Cytochemická vyšetření
Bourková L., OKH, FN Brno
substrát
↓
inkubační roztok
+
enzym
↓
buňka

obarvené precipitáty
↓
v místech přítomnosti enzymu
v buňce (v granulích)
Cytochemická reakce
hodnocení:
intenzita zbarvení granulí (precipitátu)
je úměrná množství enzymu
Myeloperoxidáza
•Princip:
Peroxidáza přenáší vodík z vhodného donoru na peroxid.
Donor je oxidován a přeměněn na nerozpustnou sraženinu.
•Hodnocení:
•v azurofilní granulaci leukocytů
•intenzita pozitivity: 0 až +++
•také se sleduje přítomnost Auerových tyčí (nemusí být při
panoptickém barvení viditelné přes jádro).
•fyziologická pozitivita:
myeloidní buňky 0 / +++
monocyty 0 / +
lymfocyty 0
•Klinický význam:
Rozlišení myeloblastické nebo monoblastické leukemie od
lymfoblastické leukemie
Lymfoblasty - negativní
Auerovy tyče
AML
Nespecifické esterázy
•Princip:
Buněčná esteráza reaguje se substrátem (např. alfa-naftyl-acetát nebo
alfa-naftyl-butyrát ) a nebo je reakce blokovaná NaF.
• inkubece jednoho nátěru bez NaF
• inkubece druhého nátěru s NaF
•Hodnocení:
• pozitivita v granulích v cytoplazmě leukocytů
• intenzita pozitivity: 0 až +++
• pozitivita bez NaF:
monocyty + až +++
myeloidní buňky, lymfocyty 0 až ++
• pozitivita po NaF:
monocyty zeslabení na 0 nebo +.
ostatních buňky: pozitivita stejná nebo snížená maximálně o (+)
•Klinický význam:
• k rozlišení AML M4 a AML M5
• ↑ NE + ↓ NE/NaF → monocytární buňky
• NE + NE/NaF – srovnatelná → myeloidní, lymfoidní buňky
Mono: ++/+++
Granulo: +
NE+NaF: 0
PAS (Periodic Acid Schiff)
•Princip:
sacharidy+kys.jodistá→aldehydy+Schiffovo barvivo→růžový precipitát
•Hodnocení:
• intenzita: 0 až +++
• vzhled (typ) pozitivity:
fyziologická pozitivita:
myeloidní buňky: difúzní zbarvení cytoplazmy
monocyty: jemně granulární pozitivita
lymfocyty: negativní, ojediněle výraznější granula
trombocyty a megakaryocyty: výrazně pozitivní
NRBC : negativní
patologická pozitivita.
lymfocyty - CLL: ve většině lymfocytů výrazná zrnitá pozitivita
blasty - ALL, nedif. leukémie: hrubozrná pozitivita
NRBC - patologické: hrubozrná pozitivita
•Klinický význam:
leukémie, MDS, anémie
VZHLED POZITIVITY
difúzní jemně granulární hrubozrnná/bloková pozitivita
……..…
……….
………..
●●●
●●●
●●●
AML - M6
pozitivita: difúzní, granulární
ALL
Typy pozitivity PAS
Poznámky
Cytochemická vyšetření hodnotit v souvislosti s:
•ostatním cytochemickým vyšetřením
•morfologickým hodnocením a rozpočtem kostní
dřěně
•stádiem vyzrávání buněk
S každým cytochemickým vyšetřením pacienta je
nutné vyšetřit i kontrolní preparát.
Cytochemické reakce
MPOX NE NE+NaF PAS
(typ pozizivity)
myeloid. b. -/+++ -/+ -/+ -/+
monocyt. b. -/+ +/+++ -/+ -/+
erytrocyt. b. - -/+ -/+ -/+
lymfoc. b. - -/+ -/+ -/+
MGK b. - -/+ -/+ -/+
Podpořeno MZ ČR – RVO (FNBr, 65269705)