Organizace skladování a výdeje transfuzních přípravků
Sekundární výroba
TRANSFUZNÍ A TKÁŇOVÉ ODDĚLENÍ
MGR. JANA TYLEČKOVÁ

Osnova
uDefinice + obecné poznámky
uPříjem TP na sklad
uSkladování TP
uMonitorování TP
uVýdej TP
uTransport TP
uSekundární úprava TP
u
u
u

Organizace skladování a výdeje TP
uVyhláška MZ ČR 143/2008 (vyhláška o lidské krvi) ve znění pozdějších předpisů
uSkladovací podmínky musí zajistit optimální životnost a funkčnost skladovaných TP po celou dobu
jejich skladování
uUložení TP nesmí vést k jejich mechanickému poškození či bakteriální kontaminaci (produktu i vaku)
uDoporučení STL
uSkladování a přeprava krve, krevních složek, suroviny pro další výrobu transfuzních přípravků
uNutná:
uvalidace postupů skladování a distribuce
upísemné postupy a záznamy
u
u
u

Transfuzní přípravky - definice
uindividuálně vyráběné léčivé přípravky (IVLP), které plní výhradně substituční funkci
uvyráběny v ZTS (= Zařízení transfuzní služby) z lidské krve či jejích složek (max. 10 dárců)
uv ČR t.č. nejsou povinně ošetřeny metodami inaktivace patogenů
ubaleny ve vacích(PVC-DEHP-ftaláty)
uexpedovány nativní nebo zmrazené
u
u
u
9e8222f0619eb9617b69ed267c92cb95
C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20180807_082951.jpg

Krevní deriváty - definice
uhromadně vyráběné léčivé přípravky (HVLP)
uvyráběny komerčně ve frakcionačních centrech
uze směsí plazmy od tisíců osob (albumin, IVIG, AT III, fibrinogen, koagulační faktory VIII a IX..)
ujsou povinně ošetřeny metodami patogenní inaktivace (eliminace obalených a neobalených virů,
bakterií, plísní, parazitů, prionů)
ujsou považovány za mnohem bezpečnější z hlediska možného přenosu krví přenosných chorob než
transfuzní přípravky
ubaleny ve skle (Albutein) nebo PVC vacích (FLEXBUMIN)
uexpedovány nativní (albuminy), zmrazené (Octaplas) nebo lyofilizované s nutnou rekonstitucí (Fbg,
FVIII)
uRozpouštědlo pro rekonstituci: Aqua pro iniectione
u
u
u

Krevní deriváty - skladování
uDle doporučení výrobce (příbalový leták, na obalu):
upři teplotě  2 - 8°C (fibrinogen, AT III, většina koagul. faktorů…)
upři teplotě 2 - 25°C (albuminy, IVIG)
upři  -18°C a nižší (Octaplas, Tisseel)
u
C:\Dokumenty 2003 - 2008\Konference\2011\Mikulov\Fotos\foto 003.jpg P2134598

Krevní deriváty – ochranné prvky
uNeporušenost obalu
uJedinečný identifikátor (2D kód) = jedinečný kód pro každé balení (S.N.)
uOvěřování a odepisování 2D kódů (centrální úložiště)
u

uKontrolujeme:
u
uvzhled a neporušenost obalu
u
usprávnost a úplnost dokumentace (seznam přijímaných TP – převodka, dod. list)
u
uúplnost údajů na štítku přípravku a jejich shodu s dodanou dokumentací, včetně zajištění podmínek
skladování během přepravy
u
9e8222f0619eb9617b69ed267c92cb95

ubezpečné a oddělené skladování TP, aby nedocházelo k chybám a záměnám (typ TP, KS…)
uautologní TP oddělené od alogenních
udoporučené vlastnosti skladovacího zařízení:
udostatečná kapacita, spolehlivé
usnadný přístup a přehled
upožadavky na bezpečnost práce a snadnou údržbu
u(desinfekční prostředky - silné detergenty)
umusí splňovat bezpečnostní a technické předpisy ČR
uv případě selhání zařízení pro skladování nebo selhání dodání el.energie je zaveden náhradní režim
- postupy stěhování, náhradní skladovací prostory
unapojení na náhradní zdroj

uTeplota:
uteplota rovnoměrná (homogenní) v celém skladovacím prostoru
upravidelně kontrolovaná nepřetržitým monitorováním
uteplota se zaznamenává v intervalu nejméně 15 minut
ucentrální monitorovací systém, na který jsou napojena teplotní čidla všech skladovacích prostor
ZTS (TTO - Falcon)
uoznámení odchylky teploty - alarm - akustický, optický
upravidelné testování alarmu - min. 1x týdně
usnímače registrující otevření dveří
uv zařízení na skladování trombocytů - snímač pohybu třepačky

uMonitorování skladovacích prostor



Erytrocytové TP
Skladování TP
Teplota:
Od +2°C do +6°C, komorová lednice, skříňové lednice
Doba skladování:
28-49 dnů ode dne odběru v závislosti na použitém konzervačním roztoku
•ery v SAGM 42 dnů
Transport:
+2°C do +10°C, max. 24 hod
(+2°C do +6°C pro dobu transportu > 24 hod.)
Odděleně TP pro:
•aktuální zásobu
•konkrétní pacienty (s platným testem kompatibility)
•autologní TP
Přípravky nevyšetřené, určené k likvidaci a proexpirované TP - musí být skladovány odděleně.
Hemolýza na konci doby skladování méně než 0,8% ery masy
Při poklesu teploty pod 1°C jsou ery TP likvidovány

Trombocytové TP
Skladování TP
Teplota:
Od +20°C do +24°C, inkubátor s agitátory
Doba skladování:
5-7dnů za trvalého třepání
Prodloužení na 7 dnů je možné, je-li provedeno vyšetření sterility přípravku, nebo je-li spojeno s
postupem snižujícím riziko této kontaminace
Transport:
Od +20°C do +24°C, při přepravě kratší než 10 hod není třeba zajišťovat třepání
Agitace: zajišťuje výměnu plynů přes stěny vaků
                         zabraňuje tvorbě agregátů

Plazmové TP
Skladování TP
Teplota:
-25°C a nižší, mrazící skříně, pulty, komory
Doba skladování:
-25°C a nižší 36 měsíců
-18 až -25°C 3 měsíce
Transport:
Teplota shodná s teplotou skladování
Zachování funkce koagulačních faktorů (zejm. f.VIII) a přirozených inhibitorů koagulace - zajištěno
šokovým zmrazením během 1 hodiny v jádře vaku na teplotu -30°C.
Před použitím:
rozmražení při teplotě 37°C v kontrolovaném prostředí, po rozmražení nesmí být v plazmě sraženiny.

Plazmové TP
Skladování TP
Plazma pro klinické použití
uPlazma z PK (P) vs. Plazma z aferézy (PA)
upo karanténě (6M vs. 4M)
uobsahuje koagulační faktory i přirozené inhibitory krevního srážení
KP = kryoprotein
uSložka plazmy připravená ze zmrazené čerstvé plazmy precipitací (srážením) bílkovin při tání ze
zmrazeného stavu a následnou resuspenzí precipitovaných bílkovin v malém objemu tekuté plazmy
uObsah: fVIII, vWf, fbg, f.XIII, fibronektin

Plazmové TP
Skladování TP
Plazma pro klinické použití
uPlazma z PK (P) vs. Plazma z aferézy (PA)
upo karanténě (6M vs. 4M)
upatogenně inaktivovaná plazma se karantenizovat nemusí
uobsahuje koagulační faktory i přirozené inhibitory krevního srážení
KP = kryoprotein (nahrazeno specifičtější léčbou KD)
uSložka plazmy připravená ze zmrazené čerstvé plazmy precipitací (srážením) bílkovin při tání ze
zmrazeného stavu a následnou resuspenzí precipitovaných bílkovin v malém objemu tekuté plazmy
uObsah: fVIII, vWf, fbg, fXIII, fibronektin
Plazma rekonvalescentní anti-SARS-CoV2
uZískaná od dárců s protilátkami po prodělaném COVID-19
uTitr virus neutralizačních protilátek ≥ 160;
(stanovení - VNT či korelující serologické testy (a-CoV2 S)

Granulocyty
Skladování TP
Teplota:
Od +20°C do +24°C
Doba skladování:
•krátkodobě, určeny k okamžitému podání, max. do půlnoci dne následujícího po odběru/darování
•bez třepání
Transport:
Od +20°C do +24°C
•Granulocyty z aferézy – po stimulaci dárce růst. faktorem
•Granulocyty z plné krve – směsné
•přípravek obsahuje příměs erytrocytů=>nutný test kompatibility
•vždy ozářit!
•

Kryokonzervace
Skladování TP
Erytrocyty - kryokonzervace možná 7 dnů po odběru přidáním glycerolu a následným zmražením
- Provádí ÚVN Praha
Teplota skladování:
-60°C až -80°C, mrazicí box, při přidání glycerolu o vysoké koncentraci
-140°C až -150°C, v parách kapalného dusíku, při přidání glycerolu o nízké koncentraci
Doba skladování:
do 30 let
Před použitím:
rozmražení a odstranění kryoprotektiva promýváním, přidání resuspenzního roztoku, podat co nejdříve
po přípravě, krátkodobé skladování (max. do 24 hod při otevř. syst.) a transport při teplotě 2-6°C

Kryokonzervace
Skladování TP
Trombocyty - kryokonzervace zahrnuje přidání kryoprotektivního roztoku k původnímu přípravku
trombocytů do 24 hod a následné zmražení.
Teplota skladování:
-80°C v elektrickém mrazicím boxu, kryoprotektivum dimetyl sulfoxid (DMSO 6%)
-150°C v parách kapalného dusíku
Doba skladování:
24 měsíců
Před použitím:
rozmražení a přidání resuspenzního roztoku (příp. plazmy), podat co nejdříve po přípravě,
krátkodobé skladování (do 12-ti hod) a transport při teplotě 20-24°C
Po rozmražení trombocytů nemusí být přítomen „swirling“ fenomén

Skladové zásoby TTO FN Brno
Skladování TP
F:\IMG Inventura ery.jpg

Skladové zásoby TTO FN Brno
uRegulované dárcovství – Zvací kalendář
uSpolupráce s úsekem dárců krve (evidence)
uMinimalizace exspirací – zvaní dle požadavku krevních skupin
u
u
Skladování TP

Skladové zásoby ery TP
TTO FN Brno
uOptimální zásoba erytrocytových transfuzních přípravků pro jednotlivé krevní skupiny je definována
jako součet počtu TU průměrného denního výdeje na dobu 10 dnů
u
u
u
uMinimální zásoba erytrocytových transfuzních přípravků pro jednotlivé krevní skupiny je definována
jako součet počtu TU průměrného denního výdeje na dobu 6 dnů
u
Skladování TP
0+
0-
A+
A-
B+
B-
AB+
AB-
270
110
330
100
130
40
55
20

Skladové zásoby klin. plazmy
TTO FN Brno
Skladování TP
0
A
B
AB
300
500
200
200
C:\Dokumenty 2003 - 2008\Publikační činnost\2010\Penka - GRADA - ZL\VERZE - POSLEDNÍ -
CD\10_Obrázek_733_8_Sklad_plazmy.TIF

uprovádí pracovník, který je oprávněn provádět výdej na základě písemného pověření
uTP je vydán na základě žádanky (Žádanka o výdej TP)
uvydaný TP je provázen dokumentací – dodací list, příp. výsledek předtransfuzního vyšetření
upříbalový leták (TP = léčivo)
uZTS
uvýdej TP pro hemoterapii pro daného pacienta
uprodej jiným ZTS a KB
u




uVýdej ze skladu expedice
uKontrola TP
uKontrola dokumentace
uKontrola  a výdej v IS
uPředání k transportu
u
G:\Fotky COS\20150603_143139.jpg F:\Fotky COS\20150603_142258.jpg

uběhem transportu musí být dodrženy skladovací podmínky pro jednotlivé typy TP
udobu přepravy omezit na minimum
upřepravní boxy vytemperované dle typu TP před vložením TP, označené, chrání TP před poškozením
během přepravy
u
u
P2130011 P2130010 P2130010 P2134596

uskladovací podmínky během transportu jsou monitorovány, pravidelně kontrolovány a validovány
u
uskladování a přeprava mimo teplotní limit - havarijní mimořádné situace - o dalším použití
TP/meziproduktů rozhoduje kvalifikovaná osoba ZTS
u
u
u
N:\TOKB\Prezentace\FOTOGRAFIE TTO\4004 expedice\IMG_9584.jpg

Sekundární výroba



udeleukotizace = leukodeplece
uodstranění leukocytů z transfuzního přípravku na hodnotu <1x106 leukocytů na jednotku
uprestorage - v procesu výroby TP
upoststorage - nevýhoda: část leukocytů již rozpadlých (uvolněny vasoaktivní  látky…)
uLaboratorní filtrace - sekundární výroba, provádí se na skladovaných TP za standardních podmínek
(proškolený personál, stabilní teplota prostředí, doba filtrace), výběr TP do 10-ti dnů po odběru,
exspirace se nezkracuje
ubed–side filtrace = deleukotizace u lůžka pacienta - méně bezpečná, nelze standardizovat, riziko
těžké hypotenze s rozvojem šokového stavu (uvolnění bradykininu)
u
uEBR – 1,2 x109 leukocytů
uERD – 1x106 leukocytů
Definice
Deleukotizace

uopakované febrilní nehemolytické potransfuzní reakce v anamnéze
upři průkazu cytotoxických HLA protilátek
upři průkazu antigranulocytárních protilátek
uchronická léčba transfuzními přípravky (pacienti v dialyzačních programech, hematoonkologičtí
pacienti)
upřed a po orgánových transplantacích (kostní dřeň, srdce, ledviny, játra)
uimunosuprimovaní pacienti
unedonošené děti a novorozenci
uintrauterinní transfuze
utěhotné ženy
uu dětí po operacích srdce a velkých cév
Indikace
Deleukotizace
C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20190115_101732.jpg

upředstavuje účinnou prevenci proti TA-GvHD (transfusion associated graft versus host disease = s
transfuzí spojená reakce štěpu proti hostiteli), která může vznikat po aplikaci transfuzních
přípravků jedincům s nevyvinutým nebo poškozeným imunitním systémem
uozařuje se paprsky gamma v dávce 25-50Gy, zdroj radionuklid Cs
uprincip:
uzničení viability lymfocytů, zablokováním jejich proliferační aktivity (rozbití DNA)
uU ozářených ery TP se zkracuje exspirace na max. 14 dnů od ozáření a zároveň max. do 28 dnů od
odběru
u
uozáření TP nenahrazuje deleukotizaci ani patogeníí inaktivaci (tato dávka neničí krví přenosná
agens)
u
u
Definice
Ozařování TP

uprimární nebo sekundární imunologický defekt
uorgánové transplantace a transplantace krvetvorných buněk
uvysokodávkovaná chemoterapie
uHodgkinova choroba
ucelotělové ozáření
uintrauterinní transfuze
utransfuze novorozencům
utransfuzní přípravky získané od pokrevních příbuzných
utransfuze HLA kompatibilních transfuzních přípravků
Indikace
Ozařování TP

uv situacích, kdy je nutné pro pacienta zajistit menší objem transfuzního přípravku (pediatrický
pacient)
uTP můžeme rozdělit (nebo oddělit jeho část) - pomocí sterilní svářečky (uzavřený systém výroby)
unový TP nové číslo TP (jedinečné)
u
Dělení TP
C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20190129_064227.jpg

uTP pro intrauterinní transfuzi (IUT) – intraumbilikální
uERD do 5 dnů stáří, ozářené (podat do 24h. od ozáření), úprava Htk na 0,70 – 0,85
uKS kompatibilní s matkou i plodem, nesmí obsahovat antigen, proti kterému si matka vytvořila
protilátku
u
uTP pro výměnnou transfuzi (exsangvinace)
uERD do 5 dnů stáří,  ozářené (podat do 24h. od ozáření)
uErytrocyty k transfuzi se volí dle AB0 kompatibility matky a novorozence, nesmí obsahovat antigen,
proti kterému si matka vytvořila protilátku
u
uPediatrické TP – s malým objemem pro transfuzi novorozencům a dětem
uErytrocyty: pediatrickou dávku lze připravit rozdělením 1 TU v množství odpovídajícím váze dítěte
uTrombocyty: pediatrická dávka vzniká standardním rozdělením 1 TD na dvě rovnocenné poloviny o
objemu cca 100 ml
u
Dělení TP

uerytrocytů, trombocytů fyziologickým roztokem = odstranění  plazmatických bílkovin obsažených v
původním přípravku
upo centrifugaci se odstraní supernatant a přidá se resuspenzní roztok, postup se opakuje 2-3x
uzkrácení exspirace:
utrombo - do 24 hod. od promytí,
uery – otevřený systém do 24 hod, uzavřený systém dle validace (5 dní)
u„ERYTROCYTY PROMYTÉ“ 40gHb, htk 0,50-0,70, obsah bílkoviny ve finálním supernatantu je nižší než
0,5g na jednotku
uindikace:
uzávažné alergické reakce na příměs plazmatických proteinů v TP
uprevence potransfuzní reakce u pacientů s IgA deficitem a současně přítomnou protilátkou anti-IgA
unení náhrada deleukotizace
u
u
Promývání TP

uDěkuji za pozornost