ABR + proteiny MUDr. RNDr. Michal Řiháček, Ph.D. Ústav laboratorní medicíny FN Brno náboj bílkovin a AK NH3+ H CH2 HOOC C •nízké pH • • • • H+ • • • • H+ • • • • H+ • • • • H+ • • • • H+ • • • • H+ • • • • H+ • • • • H+ • • • • H+ • • • • H+ • • • • H+ • • • • H+ • • • • H+ • • • • COOH Kladný náboj = kation. • • • • Stanovení Albuminu BCG H CH2 HNOC C COOH 1.Biochemický analyzátor napipetuje reagencii R1 (pufr, pH 4,1) 2.Albumin tímto získá kladný náboj, protonace (COOH a NH3+) 3.Na kladně nabitou skupinu se může navázat barvička BCG, reagencie R2 C ..OC H (CH2)4 NH3+ HNOC C H NH.. CH3 lysin (basická AK) aspartát (kyselá AK) alanin (neutrální AK) http://www.reed.edu/chemistry/alan/201_202/lab_manual/Expt_pKa/images/800px-Bromocresol_green_ionic _equilibrium_RIGHT.png změna barvy BCG náboj bílkovin a AK NH3+ H R -OOC C •izoelektrický bod (neutrální náboj) • • • • •aminokyselina není nabitá •aminokyselina se nepohybuje v elektrickém poli (elfo/fokusace) •nulový náboj aminokyseliny definuje izoelektrický bod (= specifická hodnota pH) •v této formě není kyselina ani aniont, ani kationt, ale amfiont • • • • Neutrální náboj. • • • • náboj bílkovin a AK NH2 H CH2 -OOC C •vysoké pH H+ + OH- • • • • COO- OH- • • • • OH- • • • • OH- • • • • OH- • • • • OH- • • • • OH- • • • • OH- • • • • OH- • • • • H+ + OH- • • • • H2O • • • • H2O • • • • H+ + OH- • • • • Záponý náboj = anion. • • • • Stanovení celkové bílk. (Cu2+) H CH2 HNOC C COO- + stabilizátory náboje mědi C ..OC H (CH2)4 NH2 HNOC C H NH.. CH3 lysin (basická AK) aspartát (kyselá AK) alanin (neutrální AK) Cu2+ 1.Biochemický analyzátor napipetuje reagencii R1 (pufr, pH 13,2) 2.Bílkoviny tímto získají záporný náboj, deprotonace (COO- a NH2) 3.Na záporně nabitou skupinu se může navázat měď, reagencie R2 COO- Acidobazická rovnováha: proteiny a volné kalcium •vysoké pH nízké pH • • • • •fysiologicky cca 50 % volného Ca v plasmě, 50 % vázáno na proteiny H+ • • • • NH3+ H CH2 HOOC C COOH Ca2+ • • • • H+ • • • • Ca2+ • • • • •hyperkalcémie •nevolnost, zvracení, slabost svalů, arytmie • NH2 H CH2 OOC C COO Ca • • • Ca • • • • •hypokalcémie •akutně především křeče až tetanie !!! H+ + OH- H+ + OH- ABR a kalium •kalium je obsaženo hlavně v buňkách (zjednodušeně Na+ a K+ je v bb. opačně jak v plasmě) •transport kalia mezi buňkou a plasmou je přes transportér, který za K+ přenáší H+ •vysoké pH krve nízké pH krve • • • • K+/H+ krev • • • • buňky • • • • H+ • • • H+ • • • H+ • • • K+ H+ • • • K+ • K+ K+ K+ K+ K+ K+ K+ H+ H+ • • • H+ H+ • • • H+ • • • H+ • • • K+/H+ buňky • • • • H+ • • • H+ • • • H+ • • • K+ H+ • • • K+ • K+ K+ K+ K+ K+ K+ H+ H+ • • • H+ • H+ • • • H+ • • • H+ • • • krev •acidóza = nadbytek H+ •nadbytek H+ odchází do buněk •z buněk za H+ vychází ven K+ Při acidóze proto bývá hyperkalémie. •alkalóza = úbytek H+ •H+ odchází do krve, kde je ho méně •z krve proto do buněk vchází K+ Při alkalóze proto bývá hypokalémie. Změna pH o 0,1 mění hladinu kalia až o 0,6 mmol/l. Riziko závažných arytmií až zástavy srdce. Závažné výsledky hlásit !!!