DŮKAZ BÍLKOVIN
Úkol č. 1: Koagulace bílkovin varem
Materiál: bílkovinný roztok BR (vaječný bílek ve 150 ml 0,9 % NaCl – savčí fyziologický roztok, filtrace
na skleněné vatě od chalát), kyselina octová CH3COOH (5 %), zkumavka, vodní lázeň
Pracovní postup:
• Ke 2 ml BR ve zkumavce přidáme 1 – 2 kapky CH3COOH a povaříme.
• Bílkoviny vypadnou ve formě sraženiny.
Úkol č. 2: Vysolování bílkovin těžkými kovy
Materiál: BR, nasycený roztok octanu olovnatého, síran amonný a měďnatý (1 %), zkumavka
Pracovní postup:
• Ke 2 ml BR ve zkumavce přidáme 3 – 5 kapek octanu (síranu).
• Bílkoviny vypadnou ve formě sraženiny.
Úkol č. 3: Koagulace kyselinami
Materiál: BR, koncentrovaná kyselina dusičná HNO3, nasycený roztok hydroxidu sodného NaOH,
zkumavka, vodní lázeň
Pracovní postup:
• Ke 2 ml BR ve zkumavce přidáme 1 – 2 ml HNO3.
• Bílkoviny vypadnou jako sraženina.
• Zahřátím ve vodní lázni se rozpustí na žlutý roztok.
• Po ochlazení přidáme 3 – 4 ml NaOH, barva se změní na pomerančově červenou.
Úkol č. 4: Kvalitativní důkaz bílkovin – prostá biuretová reakce
Materiál: BR, 1 % roztok peptidu, 10 % NaOH, 1 % síran měďnatý CuSO4, zkumavky
Pracovní postup:
• Ke 2 – 3 ml BR ve zkumavce přidáme 2 – 3 ml NaOH a 5 – 10 kapek CuSO4.
• Po zamíchání vznikne růžovofialové zbarvení vznikajícího biuretu.
• Obdobný postup s peptidem – vzniká modré zbarvení.
• Reakce se využívá k rozlišení bílkovin a peptidů.
Úkol č. 5: Oddělování iontů a solí od bílkovin
Materiál: BR, 1 % dusičnan stříbrný AgNO3, celofán, skleněná trubička, nit, kádinka, voda, zkumavky
Pracovní postup:
• Do celofánového sáčku po tyčince nalijeme asi 1 ml BR a sáček vložíme do kádinky
s destilovanou vodou.
• Po 15 minutách odebereme 2 ml vody do zkumavky a přidáme 5 – 8 kapek AgNO3.
• Dojde k vysrážení chloridů.