Výroba transfuzních přípravků Mgr. Jana Tylečková Transfuzní a tkáňové oddělení FN Brno Dárcovství krve •dobrovolné, bezpříspěvkové • •Transfuzní přípravek = léčivo o(Zák. o léčivu, splnění požadavků SVP) • •Výběr dárce: oDotazník DK oPředodběrová vyšetření (KO, TK) oPosouzení způsobilosti o oDárce = zdravý, vyhovuje požadavkům pro dárcovství o(18-65 let, >50kg, Hb Ž ≥125g/l, Hb M ≥135g/l,…) Typy odběrů C:\Users\1269\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\1Y1DD075\question-mark[1].jpg Z čeho se skládá krev? N:\TOKB\Prezentace\FOTOGRAFIE TTO\4046 Třebíč\Foto odd\20190410_095657.jpg Zpracování odběrů plné krve 1.Odpočinková doba po odběru (min. 1 hod.) opozvolné zchladnutí odebrané krve na pokojovou teplotu před dalším zpracováním • 2.Centrifugace • • • o C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20181108_125308.jpg C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20181108_125347.jpg C:\Users\1269\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\1Y1DD075\question-mark[1].jpg Jak krevní složky sedimentují? Zpracování odběrů plné krve 3.Lisování centrifugované PK na automatických lisech 4. C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20181108_115529.jpg -Plazma - - - -Buffy coat (trc + leu) - -Červené krvinky (do konzervač. roztoku) - Zpracování odběrů plné krve 4.Deleukotizace erytrocytárního přípravku o(deleukotizace = odstranění leukocytů z transfuzního přípravku) o Obsah leukocytů: o EBR < 1,2 x 109/TU o ERD < 1 x 106/TU – toto množství už není schopno u příjemce vyvolat imunologickou odpověď o o Pre-storage (in-line) filtrace = během zpracování, doporučuje se do dop. zprac. 6 hod. po odběru o o Post-storage filtrace o - sekundární výroba, provádí se o u skladovaných TP o - nevýhoda: část leukocytů o již rozpadlých (uvolněny o vasoaktivní látky…) C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20190128_143534.jpg C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20190115_101732.jpg Zpracování odběrů plné krve 5.Šokové zmrazení plazmy o-30°C v jádru (tj. v celém objemu P) do 1 hod. oaby se zachovala aktivita termolabilních o koagulačních faktorů oKaranténa plazmy pro klin. použití C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20190129_065335.jpg C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20190129_104505.jpg C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20190129_095048.jpg Zpracování odběrů plné krve • 6.Výroba trombocytů z buffy-coatu osměsné, v náhradním roztoku, deleukotizované osmísením 4-6 buffy-coatů shodné KS, ke kterým se přidá náhradní roztok (=1 TD) oNásledně centrifugace a separace trombocytů, které jsou resuspendovány ve směsi plazmy (30-40%) a náhradního roztoku (60-70%) • C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20180928_083756.jpg C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20190130_130822.jpg C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20190129_064227.jpg Principy značení TP •Adjustace – vaky s TP jsou opatřeny štítky konečného produktu •Obsah štítku: identifikační kód výrobce, číslo odběru, datum odběru, datum exspirace, krevní skupina AB0 RhD, objem, použité roztoky, výsledky laboratorních testů, skladovací podmínky, atd. •Důležité údaje jsou uvedeny formou čárových kódů • C:\Users\uživatel\Desktop\drive-download-20190112T213000Z-001\IMG_20190129_095048.jpg Sekundární výroba •dodatečná úprava vyrobených transfuzních přípravků • ØPost-storage deleukotizace ØPromytí (odstranění zbytkové plazmy) ØOzáření (prevence TA-GVHD) o záření gama , ozař. dávka 25-50 Gy – zablokuje proliferační aktivitu lymfocytů ØRozplnění – pediatrická jednotka o • Transfuzní přípravky (TP) •Léčivé přípravky vyrobené z lidské krve či jejích složek (IVLP, max. 10 dárců) •Pro každý typ TP stanoveny požadavky na kvalitu (objem, obsah účinných složek, obsah kontaminujících složek, swirling fenomén…) •Pro každý typ TP je stanoveno rozmezí teplot pro skladování, při kterých je garantována doba použitelnosti (monitorovaná teplota) •Příbalový leták – souhrnné informace o TP • • Erytrocytové TP •Exspirace - podle použitého antikoagulačního a resuspenzního roztoku: 21 – 49 dní (nejčastěji 42 dní) • •Skladování: od +2°C do +6°C • •Shoda AB0 i Rh(D) + předtransfuzní vyšetření (test kompatibility) • •Indikace: oÚprava anemie oNáhrada krevní ztráty o o C:\Users\1269\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\1Y1DD075\question-mark[1].jpg Jaká je funkce červených krvinek? Erytrocytové TP •EBR (erytrocyty bez buffy-coatu, resuspendované) oHb > 43g/TU, leu < 1,2 x 109/TU • •ERD (erytrocyty bez buffy coatu, resuspendované, deleukotizované) oHb > 40g/TU, leu < 1,0 x 106/TU • •EAD (erytrocyty z aferézy, deleukotizované) oHb > 40g/TU, leu < 1,0 x 106/TU o •EP (erytrocyty promyté) oCB supernatantu < 0,5/TU 9e8222f0619eb9617b69ed267c92cb95 Trombocytové TP P1050638 Trombocytové TP •TBSDR (Trombocyty z plné krve směsné, deleukotizované, resuspendované) •TADR (Trombocyty z aferézy resuspendované, deleukotizované) • oObsah trombocytů více než 200 x 109/ TD oObsah residuálních leukocytů < 1 x 106/vak opH > 6,4 na konci doby skladování / nově glukóza • •Trombocyty kryokonzervované (novinka) oSkladování: do 1 roku < - 80°C, déle než 1 rok < - 150°C (v kapalném N) oPouž. co nejdříve po rozmrazení • Plazmatické TP •Skladování a exspirace: o3 roky při teplotě méně než –25°C o3 měsíce při teplotě –18°C až –25°C o A.Plazma pro klinické použití •Obsahuje koagulační faktory i přirozené inhibitory krevního srážení •Karanténa (6M vs. 4M) •ABO shoda, test kompatibility se neprovádí •Při výrobě z plné krve musí být oddělena do 6 hodin po odběru •Indikace: oMasivní krvácení oKrvácení při DIC oKrvácení při získaném nedostatku o koagulačních faktorů (V,XI,XIII) oTTP oKrvácení při deficitu vit. K o B.Plazma k frakcionaci opro výrobu léčiv – krevních derivátů (HVLP) Sklad mražené plazmy Plazmatické TP •Plazma z plné krve (P) • •Plazma z aferézy (PA) • • Granulocytové TP •Exspirace – k okamžitému podání, max. do půlnoci dne následujícího po odběru/darování •Skladování od +20°C do +24°C v klimatizované místnosti bez agitace •Shoda AB0, Rh(D), provádí se test kompatibility (velká příměs ery) •Vždy nutno ozářit •Indikace: neutropenie < 0,5 x 109/l se současnými projevy sepse neodpovídající na léčbu ATB a antimykotiky • •Granulocyty z aferézy – po stimulaci dárce růst. faktorem •Granulocyty z plné krve – směsné • • • • Autologní TP • • • •transfuzní přípravky z odběru slouží výhradně k hemoterapii pacienta, kterému byl odběr proveden •význam u plánovaných operačních výkonů s předpokládanou velkou krevní ztrátou, která se velmi pravděpodobně bude muset hradit substitucí •Snižuje rizika přenosu původců transfuzí přenosných infekcí, aloimunizaci, je žádoucí u pacientů s klinicky významnými protilátkami. • SAPK plná krev pro autotransfuzi SAERD erytrocyty resuspendované bez buffy coatu pro autotransfuzi deleukotizované SAP zmrazená plazma pro autotransfuzi • • C:\Users\1269\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\1Y1DD075\question-mark[1].jpg Co to znamená autologní?