) * Vybereme: Dvouvýběrový t-test s rovností rozptylů - OK * Vstup 1.soubor: označíme hodnoty v prvním souboru (např. soubor A) - OK * Vstup 2.soubor: označíme hodnoty v druhém souboru (např. soubor B) - OK * Možnosti výstupu: Nový list * Hodnoty vytisknout, vyhodnotit data Dvouvýběrový t-test s rovností rozptylů Soubor 1 Soubor 2 Střední hodnota (průměr) Rozptyl (s^2) Pozorování t stat t krit(2) Je absolutní hodnota vypočítané hodnoty (t stat) větší než hodnota tabelovaná (t krit(2))? ANO NE Pokud ANO: můžeme zamítnout nulovou hypotézu, máme 95% jistotu, že mezi souborem 1 a souborem 2 je významný rozdíl Rozdíl mezi soubory A a B: ...................... mmol/l Rozdíl mezi soubory C a D: ...................... mmol/l Závěr: