Předtransfuzní vyšetření Plná krev Erytrocyty Plazma Trombocyty Granulocyty 9e8222f0619eb9617b69ed267c92cb95 C:\Users\uživatel\Desktop\Transfuzka\IMG_20191217_140846.jpg Předtransfuzní vyšetření •soubor povinně prováděných sérologických testů před podáním přípravku obsahujícího erytrocyty (erytrocytové a granulocytové TP) •podání transfuze má svá rizika – nikdy není garantovaná 100% bezpečnost = správná indikace použití TP (pouze v případě skutečné potřeby) •rizika infekční a imunologická (imunizace, potransfuzní reakce, imunosuprese) •obvykle bezpečný proces: zvýšení hodnoty Hb • (1TU o 10-15g/l, přežívání erys cca 60 dní) • Krevní vzorky •krev s antikoagulačním roztokem (EDTA) / plazma •krev srážlivá / sérum •nepoužívat hemolytické vzorky – nelze detekovat protilátky • • Krevní vzorky • •skladování vzorků –riziko změny kvality (hemolýza, zeslabení IgM Abs, vymizení komplementu) • –plná krev při 2°- 8°C po 7 dní (k vyšetření reakce) –vzácně separované sérum/plazma při ≤-20°C po 6 měsíců (opakované vyšetření protilátek) • Žádanka o transfuzi • •písemná/elektronická •příp. telefonický požadavek - zaprotokolovat •vyvarovat se dvojí dokumentace (jednoznačná totožnost) • •kontrola archivovaných záznamů (v IS) před výdejem erytrocytového transfuzního přípravku je povinná • • •Jiná žádanka o výdej TP, zasílá se v okamžiku, kdy je transfuze požadovaná • Souhlasné identifikační údaje •Údaje na zkumavce (označit před odběrem vz.): –jméno a příjmení, rodné číslo nebo jiná –jedinečná identifikace pacienta + datum odběru – •Údaje na žádance: –jméno a příjmení, rodné číslo / jiná identifikace –imunohematologická anamnéza –razítko a podpis lékaře, podpis sestry provádějící odběr –počet TU a typ přípravku –datum a hodina transfuze – stupeň naléhavosti –diagnóza, pojišťovna, IČP – •Vyšetření nelze provést, pokud: • •chybí údaje o pacientovi •jsou diskrepance údajů na žádance a na • zkumavce •urgentní pacienti dtto • • •Administrativní chyby jsou nejčastější příčinou většiny •potransfuzních hemolytických reakcí ! • Komplex předtransfuzního vyšetření • • 1.stanovení krevní skupiny AB0 a RhD příjemce 2.vyšetření nepravidelných protilátek proti erys v plazmě příjemce 3.(výběr erytrocytového přípravku) 4.test kompatibility mezi plazmou příjemce a erys dárce • • Platnost vyšetření • •předtransfuzní vyšetření platí 3 dny (max. 96 hod. dle dop. STL) od času odběru vzorku •krevní skupinu poprvé vyšetřit celou, poté před každou novou transfuzí ověřit ABD antigeny z nového vzorku (k odhalení event. záměny) •screening protilátek opakovat z nového vzorku pacienta nejpozději za 3 dny = odpovídá platnosti celého testu • • • Stanovení AB0 skupiny příjemce •vyšetření antigenů na erys (aglutinogeny) –monoklonální anti-A a anti-B diagnostická séra •vyšetření séra/plazmy (aglutininy) –A1 a B erys (pro některé situace vhodné erys 0 nebo autoctl) •přímá aglutinace, solný test při laboratorní teplotě • •tento postup u příjemců starších 4 měsíců, musí být souhlasné reakce v obou řadách •u pacientů do 4. měsíce věku opakovaně vyšetřit A a B antigeny (2x) různými dg. séry, bez detekce AB0 protilátek •u pacientů, kde daná laboratoř již vyšetřila krevní skupinu, se provádí pouze orientační test (bez vyš. aglutininů) – kontrola se záznamem v IS k odhalení event. záměny ABO_blood_type ABO Reciprocity Patient Reagent Red Cells and Anti-A Anti-B Plasma and A cells B cells Patient blood type O - - + + A + - - + B - + + - AB + + - - > Před vyšetřením – QC •Denní kontrola kvality • •Provádění kontrol pro zjištění účinnosti diagnostik – –Dg.sérum anti-A reaguje s ery A1 a nesmí reagovat s B a 0 –Dg. sérum anti-B reaguje s ery B a nesmí reagovat s A a 0 – –Dg. erytrocyty A1 a B reagují s odpovídajícími protilátkami (vzorek –krevní skupiny 0 s anti-A, anti-B) • •U dárců krve stejný postup pro vyšetření AB0 skupiny jako u příjemců • Možné problémy při určení AB0 • •Slabé/chybějící/méně obvyklé antigeny • •Slabé/chybějící/ méně obvyklé protilátky • •Jejich kombinace • Řešení •Upřesnit anamnezu, dg., léčbu, srovnat s posledními záznamy • •Přední řada: opakovat s promytými erys (teplý FR), došetřit zadní řadu, CQ, změnit inkubace a časy, DTT působení na erys, ficinovat erys •Zadní řada: přidat albumin, i erys, zvýšit poměr vyš.séra, změnit inkubace a časy, použít promyté typ.erys • •Rouleaux: stejná reaktivita všech erys včetně autoctl– doplnění FR k rozpuštění reakcí, je to neg.reakce Stanovení RhD příjemce •pomocí dvou různých monoklon. dg. sér anti-D (IgM) přímou aglutinací (solný test, laboratorní teplota) •dg. sérum nemá detekovat DVI variantu •rozliší RhD+, RhD-, RhDw/v –pacient se známou variantou D antigenu/ Dvar má být transfundován RhD negativní krví –pacient se známým slabým D antigenem/ Dweak může být dle typu antigenu považovaný za RhD pozitivního (Dweak 1–3) – •u pacientů, kde daná laboratoř již vyšetřila krevní skupinu, se provádí pouze ověření pomocí 1 dg. séra Stanovení RhD u dárce krve •povinnost testovat dárce na přítomnost všech variantních D antigenů •povinnost použít dg.sérum anti-D (IgG) pro NAT k došetření dárců stanovených jako RhD negativní •dárce Dw/v = dárce RhD pozitivní • •QC (platí pro dárce i příjemce): •Rh ctl kontrolní sérum (zařazení dle dop. výrobce) •erys RhD+ a RhD-. • • • • Vyšetřovací metody Screening nepravidelných protilátek • •vyšetření plazmy/séra příjemce nebo dárce na přítomnost nepravidelných protilátek proti erys pomocí známých diagnostických erytrocytů skupiny 0 • •povinné zastoupení určitých antigenů včetně konkrétních haplotypů (Rh, Kell, Duffy, Kidd, MNSs, Lewis, Lutheran…) na dg. erytrocytech –pro dárce krve lze použití směs dg. erytrocytů –pro pacienty nemohou být ve směsi (tři a více typů) • •povinně test v LISS-NAT 37°C (sloupc. aglutinace, pevná fáze, zkumavkové testy) •nepovinně doplnění enzymovým testem (lepší pro -Rh, -Jk) • • Vyšetření nepravidelných protilátek proti erytrocytům – screeningový test • • •pozitivní screening protilátek = patologie, nutno došetřit, identifikovat protilátku pomocí více typů diagnostických erytrocytů pro určení protilátky, stanovit klinický význam protilátky (NAT, 37°C) •určení fenotypu s ohledem na specifitu zjištěné protilátky •rozlišení aloprotilátky, autoprotilátky, jiných typů reakcí •dle toho vybrat odpovídající transfuzní přípravek = kompatibilní transfuzi • • • • •při nálezu specifických protilátek u příjemce - riziko zkráceného přežívání dárcovských erys včetně nežádoucí potransfuzní reakce při inkompatibilní transfuzi •výběr transfuze negativní pro daný antigen při protilátkách: anti-A,-B,-AB, -Rh, -Kell, -Duffy, -Kidd, -Ss, někdy -M/37° aj. • • Transfuzní přípravky Štítky na konečném produktu obsahují všechny důležité údaje –Typ přípravku –Kód výrobce –Číslo odběru –Datum odběru –Datum expirace –Krevní skupina –Množství –Použité roztoky –Výsledky předepsaných testů –Skladovací podmínky C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20190130_162301.jpg Výběr transfuzního přípravku • •AB0 a RhD shoda •pokud není, tak erytrocyty kompatibilní pro AB0 protilátky u příjemce / univerzální erytrocyty skupiny 0 –pro příjemce skupiny AB erytrocyty skupiny A,B nebo 0 –pro dívky a ženy ve fertilním věku rezervovat erytrocyty RhD negativní, K- –erytrocyty 0 jsou tzv. univerzální –plazma AB je tzv. univerzální –co nejdříve přejít na skupinově shodné přípravky Test kompatibility •potvrzení slučitelnosti krve příjemce a dárce • •reakce mezi plazmou příjemce a erytrocyty dárce (segment z vaku TP) • –negativní test = kompatibilita dárcovských erytrocytů –pozitivní test = inkompatibilní transfuze = nelze vydat –zkoušku provádí jedna osoba od začátku do ukončení – • Test kompatibility •lze použít elektronický výběr (e-cross match při zavedeném SW s implementovanými kontrolními mechanismy) –příjemce AB0, RhD ze 2 nezávislých vzorků, negat. screening abs –ověření AB0, RhD ze segmentu ery TP • •Sérologická zkouška kompatibility: •LISS-NAT 37°C (sloup. aglutinace, pevná fáze) - povinně při nálezu klinicky významné protilátky nebo problémech při vyšetření krevní skupiny, u AB0 inkompatibilního transplantátu solidního orgánu – •type and screen (zkum.) – krátký test pouze u vybraných pacientů; rychlé ověření AB0 kompatibility před výdejem TP u příjemce jednorázové trf bez protilátek proti erys (scr. negat.) • • Procesy při transfuzi (na klinickém pracovišti) •Zajistit bezpečnost transfuze –Zajistit a ověřit informace o •Pacientovi •Dárci/ transfuzním přípravku •Kompatibilitě plazmy pacienta a erytrocytů dárce –Zkontrolovat přípravek •Neporušenost obalu, vzhled •Kompatibilitu –Výsledek vyšetření z laboratoře –Číslo přípravku a krevní skupinu –Datum expirace –Bed side test –Podání transfuze + monitorování pacienta •TK, P, TT •Bez biologické zkoušky, prvních 15 minut důležitých •Dokumentace • Urgentní situace (vitální indikace) •Nedostatek času na jakékoli vyšetření / nebo chybí krevní vzorek pacienta / chyba v identifikaci pacienta • •Vydávají se univerzální transfuzní přípravky, tj. •0- erytrocyty (pokud nejsou, tak 0+) •AB plazma •trc jakékoli skupiny (resuspendované, nízký titr 0) • •neprovádí se předtransfuzní vyšetření, ale dokončí se později •existuje imunohematologické riziko non-AB0 neshody • Čas alespoň pro vyšetření skupiny •Vzorek dodán, vyšetření začalo ale není úplné, •určena jen krevní skupina pacienta: • •Vydávají se AB0 RhD shodné přípravky •Bez ostatních předtransfuzních vyšetření (Abs, TK) – –došetřit co nejdříve screening protilátek v plazmě/séru příjemce –provést test kompatibility –vzniklé problémy hlásit odesílajícímu zařízení –výhoda postupu - šetří se nedostatkové univerzální přípravky • Masivní transfuze •při ŽOK •objem převedených transfuzních přípravků během posledních 24 hodin je větší než objem krve pacienta –přepočet: hmotnost (kg) x 69 (65 ženy) • ≥10 TU erytrocytů/24 hodin, ≥ 5 TU během 2-3 hodin •není nutné provádět předtransfuzní vyšetření •ověřuje se pouze AB0 a RhD u přípravku (v rámci téže krvácivé epizody) Jiné specifikace transfuzí •fetální /intrauterinní transfuze •čerstvá krev do 5 dnů, skupiny 0, negativní pro antigen, proti kterému má matka protilátku, vysoký HTK (0,70-0,85), CMV neg, ozářená •chronicky transfundovaní pacienti •střední riziko imunizace, není nutné/je vhodné vybírat •fenotypově shodné krve (vs. srpkovitá anemie, AA, MDS) •příjemci alogenních HSCT a solidních orgánů •výběr přípravku dle typu neshody dárce a příjemce, •univerzálně erytrocyty 0, plazma AB • Exsanguinační transfuze při AB0 HON Výběr erytrocytů pro exsanguinační léčbu (AB0 HON) dítě matka erys* A 0,B 0 B 0,A 0 AB A A,0 AB B B,0 *RhD dle dítěte nebo RhD negat Tx HSC Neshoda dárce příjemce erytrocyty plazma a trombocyty Malá 0 A 0 A nebo AB 0 B 0 B nebo AB A AB A nebo 0 AB B AB B nebo 0 AB Velká A 0 0 A nebo AB B 0 0 B nebo AB AB 0 0 AB AB A A nebo 0 AB AB B B nebo 0 AB Kombinovaná A B 0 AB B A 0 AB RhD RhD+ RhD- RhD- po dobu přihojování RhD- po dobu přihojování RhD- RhD+ RhD- RhD- Tx orgánové orgán 0 orgán A orgán B orgán AB příjemce 0 ery 0 ery 0 ery 0 ery 0 plazma 0 (A, B, AB) plazma A (AB) plazma B (AB) plazma AB příjemce A ery 0 ery A (0) ery 0 ery A (0) plazma A (AB) plazma A (AB) plazma AB plazma AB příjemce B ery 0 ery 0 ery B, (0) ery B (0) plazma B (AB) plazma AB plazma B (AB) plazma AB •Deleukotizace pro pacienty s opakovanými FNHTR, CMV negativní, IUT a EXS, novorozence, imunizované leukocytárními antigeny, těhotné, polytransfundované a transplantované •Gamma záření pro pacienty s možnou reakcí GvHD, transplantované HSC, IUT a EXS, granulocyty, příbuzenské transfuze •Patogenní inkativace přípravky dtto •Promytí buněčných přípravků pro hyperreaktivitu s anti-IgA, anafylaktoidní reakce na plazmu Kontrola kvality v imunohematologii •důležitá součást laboratorních procesů – SLP –IKK –EKK (mezilaboratorní porovnání) •účast všech složek zapojených do fáze prenalytické, analytické, postanalytické •řízená dokumentace –Informovanost, verifikace metod, zavedení standardních pracovních postupů a jejich průběžná aktualizace, audity a analýzy, edukace a tréningy personálu, validace a kontroly přístrojů, kontroly dg. materiálu, SEKK, manipulace s materiálem, sledovatelnost všech procesů • • • •