Tumorové markery •Nádorová onemocnění • • •200 různých typů nádorů •Neomezená proliferace buněk •Kolonizace dalších tkání • • • • • •85% nádorů – somatická mutace •15% nádorů – mutace v zárodečné linii Metabolic Intermediates in Tumorigenesis and Progression He Y, Gao M, Tang H, Cao Y, Liu S, Tao Y. Metabolic Intermediates in Tumorigenesis and Progression. Int J Biol Sci 2019; 15(6):1187-1199. doi:10.7150/ijbs.33496. •Onkogeny a tumor supresorové geny • • •Onkogeny - HER2 NEU - prs, ovarium • K-ras, N-ras, H-ras • •Tumor supresorové geny – Rb protein (retinoblastom) • BRCA-1,BRCA-2 - časný karcinom prsu, ovaria • • •Opravné geny •Tumorové markery • •Laboratorně prokazatelné látky přítomné v organismu v důsledku vzniku a vývoje maligního procesu. • •Jsou prokazatelné v séru nebo se vyskytují v nádorových buňkách nebo na jejich povrchu • •Produkován pouze u maligních onemocnění •Orgánově specifický •Koreluje • s velikostí nádoru • se stadiem onemocnění • s prognózou • s účinností terapie •Ideální marker neexistuje • • • • • • • •Indikace vyšetření tumorových markerů • •Monitorace léčby •Pooperační sledování (remise x progrese) •Podezření na recidivu •Účinnost onkologické terapie • •Ne – obecně pro screening •omezeně u rizikových skupin •iFOBT •Prognóza •AFP, HCG – zárodečné tumory •CEA – kolorektální karcinomy http://medicine.um.edu.my/images/fom/Acad%20Prog/medInfo/image/pict-diagram.jpg Biologická povaha nádorových markerů Markery produkované tumorem •Enzymy (LD,NSE, PSA) •Imunoglobuliny (kompletní molekula nebo fragmenty) •Hormony (hCG,PTH, ACTH, kalcitonin, gastrin, prolaktin,norepinefrin, epinefrin) •Fragmenty glykoproteinů (CA19-9,CA125,CA15-3) •Fragmenty cytokeratinů (TPS,CYFRA) •Onkofetální antigeny (AFP,CEA) •Molekuly receptorové povahy (estrogenový a progesteronový receptor) •Cirkulující buněčné elementy (cirkulující nádorové buňky) Preanalytické aspekty • •Materiál – sérum • •PSA – odběr 48 hod po rektálním vyšetření prostaty, jízdy na kole, sexuální aktivitě •SCCA,CA19-9 – kontaminace vzorku slinami nebo potem •NSE, LD – hemolýza (oddělení séra od krvinek do 1 hodiny) Vlastní laboratorní analýza • •Metody imunoanalýzy •Enzymatická aktivita • •Dlouhodobé sledování pacienta – vysoká reprodukovatelnost, stejná analytická nejistota • •Při změně technologie – nutno provést srovnávací měření (rebaselining) • Interpretace •Neexistuje univerzální nádorový marker • •Vztah sensitivity a specificity – ROC křivka •Senzitivita- správný záchyt nemocných •Specificita - správná negativita u lidí bez nádorového onemocnění • •Neexistuje marker se 100% senzitivitou a specificitou • Interpretace •Hodnocení •zvýšená hladina u nemaligních onemocnění •poruchy vylučování •heterofilní protilátky u autoimunitních chorob • •Nutno znát biologický poločas • •Signifikantní změny: •Bez terapie: stoupající trend ve třech následujích odběrech i v hladinách do cut-off •Během trapie: nárůst o více než 25% značí progresi onemocnění, pokles o více jak 50% parciální remisi • Biologický poločas nádorových markerů v séru •Marker Dny Hodiny •ACTH – 0,2 •AFP 5 – •B2M – 0,7 •hCG – 1 •CA 125 4 – •CA 15-3 7 – •CA 19-9 5 – •CEA 14 – •CT – 0,2 •CYFRA 21-1 – 3 •FER 2 – •fPSA – 7 •hCG 1 – •NSE 1 – •P-ACP – 2 •PRL – 0,3 •PSA 2 – •SCCA – 0,3 •TG 2,5 – •TK 2 – •TPA 7 CEA •Onkofetální glykoprotein •V dospělosti omezeně syntetizován epiteliálními buňkami střevní sliznice, žaludku, bronchů •Cut-off 5,0 ug/l • •Nelze použít pro screening a diagnostiku •Monitorování průběhu onemocnění- karcinomy zažívacího traktu, mléčné žlázy, močového měchýře •Zvýšení u benigních nebo premaligních lézí • http://www.magazin-legalizace.cz/data/resized/files/magazin/29-3-2015/800x600-3f77-streva.jpg AFP •Onkofetální glykoprotein, embryonální žloutkový vak, fetální játra •Cut-off 10ug/l, poločas 5 dnů • •Screening u pacientů s jaterní cirhózou, tumory ze zárodečných buněk •Monitorování průběhu onemocnění • •Primární karcinom jater •Embryonální nádory •Nemaligní příčiny zvýšení – hepatitidy, těhotenství http://files.rizenadetoxikace.com/200000225-b6686b7631/jatra.jpg Pacient , muž 29 let, přichází pro bolesti břicha, které trvají asi 1 měsíc, hubnutí, nahmatal si rezistenci v břiše Provedena zobrazovací vyšetření – tumorozní masa v retroperitoneu,ultrazvuk varlete Tumor varlete, provedena orchiektomie, histologický nález – germinativní tumor Zahájena chemoterapie CA 19-9 •Cut-off 40kU/l •Není vhodný pro screening a stanovení dg. maligního onemocnění •Nádory slinivky břišní •Střevo, žlučové cesty, žaludek • • •Zvýšení u cholestázy, zánětlivá onemocnění žaludku, střeva, slinivky a jater http://www.my-personaltrainer.it/salute/img/CA-19-9.gif CA 15-3 •Antigen epiteliálního mucinu, syntetizován v dospělosti v epiteliálních buňkách vývodů mléčné žlázy, slinných žláz a bronchů •Cut-off 35 kU/l • •Nelze pro screening (vyjímka vybrané skupiny pacientů) •Monitorování nemocných s karcinomem prsu •Nemaligní příčiny zvýšení: benigní onemocnění prsu, GIT,hepatitidy, CHRI,chronická bronchitida, pneumonie http://www.apotheken-umschau.de/multimedia/216/267/160/93575618577.jpg CA-125 •Glykoprotein s vysokým podílem sacharidů •Produkován fetálními epiteliálními tkáněmi • •Zvýšení u karcinomu ovárií serózního typu •Screening v případě rodinné dispozice • • •Nemaligní příčiny zvýšení: chronická onemocnění jater, peritonitis, benigní onemocnění ovarií http://www.ladycarehealth.com/wp-content/uploads/2013/01/ovarian-cancer.jpg CA 72-4 •Fyziologicky produkuje plod v žaludku, jícnu a pankreatu •Cut-off: 7kU/l • •Monitorování maligní nádory horního GIT, mucinózní typ ovariálního karcinomu • •Příčiny nemaligního zvýšení chronické záněty GIT, jaterní cirhóza CYFRA 21-1(fragment cytokeratinu 19) •Solubilní fragment cytokeratinu 19 (strukturální protein epitelových buněk) •Cut-off: 3,3 ug/l •Screening a stanovení diagnózy nelze použít • •Monitorání průběhu choroby – epidermoidní karcinomy plic, karcinomy močového měchýře, epidermoidní nádory čípku děložního • •Nemaligní příčiny zvýšení: chronické záněty, astma, infekce respiračního traktu hCG • •Glykoprotein (2 podjednotky) •Tvoří ho buňky trofoblastu a placenty v těhotenství •Cut-off 10 IU/l • •Screening u symptomatických osob při podezření na nádor varlat, choriokarcinomy •Normální zvýšení v těhotenství, ovariální cysty http://img.medscape.com/article/778/183/778183-fig3.jpg PSA •Proteáza – zkapalnění seminální tekutiny •V séru inaktivace vazbou na alfa1-antichymotrypsin, určitý • podíl volná frakce PSA • •Zvýšení specifity: Cut-off: věková závislost •Do 50 let 2,5ug/l •Do 60 let 3,5 ug/l •Do 70 let 4,5 ug/l •Starší do 6,5 ug/l •Frakce fPSA/PSA u maligního nádoru 0-15%,u benigního onemocnění nad 20% • •Screening karcinomu prostaty , monitorování při terapii •Příčiny zvýšení z jiných příčin: digitální rektální vyšetření prostaty,předchozí biopsie prostaty,zánět prostaty • NSE(neuron-specifická enoláza) •Je produkován v nervové a plicní tkáni plodu •V dospělosti – nervová tkáň, v procesu glykolýzy •Cut-off: 15ug/l • •Není vhodné pro screening a stanovení diagnózy •Monitorování pac. s neuroblastomy a malobuněčné karcinomy plic • •Zvýšení z nemaligních příčin: plicní a jaterní choroby S-100 beta •Poprvé popsán v centrálním nervovém systému •Cut-off: 0,1ug/l •Ne pro screening a diagnostiku • •Monitorování nemocných s maligním melanomem, mozkové maligní nádory •Zvýšené hladiny z nemaligních příčin – akutní poškození mozku SCCA (antigen skvamozních buněk) •Prokázán u pacientek s karcinomem čípku děložního •Citlivý na kontaminaci slinami, potem •Cut-off: 1,5 ug/l • •Monitorace průběhu onemocnění (děložní čípek, tělo dělohy, orofaciální oblast, epitelové nádory plic) Chromogranin A •Glykoprotein – sekreční granula v neuroendokrinních tkáních • •Cut-off: 35ug/l • •Neuroendokrinní malignity (gastro-enteropankreatické neuroendokrinní tumory, neuroblastomy…) • •Nemaligní příčiny zvýšení: terapie kortikoidy, poruchy ledvin a jater Beta2-mikroglobulin •Extracelulární doména lidského leukocytárního antigenu HLA I.třídy, přítomen ve všech buňkách kromě erytrocytů • •Cut-off: 2,4 mg/l • •Nelze pro screening i diagnostiku • •Zvýšení – systémové onemocnění B-lymfocytárního původu, mnohočetný myelom,leukemie • •Nemaligní příčiny zvýšení – snížená funkce ledvin,chronická autoimunitní onemocnění