Současné možnosti automatizace močové analýzy Miroslava Beňovská C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Historie •1500 př.n.l. – Egypťané zjistili, že někteří pacienti mají zvýšený objem moče, která přitahuje mravence •V 6.stol. – Indové zjistili, že sladká moč je spojena s nemocí •V r.1674 – anglický lékař Thomas Willis zařadil ochutnávání moče do rutinní praxe a zavedl pojem Diabetes mellitus http://3.bp.blogspot.com/_ijVOsJdq68M/TSE_K0pEyUI/AAAAAAAAAG0/LmphTBOURCU/s1600/1-2UrineFlask.jpg http://i.dailymail.co.uk/i/pix/2012/09/10/article-2201221-14F06618000005DC-679_312x486.jpg Automatizovaná analýza moče •Chemická analýza moče • + •Automatická morfologická analýza moče Chemická analýza moče • •automatizace od 80. let minulého století •přístroje využívají stanovení parametrů pomocí diagnostických proužků (suchá chemie) •semikvantitativní stanovení bilirubinu, urobilinogenu, bílkoviny, ketonů, hemoglobinu, leukocytů, dusitanů, pH, glukosy a specifické hmotnosti •standardizace měřící procedury •namáčení proužků x pipetování na jednotlivé reakční zóny •analýza na principu reflexní fotometrie (případně digitální fotografie diagnostického proužku s vyvinutým zbarvením - Atellica) Diagnostické proužky •Matrice pro suchá činidla - Impregnovaná vlákna • •Analyzovaný vzorek (moč) je aplikován na povrch pevné fáze •Difunduje do její matrice a rozpouští suché činidlo, které je v matrici dispergováno • •Rozpuštěné činidlo reaguje s analyzovanou látkou za vzniku barevného produktu • •Výsledné zbarvení na povrchu pevné fáze je sledováno vizuálně nebo instrumentálně Celulózová impregnovaná vlákna •Celulózová matrice (firma Bayer – Siemens) porézní či polopropustná • •Reagencie v suché formě distribuovány - do matrice - na povrchu matrice •Postupná impregnace a zasoušení jednotlivých činidel • •Činidla oddělena separační vrstvou polymeru (ta při hydrataci praskne) Reflexní fotometrie Impregnovaná vlákna mají vysokou opacitu (neprůhlednost) Ke stanovení jejich zbarvení nutno využít reflexní fotometrii - měření ze stejné strany jako nanesen vzorek, ale na jiném místě (Roche, vhodné i pro plnou krev – přístroj Reflotron) - měření z opačné strany než aplikován vzorek (vícevrstvé filmy) Chemická analýza moče •Reflexní fotometrie: •zdroj světla - světlo emitující diody •emitují světlo o různých přesně definovaných vlnových délkách – světlo pak dopadá v různých úhlech na reagenční zóny diagnostického proužku •světlo je odráženo na fotodiodu, která slouží jako detektor •intenzita odraženého světla závisí na vybarvení reakční zóny (od bílé zóny se odráží prakticky 100%, čím tmavší zóna, tím víc světla je absorbováno) Principy jednotlivých stanovení Specifická hustota – často ne na diag. proužku - refraktometricky pH: měřeno pomocí kombinace acidobazických indikátorů Nitrity: vznik dusitanů redukcí dusičnanů vlivem patogenních mikrobů - dusitanový anion s aromatickým aminem v kyselém prostředí tvoří diazo-sloučeninu, ta kopuluje s vhodnou látkou na červené azobarvivo Bílkovina: změna barvy acidobazického indikátoru - test je citlivý především na albumin, podstatně nižší citlivost vykazuje vůči globulinům a Bence-Jonesově bílkovině Glukosa: je v přítomnosti glukosooxidázy oxidována na glukonolakton a peroxid vodíku - v přítomnosti peroxidázy peroxid vodíku oxiduje indikátor za vzniku zelené barvy Ketony: ketolátky reagují s nitroprusidem sodným v silně alkalickém prostředí za vzniku fialového zbarvení •Bilirubin: test je založen na kopulaci bilirubinu s •diazoniovou solí • •Urobilinogen: reaguje se stabilní diazoniovou solí v •kyselém prostředí za vzniku červeného azobarviva • •Leukocyty: test na základě přítomnosti esteráz •granulocytů, které štěpí ester indoxylu na indoxyl – ten •dává s diazoniovou solí barevný fialový produkt • •Erytrocyty: erytrocyty jsou hemolyzovány na •hemoglobin - ten katalyzuje oxidaci indikátoru •(organický hydroperoxid) – v přítomnosti •pseudoperoxidasy (ze žluté na zelenomodrou) • •Další zóny – kompenzace, turbidita • Hodnocení chemické analýzy moče č.met. analyt arbitrární jednotky 0 +- 1 2 3 4 144 leukocyty (elem/ul) neg 25 75 250 500 118 nitrity (dusitany) neg +1 +2 122 bílkovina (g/l) neg 0,15 0,3 1,0 3,0 10,0 123 glukóza (mmol/l) norm 3 6 12 30 60 124 ketony (mmol/l) neg 1,5 4 8 15 125 urobilinogen (µmol/l) norm 35 68 150 >150 126 bilirubin (umol/l) neg 8,5 35 100 >100 127 krev-ery (mg/l) neg 0,6 2 10 absolutní hodnoty 147 hustota (g/ml) 1,000 1,005 1,010 1,015 1,020 1,025 1,030 121 pH 5,0 6,0 7,0 8,0 9,0 Chemická analýza moče •Příklady analyzátorů •menší - často poloautomaty: • Urisys 1800 (Roche Diagnostic) • Aution JET (Arkray) • Clinitek STATUS (Siemens) • • •vysokokapacitní : • Urisys 2400 (Roche Diagnostic) • Aution Max AX -4030 (Arkray) C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\images.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Urisys 2400 (Roche Diagnostic) • •plně automatický močový analyzátor pro střední a velké laboratoře •kazety s 400 vyšetřovacími proužky •snadné vkládání vzorků ve stojanech, posuv po pásovém dopravníku •identifikace vzorků integrovanou čtečkou čárového kódu •pozice pro statimové vzorky •minimální objem vzorku 1.5ml > Urisys 2400 (Roche Diagnostic) strip Močový sediment, mikroskopické vyšetření (manuálně) • •Specifikace vzorku : • první nebo častěji druhá ranní moče •v noci zakoncentrování - patologické hodnoty výraznější •druhá ranní moč - elementy neleží dlouho v močovém měchýři, nedochází k jejich rozpadu • •Příprava pacienta : •běžný příjem tekutin •omytí genitálií vodou – ne desinfekcí •středního proud moče (mimo období menstruace) • •Příprava sedimentu – manuální provedení: •sediment ze 4 ml nativní moči •odstředěním při 2000 rpm, 5 minut, pokojová teplota, supernatant odlít • • Mikroskopické vyšetření: •10x zakoncentrovaná moč •400 násobném zvětšení. •1. preparát na mikroskopickém sklíčku - počet částic na zorné pole • 2. v komůrce Fast Read - počet částic na 1 µl nativní moče • •Erytrocyty, leukocyty, válce a epitelie – počet/µl •Bakterie, kvasinky, hlen a krystaly - přítomny, četné, záplava.. • •Provedení do jedné hodiny • • Supravitální barvení dle Sternheimera: •dvojsložková barva - modř a červeň 1:1 •lepší rozeznatelnost epitelií a válců •potíže při počítání většího počtu erytrocytů (růžová) a leukocytů (modrá) • •V dnešní době většinou jen jako rozhodčí analýza nebo při poruše automatu • Hodnocení močového sedimentu: •Leukocyty (shluky) a erytrocyty – viz chemické hodnocení moče • •Epitelie : • • Dlaždicové (skvamózní) – pochází z uretry a vagíny • nepravidelný tvar, velké, dobře viditelné jádro • minimální klinický význam – kontaminace • častý nález • • Buňky přechodného epitelu – jedná se o buňky epit. výstelky • urinálního traktu – močový měchýř, proximální část • uretry u mužů • z hlubších vrstev - hustší a kulatější • kontakt s močí, absorbce vody • menší než dlaždicové epitelie • možnost dvou jáder • menší počet může být normální • velké množství - infekce, léky • •Epitelie : • Renální tubulární – významný nález, velmi zřídka •při renální tubulární nekróze nebo virové infekci •malé, asi dvakrát větší než neutrofily •polyedrické, mají často excentrické ohraničené jádro • • •Oválná tuková tělíska : • renální tubulární epitelie nebo makrofágy naplněné tukem • • při velké permeabilitě glomerulu - snížený albumin, • zvýšená syntéza proteinů a lipoproteinů Válce: •precipitací proteinu v tubulech ledvin •základ tvoří Tamm – Horsfallův glykoprotein, který •je sekretován z renálních tubulárních buňěk •tvorbu válců podporuje - kyselejší pH, přítomnost větší koncentrace plasmových bílkovin, dehydrataci organismu, náročná fyzické aktivitě •definovaná vnější linie, paralelní strany, zakulacené konce, tvar tubulu •úlomky válců •bez barvení pod mikroskopem špatně viditelné •fázová kontrastní mikroskopie •hyalinní, buněčné, granulované, tukové, voskové a směsné sejmout0022 •Hyalinní válce - barví se světle růžově nebo světle modře •nález, který není patologický •objevují se v koncentrované kyselé moči •ve velkém počtu - záněty •úzké v důsledku otoku tubulů • •Buněčné válce – erytrocytární, leukocytární (granulocytární), z renálních tubulárních epitelií, bakteriální •patologický nález • •Erytrocytární –při glomerulární nefritidě, nejkřehčí, • nalezeny vyjímečně • Leukocytární – nejčastěji z neutrofilů při zánětech a infekcích • • Z renálních tubulárních epitelií – •po otravě Hg nebo etylenglykolem, hepatitidě, kdy dochází • k poškození tubulů • • Nelze-li určit částice - válec buněčný • • Přeměna válců: •po vytvoření nezůstávají ve stejném stavu •postupně se vyvíjí. •čím déle v ledvině (tlak), tím pozdější stádium válců •buňky v buněčných válcích postupně degenerují •zborcení, ztrátě buněčné membrány •tvorba granulí •granule podléhají další degeneraci, ztrátě struktury, válcová hmota zhoustne, zkřehne a zvoskovatí •Granulované válce: • •granule vznikají po rozbití buněčné membrány ve válci či tubulech • malý počet po intenzivní fyzické aktivitě (velký počet u otužilců) •větší počet je silně patologický. •obsahují agregované plasmatické proteiny, fibrinogen, globuliny •nelze určit původ buňek •několik granulí - válce hyalinní •Voskové válce - nejzávažnější •při chronickém onemocnění ledvin - válce renálního selhání •homogenní struktura, mohou přecházet ve válec jiného • typu – např. granulovaný •nejširší, nepravidelné zlomené konce •vypovídají o poškození tubulů, obsahují částečky ledvin • •Tukové válce – při silné renální dysfunkci, nefrotickém syndromu •v moči s pěnou, silně zvýšenou CB a Alb, u diabetiků, po intoxikaci Hg •obsahují oválná tuková tělíska •speciálním barvením lze rozlišit převahu Chol či TG • •Pseudoválce – např. vlákna hlenu, shluk buněk • • • •Krystaly a drť: • •nepříliš významný nález •oxaláty, kyselina močová, fosfáty a tripelfosfáty •vyjímečně lékové, bilirubinové, cystinové a myoglobulinové Automatická morfologická analýza moče •Techniky: • • Flow cytometrie • • Digitální zobrazení (mikroskopie) močových částic • využívá se CCD kamera, mikroskopický objektiv • - Průtoková cela, průběžné snímání, • nekoncentrovaná moč • - Automatická analýza močového sedimentu – • zakoncentrovaná moč • S centrifugací • S využitím sedimentace • • • •Kompletní systém močové analýzy – diagnostické proužky + morfologie (výsledky mají být v souladu, diskrepantní nálezy po obarvení prohlížet pod mikroskopem) • C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN • Flow (průtoková) cytometrie Průtoková cytometrie •UF 100 (Sysmex) • •první přístroj na automatickou morfologii moče •vzorek moče je automaticky naředěn a obarven a obklopen kapalinou neobsahující žádné buňky •prochází měřící celou, kde je ozářen argonovým laserem •fluorescence a rozptyl světla vznikající po ozáření se detekuje a je specifická pro jednotlivé buňky •výsledky jsou vydány jako počet buněk /ul (erytrocyty, leukocyty atd.) •nevýhoda - jednotlivé částice nemůže obsluha prohlížet Grafický výstup z přístroje UF 100 (Sysmex) AU-4050, Arkray G:\obrazovka.jpg E:\DCIM\131_PANA\P1310425.JPG Automatická analýza diagnostických proužků + fluorescenční flow cytometrie UN-Series, Sysmex •Nově na trhu: • • • UN3000-111 • • • • • UC-3500 + UF-5000/4000 + UD-10 • (Chemická analýza + Flow cytometrie + digitální zobrazení elementů) • • Modulární koncept • C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN UF-5000/4000, Sysmex •Flow cytometr – 28 parametrů •2 ml moče •105/80 vzorků moče/hod. • • •Flow cytometrie •Po nasátí proces značení fluorescenční značkou •Ozáření vzorku výkonným modrý laserem •Dva měřící kanály (buňky se značeným jádrem nebo povrchem) •Laserová technologie detekce částic umožňuje každý element odlišit podle specifických signálů charakterizujících velikost, tvar, vnitřní strukturu, polarizační vlastnosti •QC pro 5 parametrů – ery, leu, epitelie, válce, bakterie • • • C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN UF-5000/4000, Sysmex •Speciální funkce: •Stanovení počtu bakterií (pro výběr vzorků ke kultivaci) včetně rozlišení dle Grahamova barvení •Kvantifikace epitelií včetně přechodných a renálních •Rozlišení erytrocytů a krystalů – polarizační filtr •Klasifikuje zvlášť lyzované erytrocyty •Analýza jiných tělních tekutin – likvory, punktáty • UF-5000 fully automated analyzer of formed elements in urine C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN UF-5000/4000 - scattergram C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.Outlook\YXZ4HDAN\Dr Ben UF5000.PNG VEN C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg UN 3000, Sysmex •UN3000-111WS Kompletní močová analýza • •Složeno z: •UC-3500 •UF-5000/4000 •UD-10 •Dráhy pro vstup • a výstup vzorků •Podstavce s • úložným prostorem C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Digitální mikroskopie nekoncentrované moče C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN IQ 200 (IRIS) – mikroskopická analýza •2003 - plně automatizovaná mikroskopická analýza •60 vzorků/hod •možnost prohlížení částic na obrazovce •možnost přeřazení do jiné kategorie •přístroj rozlišuje 12 základních kategorií (např. erytrocyty, leukocyty, epitelie, válce) a umožňuje tvorbu podkategorií •archivace zobrazení C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg IQ 200 (IRIS) •Princip přístroje: •tenká vrstvička vzorku sendvičovitě uzavřená mezi vrstvy suspendované tekutiny se dostává do mikroskopu, který je spojen s digitální kamerou • •kamera s využitím stroboskopu zachytí 500 obrázků z jednoho vzorku - výsledný obraz je digitalizován • •jednotlivé obrazy částic jsou izolovány do rámečků – každá částice zvlášť C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg Erytrocyty – zobrazení z IQ 200 C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg iRICELL 3000plus IQ 200 SPRINT + ichemVelocity, Beckman http://www.axonlab.com/var/em_plain_site/storage/images/media/bilder/axonlab-schweiz/produkte/urind iagnostik/iricell-2000-3000_2/4971-1-ger-CH/iRICELL-2000-3000_2_lightbox.jpg Automatická mikroskopie + chemická analýza moče 100 testů/hod. C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN iRICELL 3000plus =IQ 200 SPRINT + ichemVelocity, Beckman •IQ 200 SPRINT •100 testů/hod. •12 základních a 27 předem • definovaných podkategorií • • • •ichemVelocity: •Minim. Objem 2 ml moče •240 vzorků / hodinu •13 metod včetně hustoty, barvy a zákalu (askorbová) • C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\stažený soubor.jpg C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\UNCX.png C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN C:\Users\75224\Documents\Vzdělávání\E-learning\Mocky\IQ\My Pictures\Granulvalce\granulovane valce.bmp C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN FUS-2000, DIRUI •Přístroj je hybridní močový analyzátor • •Provádí chemickou analýzu i digitální zobrazovací vyšetření moče • •Princip je stejný jako u systému iQ 200 (provádí 650 snímků/vzorek), ale zařízení je umístěno v jedné skříni •Pro obě metodiky je využit jeden pipetor C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN FUS-2000 •Výkon: 120 tests/hour •Minimální objem – 3 mL •Doba analýzy - 100s •Při nedostatku materiálu se provede pouze mikroskopie •Možnost zvětšení částic •Speciální mytí po hustých • vzorcích •Tichý chod přístroje •Big picture – odpovídá • mikroskopickému poli •Chem.anal.-reflexní fotometrie •Fyzik. anal. – refraktometrie (na spec. hustotu) + měření barvy a turbidity C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Uric acid G:\Screenshots\KM masivni.png C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN DIRUI FUS-3000Plus •Technická vylepšení: • • •Sledování teploty a vlhkosti proužků v zásobníku, stabilita 3 dny •Integrovaný promývací roztok, vylepšené promývání •Funkce síta vzorků - gating •Měření kontrol v jednom stojanu •Vylepšená správa reagencií •Snížení aspirovaného množství vzorku pro chemické vyšetření na 0.4ml •Vylepšení měřených parametrů: • •Zvětšení elementů odpovídá HPF – 400x •4 násobné navýšení počtu snímků zorných polí oproti předchozímu modelu •Rozdělení erytrocytů do 5 kategorií •Rozdělení bakterií do 2 kategorií •Měření konduktivity vzorku DIRUI FUS-1000 •Technická vylepšení: • •Sledování teploty a vlhkosti proužků v zásobníku, stabilita 3 dny •Funkce síta vzorků - „gating“ •Měření kontrol v jednom stojanu •Vylepšená správa reagencií •Vylepšení měřených parametrů: • •Nejmenší hybridní močový analyzátor na světe •Zvětšení elementů odpovídá HPF – 400x, stejně jako FUS-3000Plus •Rychlost 60 vz./hod. • •Oproti FUS-3000 postrádá •(x) Rozdělení ery do 5 skupin •(x) Rozdělení bakterií do 2 skupin •(x) Měření konduktivity vzorku •(x) Vysoká rychlost •(x) Kapacitní podavač stojánků • • Simulace zorného pole (funkci mají všechny analyzátory Dirui) Big Picture (2) ERY - akantocyty ARBC (2) Spermie SPRM (3) Tripelfosfáty MAPH (1) Automatická analýza močového sedimentu – s centrifugací C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN LabUMat2 and UriSed3 , 77 Elektronika (dodává Biovendor) •Kompletní systém na analýzu moče C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\urised3_pc_labumat2_front_kicsi.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN LabUMat2, 77 Elektronika dodává Biovendor •Chemická analýza moče pomocí diagnostických proužků • •240 tests/hour •Možno vložit až 100 vzorků •Stačí 2 ml moče •Automatizované QC • C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\labumat2_thumbnail.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Urised 3, 77 Elektronika •15 obrazů/vzorek • •Výkon 120 vzorků/hod. • •Zakoncentrování 20× (Evropské doporučení pro močovou analýzu) • •Manuální mikroskopický mód: Možnost prohlédnout kterékoliv pole v kyvetě tak, že jsou vidět i pohybující se mikroorganizmy • •Funkce zoom •Automatizované QC • •Bez carry over • •Vyhodnocovací modul rozeznává zvlášť koky a tyčkové bakterie • C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\urised_3_sideview_kicsi.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Urised 3 •Vybaven fázovým kontrastem • •Speciální kombinace • světelné mikroskopie • a fázového kontrastu • • •Sledováno trojnásobné množství vzorku v porovnání s UriSed 2 • •Kompatibilita s LabUMat 2, porovnání výsledků s chemickou analýzou • • https://www.novolab-labware.com/media/catalog/product/cache/3/thumbnail/555x361/9df78eab33525d08d6e 5fb8d27136e95/U/r/Urised_3+PC%20layeres.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Urised 3 Composite image Bright-field image Phase contrast image Fázový kontrast Světelný mikroskop Složený obraz C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN H:\kuku images\ss.jpg C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\67460-7589565.jpg cobas 6500, Roche močový sediment + chem. analýza https://www.mojemedicina.cz/files/videos/2014_11_27_CB_DGN_Ferdova-cobas-6500/slides/slide_03.jpg http://www.cobas.com/content/internet/product/cobas/en/home/product/urinalysis-testing/cobas-6500-u rine-analyzer-series/_jcr_content/mainParsys/tabs/tabsParsys/tabitem/firstProductDetailsParsys/imag e/image.img.jpg/1432122195030.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN cobas 6500 - automatický systém na močovou analýzu • •Spojením modulů cobas u 601 a cobas u 701 • vzniká platforma s automatickým • transportem vzorků celým systémem • •Analýza diagnostickým proužkem první • •Možnost vyšetření sedimentu jen u pozitivních výsledků • •Uživatel může nastavit pravidla křížové kontroly • a validace • • • • • • http://www.cobas.com/content/internet/product/cobas/en/home/product/urinalysis-testing/cobas-6500-u rine-analyzer-series/_jcr_content/mainParsys/tabs/tabsParsys/tabitem/firstProductDetailsParsys/imag e/image.img.jpg/1432122195030.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Modul cobas u 601-analýza moči pomocí testovacích proužků •Kapacita až 240 vzorků/ hod. •400 proužků v kazetě se značením RFID •Obrazový senzor (kamerový čip) • provádí fotometrická měření •Odlišení intaktních a lyzovaných erytrocytů • (do 50 Ery/μL) • • •12 parametrů: pH, leukocyty, dusitany, bílkovina, • glukóza, ketolátky, urobilinogen, bilirubin, • erytrocyty, hustota, barva a zákal • Proužky s rezistencí vůči kyselině askorbové • • • C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Modul cobas u 701 – automatizované mikroskopické vyšetření močového sedimentu. •Kapacita až 116 vzorků/hod. •Koncepce bez reagencií •Jednorázové kyvety (400 kyvet v kazetě se • značením RFID) • • •Postup: •Resuspendace vzorku •Pipetování vzorku do kyvet •Centrifugace •Zachycení, uchování a zobrazení až 15 snímků z centrifugovaného vzorku •Funkce reklasifikace umožňuje přehodnotit určení každé částice • C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN cobas 6500 – image z modulu cobas u701 Atellica 1500, Siemens • • • •Uvedení na trh 10/2017 • •Bez fázového kontrastu • •Rozlišuje přímo 10 druhů krystalů • bakterie - koky x tyčky Resultat d'imatges de atellica 1500 Atellica 1500, Siemens \\fnbrno.cz\tree\Home\27232\My Pictures\Atellica 1500.png H_DX_CLINITEKNovus_LoadCartridge_01 Cassette Loading RFID tagged cassette 14 days onboard stability Reagenční karty v kazetě místo diagnostických proužků D:\Market materials\Novus\Novus Uptodate\Images and video\CN_Cardhandler_640x480[1].jpg Reagent cards Prevent strip jamming and improves downtime Not available for sale in the U.S. Product availability varies by country Princip chem. analýzy: Digitální fotografie diagnostického proužku s vyvinutým zbarvením Vychází z chemického analyzátoru Clinitek Novus Výkon – chem.vyšetření: 200 vzorků/hod. The CLINITEK Novus automated urine chemistry analyzer utilizes a reagent cassette, which is composed of 450 test sets inside. As a daily procedure, loading the reagent is also very easy – take less than a minute. The cassette is RFID integrated, so the urine chemistry analyzer reads the cassette information (expiration date, lot #, etc.) from the RFID and incorporates into the system automatically, which saves the operator a lot of effort and prevents manual errors There are no individual strips inside the cassette – instead we use reagent cards. This design greatly improves the sample dispense accuracy and reduces strip jams, which means higher reliability and less downtime for the end user. Adobe Systems Atellica 1500, Siemens Automatická mikroskopie po centrifugaci – vychází z 77 Elektronika (100 vzorků/hod.) D:\Seuss launch\Marketing collaterals\Image library\Image for Michelle-UCSF\Images with annotation\EPI-NEC-WBC.png D:\Seuss launch\Marketing collaterals\Image library\Image library\160607_10_42_33_S0022-1_-_08_b.png Clear “In-focus” Images from Atellica 1500 UA System “Off-focus” Images Not available for sale in the U.S. Product availability varies by country Atellica 1500, Siemens image002 Automatická analýza močového sedimentu – s využitím sedimentace C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN UD-10, Sysmex (viz výše) •Využívá přirozenou sedimentaci účinkem gravitace •Přístroj k digitálnímu zobrazení močových elementů •Metoda skenování polí pomocí CCD kamery •Používá se vždy v kombinaci s UF-5000/4000 pro kompletní analýzu elementů v moči a také s chem. anal. moče UC-3500 •Uživatelsky nastavitelná pravidla • výběru vzorku k analýze na UD-10 (potvrzení • typu válce, krystalu, renální epitelie) •Funkce zoom •Rutinní mód 50 vzorků/hod. • 40 polí/vzorek •1,6 ml moče (statim 0,6 ml) • • • C:\Users\Mirka\Documents\Nová složka\UD-10.jpg Image result for UD10 Sysmex images C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN UN 3000 C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN LAURA XL, Erba Lachema • • • • • • •Hybridní koncept : analýza diagnostickými proužky a vyšetření močového sedimentu v jedné skříni •Zakoncentrování moče a tvorba sedimentu bez centrifugace •Určování částic v sedimentu s využitím softwaru s umělou inteligencí •Automatické turbidimetrické měření fyzikálních parametrů (barva a zákal moče) Laura_XL_Def5883_mod.jpg C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN • •Měřící módy: § Hybrid (100 vzorků/hod.) § Chemie (240 vzorků/hod.) § Sediment (180 vzorků/hod.) •Identifikace spotřebního materiálu - RFID •Analýza sedimentu – sedimentace s využitím gravitace (5 min.) • 14 kyvet vedle sebe současně •Minimální objem – 2,0 ml •Aspirovaný objem – 0,8 ml •Spotřební materiál chemie: destilovaná voda, diagnostické proužky •Spotřební materiál sediment: destilovaná voda, roztok Opti-sol XL LAURA XL C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN • •Měřící princip: digitální microskopie – automatizovaná světelná mikroskopie (15 obrázků/vzorek, celé pole) •Sofistikovaný software •Zobrazení elementů podobné jako pod světelným mikroskopem •Automatické vyhodnocení + možnost manuálního přeřazení uživatelem •16 automatických/16 manuálních kategorií •Zakoncentrování moče bez centrifugace (centrifugace může vést k degradaci elementů) LAURA XL – analýza sedimentu C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN •Močový sediment: • Automatické rozlišení následujících kategorií: § Leukocyty § Shluky leukocytů § Erytrocyty § Dlaždicové epitelie § Jiné epitelie § Hyalinní válce § Patologické válce § Oxalát vápenatý § Tripel fosfát § Kyselina močová § Bakterie - tyčky § Bakterie – koky § Kvasinky § Hlen § Spermie § Neklasifikované buňky • •Do dalších připravených kategorií možno přeřadit částice manuálně § • LAURA XL C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN LAURA XL – jednotlivé částice (ZOOM) C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN LAURA XL Gran CAST MUC BACR YST C:\Users\27232\AppData\Local\Microsoft\Windows\Temporary Internet Files\Content.IE5\FRFIS4VM\fn-brno-barva-pozitiv.jpg VEN Výhody a nevýhody •Přístroje využívající sedimentaci a centrifugaci – potíže s hustými vzorky (některé je třeba dělat pod mikroskopem, některé částice se musí označit) • •Velké zvětšení – pěkně vidět (Laura, Atellica, cobas) • •Rychlost prvního vzorku – výhodné pro jednotlivé statimy (FUS) • •Rozdíly v kvalitě a pružnosti software • • Močové atlasy - identifikace elementů o ohttp://www.sekk.cz/ o ohttp://is.muni.cz/do/rect/el/estud/lf/js15/mikroskop/web/index_en.html • - Mikroskopické nálezy barveného sedimentu • - Mikroskopické nálezy nativního sedimentu • - Nálezy z automatického analyzátoru iQ 200 • a FUS-2000 • o • Močové konkrementy •Nejčastější typy: •Kyselá moč - oxalát vápenatý • monohydrát - whewellit , dihydrát - wheddellit • • kyselina močová a její soli (uricit) • •Alkalická moč – fosfáty: • fosforečnan hořečnatoamonný (struvit); směs fosforečnanu a uhličitanu vápenatého (karbonát apatit), • fosforečnan vápenatý (apatit, brushit či monelit) • •Na základě metabolické choroby – cystinové, xantinové kameny • • Lékové • •Konkrementy často tvoří směsi jednotlivých minerálů •Rozměry – písek až několik centimetrů • obr1 obr2 WHEWELLIT Metody používané při analýze močových konkrementů 1)INFRAČERVENÁ SPEKTROSKOPIE • •zkoumá absorpci IČ záření molekulami vzorku •informace o přítomných funkčních skupinách a o molekulové struktuře látky •absorpční spektrum je pro látku charakteristické •při absorpci záření v IČ změna vibračních a rotačních stavů molekuly • •konkrementy - střední oblast spektra- dominují vibrační změny Infračervené spektrum •Znázorňuje závislost absorbance A nebo transmitance T na vlnočtu nebo vlnové délce •V infračerveném spektru se rozlišují dvě oblasti: • - skupinových vibrací mezi 4 000 až 1 400 cm-1 • -"otisku palce" pod 1 400 cm-1 – vibrace charakteristické pro molekulu určité chemické sloučeniny • • •Metodika přípravy vzorků - KBr technika •lisování směsi jemně rozetřené analyzované látky s KBr pod tlakem - vznik průhledné tablety • [USEMAP] Příklady IČ spekter: 2) Weddellit Whewellit Kyselina močová dihydrát 1) Kyselina močová 2) POLARIZAČNÍ MIKROSKOPIE •Využití v geologii, mineralogii a metalurgii •Vybaven polarizačním zařízením •Umožňuje studovat vlastnosti minerálů, které nejsou patrné v nepolarizovaném světle •Hodnocení komplikované Polarizační mikroskop http://www.calculi.cz/obr.php?img=PolarST1.jpg&dir=st