Sedimentace erytrocytů 1 Fyziologický ústav, Lékařská fakulta Masarykovy univerzity Může jít o obrázek 1 osoba Sedimentace erytrocytů 2 Fyziologický ústav, Lékařská fakulta Masarykovy univerzity ̶ Fyzikální proces usazování erytrocytů (krevních elementů) v neproudící nesrážlivé krvi ̶ vyšetřuje se sedimentační rychlost ̶ nespecifická laboratorní metoda - říkající nám pouze “něco se děje” ̶ měříme rychlost poklesu ery ve sloupci nesrážlivé krve (v kapiláře) ̶ Sedimentační rychlost je nepřímo úměrná suspenzní stabilitě krve Helmholtzova elektrická dvojvrstva ̶ na vnějším povrchu membrány ery se nachází záporný náboj (což jsou zbytky sialových kyselin membránových proteinů) ̶ v těsném okolí membrány se elektrostatickými silami udržují kladně nabité ionty (především Na+) - ery se díky svému „elektrickému obalu“ vzájemně odpuzují, což zabezpečuje, že neproudící nesrážlivá krev po jistou dobu setrvává jako suspenze krevních elementů v plazmě (suspenzní stabilita) + 3 Fyziologický ústav, Lékařská fakulta Masarykovy univerzity - + + + + + + - - - - - - - - - + + + + + + - + - - - + - - + - - - - - - - + - + - + - ERY - - + Mechanismus sedimentace erytrocytů ̶ gravitace – pod vlivem této síly se erytrocyty v neproudící nesrážlivé krvi postupně usazují (sedimentují) ̶ při narušení Helmholtzovy elektrické dvojvrstvy dochází ke skládání ery do válečků – tzv. penízkovatění (tvorba rouleaux, agregátů) ̶ narušení elektrické dvojvrstvy tak způsobí zvýšení sedimentační rychlosti 4 Fyziologický ústav, Lékařská fakulta Masarykovy univerzity Faktory ovlivňující rychlost sedimentace 5 Fyziologický ústav, Lékařská fakulta Masarykovy univerzity Sedimentace závisí na vlastnostech erytrocytů a složení plazmy - Albumin má záporný náboj – udržuje suspenzní stabilitu -Imunoglobulin a fibrinogen narušují náboj ery – urychlují penízkovatění -Před odběrem krve na sedimentaci by se neměla jíst tučná jídla -Sedimentace ovlivněna taky tvarem ery (sférocytóza, srpkovitá anémie) -S věkem se sedimentace zrychluje Metody vyšetření sedimentační rychlosti ̶ dle Fahraeus-Westergrena (FW, přímá metoda): ̶ kapilára postavená kolmo ̶ odečítá se po 1 hodině ̶ dle Wintroba (šikmá sedimentace): ̶ kapilára sešikmená pod úhlem 45° ̶ odečítá se po 15 minutách 6 Fyziologický ústav, Lékařská fakulta Masarykovy univerzity Fyziologické hodnoty 7 Fyziologický ústav, Lékařská fakulta Masarykovy univerzity ̶ Muži: 2-8 mm/h ̶ Ženy: 7-12 mm/h ̶ Novorozenci: 2 mm/h ̶ Kojenci: 4-8 mm/h ̶ Ženy mají méně ery a více fibrinogenu → rychlejší sedimentace ̶ S věkem se sedimentace zrychluje Změněné hodnoty sedimentace 8 Fyziologický ústav, Lékařská fakulta Masarykovy univerzity ̶ Zvýšené: ̶ Těhotenství, menstruace ̶ Makrocytémie ̶ Infekce ̶ Nádory ̶ Záněty ̶ Nekrózy tkání (infarkt, trauma) ̶ Relativní/ absolutní ztráty albuminu (nefrotický syndrom) ̶ Hyperlipidémie ̶ Snížené: ̶ Nepravidelný tvar ery – sférocytóza ̶ Polycytemia vera ̶ Leukocytóza ̶ Dysproteinémie – hypofibrinogenémie, hypogamaglobulinémie ̶ Dehydratace Osmotická rezistence erytrocytů 9 Fyziologický ústav, Lékařská fakulta Masarykovy univerzity Osmóza ̶ Proudění rozpouštědla přes semipermeabilní membránu po osmotickém gradientu ̶ Osmotický tlak – tlak potřebný k zastavení osmózy ̶ Osmolarita – udává koncentraci osmoticky aktivních částic na 1l roztoku ̶ Osmolalita – udává koncentraci osmoticky aktivních částic na 1 kg rozpouštědla 10 Fyziologický ústav, Lékařská fakulta Masarykovy univerzity DryPol system - elektronické vysoušení a trvalá izolace vlhkého zdiva staveb - YouTube Tonicita ̶ Udává osmolalitu roztoku ve vztahu k buňce ̶ Hypotonické prostředí – roztok má nižší osmolalitu – voda jde do buňky ̶ Isotonické prostředí – stejná osmolalita roztoku - fyziologický roztok (0,9% roztok NaCl) ̶ Hypertonické prostředí – roztok má vyšší osmolalitu – voda jde z buňky 11 Fyziologický ústav, Lékařská fakulta Masarykovy univerzity Hemolýza ̶ Zánik červené krvinky porušením její membrány – vede k vylití obsahu cytoplasmy erytrocytů Sedimentovaná krev s různými stupni hemolýzy 12 Fyziologický ústav, Lékařská fakulta Masarykovy univerzity Moč s různými stupni hemoglobinurie 17 Typy hemolýz ̶ Fyzikální ̶ Mechanické poškození membrány, třepání, ultrazvuk, extrémní změny teplot, UV záření ̶ Osmotická ̶ Ery v hypotonickém roztoku nasává vodu a praská ̶ Chemická ̶ Chemická reakce lipidů v membráně s chemickou látkou – silné kyseliny a zásady, tuková rozpouštědla, povrchově aktivní látky (detergenty) ̶ Toxická ̶ Bakteriální toxiny, jedy (rostlinné, hadí, hmyzí, pavoučí,…), paraziti (Plasmodium spp. - malárie) ̶ Imunologická ̶ Transfuze nekompatibilní krve - imunitní systém hemolyzuje erytrocyty (komplementem) Malárie (Plasmodium spp.) 18 Hemolytické jedy Chřestýšovec běloretý (Cryptelytrops albolabris) Koutník jedovatý (Loxosceles reclusa ) Americký pavouk, v Evropě se téměř nevyskytuje… …zatím Klííííd, skoro všichni čeští pavouci jsou jedovatí, ale jen někteří dokáží prokousnout lidskou kůži. U nás: stepník moravský, snovačka moravská, zápřednice jedovatá, vzácně snovačka jedovatá (černá vdova). Kromě černé vdovy jsou to ale vzácní, venkovní, stydliví pavouci. Kousnutí obvykle vyvolá lokální alergickou reakci, která do dvou dnů odezní. Hemolytické jedy mají i zmije a chřestýšovci. Česká zmije obecná má kombinaci hemolytického a neurotoxického jedu. Nebezpečná je pro oslabené jedince, hlavně v důsledku alergické reakce. 19 Osmotická rezistence ̶ Testování rezistence ery vůči hypotonickému prostředí ̶ specifická metoda užívající se v diferenciální diagnostice hemolytických anémii ̶ Minimální osmotická rezistence (0,4-0,44%) ̶ udává koncentraci hypotonického roztoku NaCl, při které dochází k hemolýze prvních ery – nad sedimentem pozorujeme růžové zakalení, zanikají nejméně odolné ery ̶ Maximální osmotická rezistence (0,3-0,33%) ̶ udává koncentraci hypotonického roztoku NaCl, při které ještě nedochází k úplné hemolýze ery – poslední zkumavka obsahující sedimentované ery, ty nejvíce odolné ̶ Osmotická rezistenční šíře (10-14%) – rozdíl min. a max. osmotické rezistence 20 Fyziologický ústav, Lékařská fakulta Masarykovy univerzity Osmotická rezistence - cvičení ̶ gradient roztoku od slabě hypotonického k silně hypotonickému ̶ Každá zkumavka: 10 ml roztok NaCl + 2 kapky krve 0,63 0,60 0,57 0,54 0,51 0,48 0,45 0,42 0,39 Minimální osmotická rezistence 0,36 0,33 Maximální osmotická rezistence 0,30 0,9 %NaCl Čirý nažloutlý proužek roztoku (NaCl) Neprůhledný sediment erytrocytů Hemoglobin z prvních hemolyzovaných ery obarvil proužek roztoku Sediment posledních přeživších ery Kompletní hemolýza, roztok je průhledný