1197280M0iV12 GLU Glukóza GOD-PAP cobas i Vyznačuje Roche/Hitachi analyzátory, na kterých lze soupravy použít Kat. č. Nádobka Obsahuje 902 912 MODULAR P D 11491253 £16 R=A3=NT 12 x 66 mL 11929526 216 REAGENT; 6 X 258 mL 11448668 216 .REAGENT] 18 x 50 mL 11448676 216 ;REA_GENJJ10x100mL Některé analyzátory a soupravy nejsou dostupné ve všech zemích. Pro další systémové aplikace kontaktujte místní zastoupení Roche Diagnostics. Česky Systémové Informace Analyzátory Roche/Hitachi 912/MODULAR: ACN 525. Dostupné na vyžádání: Pro analyzátor Roche/Hitachi 912: ACN 526 (R2 aplikace). Použití Enzymatická metoda pro kvantitativní in vitro stanovení glukózy v lidském séru a plazme na automatizovaných analyzátorech klinické chemie Roche. Souhrn1-" Uhlovodany zásobují organismus glukózou. Glukóza je nejdůležitějším monosacharidem přítomným v krvi s postprandiální koncentrací 5 mmol/L Glukóza jako substrát je nepostradatelným zdrojem energie pro buněčné funkce. Odbourávání glukózy probíhá v procesu glykolýzy. Stanovení glukózy je používáno při diagnostice a sledování poruch metabolismu uhlovodanů, včetně diabetes mellitus, novorozenecké hypogtykémie, ídiopatické hypoglykémie a karcinomu buněk ostrůvků pankreatu. Tato modifikovaná metoda GOD-PAP využívá Trinderovu práci, publikovanou 1969, Princip testu3 Enzymatický kolorimetrický test • Napipetování vzorku a přidání R1 a zahájení reakce: glukóza + O2 GOD -> glukonolakton + H2O2 POD 2 H2O2 + 4-aminofenazon + fenol 4-(p-benzochinon-monoimino)-fenazon +4 H2O Glukóza je oxidována glukózooxidázou (GOD) na glukonolakton v přítomnosti vzdušného kyslíku. Výsledky peroxid vodíku oxiduje, v přítomnosti peroxidázy (POD), 4-aminofenazon a fenol na 4-{p-benzochinon-monoimino)-fenazon. Intenzita vytvářeného červeného zabarvení je přímo úměrná koncentraci glukózy a může být stanovena fotometrický. Reagencie - pracovní roztoky R1 Fosfátový puf n 200 mmol/L, pH 7,5; GOD (mikroorganismy) ž 183 pkat/L; POD (křen) > 0,33 ukat/L; 4-aminofenazon: 0,77 mmol/L; fenol: 11 mmol/L Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření, nutná pro nakládání se všemi reagervciemi. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Zacházení s reagenciemi R1: Připraveno pro použiti Uskladnění a stabilita Součásti neotevřené soupravy: Do data exspirace při 2-8 "C R1: 28 dní otevřená v chlazeném prostoru analyzátoru Odběr vzorků a příprava Pro odběr a přípravu vzorků používejte vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Pouze níže uvedené vzorky byly testovány a jsou přijatelné: Sérum Plazma: Heparin nebo EDTA plazma. Stabilita (bez hemolýzy):" 8 hodin při 15-25 °C Fluoridová plazma 72 hodin při 2-8 °C Stabilita:5 3 dny pří 15-25 °C Jodacetátová plazma Stabilita;4 24 hodin při 15-25 X Odběr krve nalačno venipunkcí jedinců pomocí systému vakuových zkumavek. Stabilita glukózy ve vzorku závisí na teplotě skladování, bakteriální kontaminaci a glykolýze. Plazma nebo sérum bez konzervans (NaF) by měly být odděleny od krevních buněk či sraženiny do půl hodiny po odběru. Je-li odebrána krev a ponechána možnost koagulace a bez centrifugace při pokojové teplotě, je průměrný pokles glukózy v séru -7 % za hodinu (0,28 až 0,56 mmol/L nebo 5 až 10 mg/dL). Pokles je důsledkem glykolýzy. Glykolýza může být inhibována odběrem vzorku do zkumavek s fluoridem.6 Uvedené druhy vzorků byly testovány s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn. že do testu nebyly zařazeny všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech vliv na výsledky. Při zpracováni vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky, obsahující precipitáty, centrifugujte před provedením testu. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) • Kalibrátor C.f.a.s. (Calibrator for automated systems), Kat. Č. 10759350 190,10759350 360 (pro USA) • Kontroly: Precinorm U. např. Kat. č. 10171743 122, Precinorm U plus, Kat. č. 12149435 122,12149435 160 (pro USA); Precipath U, např. Kat. č. 10171778122, Precipath U plus, Kat. č. 12149443 122,12149443 160 (pro USA); Pro ACN 525: PreciControl ClinChem Multi 1, Kat. č. 05117003 190, 05947626 160 (pro USA), PreciControl ClinChem Multi 2, Kat. č. 05117216 190, 05947774 160 (pro USA) • 0,9% NaCI • Celkové vybavení laboratoře Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny, uvedené v dokumentaci pro analyzátory. Instrukce, specifické pro jednotlivé 2011-05, V12 Česky 1/3 Roche/Hitachi llllll GLU Glukóza GOD-PAP analyzátory, vyhledejte v uživatelské příručce. Provádění aplikací, které nejsou schváleny Roche, je bez záruky a musí být definováno uživatelem. Kalibrace Návaznost: Tato metoda byla standardizována podle metody ID-MS. S1: 0,9% NaCI S2: C.f.a.3. Frekvence kalibrace Rekalibrace je doporučována v případech: • blank kalibrace po 24 hodinách ■ 2-bodová kalibrace po změně šarže reagencie • blank kalibrace po zrněné nádobky reagencie • 2-bodová kalibrace podle požadavků postupů kontroly kvality Kontrola kvality Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v částí "Potřebný materiál". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaný postup pro případ, že hodnoty kontrol překročí požadované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá koncentraci analytu pro každý vzorek. Převodní faktor: mg/dL x 0,0555 = mmol/L Omezení - interference Kritérium: Výtěžnost v rozmezí ±10 % počáteční hodnoty. Ikterus:7 Bez významných interferencí do hodnoty I indexu 22 pro konjugovaný bilirubin a 20 pro nekonjugovaný (přibližná koncentrace konjugovaného bilirubinu: 22 mg/dL nebo 376 pmol/L; přibl. koncentrace nekonjugovaného bilirubinu: 20 mg/dL nebo 342 umcťL). Hemolýza:7 Bez významných interferencí do hodnoty H indexu 850 (přibližná koncentrace hemoglobinu: 850 mg/dL nebo 528 umol/L). Lipémie (Intralipid):7 Bez významných interferencí do hodnoty L indexu 150. Mezi L indexem (odpovídá zákalu) a koncentrací triglycendú je slabá korelace. Ve vzácných případech může gamapatie, především u typu IgM (Waldenstrômova makroglobuliněmie), způsobit nespolehlivé výsledky. Hodnoty glukózy, získané zpracováním některých zkušebních materiálů, v porovnání s metodou stanovení kyslíkovou elektrodou s glukózooxidázou, vykazuji v průměru přibližně 3 % pozitivní bias. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné posuzovat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a ostatními nálezy. POTŘEBNÝ KROK Programováni speciálního mytí: Pň zpracovávání určitých kombinací testů v analyzátorech Roche/Hitachi je nezbytné používat speciální mycí cykly. Pro další pokyny čtěte nejnovější verzi Seznamu zamezení přenosu (carry-over) a příručku pro obsluhu. Uživatelé z USA naleznou pokyny pro speciální mycí cykly v dokumentu Speciál Wash Programming (umístěném na stránce MyLabOnline) a v příručce pro obsluhu. Tam, kde je to vyžadováno, musí být před vydáním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry-over). Limity a rozmezí Rozsah měření Rozsah měřeni: 0,11-25 mmol/L (2-450 mg/dL). Analyzátor Roche/Hitachi 912 Vzorky s vyššími koncentracemi se měn pomoci funkce rerun. Vzorky nařeďte 1:3 pomocí funkce rerun. Výsledky ze vzorků, naředěných funkcí rerun, jsou automaticky vynásobeny faktorem 3. | Analyzátory Roche/Hitachi MODULAR P Vzorky s vyššími koncentracemi se měří pomocí funkce rerun. Vzorky ředíme 1:3 pomocí funkce rerun. Výsledky ze vzorků, naředěných funkcí rerun, jsou automaticky vynásobeny faktorem 3. Na přístrojích bez automatického opakování (rerunu) ručně nařeďte vzorky s vyšší koncentrací 0,9% roztokem NaCI, destilovanou nebo deionizovanou vodou (např. 1 + 2). Výsledek vynásobte odpovídajícím faktorem (např. 3). cobas Spodní detekční limit Detekční limit: 0,11 mmol/L (2 mg/dL) Spodní detekční limit představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Je vypočítána jako hodnota ležící 3 standardní odchylky nad nejnižším standardem (standard 1+3 SD, opakovatelnost, n = 21). Očekávané hodnoty2 Plazma (na lačno) 4,11-6,05 mmol/L (74-109 mg/dL) Referenční rozmezí dle Tietze8 Sérum/plazma Dospělí: 4,11-5,89 mmol/L nebo 74-106 mg/dL 60-90 let: 4,56-6,38 mmol/L nebo 82-115 mg/dL > 90 let: 4,16-6.72 mmol/L nebo 75-121 mg/dL Děti: 3,33-5,55 mmol/L nebo 60-100 mg/dL Novorozenci: 1 den: 2,22-3,33 mmol/L nebo 40-60 mg/dL > 1 den: 2,78-4,44 mmol/L nebo 50-80 mg/dL Roche nevyhodnocovalo referenční rozmezí v pediatrické populaci. Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů a je-li to nutné, stanovit si vlastni referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky, získané v různých laboratořích, se mohou lišit. Přesnost Přesnost byla stanovena použitím lidských vzorků a kontrol podle interního postupu s opakovatelností* (n = 21) a mezilehlou přesnosti"** (3 alikvoty na sérii, 1 série denně, 21 dní). Byty získány následující výsledky: Opakovatelnost* Mezilehlá přesnost" Vzorek Průměr VK Průměr VK mg/dL mmol/L % mg/dL mmol/L % Lidské sérum 116 6.44 0,9 124 6,88 1,8 Precinorm U 121 6,72 0,8 118 6,55 2,1 Precipath U 256 14,2 0,7 249 13,8 1,9 'Opakovatelnost ■ přesnost v sérii "Mezilehlá přesnost » celková přesnost / přesnost mezi sériemi / přesnost mezi dny Porovnání metod Porovnání stanovení glukózy provedené soupravou Roche Glucose GOD-PAP na analyzátorech Roche/Hitachi MODULAR P (y) a 917 (x) poskytlo následující korelaci (mg/dl): Passing/Bablok9 Lineární regrese y = 0,998x-0,198 y = 0,998x - 0,232 T = 0,976 r = 0,999 Počet stanovených lidských vzorků séra: 167 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 60 až 371 mg/dL (3,33-20,6 mmol/L). Odkazy 1. Greiling H, Gressner AM, eds. Lehrbuch der Klinischen Chemie und Pathobiochemie, 3rd ed. Stuttgart/New York: Schattauer Verlag; 1995. 2. Thomas L. Blutglucose. In: Thomas L, ed. Labor und Diagnose, 6th ed. Frankfurt/Main: TH-Books, 2005;193-99. 3. Trinder P. Determination of Glucose in Blood using Glucose Oxidase with an alternative oxygen acceptor. Ann Clin Biochem 1969;6:24-27. 4. Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rt ed. Philadelphia, Pa: WB Saunders Company, 1995:268-273. 5. Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 6th ed., Saunders Elsevier 2008, 389. 6. Sacks DB. Carbohydrates. In: Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical Chemistry. 4th ed. Philadelphia: WB Saunders 1996:351-374. 7. Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32:470-474. 8. Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 4th ed. Philadelphia. WB Saunders Company, 2006:444451. 9. Passing H, Bablok W et al. A General Regression Procedure for Method Transformation. J Clin Chem Clin Biochem 1988;26:783-790. Roche/Hitachi 2/3 2011-05, V 12 Česky