POKYNY PRO STUDENTY VE CVIČENÍ Z obecné zoologie: •1. Bezpečnost práce: ve cvičení obecné zoologie hrozí nebezpečí úrazu nebo poškození zdraví při práci: -s elektrickým proudem •- s preparačními nástroji a mikroskopickými sklíčky •- s chemikáliemi (čištění preparátů) -s biologickým materiálem •2. Ochranné pomůcky: pláště dle vlastního uvážení, rukavice jsou ve cvičení k dispozici (týká se jen několika úloh). •3. Udělení zápočtu: Pro udělení zápočtu je nutné: – Účast ve cvičení – cvičení jsou povinná. V průběhu semestru není tolerována žádná absence. Na podobě protokolu při absenci je nutné se dohodnout s vyučujícím. Ve výjimečných případech déletrvajících absencí (nemoc, cesta do zahraničí apod.) je nutné se předem s vyučujícím domluvit na řešení. Náhrada st. svátku? •– Protokoly uznané vyučujícím •– Závěrečné poznávání preparátů Protokoly: •Na nelinkované listy A4, v záhlaví protokolu z jednotlivých cvičení uvést jméno, skupinu (např. čt 7.00), datum a téma cvičení. •• Konečná úprava protokolů je individuální. •• Jednotlivé listy protokolu spojit sešívačkou. • Protokoly se odevzdávají v průběhu semestru, vždy následující hodinu. V případě vážných nedostatků a chyb musí student protokol přepracovat, nedostatky odstranit a opravený protokol předložit co nejdříve znovu ke kontrole. Neopravené nedostatky v protokolech mohou být důvodem neudělení zápočtu. •• Obrázky: kreslit měkkou tužkou, na stránku maximálně 2 obrázky, každý obrázek musí být popsaný (perem), popis co nejvíc podrobný. U každého obrázku musí být uveden: - název preparátu - použité zvětšení - podrobný popis • KRESLÍME V HODINĚ PODLE MIKROSKOPU, NEPŘEKRESLUJEME DOMA!!! Co do protokolu z tohoto cvičení? Schéma mikroskopu (můžete nakreslit nebo vytisknout a nalepit) s popisem mechanických a optických částí, tabulka se základními pojmy (numerická apertura, rozlišovací schopnost, hloubka ostrosti, pracovní vzdálenost, zvětšení užitečné a prázdné…) Postup přípravy histologického řezu - ne Postup při mikroskopování - ne Postup práce s imerzí - ano Nákres (s popisky!) a zvětšení pozorovaného preparátu HISTOLOGICKÉ METODY •• Histologie - z řečtiny: histos = tkáň, logos = nauka) •• Příprava řezů tkání z orgánů • Mikroskopie – analýza tkáně pomocí světelné a elektronové mikroskopie •• Zpracování tkání pro mikroskopii (krájení, barvení) •ZPRACOVÁNÍ TKÁNÍ PRO MIKROSKOPII I. •• ! Omezení → artefakty •• Řezy → ! 2D představa 3D struktur → série řezů (rekonstrukce) ZPRACOVÁNÍ TKÁNÍ PRO MIKROSKOPII •SM • Fixace (chem., fyz.) • Odvodnění (ethanol) • Projasnění (xylen) • Prosycení (xylen/parafin) • Zalití (parafín) • Krájení (mikrotom) • Montování (na podlož. sklo) • Odparafinovaní • Rehydratace • Barvení • Odvodnění • Xylen • Kanadský balzám • Světelná mikroskopie •EM • Fixace (chem., fyz.) • Odvodnění (ethanol) • Projasnění (propylenoxid) • Prosycení (prop./pryskyřice) • Zalití (pryskyřice) • Krájení (ultramikrotom) • Montování (Cu síťka) • Barvení, kontastování • TEM (transmisní) •• Fixace • Odvodnění (ethanol) • Vysoušení (kritický bod) • Montování (držák) • Pokovení • SEM (skenovací) Druhy mikroskopů (světelný, elektronový) Stavba mikroskopu •• NA – charakterizuje společně s vlnovou délkou rozlišovací schopnost = RS (čím blíže k 1, tím RS větší) •• RS – vzdálenost dvou bodů, které mikroskop zobrazí jako dva samostatné body •• RS lze zvýšit •A) snížením λ – využití vlastností elektronů (elektronová mikroskopie) •B) zvyšováním n – použití imerzního oleje RS Objektivy: imerzní pozorování •4x • 10x • 40x • 100x* (imerzní) •• * Imerzní tekutina se kápne (1 kapka) na krycí sklíčko preparátu a objektiv se omočí v této kapce •• v průběhu mikroskopování musí být objektiv stále spojen imerzní tekutinou s krycím sklíčkem •• po ukončení mikroskopování se musí objektiv očistit! – ether + alkohol (7:3) •• Imerzní objektivy mají na svém povrchu vyznačeny zkratky imerzních tekutin, které se smí používat. •• Imerzní tekutina se nesmí používat s objektivy, které nejsou imerzní!!! Lamblia střevni Trypanosoma spavičná Trypanosoma ptačí v klíštěti Lamblia střevni Phylum: Sarcomastigophora bezbrví, bičíkovci, flagellata Kmen Euglenozoa (krásnoočka) dírkonožci dírkonožci hromadinky hromadinky kmen: Rhizopoda (KOŘENONOŽCI) kmen: Sporozoa, Apicomplexa (VÝTRUSOVCI) Obr. 2: Krevní roztěr ryby (zdroj: Internet) Obr. 3: Krevní roztěr žáby (zdroj: Internet) Obr. 4: Krevní roztěr ptáka (zdroj: Internet) Obr. 5: Krevní roztěr savce – lidská krev (zdroj: Internet) Obr. 7: Krevní roztěr velblouda (zdroj: Internet) Obr. 9: Spermie (krysy) – pohyblivé buňky s tlačným bičíkem (foto: M. Nakládal) Obr. 11: Jaterní parenchym (řez játry) při velkém zvětšení – buňky tvaru mnohostěnu (hepatocyty) (zdroj: Internet) Obr. 12: Jaterní parenchym (řez játry) při velkém zvětšení – buňky tvaru mnohostěnu (hepatocyty) (zdroj: Internet)