Pozorování fází mitózy v buňkách kořenů cibule

Teoretický úvod

Mitóza je dělení buněčného jádra, při němž zůstává zachován počet chromozomů. Tento typ dělení je
charakteristický pro jádra tělních (somatických) buněk. Mitotické dělení jádra probíhá ve čtyřech
fázích: profáze, metafáze, anafáze a telofáze. Pro studium fází mitózy jsou vhodná rostlinná
pletiva, v nichž probíhá intenzivní buněčné dělení, např. meristémy kořenových špiček.


Materiál a pomůcky

Naklíčená cibule, fixační roztok (směs 96% alkoholu a ledové kyseliny octové v poměru 3 : 1),
macerační roztok (směs 96% alkoholu a koncentrované kyseliny chlorovodíkové v poměru 1 : 1),
barvivo (laktopropionorcein), destilovaná voda, pinzeta, žiletka, preparační jehla, podložní a
krycí skla, Petriho misky, filtrační papír.


Postup

1. Přibližně 5 dní před prováděním pokusu je nutné dát naklíčit cibuli – tak, aby ponořená ve vodě
byla jen její spodní část (jinak dojde k hnití).

2. Kořenové špičky dlouhé asi 1 cm odřízneme a pinzetou přeneseme do fixačního roztoku. Minimální
doba působení fixačního činidla jsou 2 hodiny, optimální je nechat materiál v ledničce do druhého
dne. Fixací dojde k usmrcení buněk v různých fázích mitózy, vnitřní struktury zůstanou zachovány.

3. Fixovaný materiál pinzetou přeneseme do maceračního roztoku. Doba macerace je 1-3 minuty,
macerační směs musí být v přikryté nádobě. Macerací dojde k rozrušení buněčných stěn, preparát je
možné následně roztlačit.

4. Po maceraci provádíme vypírání v destilované vodě. Doba vypíraní je shodná s délkou macerace.

5. Takto vypraný objekt připravíme na barvení: Umístíme ho do kapky vody na podložní sklíčko.
Žiletkou odřízneme co nejmenší kousek kořenové špičky (1mm) a odsajeme přebytek vody.

6. Kápneme kapku barviva (laktopropionorceinu), přiložíme krycí sklíčko a objekt opatrně
rozmáčkneme špičkou preparační jehly. Žiletkou lehce nadzvedneme rožek krycího sklíčka, aby se
barvivo přelilo přes objekt. Protější rožek přidržujeme, aby se krycí sklíčko neposunulo.


Na takto zhotoveném preparátu pozorujeme pod mikroskopem jádra buněk v různých fázích mitózy. Fáze
mitózy zakreslíme.

Profáze – dochází ke kondenzaci chromozomů

Metafáze – tvoří se dělící vřeténko

Anafáze – podélně se rozštěpí centromery, vznikají dceřinné chromozomy

Telofáze – vznik dceřiných jader

Literatura

Jelínek J. a Zicháček V.: Biologie pro střední školy gymnaziálního typu. Praktická část. – Fin

Publishing, Olomouc 1996.

Pazourková Z. a Pazourek J. : Rychlé metody botanické mikrotechniky. – Československá

akademie zemědělských věd, Praha 1960.